检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：林梵宇厦门大学

学位级别：博士

对虾白斑综合症病毒(WSSV)是危害养殖虾产业的主要病原。WSSV极早期基因在病毒感染后立即表达，它们通常编码调控因子，调控病毒下游基因的表达，或者调整病毒增殖所需的宿主细胞生理环境，从而达到促进病毒增殖的目的。对于病毒极早期... 详细信息

对虾白斑综合症病毒(WSSV)是危害养殖虾产业的主要病原。WSSV极早期基因在病毒感染后立即表达，它们通常编码调控因子，调控病毒下游基因的表达，或者调整病毒增殖所需的宿主细胞生理环境，从而达到促进病毒增殖的目的。对于病毒极早期基因转录调控的研究，有助于了解病毒侵染早期的机制，为今后研发抗病毒药物提供潜在靶点。\n 目前，共21个WSSV极早期基因得到了鉴定。然而，其中大多数基因的转录调控机制依然未知。本文针对18个极早期基因5\'端序列进行转录活性分析，鉴定得到8个启动子功能区。我们通过5\'RACE实验测定了这些具有启动子功能区的极早期基因的转录起始位点。这些极早期基因启动子在转录起始位点上游约30bp几乎都具有TATAbox，而wsv051，wsv108和wsv465的转录起始位点具有节肢动物转录起始保守元件(A/C/T)CA(G/T)T。\n 为了鉴定参与转录调控的启动子核心元件，我们构建了一系列极早期基因启动子（包括P051，P056，P083，P108，P249，P403和P465）分段缺失突变质粒。所有缺失TATAbox的突变，启动子活性都降低至阴性水平。TATAbox在转录起始中的必要性证明宿主的RNA聚合酶Ⅱ参与了WSSV极早期基因的表达。此外，除了TATAbox以外的一些启动子缺失突变也同样导致启动子活性的明显下降，包括P051的-625/-436区域，P056的-419/-285区域，P083的-475/-384区域，P403的-278/-178区域，P465的-264/-187区域。P249突变缺失-554/-331，-330/-221和-220/-151导致启动子活性从100％分别降低至83％，63％和28％。CRE转录调控元件(TGACGTCA)在多个WSSV极早期基因启动子功能区存在。针对这些CRE位点特异性突变实验证明，突变后的P403和P465的启动子活性大幅度降低，表明在这两个启动子中CRE元件对于WSSV极早期基因转录具有重要功能。\n 我们的实验结果提供了WSSV极早期基因启动子的全面信息，将会有助于我们更深刻地认识病毒基因的转录调控过程。

关键词：对虾白斑综合症病毒极早期基因启动子转录活性调控机制

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对虾白斑综合症病毒（WSSV）膜蛋白VP52B的鉴定和功能研究及极早期基因启动子的筛选

对虾白斑综合症病毒（WSSV）膜蛋白VP52B的鉴定和功能研究及极早...

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作者：林梵宇国家海洋局第三海洋研究所

学位级别：硕士

对虾白斑综合症病毒(WSSV)是危害养殖对虾的主要病原,致病能力强,传播范围广,给世界对虾养殖业造成了巨大的损失,至今依然没有有效的防治方法。本文围绕病毒膜蛋白开展研究,此外,还对病毒的极早期基因启动子进行了初步的筛选鉴定。研究... 详细信息

