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CD4CD25CD127调节性T细胞在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的水平及其临床意义

中国免疫学杂志 2023年

作者：黄可可王极宇王会平翟志敏安徽医科大学第二附属医院血液内科

目的：研究弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma， DLBCL)患者初诊时外周血中调节性T细胞(regulatory T cell， Treg)水平及其对疗效评估和预后判断的价值。方法：选取2018年1月-2022年2月期间我院收治的72例初诊DLBCL患... 详细信息

目的：研究弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma， DLBCL)患者初诊时外周血中调节性T细胞(regulatory T cell， Treg)水平及其对疗效评估和预后判断的价值。方法：选取2018年1月-2022年2月期间我院收治的72例初诊DLBCL患者作为研究对象，以17例健康志愿者为对照，使用流式细胞术检测所有纳入研究对象的外周血中CD4+CD25+CD127lowTreg水平，并结合患者的临床特征进行比较分析。结果：患者治疗前外周血Treg百分比与Ann Arbor分期、IPI评分、ECOG评分、血红蛋白(HB)相关；初诊时外周血Treg水平显著低于健康对照(3.85±0.22 vs 5.15±0.31，P=0.007)；根据初诊时外周血CD4+CD25+CD127low细胞占CD4+T细胞百分比的中位数将DLBCL患者分为高Treg组和低Treg组，低Treg组患者的治疗总有效率明显低于高Treg组(P=0.035)；有B症状(P=0.040)和低Treg(P=0.014)是影响DLBCL患者PFS的独立危险因素；有B症状(P=0.028)、ECOG评分≥2分(P=0.041)和低Treg(P=0.036)是影响患者OS的独立危险因素；低Treg组PFS(P=0.020)和OS(P=0.036)均显著低于高Treg组。结论：初诊DLBCL患者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比低提示预后不良。

关键词：调节性T细胞 DLBCL 预后

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CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)调节性T细胞在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的水平及其临床意义

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中国免疫学杂志 2025年第5期41卷 1102-1107页

作者：黄可可王极宇王会平翟志敏安徽医科大学第二附属医院血液内科合肥230601

目的:研究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者初诊时外周血中调节性T细胞(Treg)水平及其对疗效评估和预后判断的价值。方法:选取2018年1月至2022年2月安徽医科大学第二附属医院收治的72例初诊DLBCL患者作为研究对象,以17例健康志愿者为对照,... 详细信息

目的:研究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者初诊时外周血中调节性T细胞(Treg)水平及其对疗效评估和预后判断的价值。方法:选取2018年1月至2022年2月安徽医科大学第二附属医院收治的72例初诊DLBCL患者作为研究对象,以17例健康志愿者为对照,使用流式细胞术检测所有纳入研究对象的外周血中CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg水平,并结合患者的临床特征进行比较分析。结果:患者治疗前外周血Treg百分比与Ann Arbor分期、IPI评分、ECOG评分、血红蛋白(HB)相关;初诊时外周血Treg水平显著低于健康对照(3.85±0.22 vs 5.15±0.31,P=0.007);根据初诊时外周血CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg占CD4^(+)T细胞百分比的中位数将DLBCL患者分为高Treg组和低Treg组,低Treg组患者的治疗总有效率明显低于高Treg组(P=0.035);ECOG评分(P=0.040)和治疗前低Treg(P=0.014)是影响DLBCL患者无进展生存期(PFS)的独立危险因素;有B症状(P=0.028)、ECOG评分≥2分(P=0.041)和治疗前低Treg(P=0.036)是影响患者OS的独立危险因素;低Treg组PFS(P=0.020)和OS(P=0.036)均显著低于高Treg组。结论:初诊DLBCL患者外周血CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg百分比低提示预后不良。

关键词：调节性T细胞弥漫大B细胞淋巴瘤预后

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细胞衰老诱导的抑制性细胞因子累积对DLBCL细胞功能的影响

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安徽医科大学学报 2021年第9期56卷 1350-1355页

