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四川省畜牧兽医学会2010年学术年会

作者：曾诚王红宁张安云樊汶樵张毅郭自成管中斌四川大学生命科学学院，动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室，生物资源与生态环境教育部重点实验室，“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台四川，成都 610064

抗体疫苗又叫抗独特型抗体疫苗是针对抗体可变区的抗原决定簇(独特型)产生的特异性抗体，可模拟初始抗原并拥有与初始抗原相似的抗原性，已应用于很多领域。抗独特型抗体疫苗作为新一代免疫制剂，可弥补现有疫苗的一些不足，但也有一定... 详细信息

抗体疫苗又叫抗独特型抗体疫苗是针对抗体可变区的抗原决定簇(独特型)产生的特异性抗体，可模拟初始抗原并拥有与初始抗原相似的抗原性，已应用于很多领域。抗独特型抗体疫苗作为新一代免疫制剂，可弥补现有疫苗的一些不足，但也有一定缺陷。目前已针对细菌、病毒、寄生虫和肿瘤等开发了相应抗独特型抗体疫苗，经实验表明疫苗能刺激机体产生足够的免疫力。

关键词：抗体疫苗研究进展免疫力

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细菌、病毒、寄生虫抗体疫苗研究进展

细菌、病毒、寄生虫抗体疫苗研究进展

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四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会

作者：曾诚王红宁张安云樊汶樵张毅郭自成管中斌四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室生物资源与生态环境教育部重点实验室“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台

抗体疫苗又叫抗独特型抗体疫苗是针对抗体可变区的抗原决定簇(独特型)产生的特异性抗体,可模拟初始抗原并拥有与初始抗原相似的抗原性,已应用于很多领域。当用这种疫苗接种时,动物虽然没有直接接触病原微生物抗原,却能产生对相应病原微... 详细信息

抗体疫苗又叫抗独特型抗体疫苗是针对抗体可变区的抗原决定簇(独特型)产生的特异性抗体,可模拟初始抗原并拥有与初始抗原相似的抗原性,已应用于很多领域。当用这种疫苗接种时,动物虽然没有直接接触病原微生物抗原,却能产生对相应病原微生物抗原的免疫力,故又将这种抗体疫苗称为内在抗原疫苗。特别适用于目前尚不能培养,培养很困难,产量很低的病原体;直接用病原体制备疫苗有危险性的,尤其是反转录病毒;免疫原性低弱,且不能用重组DNA技术生产的多糖类抗原。细菌、病毒、寄生虫与肿瘤抗体疫苗的原理大致相仿。在兽医学界,目前已针对牛布鲁菌病、鸡传染性喉气管炎、鸡传染性法氏囊病、禽流感、猪繁殖与呼吸综合征等常见病开展了抗体疫苗研究,并取得一定进展。针对血吸虫、猪肉绦虫等寄生虫的疫苗也取得了一定的成果,对于相关疫苗的开发提供的新的技术思路。该技术不仅为疫苗开发提供了全新的技术方向,也初步解决了诸如某些病原体外培养困难,危险性大从而难以制备相关疫苗的问题。同时抗体疫苗也可作为替代抗原担任免疫检测任务,极大地方便了相关工作的进行。当前,抗体疫苗技术已成为免疫学研究的热门问题,其研究与应用前景十分广阔,目前存在的主要问题是抗独特型抗体筛选的难度比较大。随着抗独特型抗体筛选技术的不断成熟,制备安全、廉价的抗独特型疫苗将指日可待。

关键词：抗独特型抗体抗独特型抗体疫苗研究进展

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荧光定量PCR检测禽传染性支气管炎病毒人工感染SPF鸡后的体内分布

荧光定量PCR检测禽传染性支气管炎病毒人工感染SPF鸡后的体内分布

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四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会

作者：樊汶樵王红宁郭自成管中斌张毅徐昌文杨帆四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室生物资源与生态环境教育部重点实验室“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台

目的:检测禽传染性支气管炎病毒(IBV)人工感染SPF鸡后病毒在体内的分布。方法:本研究建立了使用GAPDH和UB作为内参基因的禽传染性支气管炎荧光定量PCR方法(real-time PCR);用IBV标准毒株M41株对SPF鸡进行人工感染,以103 EID50浓度接种... 详细信息

