检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：程王琨南京农业大学

学位级别：硕士

猪嗜血支原体(Mycoplasma haemosuis, ***)是一种寄生于红细胞表面的病原微生物,临床上慢性感染表现为轻度贫血,消瘦,繁殖机能障碍等,急性病例死亡率高,给养猪业带来了严重的经济损失,但目前血清学诊断技术研究较少,尚无商品化试剂盒。... 详细信息

猪嗜血支原体(Mycoplasma haemosuis, ***)是一种寄生于红细胞表面的病原微生物,临床上慢性感染表现为轻度贫血,消瘦,繁殖机能障碍等,急性病例死亡率高,给养猪业带来了严重的经济损失,但目前血清学诊断技术研究较少,尚无商品化试剂盒。因此,研究猪嗜血支原体的血清诊断试剂盒非常重要。MSG1蛋白是***的一种重要的表面黏附蛋白,具有良好的免疫原性。本研究在实验室已建立的猪嗜血支原体阻断ELISA抗体检测方法的基础上,成功组装试剂盒,并对其性能进行测定。汉赛巴尔通体(Bartonella henselae, ***)是目前已知的致病种类最多的巴尔通体,是猫抓病(SCD)的病原体,17-kDa蛋白是汉赛巴尔通体中能够诱导机体产生免疫应答的较少蛋白之一,适合用来建立检测方法。本研究具体内容如下： 1.猪嗜血支原体阻断ELISA抗体检测试剂盒各组分的制备与质量检测本研究在实验室已建立的猪嗜血支原体阻断ELISA抗体检测方法的基础上,对试剂盒各个组份进行制备,并进行质量检测。试验结果表明,纯化后获得的重组MSG1蛋白经SDS-PAGE电泳分析,在45kDa处有明显的表达带,无明显杂带,且抗原性良好,三批蛋白的浓度均为0.5mg/mL以上,能用于试剂盒的制备；包被MSG1蛋白抗原包被板、阴阳性对照血清、酶标抗体、稀释液、洗涤液、显色液、终止液经性状检验、无菌检验及效价检验显示均具有良好的性质,能用于试剂盒的组装。 2.猪嗜血支原体阻断ELISA抗体检测试剂盒的组装与保存本研究用保护剂分别处理ELISA方法中的关键试剂,然后组装成试剂盒。进行37℃加速试验及实时实温试验,测定其保存期。结果为：试剂盒各组份在37℃进行加速破坏试验时,均能表现良好的稳定性；将各组份组装成试剂盒后,37℃加速7d基本能保存稳定,实时实温试验证明在4℃保存6个月能基本保持稳定。以上结果表明,该试剂盒具有一定的稳定性,为试剂盒最终开发提供了数据基础。 3.猪嗜血支原体血清流行病学调查本研究采用阻断ELISA方法对来自7个省(区)的1492份猪血清进行了检测并对其感染的时间、空间和种群间的分布进行了分析。结果表明：血清抗体总阳性率为17.36%,其中上海地区最高为57.01%,广西地区最低为4.55%,安徽、浙江、江苏、江西和四川分别为28.40%、20.25%、13.93%、7.14%和5.49%。感染时间从6、7月份开始,9月份感染比例达到最高(33.94%),然后开始慢慢下降。种群间分析显示母猪血清阳性率为65.48%,仔猪为4.8%。血清流行病学调查结果显示猪嗜血支原体在我国猪群的感染比较普遍,而且呈现出逐年增加的趋势。 4.汉赛巴尔通体17-kDa间接ELISA方法的建立本研究将汉赛巴尔通体17-kDa蛋白基因按大肠杆菌密码子偏嗜性改造后进行全基因人工合成,然后将目的基因克隆到原核表达载体pET-28a中,构建重组质粒pET-28a-17kDa,导入大肠杆菌BL21感受态细胞中,进行诱导表达并用Ni-NTA纯化试剂进行纯化；纯化后的蛋白应用His单抗进行鉴定。以17-kDa蛋白作为包被抗原及优化ELISA反应条件,建立检测抗汉赛巴尔通体17-kDa蛋白抗体的间接ELISA方法：抗原包被量0.4μg/mL,37℃包被2h后4℃过夜,1%BSA37℃封闭3h,待检血清稀释度1：100后37℃孵育1h,二抗1：15000稀释,37℃作用30min,抗体临界值为OD450≥0.392判为阳性,OD450≤0.3326判为阴性,介于二者之间为可疑。与猪嗜血支原体、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪口蹄疫病毒等血清抗体无交叉反应,批间和批内重复性较好,对379份血清样品进行检测,抗体阳性检出率达51.72%。说明该方法可用于汉赛巴尔通体抗体检测和流行病学调查。综上所述,本研究成功组装了猪嗜血支原体阻断ELISA抗体检测试剂盒,通过试验证明该试剂盒在2-8℃保存6个月能基本保持稳定,为该试剂盒的最终产业化提供了实验基础；通过表达汉赛巴尔通体的17-kDa蛋白,成功建立了汉赛巴尔通体17-kDa间接ELISA方法,为研究该病在猪群中的流行情况奠定了物质基础；通过对猪嗜血支原体及汉赛巴尔通体血清流行病学调查,为疾病的防控提供一定数据基础。

