检索结果-内蒙古大学图书馆

经济动物学报 2025年第1期29卷 62-67页

作者：孟庆达侯嘉怡杨潍菡王静曾长军四川农业大学动物科技学院猪禽种业全国重点实验室农业生物信息教育部重点实验室农业农村部畜禽生物组学重点实验室畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室西部宠物生命科学研究院

低温保存已经广泛应用于犬精液人工授精，有效促进了优良犬品种间的遗传交流。在低温保存过程中，温度、pH与渗透压变化可导致精子出现氧化应激与冷休克等现象，严重影响犬精子质量与受精率。近年来，在犬精液稀释液中常加入抗冷物质和... 详细信息

低温保存已经广泛应用于犬精液人工授精，有效促进了优良犬品种间的遗传交流。在低温保存过程中，温度、pH与渗透压变化可导致精子出现氧化应激与冷休克等现象，严重影响犬精子质量与受精率。近年来，在犬精液稀释液中常加入抗冷物质和抗氧化物质，以防止精子冷休克，缓解氧化应激和脂质过氧化。对国内外犬精液低温保存的研究进展进行综述，为高效保存犬精液，促进犬种质资源保护以及人工授精技术的推广和应用等提供参考。

关键词：犬精液低温保存抗冷物质抗氧化物质

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槲皮素缓解内质网应激诱导的水牛卵泡颗粒细胞凋亡的初步研究

槲皮素缓解内质网应激诱导的水牛卵泡颗粒细胞凋亡的初步研究

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作者：杨潍菡广西大学

学位级别：硕士

哺乳动物卵巢上有数以千计的卵泡,但在卵泡发育过程中大部分的卵泡都会发生闭锁,影响雌性动物繁殖力,造成优良雌性资源的浪费。颗粒细胞的凋亡是引起卵泡闭锁的主要原因之一,因此探究颗粒细胞的凋亡对提高雌性动物繁殖力至关重要。内质... 详细信息

哺乳动物卵巢上有数以千计的卵泡,但在卵泡发育过程中大部分的卵泡都会发生闭锁,影响雌性动物繁殖力,造成优良雌性资源的浪费。颗粒细胞的凋亡是引起卵泡闭锁的主要原因之一,因此探究颗粒细胞的凋亡对提高雌性动物繁殖力至关重要。内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress)可以诱导细胞凋亡,影响细胞正常功能。然而,内质网应激在水牛(Bubalus bubalis)颗粒细胞的凋亡和功能中产生的影响尚不清楚。槲皮素(Quercetin QC)作为一种植物源性的黄酮类化合物,能通过抗氧化、抗炎症等多种生物途径保护细胞。QC能否缓解内质网应激对水牛颗粒细胞造成的影响仍有待探究。因此,本研究以水牛颗粒细胞为研究对象,利用衣霉素(Tunicamycin)构建内质网应激模型,探究内质网应激对水牛颗粒细胞的影响,并通过添加QC探究能否缓解内质网应激对水牛颗粒细胞的影响。本文主要研究内容如下:一、水牛颗粒细胞的分离鉴定与内质网应激模型的构建。通过对水牛卵泡液分离纯化获得水牛颗粒细胞并进行细胞免疫荧光鉴定。结果表明,获取的细胞均检测到FSHR蛋白荧光信号,表明分离得到的细胞均为水牛颗粒细胞。通过添加衣霉素构建水牛颗粒细胞内质网应激模型,使用流式细胞分析检测细胞凋亡率、q RT-PCR和Western Blot检测细胞凋亡及内质网应激相关基因和蛋白的变化。结果表明,使用2.5μg/m L的衣霉素处理颗粒细胞48 h,显著增加了颗粒细胞的凋亡率;q RT-PCR结果分析促凋亡相关基因表达量上调,抗凋亡相关基因表达量下调,内质网应激相关基因的表达量显著上升;Western Blot分析证实蛋白质表达变化与m RNA变化一致。表明成功构建水牛颗粒细胞内质网应激模型。二、槲皮素缓解内质网应激引起的水牛颗粒细胞凋亡。使用2μg/m L的QC预处理颗粒细胞8 h,再构建内质网应激模型,通过流式细胞分析检测颗粒细胞凋亡率,q RT-PCR和Western Blot检测细胞凋亡和内质网应激相关基因和蛋白的变化。结果表明,QC预处理显著降低颗粒细胞凋亡率和细胞内ROS(Reactive Oxygen Species)水平,同时可以显著降低颗粒细胞促凋亡和内质网应激相关基因和蛋白的表达,增加抗凋亡基因和蛋白的的表达。为进一步探究QC缓解内质网应激的作用机制,通过转染pc DNA3.1-CHOP过表达质粒,探究QC对内质网应激的作用机制。结果表明过表达Chop基因后,细胞凋亡率和ROS水平显著增强,QC预处理后显著降低颗粒细胞ROS水平和细胞凋亡率。说明QC预处理可通过调控内质网应激通路缓解对颗粒细胞的影响。三、槲皮素缓解内质网应激对颗粒细胞功能的影响。通过ELISA方法测定颗粒细胞中雌二醇(Estradiol,E2)和孕酮(Progesterone,PG)的含量,发现内质网应激会抑制颗粒细胞中E2和PG的分泌,QC预处理能促进E2和PG的分泌。利用q RT-PCR和Western Blot检测E2和PG合成分泌相关基因和蛋白的表达,结果表明,内质网应激发生后,CYP19A1和HSD3B1基因及蛋白的表达降低,QC预处理后,CYP19A1和HSD3B1基因和蛋白的表达量显著上调。上述结果说明水牛颗粒细胞内质网应激会抑制E2和PG的合成分泌,而QC预处理会显著增加E2和PG的合成分泌。综上所述,本研究在水牛颗粒细胞中成功构建内质网应激模型,阐明了QC通过缓解内质网应激抑制水牛颗粒细胞凋亡、促进类固醇激素分泌,初步探讨了QC缓解内质网应激的作用机制,为利用QC缓解水牛卵泡闭锁,提高雌性水牛繁殖能力提供新的思路。

