检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：廖翠怡广东海洋大学

学位级别：硕士

为了解氟苯尼考对水生细菌耐药性的影响以及湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药和毒力特点以及分子分型情况,进行了氟苯尼考胁迫模型下水体细菌对抗菌药物的敏感性试验,湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药性和耐药基因检测及大肠杆菌分离株毒... 详细信息

为了解氟苯尼考对水生细菌耐药性的影响以及湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药和毒力特点以及分子分型情况,进行了氟苯尼考胁迫模型下水体细菌对抗菌药物的敏感性试验,湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药性和耐药基因检测及大肠杆菌分离株毒力基因及分子分型分析。主要研究结果如下: （1）氟苯尼考对水生细菌耐药性影响的研究建立氟苯尼考胁迫模型,采用微量肉汤二倍稀释法和药敏纸片试验法对第0d、14 d、28 d、56 d分离的水生细菌进行药物敏感性试验。结果表明,第56 d收集的Ⅴ组（100 mg/L）水生细菌对氟苯尼考耐药率最高,为25%;分离的氟苯尼考敏感菌和耐药菌对17种抗菌药中的阿莫西林、链霉素和多西环素等8种药物的敏感性差异极显著（P<0.01）。（2）湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药性及耐药基因检测从湛江地区三个水产养殖场水体、土壤和底泥样品中分离鉴定出90株大肠杆菌,利用药敏纸片试验法检测分离株对23种抗生素的耐药性,利用PCR法检测分离株对29种耐药基因的携带情况。结果表明,90株大肠杆菌对青霉素、阿莫西林、氨苄西林等9种药物耐药率较高（≥70%）;对氨曲南、庆大霉素、阿米卡星等11种药物耐药率都较低（≤30%）。同一菌株至少耐2种药,最多耐16种药,同时耐9种药物的菌株数最多（19株）。耐药基因检测发现90株分离株对bla TEM、bla CIT、flo R等9种耐药基因检出率较高（≥50%）;对bla KPC、bla IMP、cfr等13种耐药基因检出率较低（≤30%）。同一菌株至少检出4种,最多检出15种耐药基因,其中携带10种耐药基因的菌株数最多（14株）。总体来看,养殖场Ⅱ耐药情况最复杂。相关性分析发现bla TEM、bla CIT、flo R、Optr A、cml A、aac（3）-Ⅱ、Sul2、ere A、erm B、oqx B、qnr A、mcr1、mcr2耐药基因与耐药性符合率较高（≥50%）。（3）大肠杆菌分离株毒力基因及分子流行特征研究选取30株湛江地区水产养殖场分离的大肠杆菌,利用三重PCR法进行系统发育群鉴定,对大肠杆菌进行全基因组测序后分析统计其毒力基因、血清型以及多位点序列分型（Multilocus Sequence Typing,MLST）,并利用PHYLOVIZ-2.0和MEGA 7.0软件对ST型结果进行聚类分析和系统进化树构建。30株大肠杆菌主要携带fim C（70%）、tsh（66.67%）、omp T（53.33%）毒力基因,养殖场Ⅱ携带毒力基因种类最丰富（20种）,菌株携带的耐药基因和毒力基因之间未发现存在相关性。30株大肠杆菌的定型率为80%（24/30）,O81为优势血清型。大多数分离株属于B2群（26.67%）和D群（46.67%）,耐药基因与系统发育群相关性分析发现B2群和D群大肠杆菌携带的耐药基因类型较A群和B1群丰富。30株大肠杆菌有23种ST型,ST3856为流行ST型。Ⅰ-26和Ⅲ-21菌株同属ST2179,血清型同为O9,均携带11种毒力基因,毒性最强,系统发育群同为D群。聚类分析和系统进化树显示不同水产养殖场分离株之间具有一定亲缘关系。研究表明,氟苯尼考在一定程度上增加了水生细菌耐药性;湛江地区大肠杆菌耐药性严重,携带的耐药基因复杂;湛江地区水产养殖场大肠杆菌具有丰富的多样性,潜存致病性,菌株之间存在一定的进化关系。

关键词：氟苯尼考大肠杆菌耐药特点毒力基因分子分型

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湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药特点、毒力基因及分子分型研究

湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药特点、毒力基因及分子分型研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：罗帅帅廖翠怡马驿广东海洋大学滨海农业学院动物医学系

为了解氟苯尼考对湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药特点、毒力基因和分子分型情况,进行了湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药性和耐药基因检测及大肠杆菌分离株毒力基因及分子分型分析。主要研究结果如下:1.湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药... 详细信息

为了解氟苯尼考对湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药特点、毒力基因和分子分型情况,进行了湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药性和耐药基因检测及大肠杆菌分离株毒力基因及分子分型分析。主要研究结果如下:1.湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药性及耐药基因检测从湛江地区三个水产养殖场水体、土壤和底泥样品中分离鉴定出90株大肠杆菌,利用药敏纸片试验法检测分离株对23种抗生素的耐药性,利用PCR法检测分离株29种耐药基因的携带情况。结果表明,90株大肠杆菌对青霉素、阿莫西林等9种药物耐药率较高(≥70%);对氨曲南、庆大霉素等1 1种药物耐药率都较低(≤30%)。同一株菌株至少耐2种药,最多耐16种药,同时耐9种药物的菌株数最多(19株)。耐药基因检测发现90株分离株对blaTEM、blaCIT等9种耐药基因检出率较高(≥50%);对blaKPC、blaIMP等13种耐药基因检出率较低(≤30%)。同一株菌株至少检出4种,最多检出15种耐药基因,其中携带10种耐药基因的菌株数最多(14株)。总体来看,养殖场Ⅱ耐药情况最复杂。相关性分析发现blaTEM、blaCIT、floR、OptrA、cmlA、aac(3)-Ⅱ、Sul2、ereA、ermB、oqxB、qnrA、mcr1、mcr2耐药基因与耐药性符合率较高(≥50%)。2.大肠杆菌分离株毒力基因及分子流行特征研究选取30株湛江地区水产养殖场分离的大肠杆菌,利用三重PCR法进行系统发育群鉴定,对大肠杆菌进行全基因组测序后分析统计其毒力基因、血清型以及多位点序列分型,并利用PHYLOVIZ-2.0和MEGA 7.0软件对ST型结果进行聚类分析和系统进化树构建。30株大肠杆菌主要携带fimC(70%)、tsh (66.67%)、ompT (53.33%)毒力基因,养殖场Ⅱ携带毒力基因种类最丰富(20种),菌株携带的耐药基因和毒力基因之间未发现存在相关性。30株大肠杆菌的定型率为80%(24/30),O81为优势血清型。大多数分离株属于B2群(26.67%)和D群(46.67%),耐药基因与系统发育群相关性分析发现B2群和D群大肠杆菌携带的耐药基因类型较A群和B1群丰富。30株大肠杆菌有23种ST型,ST3856为流行ST型。Ⅰ-26和Ⅲ-21菌株同属ST2179,血清型同为O9,均携带1 1种毒力基因,毒性最强,系统发育群同为D群。聚类分析和系统进化树显示不同水产养殖场分离株之间具有一定亲缘关系。研究表明,湛江地区大肠杆菌耐药性严重,携带的耐药基因复杂;湛江地区水产养殖场大肠杆菌具有丰富的多样性,潜存致病性,菌株之间存在一定的进化关系。

关键词：氟苯尼考大肠杆菌耐药特点毒力基因分子分型

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氟苯尼考胁迫对土壤解磷菌解磷能力的影响

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安徽农业科学 2023年第4期51卷 54-57页

作者：陶松若廖翠怡彭金菊张腾月戴悦马驿广东海洋大学滨海农业学院动物医学系广东湛江524088 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525032 粤西地区畜禽遗传资源与种质创新重点实验室广东湛江524088

从土壤中分离得到10株解磷菌,将菌株接种至LB液体培养基中,30℃培养24 h作为种子液。在无机磷液体培养基中加入氟苯尼考,使培养基含药浓度分别为0、0.1、1.0、10.0、50.0μg/mL。按照1%的接种量接种种子液,30℃培养5 d,每24 h取2 mL培养... 详细信息