目的:检测禽传染性支气管炎病毒(IBV)人工感染SPF鸡后病毒在体内的分布。方法:本研究建立了使用GAPDH和UB作为内参基因的禽传染性支气管炎荧光定量PCR方法(real-time PCR);用IBV标准毒株M41株对SPF鸡进行人工感染,以103 EID50浓度接种病毒后第1,4,7,10,14,21,28,35天检测脑、气管、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、腺胃、肌胃、盲肠扁桃体和法氏囊的病毒载量,对病毒感染后的体内动态分布情况进行研究。结果:从感染后第4天起,12种组织、器官内的IBV相对含量逐渐升高;15天后开始减少。肺脏的相对病毒含量最高且可从第4天持续到28天,气管从攻毒后第4天起就能检测到大量的病毒,一直可持续到35天。肺脏、肾脏、肝脏和胰腺的相对感染密度分别为23.393 31、14.849 99、10.964 22和9.903 79,是IBV M41株感染最为密集的器官。意义:本研究利用荧光定量PCR方法对IBV M41株在SPF鸡体内的动态分布和组织嗜性进行了探讨,为合理的临床采样与疫病监控打下了基础。

关键词： IBV 荧光定量PCR 动态分布组织嗜性

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一种用于生物化学实验中的反应器

一种用于生物化学实验中的反应器

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作者：刘静樊汶樵 402160 重庆市永川区红河大道319号

本实用新型公开了一种用于生物化学实验中的反应器，包括底座，所述底座的底端左右两侧均安装有支撑座，所述支撑座通过支撑杆与底座相连，所述底座的顶端中心位置安装有固定座，所述底座的顶端右侧安装有电加热器，所述固定座的顶端设... 详细信息

标准号: CN207769756U

本实用新型公开了一种用于生物化学实验中的反应器，包括底座，所述底座的底端左右两侧均安装有支撑座，所述支撑座通过支撑杆与底座相连，所述底座的顶端中心位置安装有固定座，所述底座的顶端右侧安装有电加热器，所述固定座的顶端设有转动筒，所述转动筒的内腔安装有支撑盘，所述支撑盘通过固定杆与固定座相连，所述固定杆贯穿转动筒的底端外壁，所述转动筒的顶端安装有缸体，所述缸体的顶端安装有堵板，所述缸体的内壁螺纹连接有螺纹板，所述堵板的顶端设有把手盘。该用于生物化学实验中的反应器，通过转动筒、缸体和空心筒的配合，从而更加便于对玻璃反应器进行加热，提高了实验者的工作效率，大大的满足了实验者的需求。

关键词：转动筒底座缸体固定座生物化学实验顶端安装反应器固定杆支撑盘支撑座堵板顶端中心位置本实用新型玻璃反应器底端外壁电加热器工作效率内壁螺纹左右两侧把手盘空心筒螺纹板支撑杆底端内腔加热贯穿配合

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饥饿再投喂对大鳞副泥鳅生长性能、肝脏抗氧化能力和肠道消化酶的影响

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水生生物学报 2022年第4期46卷 507-513页

作者：蔡明成孙翰昌谢明地李淳鸿添赵胤年樊汶樵杨帆重庆文理学院园林与生命科学学院永川402160 西南大学水产学院荣昌402460

为探究周期性饥饿再投喂对大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)生长性能、抗氧化能力和肠道消化酶活性的影响,实验将初始重一致的大鳞副泥鳅随机分为4组,每组3个重复,饲养于12个水箱中,每箱20尾。采用周期性饥饿2d再投喂4d(S2F4)、周... 详细信息

为探究周期性饥饿再投喂对大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)生长性能、抗氧化能力和肠道消化酶活性的影响,实验将初始重一致的大鳞副泥鳅随机分为4组,每组3个重复,饲养于12个水箱中,每箱20尾。采用周期性饥饿2d再投喂4d(S2F4)、周期性饥饿2d再投喂6d(S2F6)、周期性饥饿2d再投喂8d(S2F8)和持续投喂(对照组)4种投喂模式,投喂30d,并于第0、第15和第30天收集样本进行检测。结果表明:(1)不同处理对末体长和特定生长率无显著影响(P>0.05),S2F8处理组末体重和增重率显著高于对照组(P<0.05)。(2)周期性饥饿再投喂对肥满度、脏体比和肝体比无显著影响(P>0.05)。(3)随饥饿再投喂处理时间增长,S2F6和S2F8组肝脏SOD、CAT和GSH-PX活性显著升高;在第15天,S2F8组SOD活性显著高于对照组(P<0.05),S2F6和S2F8组肝脏CAT活性显著高于对照组(P<0.05),S2F6和S2F8组肝脏GSH-PX活性均显著高于对照组(P<0.05)。在第30天,S2F6和S2F8组SOD活性显著高于对照组(P<0.05),S2F6组CAT活性均显著高于对照组(P<0.05),S2F6和S2F8组中GSH-PX活性显著高于对照组(P<0.05)。(4)对肠道消化酶研究发现,投喂时间对肠道蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性无显著影响。在第30天时,S2F6和S2F8组肠道脂肪酶显著低于对照组(P<0.05)。综上所述,周期性饥饿再投喂可激发大鳞副泥鳅补偿生长,引起肝脏抗氧化酶活性增加,肠道消化酶活性降低。其中S2F8组补偿生长最显著,且肠道消化酶活性变化程度较小。因此,为保证饲养效果,推荐使用S2F8投喂模式。