关键词：猪嗜血支原体试剂盒汉赛巴尔通体间接ELISA 流行病学调查

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丹顶鹤马立克病病例

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中国兽医杂志 2017年第9期53卷 106-107,I0004页

作者：周薇邓长林陈蓉李敏婕程王琨南京市红山森林动物园管理处江苏南京210028 南京农业大学江苏南京210095

马立克病是比较常见的一种高度接触性淋巴组织增生性肿瘤疾病,本病由疱疹病毒引起,主要表现为外周神经、虹膜、各种内脏器官、肌肉和皮肤的单核细胞浸润,产生淋巴细胞性肿瘤。鸡、火鸡等动物比较容易感染,尤其是刚出壳的鸡,最易感染,主... 详细信息

马立克病是比较常见的一种高度接触性淋巴组织增生性肿瘤疾病,本病由疱疹病毒引起,主要表现为外周神经、虹膜、各种内脏器官、肌肉和皮肤的单核细胞浸润,产生淋巴细胞性肿瘤。鸡、火鸡等动物比较容易感染,尤其是刚出壳的鸡,最易感染,主要通过呼吸道感染,但随着个体抵抗力的增强,其易感性会逐步减弱。病禽常见消瘦,肢体麻痹,突然死亡。某动物园于2015年首次发生两例幼龄丹顶鹤感染马立克病,报告如下。

关键词：马立克病丹顶鹤呼吸道感染病例肿瘤疾病淋巴细胞性淋巴组织疱疹病毒

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我国部分省份猪嗜血支原体感染血清流行病学调查

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畜牧与兽医 2013年第11期45卷 82-84页

作者：程王琨侯成才常晨李玉峰南京农业大学农业部动物细菌学重点开放实验室江苏南京210095

为研究猪嗜血支原体在猪群中的感染情况,本研究采用阻断ELISA方法对来自我国7个省(区)的1 492份猪血清进行了检测,并对其感染的时间、空间和种群间的分布进行了分析。结果表明:血清总阳性率为17.36%,其中上海地区最高为57.01%,广西地区... 详细信息

为研究猪嗜血支原体在猪群中的感染情况,本研究采用阻断ELISA方法对来自我国7个省(区)的1 492份猪血清进行了检测,并对其感染的时间、空间和种群间的分布进行了分析。结果表明:血清总阳性率为17.36%,其中上海地区最高为57.01%,广西地区最低为4.55%,安徽、浙江、江苏、江西和四川分别为28.40%、20.25%、13.93%、7.14%和5.49%。感染时间从6、7月份开始,9月份感染比例达到最高(33.94%),然后开始慢慢下降。种群间分析显示,母猪血清阳性率为65.48%,仔猪为4.8%。血清流行病学调查结果显示猪嗜血支原体在我国猪群的感染比较普遍,而且呈现出逐年增加的趋势,应该引起足够的重视。

关键词：猪嗜血支原体阻断ELISA 血清流行病学调查

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中型非人灵长类动物压缩保定治疗笼的设计制作与应用

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野生动物学报 2020年第2期41卷 474-478页

作者：程王琨李梅荣邓长林徐翊军南京市红山森林动物园南京210028

物理保定是野生动物饲养管理的重要工作内容之一,在疾病诊治过程中起了重要作用。为了解决中型非人灵长类动物在临床检查和治疗等操作时的物理保定问题,本研究根据中型非人灵长类动物的生物学特点和兽医临床需要,研制了一种压缩保定治... 详细信息