作者：易浏颖王极宇陶千山完颜智翔朱凤凤王会平王芝涛翟志敏安徽医科大学第二附属医院血液科合肥230601

目的探讨细胞衰老在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞抵抗化疗中的作用及机制。方法将入组的DLBCL患者分为初诊(ND)组、完全缓解(CR)组、复发/难治(r/r)组。分别应用HE染色和β-半乳糖苷酶染色法检测淋巴结反应性增生患者、r/r DLBCL患者... 详细信息

目的探讨细胞衰老在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞抵抗化疗中的作用及机制。方法将入组的DLBCL患者分为初诊(ND)组、完全缓解(CR)组、复发/难治(r/r)组。分别应用HE染色和β-半乳糖苷酶染色法检测淋巴结反应性增生患者、r/r DLBCL患者淋巴结组织衰老情况;用β-半乳糖苷酶染色法检测ND、r/r组DLBCL患者外周血中的衰老情况;用10、20、40 nmol/L的阿霉素(DOX)反复诱导DLBCL细胞株LY8衰老,构建衰老模型;CCK-8法检测衰老模型细胞增殖情况;流式细胞术检测衰老模型细胞凋亡情况;ELISA法检测DLBCL患者血清和衰老模型上清液中细胞因子表达。结果r/r组DLBCL患者淋巴结组织及外周血中的衰老细胞明显增多且血清中白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、IL-35、转化生长因子-β1(TGF-β1)等促炎性和免疫抑制性细胞因子分泌增加;使用40 nmol/L DOX成功诱导LY8细胞衰老,衰老细胞比例24.77%。对对照组及DOX诱导组进行功能检测,结果提示衰老组细胞增殖率低于对照组但高于10 nmol/L和20 nmol/L DOX组(P<0.05);凋亡率高于对照组但低于10 nmol/L和20 nmol/L DOX组(P<0.05)。同时,各组IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、TGF-β1分泌量差异有统计学意义(P<0.05),与对照组比较,衰老组细胞上清液中IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-35、TGF-β1等各种促炎和免疫抑制性细胞因子分泌增加。结论细胞衰老通过诱导抑制性细胞因子累积促进DLBCL细胞凋亡抵抗。

关键词：细胞衰老抑制性细胞因子弥漫大B细胞淋巴瘤凋亡抵抗

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SENEX基因通过活化Rb/E2F通路促进弥漫大B细胞淋巴瘤增殖与复发

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安徽医科大学学报 2020年第3期55卷 432-437页

作者：完颜智翔王极宇潘莹朱凤凤易浏颖翟志敏安徽医科大学第二附属医院血液科合肥230601

目的探讨SENEX基因在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及其对DLBCL复发的影响与可能的作用机制。方法分别应用qRT-PCR和Western blot法检测3例初诊DLBCL患者(初诊组)、3例复发DLBCL患者(复发组)和3例完全缓解DLBCL患者(完全缓解组)的SE... 详细信息

目的探讨SENEX基因在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及其对DLBCL复发的影响与可能的作用机制。方法分别应用qRT-PCR和Western blot法检测3例初诊DLBCL患者(初诊组)、3例复发DLBCL患者(复发组)和3例完全缓解DLBCL患者(完全缓解组)的SENEX基因和蛋白的表达情况;应用SiRNA转染技术沉默DLBCL细胞株OCI-LY8中的SENEX基因;Western blot和qRT-PCR法验证其转染效率;CCK-8检测转染后细胞增殖情况;ELISA法检测细胞上清液中游离与腺病毒E2启动子结合的转录因子(E2F)水平;Western blot检测细胞中p16和视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)/磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)表达水平。结果复发DLBCL患者中SENEX基因和蛋白水平均增高;沉默DLBCL细胞中SENEX基因表达抑制了DLBCL细胞增殖,并抑制E2F活化和Rb活化。结论SENEX基因通过活化Rb/E2F1通路促进DLBCL增殖与复发。

