检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2010年第1期26卷 65-70页

作者：黄莹唐青张守峰扈荣良中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室北京100052 军事医学科学院军事兽医研究所长春130062

本研究选择pVAX1作为供体载体,通过分子克隆方法,分别用人工合成的锤头型核酶、丁型肝炎核酶序列(用于获得转录后病毒基因组RNA的精确末端)和含有9个常用限制性酶切位点的linker序列(用于病毒基因组插入的多克隆酶切位点)取代真核表达载... 详细信息

本研究选择pVAX1作为供体载体,通过分子克隆方法,分别用人工合成的锤头型核酶、丁型肝炎核酶序列(用于获得转录后病毒基因组RNA的精确末端)和含有9个常用限制性酶切位点的linker序列(用于病毒基因组插入的多克隆酶切位点)取代真核表达载体pVAX1的多克隆酶切位点,将其改造成负链不分节段RNA病毒反向遗传系统的通用型表达载体。通过酶切鉴定和序列测定表明,pVAX1载体中插入的核酶及linker序列正确无误,并将CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA插入pVAX-R中,通过与辅助质粒的共转染成功拯救CTN株狂犬病毒,证明通用型真核表达载体构建成功,为快速建立负链不分节段RNA病毒反向遗传系统奠定基础。

关键词：负链不分节段RNA病毒反向遗传真核表达载体构建

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动物抗病毒感染基因工程育种研究进展

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病毒学报 1994年第1期10卷 86-92页

作者：殷震扈荣良长春农牧大学兽医研究所

动物抗病毒感染基因工程育种研究进展殷震，扈荣良（长春农牧大学兽医研究所长春１３００１２）动物传染病，尤其是动物病毒性传染病，严重威胁畜禽健康。一些很早发现的传染病迄今未能有效控制。随着集约化饲养和养殖条件的改变，近年... 详细信息

动物抗病毒感染基因工程育种研究进展殷震，扈荣良（长春农牧大学兽医研究所长春１３００１２）动物传染病，尤其是动物病毒性传染病，严重威胁畜禽健康。一些很早发现的传染病迄今未能有效控制。随着集约化饲养和养殖条件的改变，近年来又相继发生和流行一些新的传染病。...

关键词：动物抗病毒基因遗传工程育种

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现代动物病毒学

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2014年

作者：扈荣良

本书由动物病毒学基础和技术总论与动物病毒学各论两篇组成。第一篇动物病毒学和技术总论介绍病毒的基本概念和动物病毒学简史, 病毒的本质、起源和演化等 ; 第二篇动物病毒学各论, 介绍双股DNA病毒, 包括痘病毒科、非洲猪瘟病毒科、虹... 详细信息

ISBN: (纸本)9787109197435

本书由动物病毒学基础和技术总论与动物病毒学各论两篇组成。第一篇动物病毒学和技术总论介绍病毒的基本概念和动物病毒学简史, 病毒的本质、起源和演化等 ; 第二篇动物病毒学各论, 介绍双股DNA病毒, 包括痘病毒科、非洲猪瘟病毒科、虹彩病毒科等。

关键词：动物病毒

来源：内蒙古大学图书馆图书评论

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细胞适应株狂犬病病毒反向遗传系统辅助质粒的构建

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中华实验和临床病毒学杂志 2008年第4期22卷 247-250页

作者：黄莹扈荣良唐青吉林大学长春130062 军事医学科学院军事兽医研究所中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所脑炎室

目的构建细胞适应株狂犬病病毒反向遗传系统中所需的4个结构蛋白辅助质粒。方法利用RT-PCR方法扩增细胞适应株狂犬病毒的核蛋白（N）、磷酸化蛋白（P）、糖蛋白（G）、转录大蛋白（L）基因，测序结果正确后，分别连接表达载体，构建反... 详细信息

目的构建细胞适应株狂犬病病毒反向遗传系统中所需的4个结构蛋白辅助质粒。方法利用RT-PCR方法扩增细胞适应株狂犬病毒的核蛋白（N）、磷酸化蛋白（P）、糖蛋白（G）、转录大蛋白（L）基因，测序结果正确后，分别连接表达载体，构建反向遗传所需的4个功能性蛋白辅助质粒。结果成功扩增4个结构基因，经测序完全正确，并成功构建反向遗传体系中N蛋白、P蛋白、G蛋白、L蛋白的辅助表达质粒，酶切鉴定完全正确。结论成功构建狂犬病病毒拯救系统的4个辅助质粒，为此细胞适应株狂犬病病毒的拯救奠定基础。

