检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽农业科学 2008年第3期36卷 978-981,1009页

作者：陈丽梅殷飞李昆志魏云林林连兵昆明理工大学生物工程技术研究中心云南昆明650224

从污水样品筛选出能利用甲醇的菌株A和B，经16S rDNA测序分析，鉴定为芽孢杆菌（Bacillus ***01）和肺炎克氏杆菌（Kleb-siella pneumoniae）。甲醛耐受能力的测试表明，这两种分离菌对甲醛具有较强的耐受能力，能在含8～15mmol／L甲醛... 详细信息

从污水样品筛选出能利用甲醇的菌株A和B，经16S rDNA测序分析，鉴定为芽孢杆菌（Bacillus ***01）和肺炎克氏杆菌（Kleb-siella pneumoniae）。甲醛耐受能力的测试表明，这两种分离菌对甲醛具有较强的耐受能力，能在含8～15mmol／L甲醛的LB培养基上生长。Southern杂交分析结果说明，这两株菌的基因组中有兼性甲基营养菌每磷酸己酮糖合成酶（HPS）和6-磷酸果糖异构酶（PHI）基因的同源序列。以pUC118为载体构建了这两种分离菌的基因组文库，进一步的检测结果说明所构建的基因组文库质量符合要求。

关键词：甲醇甲基营养菌甲醛耐受性 16S rDNA 基因组文库

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硫化叶菌病毒dUTPase基因的表达及酶学活性分析

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应用与环境生物学报 2014年第4期20卷 712-716页

作者：朱国东魏云林张琦季秀玲林连兵昆明理工大学生命科学与技术学院昆明650500 云南民族大学图书馆昆明650031

对硫化叶菌病毒(Sulfolobus virus)STSV2脱氧尿苷焦磷酸酶(dUTPase)基因进行克隆表达,并分析其酶学特征.根据STSV2的dUTPase基因序列设计特异性引物,以病毒STSV2 DNA为模板进行PCR扩增,将产物克隆至原核表达载体pET32a(+)中,然后,将其... 详细信息

对硫化叶菌病毒(Sulfolobus virus)STSV2脱氧尿苷焦磷酸酶(dUTPase)基因进行克隆表达,并分析其酶学特征.根据STSV2的dUTPase基因序列设计特异性引物,以病毒STSV2 DNA为模板进行PCR扩增,将产物克隆至原核表达载体pET32a(+)中,然后,将其转化至Escherichia coli BL21(DE3)进行dUTPase的IPTG诱导表达及纯化,通过SDS-PAGE检测其大小,并测定其酶学活性.结果表明,诱导表达的重组dUTPase蛋白分子量(Mr)约为38×103(含pET32a(+)自带的助溶标签),重组dUTPase在Mg2+存在的情况下能特异性催化dUTP生成dUMP和PPi,其反应最适温度为60℃,在pH值3-8之间有较高的活性,其在提高PCR扩增效率和特异性方面具有一定的作用.本研究通过克隆表达获得了硫化叶菌病毒(Sulfolobus virus)STSV2脱氧尿苷焦磷酸酶,其在基因扩增领域有一定的应用价值.

关键词：硫化叶菌病毒脱氧尿苷焦磷酸酶 PCR扩增效率原核表达酶学活性

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腾冲热海嗜热芽孢杆菌的分离鉴定

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科学技术与工程 2012年第15期20卷 3564-3567页

作者：晏爱芬余丽林连兵保山学院资源环境学院保山678000 昆明理工大学生物工程技术研究中心昆明650224

从云南腾冲热海温泉中分离得到26株嗜热芽孢杆菌菌株,对其中一株嗜热芽孢杆菌菌株NHH4进行电镜形态、生长特征、碳源、氮源等分析。该菌株细胞形态为杆状,产芽胞,革兰氏染色阳性,严格好氧,其最适生长温度为55℃,最适为pH7.5。能利用葡... 详细信息