关键词： SENEX Rb/E2F 弥漫大B细胞淋巴瘤增殖复发

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髓源性抑制细胞在急性白血病中的表达及临床意义

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安徽医科大学学报 2020年第3期55卷 471-475页

作者：朱凤凤王会平许旋旋王芝涛王极宇陶千山翟志敏安徽医科大学第二附属医院血液科合肥230601

目的研究外周血髓源性抑制细胞(MDSCs)在急性B淋巴细胞白血病中(B-ALL)的表达及临床相关性。方法收集85例确诊B-ALL患者(缓解组34例,未缓解组51例)和15例健康对照者,采用流式细胞术(FCM)检测外周血中MDSCs的表达水平。结果未缓解组M-MD... 详细信息

目的研究外周血髓源性抑制细胞(MDSCs)在急性B淋巴细胞白血病中(B-ALL)的表达及临床相关性。方法收集85例确诊B-ALL患者(缓解组34例,未缓解组51例)和15例健康对照者,采用流式细胞术(FCM)检测外周血中MDSCs的表达水平。结果未缓解组M-MDSCs水平高于缓解组及健康对照组(P<0.05);未缓解组及缓解组G-MDSCs水平均高于健康对照组(P<0.05),且未缓解组G-MDSCs水平高于缓解组(P<0.05);高危组M-MDSCs表达水平高于中危组(P<0.05);有中枢侵犯的B-ALL患者较无中枢侵犯的G-MDSCs升高(P<0.05);与预后良好患者相比,预后不良患者M-MDSCs水平升高(P<0.05);在G-MDSCs中,预后不良及中间组均高于预后良好组(P<0.05)。结论 B-ALL患者外周血中MDSCs的水平变化可能与该病的发生发展密切相关,且对判断患者预后存在一定价值。

关键词：髓源性抑制细胞急性B淋巴细胞白血病流式细胞术

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JAK2、CALR及MPL基因突变检测对BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤的诊断价值

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安徽医科大学学报 2018年第5期53卷 750-754页

作者：杨艳熊术道陶千山王极宇刘军李曼曼翟志敏安徽医科大学第二附属医院血液科安徽医科大学血液病研究中心合肥230601

目的探究JAK2、CALR及MPL突变对BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN)的诊断价值。方法对171例外周血细胞计数异常且临床表现疑似MPNs的患者进行回顾性分析,其中106例BCR-ABL阴性MPN患者作为病例组,65例非BCR-ABL阴性MPN患者作为对照组,分析J... 详细信息

目的探究JAK2、CALR及MPL突变对BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN)的诊断价值。方法对171例外周血细胞计数异常且临床表现疑似MPNs的患者进行回顾性分析,其中106例BCR-ABL阴性MPN患者作为病例组,65例非BCR-ABL阴性MPN患者作为对照组,分析JAK2、CALR及MPL突变检测诊断BCR-ABL阴性MPN患者的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及符合率情况。结果(1)与对照组相比,病例组JAK2、CALR及MPL突变总的阳性率明显升高(P<0.01);相比于单独检测,当3种基因突变联合检测时灵敏度、阴性预测值及符合率分别提高至84.9%、79.2%、88.3%,特异度为93.9%,Kappa值为0.76;(2)选取病例组中经典的BCR-ABL阴性MPN患者为对象,以WHO诊断标准作为参考,基因突变检测、骨髓病理诊断与WHO诊断标准一致的符合率分别为85.1%、90.1%,两种方法比较符合率差异无统计学意义;而基因突变检测与骨髓病理之间的诊断符合率为75.2%(P>0.05)。结论 3种基因联合检测比单独检测对BCR-ABL阴性MPN诊断的灵敏度、符合率升高,同时可保持一定特异度;3种基因突变联合检测与骨髓病理对诊断经典的BCR-ABL阴性MPN的准确率存在高度一致性。

关键词： BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤 JAK2 CALR MPL

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CD19 CAR-T细胞治疗复发/难治性B-ALL后细胞因子水平变化及其临床意义