对虾白斑综合症病毒(WSSV)是危害养殖对虾的主要病原,致病能力强,传播范围广,给世界对虾养殖业造成了巨大的损失,至今依然没有有效的防治方法。本文围绕病毒膜蛋白开展研究,此外,还对病毒的极早期基因启动子进行了初步的筛选鉴定。研究工作主要包括以下几个方面: (1)本文对WSSV膜蛋白VP52B进行了鉴定和功能分析。该蛋白是病毒基因wsv256的编码产物。在*** BL-21菌株中表达了GST-VP52B,并制备了相应的抗血清。GST pull-down分析发现VP52B能与另一个病毒膜蛋白VP26相互作用。之前的研究认为VP26是重要的连接蛋白,为了确定该蛋白与VP52B的结合位点,表达了不同长度的VP26突变体,并发现VP26和VP52B相互作用的位点位于VP26 135～170Aa。 (2)通过超声法将WSSV基因组随机断裂至400～900bp DNA片段,并插入PIZ△IE/V5-EGFP载体以构建文库,转染昆虫细胞Hi5后,发现其中部分细胞有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,说明这部分细胞中的DNA片段可能具有极早期启动子活性。这对于进一步筛选和鉴定WSSV极早期基因及开展极早期启动子研究具有重要意义。 (3)从WSSV基因组中选择了20多个有锌指结构域或其他转录调控相关结构域的基因,克隆其上游400～500bp的启动子序列,连接到检测启动子活性的载体中。转染昆虫细胞Hi5发现有两个ORF(ORF249、ORF403)上游序列具有较强的启动子活性。这两个ORF序列分析发现,它们都具有Ring-H2 finger motif,因此推测这种结构特点与WSSV极早期基因启动子活性相关。

关键词： VP52B 启动子极早期基因

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对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒荧光病毒样颗粒的构建

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应用海洋学学报 2015年第3期34卷 411-418页

作者：侯路红林梵宇国家海洋局第三海洋研究所国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室福建厦门361005

对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是对虾养殖业中主要的致病病毒之一.在原核系统中表达该病毒的衣壳蛋白,发现其能够自组装成与天然病毒大小、形态相似的病毒样颗粒.本研究通过在衣壳蛋白原核表达质粒上融合表达增强型绿色荧光... 详细信息

对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是对虾养殖业中主要的致病病毒之一.在原核系统中表达该病毒的衣壳蛋白,发现其能够自组装成与天然病毒大小、形态相似的病毒样颗粒.本研究通过在衣壳蛋白原核表达质粒上融合表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP),并在两融合蛋白之间插入一段接头序列(linker),使自组装不受空间位阻的影响.通过原核表达纯化,成功得到IHHNV的荧光病毒样颗粒(f VLPs).电镜下观察样品具有完整的二十面体形态,免疫金标实验发现EGFP成功展示在病毒样颗粒外表面.

关键词：海洋生物学对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒荧光病毒样颗粒融合蛋白接头序列

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对虾白斑综合症病毒极早期基因启动子筛选文库的构建

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台湾海峡 2010年第2期29卷 184-188页

作者：林梵宇徐丽美杨丰国家海洋局第三海洋研究所生物遗传资源国家海洋局重点实验室福建厦门361005

对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是危害对虾养殖业的主要病原,而WSSV极早期基因对病毒功能基因的转录翻译和调控起着至关重要的作用.本研究将WSSV基因组以超声法随机断裂至400～900bp DNA片段,并插入启动子缺失且... 详细信息

对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是危害对虾养殖业的主要病原,而WSSV极早期基因对病毒功能基因的转录翻译和调控起着至关重要的作用.本研究将WSSV基因组以超声法随机断裂至400～900bp DNA片段,并插入启动子缺失且多克隆位点下游具有报告基因的载体来构建文库,转染昆虫细胞Hi5.倒置荧光显微镜观察发现部分转染后的细胞有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,表明这部分细胞中的DNA片段可能具有极早期启动子活性.流式细胞仪分析显示,这部分荧光细胞占总细胞的比例为0.35%.由于转染效率为50%,可认为占比0.7%的WSSV基因组随机片段能在Hi5细胞中激发下游报告基因的转录翻译,可能具有极早期基因启动子活性.这对于进一步筛选和鉴定WSSV极早期基因及开展极早期启动子研究具有重要的意义.