关键词：饥饿再投喂生长性能抗氧化酶活性消化酶活性大鳞副泥鳅

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四川山地乌骨鸡IL-1β、IL-16基因DNA质粒与IBV DNA疫苗联合免疫研究

四川山地乌骨鸡IL-1β、IL-16基因DNA质粒与IBV DNA疫苗联合免疫...

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四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会

作者：张毅王红宁樊汶樵张安云曹海鹏郭自成丁梦蝶四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室生物资源与生态环境教育部重点实验室“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台

四川山地乌骨鸡是四川山区特有的抗病力较强的地方鸡品种,为了研究四川山地乌骨鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫是否有增强作用,根据Genbank中的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR的方法从四川山地乌骨... 详细信息

四川山地乌骨鸡是四川山区特有的抗病力较强的地方鸡品种,为了研究四川山地乌骨鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫是否有增强作用,根据Genbank中的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR的方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆了IL-1β和IL-16基因,与真核表达质粒pcDNA3.1（+）连接构建了pDNAIL-1β和pDNAIL-16。分别将两种重组质粒与IBV DNA联合免疫SPF雏鸡并进行攻毒试验。结果表明,pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加（P<0.05）,增强IBV DNA疫苗对同型强毒的保护率15%5%,pDNAIL-1β提升DNA疫苗的抗体水平的时间比pDNAIL-16延长至少7 d。实验数据证明,鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。

关键词：四川山地乌骨鸡细胞因子鸡IL-1β 鸡IL-16 IBV DNA疫苗免疫增强作用

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鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研究

鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研...

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四川省畜牧兽医学会2010年学术年会

作者：张毅王红宁樊汶樵张安云曹海鹏郭自成丁梦蝶四川农业大学动物科技学院动物遗传育种研究所四川，雅安 625014

根据Genbank中的鸡IL—1β和IL—16序列设计两对引物，采用RT—PCR的方法从山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆了IL—1β和IL-16基因，与真核表达质粒pcDNA3．1(+)连接构建了pDNAIL—1B和pDNAIL—16，为了研究两种重组质粒对lBV DNA疫... 详细信息

根据Genbank中的鸡IL—1β和IL—16序列设计两对引物，采用RT—PCR的方法从山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆了IL—1β和IL-16基因，与真核表达质粒pcDNA3．1(+)连接构建了pDNAIL—1B和pDNAIL—16，为了研究两种重组质粒对lBV DNA疫苗的免疫增强效果，与IBV DNA联合免疫雏鸡并进行攻毒试验。结果表明，pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加(P<0．05)，增强IBV DNA疫苗对同型强毒的攻击保护，与pDNAIL-16相比，pDNAIL-1β能够更持久的提高DNA疫苗的抗体水平，但攻毒保护率仍略低于常规的灭活疫苗和弱毒疫苗。由此可见，鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。

关键词：禽传染性支气管炎病毒鸡IL-1β 鸡IL-16 免疫增强作用

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禽冠状病毒IBV多表位基因重组乳酸菌表达载体构建和鉴定

禽冠状病毒IBV多表位基因重组乳酸菌表达载体构建和鉴定

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四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会

作者：曹海鹏王红宁张毅樊汶樵张安云郭自成丁梦蝶四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室生物资源与生态环境教育部重点实验室“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台

目的:获得IBV多表位肽表达量高、有生物活性、能分泌到胞外或通过锚定肽在细胞壁上的重组乳酸菌,并以此为活载体疫苗口服施喂鸡群,筛选出免疫效果好的重组乳酸菌,为下一步关于乳酸菌活载体疫苗研究奠定基础。方法:将本实验室构建好的IB... 详细信息

