检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：晏凡晨湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨BYHWD苷类组分修复损伤血管内皮的作用,并从整合素/细胞外基质环节明确其作用机制。方法:(1)建立大鼠气虚血瘀的内皮损伤模型。大鼠喂养高脂饲料14天后实施球囊损伤术,建立内皮损伤模型。(2)密度梯度离心法提取EPCs。免疫荧光... 详细信息

目的:探讨BYHWD苷类组分修复损伤血管内皮的作用,并从整合素/细胞外基质环节明确其作用机制。方法:(1)建立大鼠气虚血瘀的内皮损伤模型。大鼠喂养高脂饲料14天后实施球囊损伤术,建立内皮损伤模型。(2)密度梯度离心法提取EPCs。免疫荧光法鉴定CD34,CD133,Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1是否为阳性。细胞经慢病毒转染72h后在荧光显微镜下观察转染的结果。(3)将SD大鼠随机分为假手术组,模型组,BYHWD组,苷类组分组,EPCs组,BYHWD+EPCs组,苷类组分+EPCs组和阿托伐他汀组,每组6只。取材后,进行以下检测:HE染色观察血管内膜增厚变化;Western blot检测各组eNOS,ITGβ3,ITGβ6,FAK,P-FAK,ERK1/2,P-ERK1/2 含量;Elisa检测 TC,TG,HDL-C,LDL-C,Col-1,MMP-9,TIMP-1的含量;冰冻切片检测EPCs在体内的归巢情况。结果:(1)与假手术组相比,模型组内膜增生明显,eNOS水平降低,TG、TC、LDL-C水平升高,HDL-C水平降低,证明造模成功。(2)EPCs经鉴定后,CD34,CD133,Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1呈阳性,证实为EPCs。细胞转染率约为90%,细胞转染并标记成功。(3)①与假手术组相比,模型组的内膜/中膜面积比显著升高(P<0.01);与模型组相比,各组的内膜/中膜面积比显著降低(P<0.01);与EPCs组相比,苷类组分+EPCs组的内膜/中膜面积比降低(P<0.05);与BYHWD组相比,苷类组分组的内膜/中膜面积比无差异。②与假手术组相比,模型组的eNOS水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,BYHWD组,苷类组分+EPCs组,阿托伐他汀组的eNOS水平显著升高(P<0.01),其余组eNOS水平升高(P<0.05);与EPCs组相比,苷类组分+EPCs组的eNOS水平升高(P<0.05);与BYHWD组相比,苷类组分组的eNOS水平无差异。③与假手术组相比,模型组TG、TC和LDL-C的水平显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,除EPCs组外,其余组的TG、TC和LDL-C的水平显著降低(P<0.01),HDL-C水平显著升高(P<0.01),阿托伐他汀组的HDL-C水平升高(P<0.05)。④与假手术组相比,EPCs组,BYHWD+EPCs组和苷类组分+EPCs组荧光亮度显著增强(P<0.01);与BYHWD+EPCs组相比,苷类组分+EPCs组荧光亮度显著增强(P<0.01)。⑤与假手术组相比,模型组的ITGβ3和ITGβ6水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,BYHWD组,苷类组分组和EPCs组的ITGβ3水平降低(P<0.05),其余组的ITGβ3水平显著降低(P<0.01);苷类组分组,BYHWD+EPCs组,苷类组分+EPCs组和阿托伐他汀组的ITGβ6水平降低(P<0.05);与EPCs组相比,苷类组分+EPCs组的ITGβ6水平降低(P<0.05);与BYHWD组相比,苷类组分组的ITGβ3和ITGβ6水平无差异。⑥与假手术组相比,模型组的MMP-9、col-1显著升高,TIMP-1水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,各组的col-1水平显著降低,TIMP-1水平显著升高(P<0.01);EPCs组的MMP-9水平降低(P<0.05),其余组的MMP-9水平显著降低(P<0.05);与EPCs组相比,苷类组分+EPCs组的col-1和MMP-9水平降低,TIMP-1水平升高(P<0.05);与BYHWD组相比,苷类组分组的MMP-9、col-1和TIMP-1水平无差异。⑦与假手术组相比,模型组的P-FAK和P-ERK水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,各组的P-FAK水平显著降低(P<0.01);BYHWD组,BYHWD+EPCs组和阿托伐他汀组的P-ERK水平降低(P<0.05),苷类组分组和苷类组分+EPCs组的P-ERK水平显著降低(P<0.01);与BYHWD组相比,苷类组分的P-FAK和P-ERK水平无差异。结论:苷类组分能促进EPCs修复损伤的血管内皮,且苷类组分与原方作用相似,提示为原方的主要药效物质;苷类组分保护血管内皮的机制可能与抑制整合素/细胞外基质及FAK/ERK通路蛋白表达有关。