关键词：海洋生物学对虾白斑综合症病毒极早期基因启动子筛选文库增强型绿色荧光蛋白

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微区XRF技术分析无机元素在植物中的原位分布

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植物学报 2020年第6期55卷 733-739页

作者：林梵宇尹希杰梁毓娜黄杰超自然资源部第三海洋研究所厦门361005

植物的无机元素分布特征对植物生理过程具有重要的指标作用,可揭示营养物质分布、代谢途径及毒理耐受性等多种生命过程。用微区XRF技术测试样品中无机元素的分布,具有原位无损、可进行较大面积样品连续成像分析以及前处理过程简单等诸... 详细信息

植物的无机元素分布特征对植物生理过程具有重要的指标作用,可揭示营养物质分布、代谢途径及毒理耐受性等多种生命过程。用微区XRF技术测试样品中无机元素的分布,具有原位无损、可进行较大面积样品连续成像分析以及前处理过程简单等诸多优势。将微区XRF技术应用于植物样品不同器官的无机元素分布检测,旨在探讨该技术在植物样品测试中的仪器参数选择、样品前处理方法和数据后处理手段等对测试结果的影响。为得到可靠的实验结果,对不同含水量的器官进行不同的前处理,并比较不同驻留时间、测试腔体真空与否等仪器条件对测试结果的影响,同时对数据处理方法进行探索,包括对获得的数据进行图像叠加及对不同元素浓度比例进行半定量分析。研究结果表明,微区XRF技术测试植物样品中无机元素分布具有一定的技术优势。

关键词：植物微区XRF 元素分布原位无损

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绣球属(Hydrangea L.)不育花萼片微形态以及元素含量和分布的分析

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分子植物育种 2023年

作者：张梅杨加文林梵宇刘雅倩童琪汤升虎何选泽徐建贵州省植物园自然资源部第三海洋研究所西宁市园林植物园

绣球属(Hydrangea)隶属于绣球花科(Hydrangeaceae)的绣球族(Hydrangeeae)。该属多数为灌木，蒴果顶端突出或截平，其最大的特点是具有不育花，花序硕大、色彩丰富，具有重要的观赏价值。然而，如何控制该属不育花的花色是育种领域的一... 详细信息

绣球属(Hydrangea)隶属于绣球花科(Hydrangeaceae)的绣球族(Hydrangeeae)。该属多数为灌木，蒴果顶端突出或截平，其最大的特点是具有不育花，花序硕大、色彩丰富，具有重要的观赏价值。然而，如何控制该属不育花的花色是育种领域的一大难题。应用能谱-扫描电子显微镜技术和微区X射线荧光元素分析测试，对绣球属14种植物不育花萼片的微形态性状进行观察、元素分布和含量进行分析。结果表明：不育花萼片表面的细胞轮廓分为2种类型为轮廓明显型和轮廓不明显型；垂周壁为波状或者进平直型；细胞表面纹饰为皱褶状、脊状、条状以及脑纹状雕纹；不育花萼片毛被为光滑型或棘状突起型；气孔形状可分为椭圆型、狭椭圆形、纺锤形和近圆形；这些性状在绣球属植物物种演化研究方面具有重要的参考价值。在绣球属不育花瓣中分析了元素周期表钠(Na)以后的14种元素，即镁(Mg)、铝(Al)、磷(P)、硫(S)、钾(K)、钙(Ca)、钛(Ti)、铬(Cr)、锰(Mn)、铁(Fe)、镍(Ni)、铜(Cu)、锌(Zn)、铂(Pb)；其中，含量比较高的元素是钾(56.497%)、钙(28.481%)，含量比较少的元素是镍(0.266%)、锌(0.315%)、铜(0.438%)和铝(0.461%)；在花瓣组织和细胞水平上，元素分布和含量特征基本一致。