从土壤中分离得到10株解磷菌,将菌株接种至LB液体培养基中,30℃培养24 h作为种子液。在无机磷液体培养基中加入氟苯尼考,使培养基含药浓度分别为0、0.1、1.0、10.0、50.0μg/mL。按照1%的接种量接种种子液,30℃培养5 d,每24 h取2 mL培养液,利用钼锑抗分光光度法测定培养液中速效磷含量。结果表明,10株解磷菌在50.0μg/mL药物浓度下,培养基中速效磷含量明显低于其他药物浓度组;大部分菌株在药物浓度0~50.0μg/mL菌液中细菌数量变化不明显。说明氟苯尼考对解磷菌的解磷能力产生了抑制作用,但与细菌的生长繁殖并无明显相关性。

关键词：解磷菌氟苯尼考解磷能力

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湛江地区罗非鱼病原菌分离鉴定及毒力基因检测

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安徽农业科学 2024年第5期52卷 96-98,107页

作者：罗帅帅丁月霞廖翠怡叶梓茵谢星朋戴悦彭金菊马驿广东海洋大学滨海农业学院动物医学系广东湛江524088 岭南现代农业科学与技术广东省试验室茂名分中心广东茂名525000

[目的]了解湛江市某水产养殖场患病罗非鱼病原菌携带毒力基因情况。[方法]从10尾患病罗非鱼心脏、肠道、脾、肝脏等器官分离细菌,提取分离纯化细菌的总DNA,PCR扩增16S rDNA基因后经过基因测序鉴定细菌,并利用PCR技术检测分离菌株的毒力... 详细信息

[目的]了解湛江市某水产养殖场患病罗非鱼病原菌携带毒力基因情况。[方法]从10尾患病罗非鱼心脏、肠道、脾、肝脏等器官分离细菌,提取分离纯化细菌的总DNA,PCR扩增16S rDNA基因后经过基因测序鉴定细菌,并利用PCR技术检测分离菌株的毒力基因。[结果]从罗非鱼内脏中分离的细菌为华纳葡萄球菌、大肠杆菌和粪肠球菌,在毒力基因检测中发现华纳葡萄球菌携带毒力基因gap,大肠杆菌携带毒力基因pap、afa,粪肠球菌携带毒力基因efaA、cylM、cylB。[结论]该研究结果可为湛江地区罗非鱼细菌性疾病防控提供理论依据。

关键词：罗非鱼病原菌纯化分离与鉴定毒力基因

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氟苯尼考对水生细菌耐药性的影响研究

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安徽农业科学 2022年第2期50卷 99-101页

作者：廖翠怡陶松若彭金菊丁月霞马驿广东海洋大学滨海农业学院动物医学系广东湛江524088

[目的]建立水体模型,探究氟苯尼考对水生细菌耐药性的影响。[方法]将水体样品分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,每组3个重复,各组添加不同浓度的氟苯尼考。分离培养建模前以及建模后第14、28、56天水生细菌,利用微量肉汤二倍稀释法和KB药敏纸... 详细信息

[目的]建立水体模型,探究氟苯尼考对水生细菌耐药性的影响。[方法]将水体样品分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,每组3个重复,各组添加不同浓度的氟苯尼考。分离培养建模前以及建模后第14、28、56天水生细菌,利用微量肉汤二倍稀释法和KB药敏纸片法对分离的水生细菌分别进行氟苯尼考和17种抗菌药物的敏感性试验。[结果]第56天收集的Ⅴ组水生细菌对氟苯尼考的耐药率最高,达到25.00%;分离的氟苯尼考敏感菌和耐药菌对阿莫西林、链霉素和多西环素等8种药物的敏感性差异极显著(P<0.01)。[结论]氟苯尼考在一定程度上增加了水生细菌的耐药性。

关键词：氟苯尼考水生细菌耐药性

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氟苯尼考胁迫对土壤解磷菌耐药性的影响

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中兽医医药杂志 2022年第1期41卷 64-68页

作者：陶松若廖翠怡彭金菊丁月霞马驿广东海洋大学滨海农业学院动物医学系广东湛江524088

建立土壤生态模型,考察氟苯尼考胁迫对土壤解磷菌耐药性的影响。在土壤中添加不同浓度氟苯尼考(Ⅰ组0 mg/kg,Ⅱ组0.1 mg/kg,Ⅲ组1.0 mg/kg,Ⅳ组10.0 mg/kg,Ⅴ组100.0 mg/kg),于加药前和加药后第7天、第21天、第49天采集土壤样品,分离解... 详细信息