从云南腾冲热海温泉中分离得到26株嗜热芽孢杆菌菌株,对其中一株嗜热芽孢杆菌菌株NHH4进行电镜形态、生长特征、碳源、氮源等分析。该菌株细胞形态为杆状,产芽胞,革兰氏染色阳性,严格好氧,其最适生长温度为55℃,最适为pH7.5。能利用葡萄糖、蔗糖、D-果糖、D-甘露糖,不能利用麦芽糖、乳糖、D-木糖、L-鼠季糖。通过对其16S rRNA基因序列的系统发育分析表明,NHH4与Bacillus licheniformis strain N8的序列相似性为99%,将此菌株鉴定为嗜热地衣芽胞杆菌菌株。

关键词：嗜热菌嗜热芽孢杆菌分离鉴定

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中药贴敷治疗腰椎间盘突出症临床观察

中药贴敷治疗腰椎间盘突出症临床观察

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2013浙江省针灸学会年会暨学术交流会

作者：郑兆俭林连兵温岭第一人民医院温岭第三人民医院

目的观察中药贴敷治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法将腰椎间盘突出症患者70例按门诊就诊顺序随机分为治疗组35例(中药贴敷治疗)与对照组35例(推拿治疗),观察治疗结束后疗效及疼痛积分、JOA评分情况,并进行对照分析。结果中药贴敷治... 详细信息

目的观察中药贴敷治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法将腰椎间盘突出症患者70例按门诊就诊顺序随机分为治疗组35例(中药贴敷治疗)与对照组35例(推拿治疗),观察治疗结束后疗效及疼痛积分、JOA评分情况,并进行对照分析。结果中药贴敷治疗的疗效、疼痛积分与JOA评分改善情况均优于推拿治疗,P<0.05。结论中药贴敷是临床治疗腰椎间盘突出症的较有效方法。

关键词：中药贴敷椎间盘移位推拿腰椎间盘突出症疗效观察

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中西医结合无痛护理在外科术后疼痛中的应用价值

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中华全科医学 2014年第9期12卷 1491-1493页

作者：郑桑钟辉赵华林连兵浙江省台州市中西医结合医院护理部 317523 浙江省台州市中西医结合医院外科 317523

目的探讨中西医结合无痛护理模式在外科手术治疗患者术后疼痛中的应用效果,以为临床外科术后疼痛的护理提供理论依据。方法选取台州市中西医结合医院行外科手术治疗的患者128例为研究对象,按照1∶1比例分为对照组64例和观察组64例,分别... 详细信息

目的探讨中西医结合无痛护理模式在外科手术治疗患者术后疼痛中的应用效果,以为临床外科术后疼痛的护理提供理论依据。方法选取台州市中西医结合医院行外科手术治疗的患者128例为研究对象,按照1∶1比例分为对照组64例和观察组64例,分别给予术后常规疼痛护理和中西医结合无痛护理模式1个月,采用视觉模拟评分法(VAS)、改良睡眠状况自评量表(SRSS)及满意度调查问卷对护理前后2组患者各指标进行测量,并采用SPSS 17.0统计学软件进行统计分析,评价疗效。结果护理干预后,观察组患者过去24 h及术后经历的最严重疼痛评分及SRSS评分分别为(2.17±1.50)分、(4.00±2.12)分、(15.60±2.71)分均显著低于对照组的(4.60±1.55)分、(6.39±2.61)分、(24.63±2.49)分,差异有统计学意义(t=5.710、7.095、5.621,P=0.011、0.006、0.015);观察组满意度100.00%明显优于对照组满意度76.63%(χ2=4.569,P=0.002)。结论通过中西医结合无痛护理模式不仅能有效减轻患者疼痛,且可为患者术后身体恢复、心理、生理状态调整创造有利条件,提高患者对护理工作满意度,值得临床广泛推广和应用。