关键词：补阳还五汤苷类组分内皮祖细胞内皮功能障碍整合素/细胞外基质

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大鼠主动脉血管内皮细胞原代培养方法改良及氧化损伤模型构建

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中国药理学通报 2023年第11期39卷 2192-2198页

作者：马露杨雷晏凡晨刘晓丹丁煌谭维李菀榆唐映红张伟邓常清湖南中医药大学中西医结合学院湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧... 详细信息

目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧光染色法检测vW因子(vWF)进行细胞鉴定。选用2~4代的AVECs,用不同浓度的POVPC干预24 h,检测细胞增殖、细胞骨架、成管能力、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS),构建POVPC诱导的AVECs氧化损伤模型。结果植块联合胶原酶消化法提取培养的内皮细胞具有典型的“铺路石”样特性,生长状态良好,vWF免疫荧光染色阳性,阳性率占0.95,鉴定为内皮细胞。该法可缩短细胞传代时间。采用4.375~70μmol·L^(-1)的POVPC干预培养AVECs,POVPC在17.5~70μmol·L^(-1)时可明显抑制AVECs增殖(P<0.05);POVPC在8.75~70μmol·L^(-1)时,可导致细胞骨架交叉断裂堆积、解聚、结构模糊,且细胞成管能力明显降低(P<0.01),细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。以上改变在POVPC浓度为35μmol·L^(-1)时尤为明显。结论采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法可获得较多的内皮细胞,细胞生长状态良好,缩短了细胞的生长周期,是一种简便、可行的AVECs培养方法。17.5~705μmol·L^(-1)的POVPC可构建稳定AVECs氧化损伤模型。

关键词：血管内皮细胞主动脉 POVPC 模型活性氧氧化损伤

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衛生政策與醫務管理

台湾公共卫生学会联合年会学术研讨会手册

引用

台湾公共卫生学会联合年会学术研讨会手册 2017年 183-215页

作者：陳姿羽張弘潔陳羿澐駱榮問蘇文凱張元瀚古珮綾何婉綺 Meng-tse Lee Wan-Chien Lee Lorenzo Porta Chia-Hung Yo Sze-Da Chen Chien-Chang Lee 張秋文陳薇婷潘炤穎黃志中陳秉立閻永祺孔憲法葉宇柔王重元蔡宗育許弘毅蔡惠婷黃偉堯朱彥蓉王照元蔡祥麟曾斐琪陳依琳葉明叡鄺建濤梁容方張慈桂何清治李美文程一雄李淑芬洪錦墩梁峻豪程珮鳳黃元璋劉慧俐宗念華方麗珍翁瑞宏鄭采容王俐絢蔡惠鞠吳宗晉康雅婷謝慧敏李耿德董鈺琪周盈邑許怡平胡益進鄭雅蕙陳芬如劉博銘陳志弘黃英彥龔嘉德林佩蓉馬震中葉世安郭光明張美娟王英偉魏米秀謝至鎠尤瑞鴻吳泰進范勝雄林孟宏吳宜樺謝惠娟郭子豪黃詩淇張晏菱歐佳齡謝明玉潘寶密梁亞文陳怡靜蘇翠蓉駱靜蘭趙健宏陳明志彭淑惠洪士強陳芬如張曉鳳林育秀趙堡蕓顏淑婷戴碩瑩王志榮顏亦廷沈延盛應純哲鍾國彪吳佾燐廖思詠葉德豐蔡宛汝許立安呂宜蓉張育嘉黃建財林川雄黃麗玲鍾燕宜吳杰亮黃蜀雯楊佳怡張善溱黃莞智邱亨嘉王照元張麗蘋謝慧敏姜鐿晨蕭振陽陳崇桓黃琇棠陳雅婷梁正隆林雨亭郭年真劉玉玲陳金淵陳定紘李宜恭鄭伯良李雅玲郭淑慧林虹汝鄭雅文唐季祿李善茹邱于容曾雅梅劉燕欣鄭世緯賴錦皇方文輝黃淑玲周品三高森永陳一凡吳肖琪陳文欣曾雅梅陳雪芬羅于涵劉晏孜林益卿江東亮張倖慈高月慈李芳盈林垠瀚金家玉林頂李龍騰謝明娟鍾麗琴許淨閔廖翊涵古鯉榕劉立凡張麗娟徐婕陳珮青李玉春郭怡君張淑潔盧宛暄楊雅婷許惠媗林靖晏林宜柏林正介王英偉林志學李采娟林雪淳張李淑女李佳霙李心瑜許怡欣王敬蓉王于心陳俞蓁許齡方林莉茹李啟仁鄭淇丰李牧芸周姿蓉鍾遠芳張美娟蕭茹鈴蔡益堅林宇旋翁珮綺金婉玲葉若分劉雪霞袁旅芳陳雯玲謝婉華蔡鶯鶯林紋正鍾燕宜蘇文凱林良進

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