检索结果-内蒙古大学图书馆

生命科学 2011年第4期23卷 402-406页

作者：季秀玲林连兵张琦魏云林昆明理工大学生物工程技术研究中心昆明650224

低温环境分布最广,生物圈约80%以上的部分为常年低于5℃的低温地区,而在水环境(包括深海、极地海洋、海冰和高纬度湖泊等)中病毒的分布和含量是非常丰富的。在这些低温环境中,噬菌体在生态系统调控、全球生物地球化学循环(尤其是碳循环... 详细信息

低温环境分布最广,生物圈约80%以上的部分为常年低于5℃的低温地区,而在水环境(包括深海、极地海洋、海冰和高纬度湖泊等)中病毒的分布和含量是非常丰富的。在这些低温环境中,噬菌体在生态系统调控、全球生物地球化学循环(尤其是碳循环)、深海代谢和生物基因多样性保存等方面扮演着重要角色。该文主要对海洋和淡水湖泊中低温噬菌体的多样性进行简要综述。

关键词：海洋淡水湖泊低温噬菌体多样性

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汉坦病毒核心蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及鉴定

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云南大学学报（自然科学版） 2007年第S3期29卷 463-466页

作者：井申荣李光季秀玲王钰宁林连兵昆明理工大学生物工程技术研究中心云南昆明650224

汉坦病毒是引起人类流行性出血热的病原体,为了获得具有细胞免疫的核心蛋白,采用PCR从S/pUC18载体上扩增含有较多CTL表达的汉坦病毒核心蛋白NP基因,通过TA克隆重组到T载体上,然后使用Nhe Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切构建重组表达质粒NP/pET28a,鉴... 详细信息

汉坦病毒是引起人类流行性出血热的病原体,为了获得具有细胞免疫的核心蛋白,采用PCR从S/pUC18载体上扩增含有较多CTL表达的汉坦病毒核心蛋白NP基因,通过TA克隆重组到T载体上,然后使用Nhe Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切构建重组表达质粒NP/pET28a,鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),不同温度下用IPTG诱导目的蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定,结果表明获得了可溶性表达的核心蛋白,而且可与抗汉坦病毒的多克隆抗体呈阳性反应,为进一步研究核心蛋白的细胞免疫功能奠定了基础.

关键词：汉坦病毒核心蛋白可溶性表达

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一种高效的真菌总蛋白质提取方法

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中国生物工程杂志 2013年第9期33卷 53-58页

作者：胡彬彬林连兵魏云林季秀玲张琦昆明理工大学生命科学与技术学院昆明650500

蛋白的提取是蛋白质组学研究的首要步骤,其质量的好坏直接影响蛋白质表达分析研究的开展及其结果的准确性。为了从深黄被孢霉M6-22中提取细胞总蛋白质并进一步进行蛋白组学等一些相关研究,采用五种已报道的蛋白质提取方法分别提取深黄... 详细信息

蛋白的提取是蛋白质组学研究的首要步骤,其质量的好坏直接影响蛋白质表达分析研究的开展及其结果的准确性。为了从深黄被孢霉M6-22中提取细胞总蛋白质并进一步进行蛋白组学等一些相关研究,采用五种已报道的蛋白质提取方法分别提取深黄被孢霉M6-22的总蛋白质,以蛋白质浓度和SDS-PAGE结果分析相结合的方法比较提取方法。结果显示,其中一种方法提取的蛋白质浓度相对较高而且蛋白质条带丰度最高,进一步对该方法进行了改良,所获得蛋白质的浓度可达约2.99mg/ml。改进后的方法操作步骤简单,蛋白质条带丰度更高。采用改进后的方法提取其他五种真菌的总蛋白质,结果显示其对其他真菌也有很好的提取效果,说明可作为一种真菌总蛋白质的高效提取方法。

关键词：真菌总蛋白深黄被孢霉M6-22 SDS—PAGE

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栖热菌噬菌体TSP4密码子偏嗜性及其对基因异源表达的影响