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中国免疫学杂志 2019年第19期35卷 2385-2390页

作者：张秋叶王极宇张家奎王会平陶千山翟志敏安徽医科大学第二附属医院血液科

目的:探索CD19 CAR-T细胞治疗复发/难治性B-ALL后细胞因子水平的变化及其临床意义。方法:选取2015年8月至2018年2月我院血液科接受CD19 CAR-T细胞治疗的复发/难治性B-ALL患者23例,应用CBA技术和免疫比浊法检测输注前后血清中IL-6、IFN-... 详细信息

目的:探索CD19 CAR-T细胞治疗复发/难治性B-ALL后细胞因子水平的变化及其临床意义。方法:选取2015年8月至2018年2月我院血液科接受CD19 CAR-T细胞治疗的复发/难治性B-ALL患者23例,应用CBA技术和免疫比浊法检测输注前后血清中IL-6、IFN-γ、IL-10、TNF-α和CRP水平。然后根据CTCAE v4.0将发生CRS的患者分为轻度CRS组(1~2级)和重度CRS组(3~5级),比较两组细胞因子水平的差异及治疗反应。结果:①CD19 CAR-T细胞输注前后患者血清中IL-6(2.00~28.50 vs 34.50~112.00)、IFN-γ(2.13~3.12 vs 4.35~10.07)、IL-10(1.00~1.80 vs 4.01~39.92)、TNF-α(2.91~4.60 vs 4.99~40.18)差异均具有统计学意义(P=0.000,0.000,0.001,0.002);②轻度CRS组和重度CRS患者相比,血清中IL-6(28.75~61.25 vs 91.00~1 074.00)、IFN-γ(3.93~7.28 vs 12.53~15.30)、IL-10(3.13~7.47 vs 39.92~84.97)、TNF-α(4.60~15.77 vs 40.18~62.51)和CRP(4.95~46.86 vs 37.81~120.17)差异均具有统计学意义(P=0.004、0.004、0.003、0.000、0.045);③CD19 CAR-T治疗后完全缓解(包括血象未完全恢复患者)组与未缓解组间上述细胞因子与CRP水平均差异无统计学意义;④IL-6显著升高的重度CRS患者,应用IL-6受体拮抗剂治疗后均好转。结论:IL-6、IFN-γ、IL-10、TNF-α细胞因子的水平可作为判断CRS严重程度的实验室参考指标,并可指导临床靶向选择细胞因子拮抗剂,但对CD19 CAR-T疗效预测价值有待进一步验证。

关键词：细胞因子释放综合征细胞因子嵌合抗原受体T细胞复发/难治 B-ALL CD19

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MicroRNA-21/145和pSmad3C/3L在肝细胞癌中的交互作用机制研究

MicroRNA-21/145和pSmad3C/3L在肝细胞癌中的交互作用机制研究

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作者：王极宇安徽医科大学

学位级别：硕士

原发性肝癌是当今社会人类癌症死亡的第三大原因,也是我国最常见的恶性肿瘤之一,死亡率仅次于胃癌和食道癌。其中,肝细胞癌(HCC,Hepatocellular Carcinoma)约占原发性肝癌的90%。HCC由于其发病隐匿,生存周期短,预后差,死亡率高而成为目... 详细信息