建立土壤生态模型,考察氟苯尼考胁迫对土壤解磷菌耐药性的影响。在土壤中添加不同浓度氟苯尼考(Ⅰ组0 mg/kg,Ⅱ组0.1 mg/kg,Ⅲ组1.0 mg/kg,Ⅳ组10.0 mg/kg,Ⅴ组100.0 mg/kg),于加药前和加药后第7天、第21天、第49天采集土壤样品,分离解磷菌。分别采用微量肉汤二倍稀释法和K-B纸片扩散法测定解磷菌对氟苯尼考和17种抗菌药的敏感性。结果表明,随着氟苯尼考添加浓度的增大,耐氟苯尼考解磷菌的数量逐渐增多;加药后第49天,从Ⅳ组分离的解磷菌对氟苯尼考的耐药率最高为45%;17种抗菌药中,对氟苯尼考敏感的解磷菌和耐氟苯尼考解磷菌对其中10种抗菌药的敏感性差异极显著(P<0.01)。说明氟苯尼考一定程度上增强了解磷菌的耐药性。

关键词：氟苯尼考胁迫解磷菌耐药性

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9种中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌体外抑制作用

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中兽医医药杂志 2022年第1期41卷 81-84页

作者：戴悦江源誉张腾月廖翠怡马驿彭金菊广东海洋大学滨海农业学院动物医学系广东湛江524088

研究石榴皮、花椒、大青叶等9种中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用。采用水煎煮法分别提取9种不同中草药的有效成分;采用二倍稀释法、平板培养法分别检测中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(... 详细信息

研究石榴皮、花椒、大青叶等9种中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用。采用水煎煮法分别提取9种不同中草药的有效成分;采用二倍稀释法、平板培养法分别检测中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),筛选出抑菌功效良好的5味中草药,再分别对2种细菌进行联合用药,测定中草药联用的体外抑菌功效。结果表明,花椒、黄连、石榴皮、诃子、龙胆草等单味药具有较好的体外抑菌功效,在9种中草药中抑菌作用最佳的是黄连,其对沙门菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别为1.625 mg/mL和3.125 mg/mL,MBC值分别为100.000 mg/mL和200.000 mg/mL。对金黄色葡萄球菌,中草药间有拮抗作用的组合有黄连+花椒、黄连+诃子、石榴皮+龙胆草,其他中草药联合时均为无关作用;对沙门菌,中草药间有拮抗作用的组合有黄连+花椒、诃子+龙胆草、石榴皮+诃子、黄连+诃子、石榴皮+龙胆草,中草药间有相加作用的组合是花椒+石榴皮,其MIC值为3.125 mg/mL,FIC值为0.75,其他中草药联合时均为无关作用。结果提示,单独用药对细菌具有良好抑菌功效的中草药,联合用药时抑菌作用未必会增强。

关键词：中草药沙门菌金黄色葡萄球菌抑菌作用

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30种中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌体外抑制作用的研究

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中兽医医药杂志 2021年第2期40卷 31-34页

作者：廖翠怡邱茹茵陶松若马驿彭金菊广东海洋大学滨海农业学院动物医学系广东湛江524088

研究中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果。采用水煎法提取30种中草药的有效成分,采用二倍稀释法分别测定对沙门菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并筛选出有较强抗菌作用的中草药与其他中草药联合... 详细信息

研究中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果。采用水煎法提取30种中草药的有效成分,采用二倍稀释法分别测定对沙门菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并筛选出有较强抗菌作用的中草药与其他中草药联合,评价抑菌效果。结果显示,黄连、诃子、五倍子等对两种细菌的抑制作用都比较强,其中五倍子水提取物对沙门菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,MIC值均为1.563 mg/mL,MBC值分别为12.5 mg/mL和6.25 mg/mL。在两药联合中,对沙门菌,黄连和紫花地丁、金银花和连翘、金银花和穿心莲的联合药对均呈现协同作用,其中黄连和紫花地丁联合药对抑制效果最好(MIC为12.5 mg/mL,MBC为100 mg/mL);而对金黄色葡萄球菌,紫花地丁和艾草、金银花和穿心莲的联合药对为协同作用。黄莲和艾草、菊花和连翘、花椒和黄芪的联合药对对两种菌都呈拮抗作用,其余大部分为相加或无关作用。说明抑菌能力强的中草药与其他中草药联合,抑菌效果不一定增强。