关键词：狂犬病病毒质粒病毒结构蛋白质类

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非人灵长类疱疹病毒对人的潜在危害

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中国生物制品学杂志 2011年第9期24卷 1109-1111,1115页

作者：刘晔扈荣良中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室长春130062

非人灵长类动物(Non-human primate,NHP)是开展人类组织结构、免疫、生理和代谢等医学研究必不可少的实验动物之一,但NHP携带多种人兽共患病病毒,对人类健康造成不同程度的威胁,甚至危及生命。本文对非人灵长类疱疹病毒的致病特性及对... 详细信息

非人灵长类动物(Non-human primate,NHP)是开展人类组织结构、免疫、生理和代谢等医学研究必不可少的实验动物之一,但NHP携带多种人兽共患病病毒,对人类健康造成不同程度的威胁,甚至危及生命。本文对非人灵长类疱疹病毒的致病特性及对人类的生物安全性作一综述。

关键词：非人灵长类疱疹病毒人兽共患病

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通过自制PCR试剂盒确诊雏鹅细小病毒感染

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中国兽医学报 2004年第6期24卷 537-538页

作者：张守峰扈荣良军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062

通过 PCR条件选择 ,组装了可用于确诊鹅细小病毒 (goose parvovirus,GPV)感染的试剂盒。首先根据 Gen Bank中已发表的鹅细小病毒不同株的核苷酸序列 ,设计并合成了 GPV特异性简并引物 ,利用该引物确定 PCR扩增条件 ,并鉴定了扩增产物的... 详细信息

通过 PCR条件选择 ,组装了可用于确诊鹅细小病毒 (goose parvovirus,GPV)感染的试剂盒。首先根据 Gen Bank中已发表的鹅细小病毒不同株的核苷酸序列 ,设计并合成了 GPV特异性简并引物 ,利用该引物确定 PCR扩增条件 ,并鉴定了扩增产物的特异性。根据上述扩增条件 ,组装 GPV诊断试剂盒。试剂盒共有 3个反应管 ,贮于 - 2 0℃ ,应用时取 1号管 ,加入煮沸的肝脏悬液上清 ,2、3号管分别为阴性和阳性对照。按固定条件扩增 ,结果显示 ,待检病料的检出率在 96 %以上。该试剂盒操作简单 ,效果稳定 ,可用于

关键词：自制PCR试剂盒雏鹅细小病毒感染诊断

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组织型纤溶酶原激活剂突变体基因转染细胞株的建立

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北京大学学报（自然科学版） 2004年第4期40卷 583-587页

作者：李敏王玉炯崔景荣扈荣良张守峰宁夏大学生命科学学院银川750021 北京大学医学部天然药物与仿生药物国家重点实验室北京100081 中国人民解放军军需大学研究所长春130062

以脂质体介导法将含有t PA突变基因的真核表达载体pCSRA及pCSRK分别转染CHO dhfr ,经G4 1 8及DMEM双重选择 ,获得两者的稳定表达细胞株。结果表明 ,表达产物具有良好溶纤活性 ;Western印迹实验证明 ,产物具有特异抗原性 ;经多次传代 ,... 详细信息

以脂质体介导法将含有t PA突变基因的真核表达载体pCSRA及pCSRK分别转染CHO dhfr ,经G4 1 8及DMEM双重选择 ,获得两者的稳定表达细胞株。结果表明 ,表达产物具有良好溶纤活性 ;Western印迹实验证明 ,产物具有特异抗原性 ;经多次传代 ,细胞株具有良好的稳定性。比较了无血清培养基CHO S SFMⅡ与常规培养基DMEM培养条件下pCSRK细胞株产物的表达量 ,前者约为后者的 2倍 ,表明无血清培养基SFM有可能用于药用性蛋白的生产。实验为t

关键词：重组纤溶酶原激活剂突变体稳定表达

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HEP-Flury株病毒辅助质粒包装CTN株病毒基因组拯救狂犬病病毒

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中华流行病学杂志 2009年第5期30卷 493-496页

作者：黄莹唐青扈荣良吉林大学农业系长春130062 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室军事医学科学院军事兽医研究所

目的以CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA重组质粒（pCTN-GFP）和HEP-Flury株病毒N、P、L辅助质粒共转染拯救具有活性的CTN株重组狂犬病病毒（CTN-GFP）。方法将CTN株狂犬病病毒全长基因组分4段进行扩增，体外连接扩增片段并克隆人表达载... 详细信息