目的:获得IBV多表位肽表达量高、有生物活性、能分泌到胞外或通过锚定肽在细胞壁上的重组乳酸菌,并以此为活载体疫苗口服施喂鸡群,筛选出免疫效果好的重组乳酸菌,为下一步关于乳酸菌活载体疫苗研究奠定基础。方法:将本实验室构建好的IBV多表位基因AN插入pNZ8149(Nco I酶切位点之后),电转化乳酸菌NZ3900构建基因AN的乳酸菌胞内表达体NZ3900/pNZ8149-AN;将乳酸菌外源蛋白分泌表达信号肽基因SPusp45与AN连接,再使用同样方法插入质粒pNZ8149中并通过电转构建分泌型重组乳酸菌NZ3900/pNZ8149-SP-AN;将分泌增强子九肽(Leisstcda)基因通过分子生物学方法连接在信号肽基因与AN基因之间,采用同样方法插入pNZ8149并转化乳酸菌,构建增强分泌型重组乳酸菌NZ3900/pNZ8149-SP-LEISS-AN;将金黄色葡萄球菌的细胞壁锚定蛋白SPA的碳末端基因Cspa使用菌落PCR扩增的方法扩增出来,连接在分泌型重组质粒pNZ8149-SP-AN的后端构建锚定型外源基因表达体NZ3900/pNZ8149-SP-AN-Cspa。所有重组菌通过对目的基因的PCR扩增、重组质粒的双酶切、DNA测序鉴定与相应目的序列一致,重组菌体外培养并使用抗菌肽Nisin诱导,离心分离上清和沉淀分别制备蛋白样品SDS-PAGE鉴定表明,IBV多表位基因AN在所有重组菌内都得到了表达,并且分泌表达体的产量明显高于胞内表达体。结论:本实验室构建了BV多表位基因AN重组乳酸菌不同形式的表达体:NZ3900/pNZ8149-AN、NZ3900/pNZ8149-SP-AN、NZ3900/pNZ8149-SP-LEISS-AN、

关键词：禽冠状病毒IBV 多表位基因分泌表达乳酸菌NZ3900 锚定

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禽冠状病毒IBV多表位基因重组乳酸菌表达载体构建和鉴定

禽冠状病毒IBV多表位基因重组乳酸菌表达载体构建和鉴定

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四川省动物学会第九届会员代表大会暨第十届学术研讨会

作者：曹海鹏王红宁张毅樊汶樵张安云郭自成四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室生物资源与生态环境教育部重点实验室“985 工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台成都 610064 四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室生物资源与生态环境教

目的:获得IBV 多表位肽表达量高、有生物活性、能分泌到胞外或通过锚定肽在细胞壁上的重组乳酸菌,并以此为活载体疫苗口服施喂鸡群,筛选出免疫效果好的重组乳酸菌,为下一步关于乳酸菌活载体疫苗研究奠定基础.

关键词：禽冠状病毒IBV 多表位基因分泌表达乳酸菌NZ3900 锚定

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野猪瘁死症病原的分离鉴定

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四川动物 2006年第3期25卷 606-610页

作者：颜其贵曹洪志肖雪欧洋樊汶樵张传斌赖维莉四川农业大学动物生物技术中心四川雅安625014

采集病死野猪的脾脏和血清,用特异抗猪瘟病毒抗体进行琼脂扩散试验检测发现有明显的沉淀线出现,证明野猪感染了猪瘟病毒,猪的致病性实验表明并非猪瘟强毒感染。采集病死野猪的心、肝、脾、肺、心血,经镜检、细菌分离培养、纯培养、生化... 详细信息

采集病死野猪的脾脏和血清,用特异抗猪瘟病毒抗体进行琼脂扩散试验检测发现有明显的沉淀线出现,证明野猪感染了猪瘟病毒,猪的致病性实验表明并非猪瘟强毒感染。采集病死野猪的心、肝、脾、肺、心血,经镜检、细菌分离培养、纯培养、生化试验和细菌G+C mol%含量测定等检验,证实致病细菌有多杀巴氏杆菌,其G+C mol%含量为39.7。毒力测试发现巴氏杆菌具有较强的致病性,LD50=10-1.57/0.5 ml。化脓放线杆菌的分离和毒力表明,化脓放线杆菌也参与致病作用。由此推测本次致死野猪的病原体为多杀巴氏杆菌并发或继发猪瘟病毒、化脓放线杆菌的三重感染所致。纸片扩散法(K-B法)药敏试验表明,两株细菌对头孢哌酮、头孢唑啉、丁胺卡拉霉素等高度敏感,为临床治疗和有效预防该瘁死症奠定基础。

关键词：野猪瘁死症多杀巴氏杆菌化脓性放线杆菌分离鉴定药敏试验

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