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云南大学学报（自然科学版） 2012年第1期34卷 107-112,119页

作者：薛寒张琦李秋鹏季秀玲魏云林林连兵昆明理工大学生命科学与技术学院生物工程技术研究中心云南昆明650224

为了探索噬菌体TSP4、栖热菌模式菌株Thermus thermophilus HB27中6种蛋白编码序列和Escherichi-a coli基因组遗传密码子使用偏嗜性,探索TSP4基因密码子偏嗜性对其基因异源表达的影响本研究利用生物学软件Editseq和RSCU算法统计噬菌体T... 详细信息

为了探索噬菌体TSP4、栖热菌模式菌株Thermus thermophilus HB27中6种蛋白编码序列和Escherichi-a coli基因组遗传密码子使用偏嗜性,探索TSP4基因密码子偏嗜性对其基因异源表达的影响本研究利用生物学软件Editseq和RSCU算法统计噬菌体TSP4密码子使用频率并分析其偏嗜性,与栖热菌HB27的同源基因以及常温菌***基因组的密码子使用偏嗜性进行对比分析.结果显示,噬菌体TSP4与栖热菌HB27优势密码子相似度高达85%,而与***的相似性仅有65%.为了验证分析结果,选取TSP4基因组中一个潜在分子伴侣基因序列在*** BL21和*** Rosetta(补充了BL21菌株中缺失的6个稀有密码子)中进行异源表达.噬菌体TSP4与其宿主菌HB27之间密码子高相似性说明在长期的进化过程中TSP4在基因水平上形成对宿主的一种适应性机制.异源表达结果显示,分子伴侣基因在*** BL21中未见明显表达,但在Rosetta中高效表达,说明Rosetta中补充的6个稀有密码子明显有助于分子伴侣基因的表达,该结果也进一步证明密码子偏嗜性是否一致在很大程度上影响基因的表达.

关键词：噬菌体TSP4 栖热菌HB27 密码子偏嗜性异源表达大肠杆菌Rosetta菌株

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栖热菌噬菌体TSP4 dCTP脱氨酶基因的克隆表达

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中国生物工程杂志 2013年第4期33卷 34-39页

作者：高婷婷张琦魏云林季秀玲林连兵昆明理工大学生命科学与工程学院昆明650500

将编码栖热菌噬菌体TSP4菌株的dCTP脱氨酶tspdCD基因亚克隆到表达载体pET-32a中,并将重组质粒pET-32a-tspdCD转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,目的蛋白经IPTG诱导后在大肠杆菌Rosetta(DE3)中以可溶性... 详细信息

将编码栖热菌噬菌体TSP4菌株的dCTP脱氨酶tspdCD基因亚克隆到表达载体pET-32a中,并将重组质粒pET-32a-tspdCD转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,目的蛋白经IPTG诱导后在大肠杆菌Rosetta(DE3)中以可溶性形式高效表达。通过Ni-NTA agarose亲和层析柱纯化表达的tspdCD,并对其活性,最适作用温度、pH、底物特异性以及金属离子和有机溶剂对其活性的影响进行测定,检测结果表明重组蛋白活性达到4.12U/mg,它的最适作用温度和pH分别为60℃和7.5,最佳反应底物是dCTP,2mmol/L的Ca2+和Mg2+对其活性具有明显的促进作用,而同浓度的Ni2+和Cu2+对其活性产生了明显的抑制作用,10%(V/V)的乙酸乙酯和异丙醇对其活性有很明显的促进作用,而同体积比的丙酮对其活性产生明显的抑制作用。实现了tspdCD在大肠杆菌系统中的功能性表达,为进一步研究高温噬菌体tspdCD的功能奠定了基础。

关键词：栖热菌噬菌体 tspdCD 克隆表达亲和纯化

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泽泻提取物对绿壳蛋鸡生产性能及胆固醇代谢的影响

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食品与生物技术学报 2017年第4期36卷 376-382页