关键词：绣球属分类学微形态不育花元素分布

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索马里海盆多金属结核中关键金属富集机制及古环境记录

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岩石学报 2023年第9期39卷 2778-2794页

作者：程宇龙徐勇航李东义陈坚李云海林梵宇尹希杰自然资源部第三海洋研究所海洋与海岸地质研究室厦门361005 福建省海洋物理与地质过程重点实验室厦门361005 中国科学院海洋研究所海洋地质与环境重点实验室青岛266071 中国科学院大学北京100049

多金属结核富含Mn、Fe、Ni、Cu等元素以及Co和REY(稀土元素和钇)等关键金属,是重要的大洋矿产资源。为了探究西北印度洋索马里海盆结核中关键金属的富集机制及古环境记录,本文使用X射线衍射仪(XRD)分析了一个结核的矿物成分,并通过激光... 详细信息

多金属结核富含Mn、Fe、Ni、Cu等元素以及Co和REY(稀土元素和钇)等关键金属,是重要的大洋矿产资源。为了探究西北印度洋索马里海盆结核中关键金属的富集机制及古环境记录,本文使用X射线衍射仪(XRD)分析了一个结核的矿物成分,并通过激光剥蚀电感耦合等离子体质谱仪(LA-ICPMS)和电子探针(EPMA)原位分析了该结核的微区元素组成。结果表明,研究区结核内层为柱状结构,中间为掌状,外层又变为柱状。结核主要由水成型富铁层构成,但外层中还存在薄的(100~200μm)成岩-混合型富锰层。富铁层MnO平均含量为25.1%,FeO为30.4%,Co为0.26%,Ni为0.24%,Cu为0.09%,ΣREY为1981×10^(-6)。富锰层MnO平均含量为52.0%,FeO为7.40%,Co为0.09%,Ni为2.45%,Cu为0.53%,ΣREY为719×10^(-6)。富铁层主要由含铁水羟锰矿构成,而富锰层主要由Ⅰ型布赛尔矿构成。Ni和Cu主要赋存于Ⅰ型布赛尔矿,Co和REY则主要赋存于含铁水羟锰矿中,并且Co存在一个“拐点”。富锰矿物(Ⅰ型布赛尔矿)相对更富集HREE,而含铁水羟锰矿中更富集LREE。从内到外,结核中ΣREY呈下降趋势,REY的变化主要受Ce影响。结核Mn/Fe比值与δCe不相关,但生长速率与δCe显著负相关,表明生长速率可能是控制Ce异常的主要因素,仅凭Ce异常不能区分结核微区的成因及氧化还原环境。根据Co经验公式估算,索马里海盆结核形成年龄为~1.46Ma。柱状结构的开始形成可能与早更新世晚期的古海洋环境转型有关。而掌状结构开始生长于~0.6Ma,中更新世气候转型之后风尘增加使得结核中Si和Al增加,并稀释了其他成矿元素。结核富锰层可能生长于末次间冰期的亚氧化底层水环境,且具有一定对称性和渐变性,指示了氧化还原环境的逐渐改变和恢复。

关键词：索马里海盆多金属结核关键金属富集机制古环境记录

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利用微区XRF技术的大洋固体矿产成分快速无损检测

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海洋地质与第四纪地质 2021年第1期41卷 223-232页

作者：林梵宇尹希杰黄威黄杰超梁毓娜自然资源部第三海洋研究所厦门361005 中国地质调查局青岛海洋地质研究所青岛266071

深海固体矿产主要由铁锰结核、富钴结壳和多金属热液硫化物组成,元素在矿产中原位的分布和含量,对了解矿物成因、品位以及评估其经济价值有重要指示作用。本研究利用微区XRF分析技术对铁锰结核、富钴结壳、热液硫化物3种大洋类型矿产样... 详细信息