关键词：中西医结合无痛护理术后疼痛睡眠

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来源于热泉宏基因组的β-半乳糖苷酶及其特征

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食品与发酵工业 2014年第5期40卷 60-64页

作者：郑健张琦魏云林林连兵昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500

研究了在大肠杆菌中克隆和表达来自热泉宏基因组的一个β-半乳糖苷酶基因以及该β-半乳糖苷酶在动物营养中的初步应用。以大理洱源一个65℃热泉微生物宏基因组DNA为模板,克隆得到该基因全序列。根据同源性分析,该β-半乳糖苷酶与Thermot... 详细信息

研究了在大肠杆菌中克隆和表达来自热泉宏基因组的一个β-半乳糖苷酶基因以及该β-半乳糖苷酶在动物营养中的初步应用。以大理洱源一个65℃热泉微生物宏基因组DNA为模板,克隆得到该基因全序列。根据同源性分析,该β-半乳糖苷酶与Thermotoga lettingae TMO来源的糖苷水解酶(Sequence ID:YP_001471199.1)同源性最高,为71%。重组转化子经诱导所得酶最适反应温度为55℃,最适pH值为7.5,酶液经58℃热处理30min,酶活残留65%以上,该酶能将乳糖或豆粕中的乳糖水解为半乳糖和葡萄糖。

关键词：热泉宏基因组 β-半乳糖苷酶克隆表达酶学性质

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低温菌启动子探针质粒的构建

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生物工程学报 2007年第3期23卷 530-534页

作者：魏云林林连兵季秀玲井申荣昆明理工大学生物工程技术研究中心昆明650224

为了在宿主菌Acinetobacter ***6中构建低温菌蛋白表达载体,以pBR322质粒为基础,去除质粒上β-内酰胺酶基因的启动子片段,取而代之为来源于质粒pJRD215的卡那霉素抗性基因片段,并在pBR322中插入Acinetobacter菌属特异性ori的DNA片段,构... 详细信息

为了在宿主菌Acinetobacter ***6中构建低温菌蛋白表达载体,以pBR322质粒为基础,去除质粒上β-内酰胺酶基因的启动子片段,取而代之为来源于质粒pJRD215的卡那霉素抗性基因片段,并在pBR322中插入Acinetobacter菌属特异性ori的DNA片段,构建了能在Acinetobacter ***6和***中正常复制的启动子探针质粒pBAP1。通过在质粒pBAP1中的β-内酰胺酶基因上游随机导入Acinetobacter ***6基因组片段,通过检测宿主细胞的氨苄青霉素抗性和β-内酰胺酶活性,来筛选强启动子片段,并分析了启动子探针质粒载体的功能及启动子的强度。

关键词：低温菌启动子探针质粒载体 β-内酰胺酶

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嗜热土芽孢杆菌GSEY01及其高温蛋白酶的初步研究

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生物技术通报 2010年第6期26卷 189-194页

作者：廖艳江季秀玲魏云林林连兵昆明理工大学生物工程技术研究中心昆明650224

从云南腾冲热海热泉中分离出一株产高温蛋白酶的菌株GSEY01。该菌株最适生长温度为60℃,16S rRNA基因序列分析表明,该菌株为土芽孢杆菌属(Geobacillus)的耐热菌株。该菌株所产高温蛋白酶可以通过超滤浓缩,硫酸铵分级沉淀和强阴离子交换... 详细信息

从云南腾冲热海热泉中分离出一株产高温蛋白酶的菌株GSEY01。该菌株最适生长温度为60℃,16S rRNA基因序列分析表明,该菌株为土芽孢杆菌属(Geobacillus)的耐热菌株。该菌株所产高温蛋白酶可以通过超滤浓缩,硫酸铵分级沉淀和强阴离子交换层析获得纯酶。此高温蛋白酶分子量约为42kD,最适催化温度为80℃,最适催化pH7.5,Mg2+能增强该酶活力,Fe3+,Cd2+和Ni2+对其活性则有抑制作用。PMSF对该酶影响较小,乙二胺四乙酸(EDTA)和十二烷基磺酸钠(SDS)则对其有强烈的抑制作用,此高温蛋白酶和其他土芽孢杆菌所产蛋白酶有较大差异,可以应用于相关的高温催化环境。