目的以CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA重组质粒（pCTN-GFP）和HEP-Flury株病毒N、P、L辅助质粒共转染拯救具有活性的CTN株重组狂犬病病毒（CTN-GFP）。方法将CTN株狂犬病病毒全长基因组分4段进行扩增，体外连接扩增片段并克隆人表达载体中，构建CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA重组质粒，基因组ψ基因被标识基因GFP取代，通过与HEP-Flury株病毒N、P、L3个辅助质粒共转染BHK-21细胞，拯救能够稳定表达GFP的重组病毒CTN-GFP。结果成功扩增全长基因组的4个基因片段，并将其克隆入表达载体，构建了CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA重组质粒pCTN-GFP，经酶切鉴定和序列测定证明pCTN-GFP为正确克隆，可直接用于病毒拯救。将pCTN-GFP与HEP-Flury株病毒辅助质粒共转染BHK-21细胞4d后，成功拯救出CTN株重组狂犬病病毒，重组病毒能够表达标识基因GFP，荧光显微镜下可直接观察到标识基因GFP的表达，设计跨GFP和L基因的特性引物对重组病毒进行RT-PCR检测，结果证明此病毒是从克隆的质粒中拯救的重组病毒。结论HEP-Flury株病毒的结构蛋白能够包装并转录CTN株病毒的基因组RNA。

关键词：狂犬病病毒基因组结构蛋白病毒拯救

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狂犬病病毒检测历史及研究进展

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中国人兽共患病学报 2007年第11期23卷 1150-1152,1159页

作者：卢彦欣王雷扈荣良军事医学科学院军事兽医研究所长春130062 吉林大学畜牧兽医学院长春130062

狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus)感染温血动物和人的中枢神经系统后引发急性致死性脑脊髓炎的一种人兽共患传染病。狂犬病是迄今为止人类病死率最高的急性传染病之一,无特效的治疗药物,一旦发病,死亡率几近100%。狂犬病主... 详细信息

狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus)感染温血动物和人的中枢神经系统后引发急性致死性脑脊髓炎的一种人兽共患传染病。狂犬病是迄今为止人类病死率最高的急性传染病之一,无特效的治疗药物,一旦发病,死亡率几近100%。狂犬病主要分布在亚洲、非洲和拉丁美洲等发展中国家。2000多年前,我国就有狂犬病的记载,目前,我国是世界上受狂犬病危害最为严重的国家之一。[第一段]

关键词：狂犬病病毒病毒检测人兽共患传染病急性传染病中枢神经系统发展中国家狂犬病危害脑脊髓炎

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一种改进的简单快速的多位点突变方法

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中国兽医学报 2004年第1期24卷 59-61页

作者：张守峰扈荣良夏咸柱解放军军需大学军事兽医研究所吉林长春130062

为了在 1个基因序列内同时实现多个位点突变 ,本试验以犬 2型腺病毒 E3区为突变目的基因 ,建立了一种以多个引物多聚酶链式反应为基础的简单快速的多位点突变方法。首先根据需要在 E3区不同位置设计了与同一条链互补的 4条突变引物 ,在 ... 详细信息

为了在 1个基因序列内同时实现多个位点突变 ,本试验以犬 2型腺病毒 E3区为突变目的基因 ,建立了一种以多个引物多聚酶链式反应为基础的简单快速的多位点突变方法。首先根据需要在 E3区不同位置设计了与同一条链互补的 4条突变引物 ,在 4条引物 (PBGL、PNCO、PBST、PNOT)中分别引入了 Bgl 、Nco 、Bst B 和 Not 位点 ,与模板链核苷酸序列相比 ,每条引物内均包含了 2～ 3个突变的碱基 ;然后以含 CAV- 2 E3区基因的质粒为模板 ,利用高保真 DNA聚合酶、d NTPs和 5′末端磷酸化的 4条引物 ,在同一个 PCR反应管内进行突变 PCR反应 ,最后以 Dpn 消化反应管内模板链 ,取少许电激转化 *** DH10 B感受态细胞获得转化子。经上述 4种内切酶对转化子 DNA的酶切鉴定 ,证明获得了存在多种突变组合的突变基因 ,为进一步研究 E3区不同缺失对外源基因表达的影响奠定了基础。

关键词：多位点突变方法犬2型腺病毒 E3区聚合酶链式反应

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