背景:银屑病是多因素介导的慢性、复发性、炎症性、系统性疾病,典型临床表现为反复发作的鳞屑性红斑或斑块,局限或广泛分布于全身,治疗困难,给患者的身心健康和生活质量带来严重负面影响,为社会和家庭带来沉重负担,寻常型银屑病是最主要的一型。角质形成细胞过度增殖、真皮乳头血管扩张迂曲、炎细胞浸润是寻常型银屑病最重要的病理表现。导致角质形成细胞过度增殖的氧化应激相关信号通路丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路在银屑病中异常激活,且典型的RAS/MAPK通路受到许多蛋白质、衰减器和负反馈机制的严格调控,辅助蛋白等调控因子的突变可导致RAS/MAPK通路失调,从而导致癌症和RAS相关的发育综合征等。与芽孢相关的EVH1结构域蛋白1(Sprouty-related EVH1domain-containing protein 1,Spred1)是细胞增殖调节蛋白,可通过抑制RAS/MAPK信号通路发挥抑制细胞过度增殖的作用,目前发现已经在肿瘤、心血管疾病、肺血管疾病、神经系统疾病、骨疾病以及炎症性疾病中发挥重要作用;部分研究显示Spred1在结肠癌的发病中起癌基因的作用,与肿瘤的发生发展呈正相关,推测Spred1在细胞增殖性疾病的发生发展中呈现多态性。到目前为止,Spred1在银屑病中的相关研究甚少,然而银屑病作为以角质形成细胞过度增殖为主要表现的皮肤病,探索Spred1在银屑病角质形成细胞增殖中的作用是很有必要的。本实验室先前的研究发现银屑病真皮间充质干细胞(Dermal mesenchymal stem cell,DMSC)可抑制Spred1的正常表达,增加MAPK及其下游信号分子的mRNA表达水平,同时对665名银屑病的患者外周血进行了DNA测序分析,发现Spred1存在8个非同义突变点,与正常人相比有统计学意义。根据国内外的研究,我们推测银屑病患者皮肤组织中的Spred1或许也存在异常表达,银屑病患者皮肤组织中Spred1的异常表达是造成角质形成细胞异常增殖的重要原因。为了证实这一推测,我们利用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,RT-PCR)和免疫组化(Immunohistochemical,IHC)方法检测了寻常型银屑病患者皮损、非皮损及正常人皮肤组织Spred1的mRNA表达水平以及Spred1蛋白的表达位置、表达量,以初步证明Spred1在寻常型银屑病患者皮损形成中发挥作用。方法:收集2021年4月-2021年10月就诊于太原市中心医院皮肤科门诊并被首次诊断为寻常型银屑病的患者12例,男6例,女6例,取其皮损组织、非皮损组织分别作为本研究的皮损组和非皮损组。收集同期就诊于太原市中心医院皮肤外科行整形手术的健康人12例,男6例,女6例,取其切除的多余皮肤组织作为本研究的正常对照组。将以上3组皮肤组织均分别给予2种不同的处理:1.直接冷冻于-80℃冰箱待用;2.用10%福尔马林溶液固定后石蜡包埋待用。待组织标本收齐,RT-PCR方法检测Spred1mRNA的表达,用2法计算Spred1mRNA的相对表达量;IHC法检测Spred1蛋白的表达,用Image Pro Plus 6.0软件分析Spred1蛋白的表达量、表达位置,在400×光学显微镜下计数10个视野Spred1蛋白胞浆及胞膜阳性细胞的平均个数。寻常型银屑病患者皮损组和非皮损组间的比较用Wilcoxon符号秩和检验;正常对照组与寻常型银屑病患者皮损组、非皮损组的比较用Mann-Whitney U检验。结果:1.寻常型银屑病患者皮损和非皮损Spred1 mRNA表达量差异无统计学意义,且二者Spred1mRNA表达量较正常对照组均上调,差异有统计学意义(P<0.017)。2.寻常型银屑病患者皮损和非皮损Spred1蛋白表达模式为棘细胞层胞核表达为主,正常对照组Spred1蛋白表达模式为基底层胞浆及胞膜表达为主。3.寻常型银屑病患者皮损和非皮损Spred1蛋白表达总量差异无统计学意义;且二者Spred1蛋白表达总量较正常对照组均上调,差异有统计学意义(P<0.017)。4.寻常型银屑病患者皮损和非皮损Spred1蛋白胞浆和胞膜表达量差异无统计学意义;且二者Spred1蛋白胞浆及胞膜表达水平较正常人组均下调,差异有统计学意义(P<0.017)。结论:本研究发现寻常型银屑病患者皮损和非皮损皮肤Spred1mRNA和Spred1蛋白表达总量较正常人上调而浆膜表达量较正常人下调,Spred1蛋白在寻常型银屑病患者中表达模式与正常人存在差异,研究初步表明Spred1蛋白参与寻常型银屑病角质形成细胞过度增殖的过程。本课题为山西省医学重点攻关专项“Spred1调控ERK信号通路在银屑病角质形
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