检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：杨占娜南京农业大学

学位级别：硕士

细胞因子是由免疫细胞和非免疫细胞产生的一类具有广泛生物学活性的异质性肽类调节因子,在体内能激活免疫活性细胞,对免疫应答的产生和调节有重要作用。IL-2、IL-4和IFN-γ,具有调节细胞和体液免疫、抵抗微生物感染、抗肿瘤等多种生物... 详细信息

细胞因子是由免疫细胞和非免疫细胞产生的一类具有广泛生物学活性的异质性肽类调节因子,在体内能激活免疫活性细胞,对免疫应答的产生和调节有重要作用。IL-2、IL-4和IFN-γ,具有调节细胞和体液免疫、抵抗微生物感染、抗肿瘤等多种生物学功能,对调节和增强机体的免疫反应有重要作用。本研究分别成功的构建了山羊和猪的三种细胞因子的真核和原核重组质粒,研究了山羊三种细胞因子对口蹄疫灭活苗的免疫增强作用。为以后筛选高效的细胞因子免疫佐剂奠定基础。1.猪IL-4和IFN-γ的基因克隆依据NCBI上猪IL-4的GenBank NM214123.1登录号,猪IFN-yGenBankNM213948.1登录号,设计合成特异性引物,从刀豆素（ConA）刺激的猪外周血淋巴细胞（PBMC）,应用RT-PCR技术扩增出猪IL-4和IFN-γ基因序列,并采用软件进行生物信息学分析。克隆得到的猪IL-4成熟序列321bp,编码107个氨基酸；猪IFN-γ基因成熟序列432bp编码144个氨基酸与已公布的序列同源性分别为99.5%和100%。2.猪三种细胞因子重组蛋白的表达及活性检测构建了猪三种细胞因子的原核表达载体,并成功的表达了重组蛋白。pET328a（+）-SIL-2的融合蛋白大小为21.4 KD,pET32a（+）-SIL-4融合蛋白为30.3KD, pET28a（+）-SIFN-y融合蛋白为18.4 KD。采用亲和层析的方法对包涵体进行纯化,同时应用梯度透析复性的方式对纯化后的蛋白复性,获得了高纯度的重组蛋白。采用MTT法检测结果显示重组蛋白对猪外周血淋巴细胞的增殖作用的最佳浓度分别为 4 μg/mL、8μg/mL。在 PK-15/VSV系统检测 IFN-γ的抗病毒活性,结果显示在PK-15细胞上抑制VSV病毒复制的活性为2.70×103U/mg。3.真核表达系统的构建通过将山羊和猪的IL-2、IL-4、IFN-y基因分别与真核表达载体pVAX1.0连接,成功获得重组质粒。将重组质粒免疫小鼠,采用RT-PCR和westen-blot法可以检测到重组真核表达载体在小鼠体内成功转录和表达。4山羊细胞因子的免疫增强作用的研究将山羊的三种重组细胞因子作为免疫佐剂与口蹄疫疫苗同时免疫山羊,免疫后山羊检测血清中抗体和***-4、IL-10、IL-17、IFN-γ的水平,检测结果显示免疫重组蛋白实验组的抗体和细胞因子与对照组相比均有明显的升高。

关键词：猪细胞因子山羊免疫增强

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髓过氧化物酶与冠心病合并2型糖尿病患者冠脉病变的相关性研究

髓过氧化物酶与冠心病合并2型糖尿病患者冠脉病变的相关性研究

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作者：杨占娜山西医科大学

学位级别：硕士

目的:检测冠心病(coronary heart disease,CHD)合并2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血浆髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)浓度,探讨MPO水平与冠心病合并2型糖尿病患者冠脉病变程度的相关性。方法:选取山西省汾阳医院202... 详细信息