物理保定是野生动物饲养管理的重要工作内容之一,在疾病诊治过程中起了重要作用。为了解决中型非人灵长类动物在临床检查和治疗等操作时的物理保定问题,本研究根据中型非人灵长类动物的生物学特点和兽医临床需要,研制了一种压缩保定治疗笼。该笼具为长方体结构,通过滑轮、推拉杆等装置控制后侧面移动,以改变笼体空间大小,实现压缩功能;并配有操作窗口、可拆卸喂食(水)盘、折叠式输液架等结构。临床应用结果表明,该笼具对长臂猿、金丝猴、猕猴等多种中型非人灵长类动物都能实现压缩保定,对提高临床检查效率和治疗效果起到了积极作用。

关键词：非人灵长类动物物理保定压缩笼设计

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东北虎胃内异物的诊治

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中国兽医杂志 2020年第11期56卷 109-110,I0009页

作者：邓长林马小萍陈楠章小小陈蓉程王琨曹杰周薇李明杰江苏省南京市红山森林动物园兽医院江苏南京210028

胃内异物是动物误食难以消化的异物并停留在胃内的状态,多是由于动物啃咬物品时误吞入石头、塑料、布块、骨头块、金属物等。这些物品一般不能消化或不易消化,也不易通过肠道排出。另外,维生素、微量元素和矿物质的缺乏等也会导致动物... 详细信息

胃内异物是动物误食难以消化的异物并停留在胃内的状态,多是由于动物啃咬物品时误吞入石头、塑料、布块、骨头块、金属物等。这些物品一般不能消化或不易消化,也不易通过肠道排出。另外,维生素、微量元素和矿物质的缺乏等也会导致动物出现异食现象。如不将胃内异物取出,对动物的健康影响很大,甚至危及生命。2019年3月,南京红山森林动物园兽医院给3只误食轮胎的东北虎做了胃切开手术,在胃中取出三轮车内外胎碎片,经手术治疗后,东北虎很快恢复健康。发病情况及治疗经过介绍如下。

关键词：胃内异物兽医院东北虎金属物微量元素误食三轮车红山森林动物园

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大鲵饲养中常见疾病的防治及病因探讨

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农业与技术 2017年第16期37卷 104-105页

作者：李银花程王琨南京市建邺区动物卫生监督所江苏南京210019 南京市红山动物园江苏南京210028

中国大鲵是我国的特有珍稀物种,近年来,随着人工养殖的集约化程度的提高,大鲵病害也逐渐严重。本文综述了中国在大鲵养殖过程中出现的常见疾病,共讨论了细菌性疾病、真菌病、非传染性疾病、寄生虫病,并对病因和预防措施进行了探讨。

关键词：大鲵疾病病因预防

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赤大袋鼠馆气载需氧菌分离鉴定及致病性分析

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野生动物学报 2019年第4期40卷 895-900页

作者：李俊娴李敏捷李梅荣程王琨南京红山森林动物园南京210028 南京农业大学南京210095 成都产品质量检验研究院有限责任公司成都610100

本试验采用自然沉降法对南京红山森林动物园赤大袋鼠馆的运动场、缓冲道、饲养内舍、工作通道和饲料间5个区域一年四季的气载需氧菌浓度进行测定,通过16SrRNA基因和生理生化鉴定相结合的方法分析气载需氧菌的组成。通过动物致病性试验... 详细信息

本试验采用自然沉降法对南京红山森林动物园赤大袋鼠馆的运动场、缓冲道、饲养内舍、工作通道和饲料间5个区域一年四季的气载需氧菌浓度进行测定,通过16SrRNA基因和生理生化鉴定相结合的方法分析气载需氧菌的组成。通过动物致病性试验对所分离的细菌进行致病性分析,采用药敏试纸片法分析致病菌株的耐药情况。结果显示,赤大袋鼠馆各个区域一年四季气载需氧菌浓度与温度呈正相关。经生化鉴定及16SrRNA比对结果分析,共鉴定3大类细菌71株,其中葡萄球菌属共8种共37株,占分离菌的52.1%;肠杆菌科细菌9个属,10种共31株,占分离菌的43.7%;链球菌属细菌仅分离到2种3株,占分离菌的4.2%。71株菌中,从饲养内舍分离出44株,其他区域共分离到27株,分离率分别为62.0%和38.0%。经致病性分析,2株大肠埃希菌,1株弗氏志贺菌,2株金黄色葡萄球菌及1株巴黎链球菌,共计6株菌为致病菌。分离的6株致病菌均对克林霉素耐药,对环丙沙星、氟苯尼考、庆大霉素、恩诺沙星和磺胺甲基异恶唑敏感。