作者：门文卉陈晗李先永林连兵邓先余昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500

研究了不同水平泽泻提取物对绿壳蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标和蛋黄胆固醇含量的影响。实验选用190日龄体况良好、产蛋率接近的绿壳蛋鸡225羽,随机分成5组,每组3个重复,每个重复15羽鸡。空白对照组不含泽泻添加物,阳性对照组添... 详细信息

研究了不同水平泽泻提取物对绿壳蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标和蛋黄胆固醇含量的影响。实验选用190日龄体况良好、产蛋率接近的绿壳蛋鸡225羽,随机分成5组,每组3个重复,每个重复15羽鸡。空白对照组不含泽泻添加物,阳性对照组添加0.58 mg/kg洛伐他汀,给药组分别添加0.1%、0.3%、0.5%的泽泻提取物,实验期42 d。结果表明,与空白对照组相比,质量分数0.5%泽泻提取物提高产蛋率12.28%;质量分数0.3%泽泻提取物能显著降低蛋黄胆固醇质量分数24.2%和甘油三酯质量分数35.5%;质量分数0.3%泽泻提取物能显著降低血清胆固醇质量分数51.97%;质量分数0.1%泽泻添加物组的能显著提高免疫水平。由此可见,一定剂量的泽泻提取物能降低鸡蛋和血清中胆固醇含量、提高鸡蛋品质和鸡群免疫水平,最佳添加量为质量分数0.3%。

关键词：绿壳蛋鸡泽泻提取物生产性能蛋品质胆固醇

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基于响应面法降低鸡蛋胆固醇中草药复方添加剂配方的优化

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2016年第12期44卷 35-44页

作者：门文卉陈晗林连兵邓先余昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500

【目的】对泽泻、决明子、绞股蓝等3种中草药超微粉用量进行优化组合,探索降低鸡蛋胆固醇的中草药复方添加剂最佳配方。【方法】选取泽泻、决明子、绞股蓝超微粉用量3因素为自变量,以蛋黄胆固醇浓度为响应值,采用响应面法中Box-Behnken... 详细信息

【目的】对泽泻、决明子、绞股蓝等3种中草药超微粉用量进行优化组合,探索降低鸡蛋胆固醇的中草药复方添加剂最佳配方。【方法】选取泽泻、决明子、绞股蓝超微粉用量3因素为自变量,以蛋黄胆固醇浓度为响应值,采用响应面法中Box-Behnken模型,共设计17种中草药复方添加剂配方,选取190日龄绿壳蛋鸡255羽,随机均分成17组,分别饲喂添加了17种中草药复方添加剂配方的基础日粮,测定饲喂第28天各组鸡蛋蛋黄胆固醇浓度,确定中草药复方添加剂最优配方。另取190日龄绿壳蛋蛋鸡30羽,平均分成2组,空白组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+最优配方中草药添加剂,饲喂28d后测定蛋鸡生产性能、鸡蛋品质、蛋黄胆固醇和甘油三酯浓度、血清生化指标、免疫指数等,评估最优中草药复方添加剂配方的饲喂效果。【结果】响应面优化得到的降低鸡蛋胆固醇中草药复方添加剂的最佳配比为:泽泻超微粉用量695.49 mg/只,决明子超微粉用量893.14 mg/只,绞股蓝超微粉用量334.13mg/只,该条件下饲喂28d后测定的鸡蛋胆固醇浓度为2.48mmol/L。饲喂效果验证试验结果表明,与空白组相比,试验组的料蛋比降低了33.64%,产蛋率提高了11.73%,差异均达显著水平(P<0.05);蛋黄胆固醇和甘油三酯浓度分别降低了69.90%和41.78%(P<0.05),血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇浓度分别下降了52.90%,55.23%和51.85%,并显著提高了蛋鸡的免疫能力(P<0.05)。【结论】响应面法能够用于中草药复方添加剂配方优化;用得到的中草药复方添加剂最优配方饲喂蛋鸡,能显著降低鸡蛋胆固醇浓度,可在实际生产中推广应用。