关键词：槲皮素水牛颗粒细胞内质网应激细胞凋亡类固醇激素

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水牛PADI6重组蛋白多克隆抗体的制备及表达模式分析

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中国兽医科学 2021年第11期51卷 1468-1474页

作者：杨潍菡陈东荣张俊俊黄星晨张明广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004

为了解PADI6母源基因在水牛上的表达模式,初步阐明母源基因对卵母细胞的成熟和胚胎早期发育的作用,首先分析了PADI6基因在水牛上的表达情况,通过基因克隆,制备多克隆抗体,发现PADI6基因在不同物种中进化具有保守性。将所得PADI6多克隆... 详细信息

为了解PADI6母源基因在水牛上的表达模式,初步阐明母源基因对卵母细胞的成熟和胚胎早期发育的作用,首先分析了PADI6基因在水牛上的表达情况,通过基因克隆,制备多克隆抗体,发现PADI6基因在不同物种中进化具有保守性。将所得PADI6多克隆抗体进行特异性表达分析,发现PADI6仅在卵母细胞中表达。为进一步了解PADI6母源基因在早期胚胎的表达情况。对水牛PADI6母源基因转录水平进行了分析,发现转录产物在GV期和MⅡ期卵母细胞中大量积累,在桑椹胚和囊胚阶段显著降低。上述研究结果表明,母源基因PADI6对卵母细胞的成熟和胚胎早期发育至关重要。

关键词：水牛 PADI6 母源基因表达模式多克隆抗体

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获能前后水牛精子的差异蛋白质组分析

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河南农业科学 2022年第5期51卷 140-147页

作者：刘润峰候振黄星晨肖凯杨潍菡张俊俊付强广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004

为了探索获能前后水牛精子的蛋白质动态变化,通过串联质谱标签(TMT)结合液质联用(LCMS/MS)分析技术,对获能前后水牛精子的总蛋白质进行定量分析。结果表明,获能前后水牛精子的差异表达蛋白质共有93个,获能后表达上调蛋白质52个,表达下... 详细信息

为了探索获能前后水牛精子的蛋白质动态变化,通过串联质谱标签(TMT)结合液质联用(LCMS/MS)分析技术,对获能前后水牛精子的总蛋白质进行定量分析。结果表明,获能前后水牛精子的差异表达蛋白质共有93个,获能后表达上调蛋白质52个,表达下调蛋白质41个。差异表达蛋白质参与了有性生殖、细胞骨架、转运和精子发生等生物学进程,也参与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)和可溶性NSF附着蛋白受体(SNARE)等信号通路。经蛋白质互作网络分析,筛选出调节通路的中心蛋白(Hub)有拓扑异构酶2(TOP2A)、烯醇化酶3(ENO3)等。Western blot结果表明,囊泡相关膜蛋白4(VAMP4)和载脂蛋白C 3(APOC3)在水牛精子获能后表达量升高。

关键词：水牛精子获能串联质谱标签液质联用蛋白质组学

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槲皮素缓解内质网应激(ERS)介导的水牛颗粒细胞凋亡

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中国兽医学报 2022年第8期42卷 1713-1718页

作者：杨潍菡刘润峰张俊俊黄星晨张鹏飞黄良凤张明广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004

内质网应激(ERS)在颗粒细胞的凋亡中起重要作用,颗粒细胞的凋亡又是诱发卵泡闭锁的关键因素。槲皮素(QC)做为一种植物源性黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎等生物活性。研究表明QC可通过内质网应激保护细胞。为了解QC对水牛颗粒细胞的保... 详细信息

内质网应激(ERS)在颗粒细胞的凋亡中起重要作用,颗粒细胞的凋亡又是诱发卵泡闭锁的关键因素。槲皮素(QC)做为一种植物源性黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎等生物活性。研究表明QC可通过内质网应激保护细胞。为了解QC对水牛颗粒细胞的保护作用,初步阐明QC通过内质网应激缓解水牛颗粒细胞的凋亡机制。分析QC对细胞活力的影响,利用CCK-8试剂检测细胞活力,发现低质量浓度(1.0~2.5 mg/L)的QC能够增加细胞活力;使用内质网应激诱导剂衣霉素,在体外构建内质网应激模型,利用流式细胞术检测细胞凋亡情况,q-PCR检测内质网应激相关基因表达量情况,发现2.5 mg/L的衣霉素可促使内质网应激相关基因表达显著上升,细胞凋亡也显著增加;随后,探究QC对内质网应激条件下水牛颗粒细胞的保护作用,通过流式细胞术检测细胞凋亡情况,q-PCR和Western blot检测内质网应激以及细胞凋亡相关基因和蛋白的表达情况,发现QC预处理后,内质网应激相关基因的表达显著降低,细胞凋亡情况也得到缓解。综上,QC能缓解内质网应激诱导的细胞凋亡。

关键词：槲皮素(QC) 内质网应激(ERS) 水牛颗粒细胞细胞凋亡

来源：评论

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