深海固体矿产主要由铁锰结核、富钴结壳和多金属热液硫化物组成,元素在矿产中原位的分布和含量,对了解矿物成因、品位以及评估其经济价值有重要指示作用。本研究利用微区XRF分析技术对铁锰结核、富钴结壳、热液硫化物3种大洋类型矿产样品,进行高分辨、原位和无损的多元素空间分布检测,结果显示了不同元素在3种类型矿物中的空间分布特征。通过对测试数据进一步处理和优化成图流程,可以获得特定元素在矿物中半定量分布图,并对不同元素在矿物空间分布的差异性和相关性进行对比分析,从而建立一种肉眼可见的测试大洋矿产资源样品中元素原位分布的新方法。

关键词：结核结壳热液硫化物微区XRF 元素分布原位无损

来源：评论

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共沉淀富集法测定海水中稀土元素含量方法研究

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应用海洋学学报 2020年第4期39卷 581-589页

作者：林梵宇曾怡杭尹希杰梁毓娜自然资源部第三海洋研究所福建厦门361005

稀土元素已越来越多地应用于示踪各类地球化学体系的物质来源与岩石矿物形成等演化过程。但在进行海水样品的稀土元素检测时,由于样品的高盐特征和稀土元素的痕量特征又使得分析具有相当的挑战性。本研究旨在从高盐的海水基质中有效分... 详细信息

稀土元素已越来越多地应用于示踪各类地球化学体系的物质来源与岩石矿物形成等演化过程。但在进行海水样品的稀土元素检测时,由于样品的高盐特征和稀土元素的痕量特征又使得分析具有相当的挑战性。本研究旨在从高盐的海水基质中有效分离并富集痕量的稀土元素,同时结合电感耦合等离子体质谱(Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry,ICP-MS)技术对海水中的稀土进行定量分析。通过对海水样品稀土元素的定量限分析、加标回收实验和梯度加标回收实验,验证了方法的准确性,评估方法的分离富集效率。通过共沉淀过程中的pH比较、氢氧化钠与氨水作为共沉淀剂的比较,确定了富集过程中共沉淀剂用量、种类等影响因素。通过稀土元素配分曲线的绘制与类似样品结果进行比对,以及标准海水的检测结果,验证了方法在实际样品中的可行性。本研究探索了共沉淀富集法在分离富集海水中稀土元素的实验条件,实现高盐背景下痕量稀土的准确定量,并将其用于近岸海水与孔隙水的实际检测。

关键词：海洋化学稀土元素海水 ICP-MS 共沉淀

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基于微区XRF技术的海洋生物元素快速无损检测

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海洋科学进展 2021年第4期39卷 626-635页

作者：林梵宇尹希杰郑新庆黄杰超梁毓娜自然资源部第三海洋研究所福建厦门361005 福建省海洋生态保护与修复重点实验室福建厦门361005 自然资源部海峡西岸海岛海岸带生态系统野外科学观测研究站福建厦门361005

海洋生物体中无机元素的分布特征,对其生理代谢活动具有重要的指示作用,并且能够揭示包括海洋重金属污染在内的多种环境变化特征。利用微区XRF技术对鱼、虾、双壳类、海胆等多种类型海洋生物样品表面的无机元素进行检测,并进行了高分辨... 详细信息

海洋生物体中无机元素的分布特征,对其生理代谢活动具有重要的指示作用,并且能够揭示包括海洋重金属污染在内的多种环境变化特征。利用微区XRF技术对鱼、虾、双壳类、海胆等多种类型海洋生物样品表面的无机元素进行检测,并进行了高分辨、原位无损的多元素微区分布特征分析。结果显示,微区XRF技术检测虾类样品时可见氯(Cl)、钙(Ca)存在明显的分布互补性;检测鱼类样品时可观察到钾(K)、硫(S)在侧线的前后两侧分别存在趋同性和差异性;检测双壳类、海胆时也存在不同元素特异的分布特征。由此可见,该技术适用于多种海洋生物样品,便于比较不同元素在海洋生物表面分布的差异及相关性,并可在数据处理后形成肉眼可视的图像,从而为该技术在海洋生物元素分布检测领域的应用提供技术支持。

关键词：海洋生物微区XRF 元素分布原位无损

来源：评论

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