关键词：鸡蛋胆固醇中草药复方添加剂配方优化响应面法

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明永冰川地区假单胞菌的分离及系统发育分析

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云南大学学报（自然科学版） 2007年第S3期29卷 408-412页

作者：魏云林周长涛季秀玲林连兵井申荣昆明理工大学生物工程技术研究中心云南昆明650224

从云南省低纬度、高海拔的明永冰川地区分离出8株假单胞菌菌株,对其进行形态学和生理生化特性研究表明,所有菌株均为杆状,均可在4～28℃生长,对氨苄青霉素有抗性.系统发育分析表明,从明永冰川地区得到的假单胞菌16S rRNA基因序列在系统... 详细信息

从云南省低纬度、高海拔的明永冰川地区分离出8株假单胞菌菌株,对其进行形态学和生理生化特性研究表明,所有菌株均为杆状,均可在4～28℃生长,对氨苄青霉素有抗性.系统发育分析表明,从明永冰川地区得到的假单胞菌16S rRNA基因序列在系统发育树上形成了4个簇.研究结果表明,明永冰川地区假单胞菌的多样性明显高于世界上其它冰川地区.

关键词：假单胞菌多样性系统发育分析明永冰川

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复合微生态制剂在黄羽乌骨仔鸡中的应用研究

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中山大学学报（自然科学版） 2016年第3期55卷 139-144页

作者：门文卉胡志铭林连兵邓先余昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500

为研究益生菌、中草药和蝇蛆粉作为饲料添加剂对黄羽乌骨仔鸡生长性能、免疫功能、抗氧化水平和盲肠内容物pH及定植益生菌数的影响,选取300只健康1日龄仔鸡,随机分为益生菌剂1组、益生菌剂2组、益生菌剂2+中草药+蝇蛆粉组、中草药+蝇蛆... 详细信息

为研究益生菌、中草药和蝇蛆粉作为饲料添加剂对黄羽乌骨仔鸡生长性能、免疫功能、抗氧化水平和盲肠内容物pH及定植益生菌数的影响,选取300只健康1日龄仔鸡,随机分为益生菌剂1组、益生菌剂2组、益生菌剂2+中草药+蝇蛆粉组、中草药+蝇蛆粉组和空白组。结果表明:1微生态制剂对平均日采食量无显著影响(P>0.05),但能显著增加平均日增质量和降低料质量比(P<0.05)。2微生态制剂能显著刺激胸腺、法氏囊和脾脏等免疫器官的生长并且使免疫球蛋白IgG的含量和溶菌酶的活性分别提高了46%和69%。3微生态制剂能通过提高血液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性来显著增强机体抗氧化水平并且肝脏中以上3种酶活性的提高程度更大。4微生态制剂可显著降低肠道p H值并且使肠道益生菌的比例增加20.2%。

关键词：益生菌中草药蝇蛆粉仔鸡

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低温真菌吸附Zn^(2+)的特性研究

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云南大学学报（自然科学版） 2007年第S3期29卷 437-441页

作者：魏云林谢莹季秀玲王鲁民林连兵昆明理工大学生物工程技术研究中心云南昆明650224

由于低温微生物的最适生长温度接近于自然水体的温度,因此它们在处理重金属污染废水中具有潜在的优势.试验采用低温真菌和常温真菌进行比较,分别对锌离子进行物理吸附,研究对不同Zn^(2+)质量浓度的吸附情况及Zn^(2+)在不同pH值、温度等... 详细信息

由于低温微生物的最适生长温度接近于自然水体的温度,因此它们在处理重金属污染废水中具有潜在的优势.试验采用低温真菌和常温真菌进行比较,分别对锌离子进行物理吸附,研究对不同Zn^(2+)质量浓度的吸附情况及Zn^(2+)在不同pH值、温度等因素下对吸附的影响,并对50mg/L Zn^(2+)溶液的多级吸附进行了研究,结果表明低温真菌的吸附同常温真菌相比最主要的优势在于当废水温度接近自然水温的情况下更有利于吸附,这为今后更深入的研究做了有益的探索.

关键词：低温真菌生物吸附 Zn2+

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