原发性肝癌是当今社会人类癌症死亡的第三大原因,也是我国最常见的恶性肿瘤之一,死亡率仅次于胃癌和食道癌。其中,肝细胞癌(HCC,Hepatocellular Carcinoma)约占原发性肝癌的90%。HCC由于其发病隐匿,生存周期短,预后差,死亡率高而成为目前研究的热点领域之一。尽管分子靶向药物增加了HCC患者的生存周期,但HCC治疗仍面临着巨大挑战。现有研究认为,HCC发生发展关联到多种信号通路失调,其中包括TGF-b/Smad,它直接或间接地与micro RNAs相互作用并在癌变过程中担任着重要角色。研究认为,micro RNA-21在HCC中表达上调,而micro RNA-145在HCC中表达下调,但是它们的异常表达是如何与TGF-b/Smad信号通路下游Smad3蛋白特定结合域磷酸化相互关联,还是未知的。本研究在此基础上,探究Smad3C末端(p Smad3C)和连接区磷酸化(p Smad3L)与micro RNA-21和micro RNA-145在HCC中的相互作用以及对HCC进展影响的作用机制。目的:1.建立裸鼠移植瘤模型,采用agomir/antagomir分别在裸鼠移植瘤中干预mi R-21和mi R-145的表达,观察分别下调micro RNA-21和上调micro RNA-145对肿瘤生长及肿瘤细胞凋亡的影响。2.分别将选择性上调p Smad3C或p Smad3L蛋白水平的稳转细胞株(Smad3EPSM,Smad3 3S-A)接种到裸鼠体内,建立肝细胞癌移植瘤模型,观察分别上调p Smad3C和p Smad3L蛋白水平对肿瘤生长和肿瘤细胞凋亡的影响。3.在肝细胞癌移植瘤模型中,检测下调micro RNA-21表达或上调micro RNA-145表达对p Smad3C和p Smad3L蛋白水平的影响;4.在分别选择性上调p Smad3C和p Smad3L蛋白水平的裸鼠移植瘤模型中检测micro RNA-21和micro RNA-145表达。5.探究在HCC中micro RNA-21/145和p Smad3C/3L的相互作用以及对HCC进展的影响。方法:1.整体动物实验:实验一:雄性BALB/c裸鼠24只,3-5周龄,14-18g,适应性饲养一周。选取状态良好,对数生长期的Hep G2细胞,调细胞密度至4.5×107细胞/ml,每只裸鼠接种0.2ml,每只裸鼠接种细胞数量9×106。分别向各组裸鼠皮下接种Hep G2细胞,待皮下形成明显瘤块后,按瘤体积均分为4组(n=6):mi R-21 antagomir NC组,mi R-21 antagomir组,mi R-145 agomir NC组和mi R-145 agomir组。分别向瘤体内注射20ml mi R-21antagomir NC,mi R-21 antagomir,mi R-145 agomir NC和mi R-145 agomir,每4天注射1次,注射7次后取材。28天后,处死动物,取出瘤块,排水法测量瘤体积,Western-blot和免疫组织化学方法检测瘤体中p Smad3C、p Smad3L和Smad3、Smad4的表达情况,HE染色检测细胞病理学改变,透射电镜检测细胞凋亡情况。雄性BALB/c裸鼠24只,3-5周龄,14-18g,适应性饲养一周。随机分为四组(n=6):Hep G2组,WT组,EPSM组和3S-A组。分别向裸鼠皮下接种稳转Hep G2细胞的Smad3 WT,Smad3 EPSM和Smad3 3S-A细胞(细胞数9×106),待皮下形成明显瘤块后,每4天1次测量肿瘤体积。28天后,处死动物,取出皮下瘤块,测量瘤重瘤体积。Western-blot法检测瘤组织中p Smad3C,p Smad3L和Smad3蛋白表达情况;HE染色和透射电镜检测细胞凋亡情况;q RT-PCR法检测各组中micro RNA-21/145的表达情况。2.体外细胞实验:体外常规培养HepG2细胞,传代培养,选取生长状态良好,对数生长期的细胞,待培养瓶中细胞长至单层铺展面积达90%-95%时,弃培养液,每瓶加胰酶消化(1 ml,17℃,2 min),加DMEM混悬细胞(1.5 ml),转移至10 ml管中(四瓶细胞),离心沉淀细胞(低速离心机,1500转,5 min),弃上清,加PBS混悬细胞。调细胞密度至4.5×107细胞/ml,每只裸鼠接种0.2 ml,每只裸鼠接种细胞数量9×106。向Hep G2细胞中转染mi R-21 antagomir/NC和mi R-145 agomir/NC,体外检测p Smad3C/3L表达。体外培养Hep G2细胞,使用脂质体稳定转染法将三种质粒Smad3 WT、Smad3 EPSM、Smad3 3S-A转入Hep G2细胞