关键词：赤大袋鼠馆气载需氧菌分离鉴定致病性药敏试验

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黄颊长臂猿颜面瘘病例的诊治

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中国兽医杂志 2021年第2期57卷 103-104,F0003,I0003页

作者：邓长林马小萍陈楠章小小陈蓉周薇程王琨曹杰李明杰南京市红山森林动物园兽医院江苏南京210028

2019年9月,南京红山森林动物园兽医院接诊1例黄颊长臂猿面颊部肿、局部破溃,挤压肿处后有脓汁流出的病例。经临床麻醉后检查,确诊为牙源性颜面瘘,通过拔除患牙、清创瘘管、消炎等处理措施,黄颊长臂猿颜面瘘伤口愈合良好。报告如下。1基... 详细信息

2019年9月,南京红山森林动物园兽医院接诊1例黄颊长臂猿面颊部肿、局部破溃,挤压肿处后有脓汁流出的病例。经临床麻醉后检查,确诊为牙源性颜面瘘,通过拔除患牙、清创瘘管、消炎等处理措施,黄颊长臂猿颜面瘘伤口愈合良好。报告如下。1基本情况1只黄颊长臂猿,公,呼名“大黑”,体重8.0 kg,右侧面部肿,局部破溃,有脓汁流出。右眼未能完全睁开,精神状况良好,活动正常,采食未见异常,粪便正常。

关键词：兽医院伤口愈合临床麻醉面颊部长臂猿牙源性红山森林动物园瘘管

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虎疑似杯状病毒感染病例的诊疗

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中国兽医杂志 2019年第5期55卷 47-48页

作者：程王琨邓长林李明杰李俊娴陈楠章小小陈蓉周薇南京市红山森林动物园

猫杯状病毒(Feline Calicivirus,FCV)是杯状病毒科的成员之一,同时也是猫科动物中一种重要的致病病原。猫杯状病毒感染又称猫传染性鼻-结膜炎,是由FCV引起的猫科动物的一种多发性口腔和呼吸道传染病。病毒可以随唾液、眼泪、鼻液扩散传... 详细信息

猫杯状病毒(Feline Calicivirus,FCV)是杯状病毒科的成员之一,同时也是猫科动物中一种重要的致病病原。猫杯状病毒感染又称猫传染性鼻-结膜炎,是由FCV引起的猫科动物的一种多发性口腔和呼吸道传染病。病毒可以随唾液、眼泪、鼻液扩散传播,病猫康复后长期带毒[1],且临床症状多样,如上呼吸道感染、口腔溃疡、慢性口炎、鼻炎、结膜炎、肺炎与跛行等,与由猫疱疹病毒(Feline Herpesvirus,FHV)引起的猫传染性鼻炎十分相似,两者也常混合感染[2]。

关键词：呼吸道传染病猫科动物传染性鼻炎扩散传播口腔溃疡上呼吸道感染疱疹病毒结膜炎

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淠河总干渠大型底栖动物初步调查

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环境与健康杂志 2011年第4期28卷 332-335页

作者：刘昌利黄林马永富田华祥冯新长程王琨赵偲皖西学院生物与制药工程学院安徽六安237012 六安市环境监测中心站

目的研究淠河总干渠大型底栖动物分布及水质状况。方法于2009年5月—2010年3月,对淠河总干渠六安段进行水质理化监测与大型底栖动物群落生态调查,并采用生物多样性指数(H)和综合污染指数(K)评价水质。结果共检出底栖动物21种,隶属于3门5... 详细信息

目的研究淠河总干渠大型底栖动物分布及水质状况。方法于2009年5月—2010年3月,对淠河总干渠六安段进行水质理化监测与大型底栖动物群落生态调查,并采用生物多样性指数(H)和综合污染指数(K)评价水质。结果共检出底栖动物21种,隶属于3门5纲6目13科。优势种是中国圆田螺(Cipangopaludina chinensis)、方格短沟蜷(Semisulcospira cancellata)、湖沼股蛤(Limnoperna lacustris)、萝卜螺(Radix auricularia)。淠河总干渠K值为0.80,H值为2.08,水体质量为中度污染;秋、冬季水质好于春、夏季;横派头、焦厂渡口、罗管闸水质好于解放南路桥、樊通桥。结论淠河总干渠六安段底栖动物种类变化不明显,水质主要为中度污染。

关键词：水大型底栖动物生物多样性指数综合污染指数淠河

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