关键词：土芽孢杆菌高温蛋白酶纯化酶学性质

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穴位贴敷治疗慢性腰椎间盘突出症临床疗效观察

穴位贴敷治疗慢性腰椎间盘突出症临床疗效观察

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2012浙江省针灸学会年会暨学术交流会

作者：郑兆俭林连兵温岭第一人民医院温岭第三人民医院

目的:观察穴位贴敷治疗慢性腰椎间盘突出症的临床疗效。方法:将慢性腰椎间盘突出症患者90例按门诊就诊顺序随机分为治疗组45例（穴位贴敷治疗）与对照组45例（口服VitB片与针刺治疗）,观察治疗结束后、12个月的疗效及疼痛积分情况、复... 详细信息

目的:观察穴位贴敷治疗慢性腰椎间盘突出症的临床疗效。方法:将慢性腰椎间盘突出症患者90例按门诊就诊顺序随机分为治疗组45例（穴位贴敷治疗）与对照组45例（口服VitB片与针刺治疗）,观察治疗结束后、12个月的疗效及疼痛积分情况、复发情况,并进行对照分析。结果:穴位贴敷治疗的远期疗效、远期疼痛积分改善情况、复发率均优于口服VitB片与针刺治疗,P<0.05。结论:穴位贴敷是临床治疗慢性腰椎间盘突出症的较有效方法。

关键词：穴位贴敷椎间盘移位腰椎间盘突出症疗效观察

来源：评论

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云南松毛虫肠道真菌的分离鉴定及降解纤维素真菌的筛选

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应用与环境生物学报 2020年第6期26卷 1437-1442页

作者：江宇航蔡赛波李宏伟林连兵张棋麟昆明理工大学生命科学与技术学院昆明650500 云南省高校饲用抗生素替代技术工程研究中心昆明650500

为明确云南松毛虫肠道内可培养真菌的组成,筛选出具有降解纤维素性能的肠道真菌,采用传统真菌培养方法结合ITS扩增子测序对云南松毛虫幼虫肠道内的可培养真菌进行鉴定.然后利用刚果红染色法筛选出具有一定降解纤维素能力的真菌,使用二... 详细信息

为明确云南松毛虫肠道内可培养真菌的组成,筛选出具有降解纤维素性能的肠道真菌,采用传统真菌培养方法结合ITS扩增子测序对云南松毛虫幼虫肠道内的可培养真菌进行鉴定.然后利用刚果红染色法筛选出具有一定降解纤维素能力的真菌,使用二硝基水杨酸(DNS)法测定不同pH(5.0-9.0)下降解羧甲基纤维素酶的活性.结果发现:云南松毛虫肠道内真菌菌群多样,并从中筛选到根霉属(Rhizopus)、Cystobasidium、Trichaptum、Hypocreales、曲霉菌属(Aspergillu)、镰孢菌属(Fusarium)、青霉菌属(Penicillium)、念珠菌属(Candida)等3门8属的真菌,其中具有降解纤维素能力的2株为链状假丝酵母(Candida catenulate)和桔青霉(Penicillium citrinum).酶活力测定结果显示:2株降解羧甲基纤维素的真菌在pH=6.0-8.0之间均有相对较高的酶活性,在pH=7.0达到最高.本研究表明云南松毛虫幼虫肠道真菌种类多样,存在具有降解纤维素能力的真菌菌株,其酶活力在中性条件时最高,偏酸性条件下的羧甲基纤维素酶活性显著高于偏碱性条件下;获得的降解纤维素真菌可为饲料生产、食品加工、化学能源等提供有价值的菌种资源.(图4表5参31)

关键词：云南松毛虫可培养肠道真菌菌种鉴定纤维素降解羧甲基纤维素酶

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