关键词：中草药沙门菌金黄色葡萄球菌抑菌

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36种中药提取物对罗非鱼大肠杆菌和华纳葡萄球菌的抑菌效果研究

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中兽医医药杂志 2022年第6期41卷 55-59页

作者：谢星朋丁月霞廖翠怡张宏伟岑雪萍罗帅帅彭金菊马驿广东海洋大学滨海农业学院动物医学系广东湛江524088 岭南现代农业科学与技术广东省试验室茂名分中心广东茂名525000

研究36种中药对罗非鱼大肠杆菌和华纳葡萄球菌的体外抑菌效果。采用水提法提取芦根、地榆、苦参、黄芩、大青叶、黄柏、丁香、蛇床子、连翘、金银花、栀子、山楂、黄连等36种中药有效成分,采用肉汤二倍稀释法测定中药提取物对大肠杆菌... 详细信息

研究36种中药对罗非鱼大肠杆菌和华纳葡萄球菌的体外抑菌效果。采用水提法提取芦根、地榆、苦参、黄芩、大青叶、黄柏、丁香、蛇床子、连翘、金银花、栀子、山楂、黄连等36种中药有效成分,采用肉汤二倍稀释法测定中药提取物对大肠杆菌和华纳葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC),选择抑菌效果较好的单药进行联合抑菌试验。结果表明,山楂对罗非鱼大肠杆菌抑菌效果最佳,MIC值为31.250 mg/mL;栀子、地榆、丁香对罗非鱼华纳葡萄球菌抑菌效果较好,MIC值为62.500 mg/mL。联合用药结果显示,在对大肠杆菌的体外抑菌试验中,大青叶与地榆、大青叶与黄连、大青叶与山楂、地榆与丁香、地榆与山楂、丁香与黄连、丁香与山楂、黄连与山楂等药物联合均为拮抗作用(FIC指数>2.000),其余发生沉淀反应;在对华纳葡萄球菌的体外抑菌试验中,只有山楂和黄连联用时有相加作用,其FIC值为1.000,其余均为无关作用或发生沉淀反应。由此可见,两种中药进行联合用药有可能产生无关甚至拮抗等作用,反而导致抑菌活性降低。

关键词：中药大肠杆菌华纳葡萄球菌抑菌作用罗非鱼

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四味穿心莲散及其组分对沙门菌的体外抑菌效果观察

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中兽医医药杂志 2020年第5期39卷 64-67页

作者：陶松若王玉婷廖翠怡牛金利明月月马驿彭金菊广东海洋大学农学院动物医学系广东湛江524088

检测四味穿心莲散及其组分(穿心莲、辣蓼、大青叶和葫芦茶)对沙门菌的体外抑菌效果。试验选用穿心莲、辣蓼、大青叶、葫芦茶等10种中药,采用试管二倍稀释法测定各中药水提物、两药联合及市售四味穿心莲散和自制四味穿心莲散对沙门菌的... 详细信息

检测四味穿心莲散及其组分(穿心莲、辣蓼、大青叶和葫芦茶)对沙门菌的体外抑菌效果。试验选用穿心莲、辣蓼、大青叶、葫芦茶等10种中药,采用试管二倍稀释法测定各中药水提物、两药联合及市售四味穿心莲散和自制四味穿心莲散对沙门菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,四味穿心莲散的4种组分中,大青叶对沙门菌的抑菌活性最强,MIC为12.5 mg/mL;4种组分杀菌活性一致,MBC均为400 mg/mL;在两药联合中,4种联合呈现相加作用或协同作用;市售四味穿心莲散MIC和MBC均为200 mg/mL,自制四味穿心莲散MIC为50 mg/mL,MBC为200 mg/mL。分析结果表明,大青叶抑菌效果最好,杀菌效果与其他3种组分一致;自制四味穿心莲散的抑菌效果更具优势,杀菌效果与市售方剂一致。

关键词：四味穿心莲散沙门菌最小抑菌浓度最小杀菌浓度

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