目的:检测冠心病(coronary heart disease,CHD)合并2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血浆髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)浓度,探讨MPO水平与冠心病合并2型糖尿病患者冠脉病变程度的相关性。方法:选取山西省汾阳医院2020年1月至2021年10月因胸痛或胸闷症状住院并且首次行冠状动脉造影(coronary angiography,CAG)检查的患者共298例,收集入选者一般临床资料,根据患病不同将入选的研究对象分为A、B、C、D四组,其中A组70例(正常对照组,即无CHD和T2DM组)、B组25例(单纯T2DM组,即没有合并CHD的T2DM组)、C组98例(单纯CHD组,即没有合并T2DM的CHD组)、D组105例(CHD合并T2DM组)。全部研究对象均检测了血浆MPO水平并根据CAG结果进行Gensini评分来测定冠状动脉病变的程度。A、B、C、D多组间比较采用单因素方差分析,在各组差异有统计学意义的基础上再通过LSD检验进行组间两两比较分析。采用Logistic回归对D组进行多因素分析。四组Gensini评分与MPO水平之间的关系采用Spearman相关分析(不符合双正态分布)和Pearson线性相关分析(符合双正态分布),P<0.05认为差异性有统计学意义。结果:1.四组一般临床资料及实验室指标比较分析结果显示:年龄、性别、高血压病史、吸烟史、饮酒史、TC及TG比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(Hb Alc)、HDL、LDL、MPO及Gensini评分有统计学意义(P<0.05)。在此基础上再对四组进行组间两两比较,结果显示D组(冠心病合并2型糖尿病组)的空腹血糖、MPO及Gensini评分与其他三组比较均有统计学意义(P<0.05)。2.对在上述单因素分析中有统计学意义的指标进行冠心病合并2型糖尿病(D组)患病的多因素Logistic回归分析,结果显示MPO为冠心病合并2型糖尿病的危险因素(OR=1.030,P<0.05)。3.通过正态检验显示B组符合双正态分布,采用Pearson相关性分析,其余组不符合双正态分布,采用Spearman相关性分析。结果显示所有研究对象MPO与Gensini评分呈正相关(r=0.674,P<0.05)。对四组分别进行MPO与Gensini评分相关分析,结果显示A组(r=0.363,P<0.05)、B组(r=0.609,P<0.05)、C组(r=0.672,P<0.05)、D组(r=0.906,P<0.05)四组MPO与Gensini评分均呈正相关,而D组(冠心病合并2型糖尿病组)的相关系数更大。结论:MPO是冠心病合并2型糖尿病的危险因素,MPO水平对冠心病合并2型糖尿病患者冠状动脉病变程度有一定的预测价值。

关键词：髓过氧化物酶冠脉病变程度冠状动脉造影冠心病合并2型糖尿病 Gensini评分

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MPO水平与冠心病合并2型糖尿病病人冠状动脉病变程度的相关性

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中西医结合心脑血管病杂志 2024年第4期22卷 711-714页

作者：杨占娜李建国山西医科大学汾阳学院山西汾阳032200 山西医科大学附属汾阳医院山西汾阳032200

目的:探讨冠心病(CHD)合并2型糖尿病(T2DM)病人血浆髓过氧化物酶(MPO)水平与冠状动脉病变严重程度的相关性。方法:选取2020年1月—2021年10月于山西医科大学附属汾阳医院因胸痛或胸闷症状住院并首次行冠状动脉造影(CAG)检查的298例病人... 详细信息

目的:探讨冠心病(CHD)合并2型糖尿病(T2DM)病人血浆髓过氧化物酶(MPO)水平与冠状动脉病变严重程度的相关性。方法:选取2020年1月—2021年10月于山西医科大学附属汾阳医院因胸痛或胸闷症状住院并首次行冠状动脉造影(CAG)检查的298例病人作为研究对象,分为对照组(70例)、T2DM组(25例)、CHD组(98例)、CHD合并T2DM组(105例)。收集病人的年龄、性别、高血压病史、吸烟史、饮酒史等临床资料;所有入选者均于入院24 h内采集空腹肘静脉血进行总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)测定;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆MPO水平。根据CAG结果进行Gensini评分评估冠状动脉病变的程度。采用Logistic回归分析对CHD合并T2DM组进行多因素分析。4组Gensini评分与MPO水平之间的关系采用Pearson线性相关分析。结果:4组病人年龄、性别、高血压病史、吸烟史、饮酒史、TC及TG比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic回归分析显示,MPO是CHD合并T2DM的危险因素(OR=1.030,P<0.05)。Pearson相关分析显示,对照组、T2DM组、CHD组、CHD合并T2DM组MPO水平与Gensini评分均呈正相关,且CHD合并T2DM组的相关系数更大。结论:MPO是CHD合并T2DM的危险因素,MPO水平对CHD合并T2DM病人冠状动脉病变程度有一定的预测价值。

关键词：冠心病 2型糖尿病髓过氧化物酶冠状动脉病变程度冠状动脉造影 Gensini评分

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全市第一栖霞建成11个湿地保护小区

全市第一栖霞建成11个湿地保护小区

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南京日报

作者：肖凡杨占娜

本报讯（记者肖凡通讯员杨占娜）清风徐来，碧波荡漾，长江龙潭段岸边，芦苇芦竹摇曳，沿江滩涂的柳树林郁郁葱葱，在此休憩停留的白头鹎、白鹭，时而欢快跳跃，时而低空掠过水面。记者了解到，栖霞区将在本月底前建成带子洲湿地保... 详细信息

本报讯（记者肖凡通讯员杨占娜）清风徐来，碧波荡漾，长江龙潭段岸边，芦苇芦竹摇曳，沿江滩涂的柳树林郁郁葱葱，在此休憩停留的白头鹎、白鹭，时而欢快跳跃，时而低空掠过水面。记者了解到，栖霞区将在本月底前建成带子洲湿地保护小区。带子洲湿地保护小区范围内包括......