关键词：肝细胞癌 microRNA-21 microRNA-145 pSmad3C pSmad3L

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利妥昔单抗对B细胞非霍奇金淋巴瘤患者体液免疫的影响

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中国现代医学杂志 2019年第9期29卷 27-33页

作者：许旋旋吴凡张家奎王极宇阮燕洁朱凤凤张秋叶王会平翟志敏安徽医科大学第二附属医院血液科(安徽医科大学血液病研究中心) 安徽合肥230601

目的探讨利妥昔单抗(RTX)治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)后对患者体液免疫的影响。方法回顾性分析安徽医科大学第二附属医院诊治的86例B-NHL患者,按治疗方案不同分为观察组和对照组,其中使用RTX联合环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、泼尼... 详细信息

目的探讨利妥昔单抗(RTX)治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)后对患者体液免疫的影响。方法回顾性分析安徽医科大学第二附属医院诊治的86例B-NHL患者,按治疗方案不同分为观察组和对照组,其中使用RTX联合环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、泼尼松(R-CHOP)方案治疗为观察组,CHOP方案治疗为对照组,比较两组患者治疗前后外周血中CD20^+正常B淋巴细胞比例、血清中免疫球蛋白及其主要亚型的变化以及治疗过程中感染发生情况。结果①4个疗程后,观察组仅14%(9/64)的患者外周血中检测出CD20^+正常B淋巴细胞,而对照组100%(16/16)患者外周血中CD20^+正常B淋巴细胞均可测出。②观察组患者化疗后外周血免疫球蛋白及其主要亚型IgG、IgA及IgM水平降低(P <0.05),而对照组治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。其次,观察组4个疗程后低免疫球蛋白血症发生率高于对照组(P<0.05)。③治疗过程中,观察组患者感染发生率为45.71%,感染事件分级以1、2级为主,占81.25%。4个疗程后,与免疫球蛋白正常的患者比较,出现低免疫球蛋白的患者更易发感染(P<0.05)。结论 RTX治疗B-NHL后会损伤患者体液免疫,同时增加感染事件发生率。因此,化疗期间应动态检测患者血清中免疫球蛋白及其主要亚型的水平,避免感染的发生。

关键词：淋巴瘤,非霍奇金利妥昔单抗体液免疫免疫球蛋白

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一种电解槽伏安特性模拟装置、系统及方法

一种电解槽伏安特性模拟装置、系统及方法

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作者：陈元初周立明左志远郭建齐张群陈钢丁龙王磊苏烽于剑宇陈越王桂楠于吉庆吕相南刘先海王立新金名极 410217 湖南省长沙市高新开发区袁家冲路6号

本申请公开一种电解槽伏安特性模拟装置、系统及方法，涉及电解制氢技术领域，用于实现制氢电源的陪试模拟，针对使用电解槽原型设备所存在的成本及安全问题，以及使用纯电阻方案所存在的模拟效果不好等问题，提供一种电解槽伏安特性模...

标准号: CN119716320A

本申请公开一种电解槽伏安特性模拟装置、系统及方法，涉及电解制氢技术领域，用于实现制氢电源的陪试模拟，针对使用电解槽原型设备所存在的成本及安全问题，以及使用纯电阻方案所存在的模拟效果不好等问题，提供一种电解槽伏安特性模拟装置，通过DC/DC变流器和可变负载模块的组合，实现模拟各种场景下制氢电解槽的不同伏安特性。使得本装置可以代替真实的制氢电解槽设备参与制氢供电系统试验测试，也省去了真实的制氢电解槽实际运行过程所需要的相关水处理设备和气体处理设备，降低了试验系统的建造投资和试验过程中的成本及安全风险，且可基于模块化装置组合模拟出不同功率等级的电解槽设备的电气特性满足制氢电源的负载性能考核试验。

关键词：

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