关键词：湿地保护栖霞区

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猪重组IL-2、IL-4和IFN-γ对口蹄疫合成肽疫苗的免疫增强作用研究

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畜牧兽医学报 2015年第8期46卷 1390-1399页

作者：涂浩赵星灿杨占娜李梦辉徐立新严若峰宋小凯李祥瑞南京农业大学动物医学院南京210095 洛阳市动物疫病控制中心洛阳471002

为了研究猪IL-2、IL-4和IFN-γ对口蹄疫合成肽疫苗的免疫佐剂效应,将经测定具有生物学活性的猪重组IL-2、IL-4和IFN-γ与口蹄疫合成肽疫苗配伍免疫仔猪,检测仔猪抗口蹄疫抗体水平和血清细胞因子IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ含量的变化,... 详细信息

为了研究猪IL-2、IL-4和IFN-γ对口蹄疫合成肽疫苗的免疫佐剂效应,将经测定具有生物学活性的猪重组IL-2、IL-4和IFN-γ与口蹄疫合成肽疫苗配伍免疫仔猪,检测仔猪抗口蹄疫抗体水平和血清细胞因子IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ含量的变化,观察其免疫佐剂效应。结果表明:制备的IL-2、IL-4和IFN-γ重组蛋白质均有较好的生物学活性,其中IL-2和IFN-γ重组蛋白质均能极显著提高仔猪抗口蹄疫抗体水平(P<0.01),而IL-4重组蛋白质抑制口蹄疫抗体的产生(P<0.01)。血清细胞因子检测结果发现口蹄疫疫苗+IL-4组的IL-4和IL-10含量均较空白疫苗免疫猪显著升高(P<0.05),口蹄疫疫苗+IL-2组及口蹄疫疫苗+IFN-γ组的IFN-γ含量较空白疫苗免疫猪极显著升高(P<0.01)。结果提示,重组细胞因子IL-2和IFN-γ分别作为免疫佐剂与口蹄疫疫苗联用,能显著增强机体的体液和细胞免疫应答。

关键词：重组蛋白质 IL-2 IL-4 IFN-γ 佐剂效应口蹄疫

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乙型脑炎病毒感染猪睾丸细胞的miRNA表达谱差异分析

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南京农业大学学报 2019年第4期42卷 734-739页

作者：张元鹏杨占娜杨利李兰于晓明杜露平陈瑾侯立婷乔绪稳侯继波郑其升江苏省农业科学院动物免疫工程研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京市栖霞区动物卫生监督所江苏南京210046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 江苏省食品质量安全重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014

[目的]本试验旨在分析乙型脑炎病毒(JEV)感染猪睾丸(ST)细胞和正常ST细胞miRNA差异表达谱,以探索miRNA在JEV感染过程中的作用及其调控机制。[方法]分别提取正常ST细胞和JEV感染8h后的ST细胞总RNA,利用高通量测序技术检测分析ST细胞中的m... 详细信息

[目的]本试验旨在分析乙型脑炎病毒(JEV)感染猪睾丸(ST)细胞和正常ST细胞miRNA差异表达谱,以探索miRNA在JEV感染过程中的作用及其调控机制。[方法]分别提取正常ST细胞和JEV感染8h后的ST细胞总RNA,利用高通量测序技术检测分析ST细胞中的miRNA表达谱并进行差异分析。使用miRanda软件对表达差异显著miRNA的靶基因进行预测并对靶基因进行GO分析。选取6个显著性差异表达的miRNA通过RT-qPCR进行验证。[结果]与正常ST细胞相比,JEV感染后的ST细胞有112个差异表达miRNA,其中80个miRNA上调表达,32个miRNA下调表达。经RT-qPCR方法验证6个差异表达的miRNA结果与高通量测序结果一致。差异表达miRNA靶基因的生物学功能相对集中在细胞代谢、细胞黏附等生物过程。[结论]检测和分析JEV感染后猪睾丸细胞的miRNA表达谱,获得了大量的与JEV感染相关的miRNA表达谱数据,为揭示JEV感染生殖系统致病机制提供了有效的数据和理论基础。

关键词：乙型脑炎病毒猪睾丸细胞 miRNA 高通量测序

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民办高校大学生德育主体性教育途径实证研究——以西安外事学院为例