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中华医学会病理学分会第二十三次学术会议暨第七届中国病理年会

作者：杨军濮晓红管文燕张标樊智文南京市鼓楼医院

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单纯疱疹病毒Ⅰ型包膜糖蛋白D的表达及免疫学活性研究

单纯疱疹病毒Ⅰ型包膜糖蛋白D的表达及免疫学活性研究

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会

作者：管文燕王正茂李琳李越希南京医科大学基础医学院南京军区军事医学研究所江苏省医药生物技术重点实验室

目的表达单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)包膜糖蛋白D(gD)胞外区,研究其免疫学活性,探讨其保护活性和疫苗候选分子的可能性。方法化学合成含强抗原决定簇的HSV-ⅠgD胞外区的基因序列,并在N端添加人IgG轻链可变区的信号肽以提高在哺乳动物细胞... 详细信息

目的表达单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)包膜糖蛋白D(gD)胞外区,研究其免疫学活性,探讨其保护活性和疫苗候选分子的可能性。方法化学合成含强抗原决定簇的HSV-ⅠgD胞外区的基因序列,并在N端添加人IgG轻链可变区的信号肽以提高在哺乳动物细胞中的表达量。将合成好的基因片段插入真核表达载体pCEP4中,构建重组表达载体pCEP4-gDl,并对其进行PCR、酶切及测序鉴定,随后在CHO细胞中进行瞬时转染表达。表达的细胞上

关键词：包膜糖蛋白免疫学活性单纯疱疹病毒Ⅰ型

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HSV1糖蛋白B胞外区编码基因的真核表达及纯化鉴定

HSV1糖蛋白B胞外区编码基因的真核表达及纯化鉴定

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：管文燕王正茂李琳李越希南京医科大学基础医学院南京 210029 南京医科大学基础医学院南京 210029 南京军区军事医学研究所江苏省医药生物技术重点实验室南京 210002

应用基因工程技术构建、纯化单纯疱疹病毒1型截短(胞外区)糖蛋白B的亚单位疫苗。方法：通过对HSV1—gB蛋白的抗原表位分析,化学合成HSV1—gB胞外区含信号肽序列的基因序列。定向插入真核表达质粒pCEP4载体中,构建出重组真核表达质粒pCEP... 详细信息

应用基因工程技术构建、纯化单纯疱疹病毒1型截短(胞外区)糖蛋白B的亚单位疫苗。方法：通过对HSV1—gB蛋白的抗原表位分析,化学合成HSV1—gB胞外区含信号肽序列的基因序列。定向插入真核表达质粒pCEP4载体中,构建出重组真核表达质粒pCEP4—gB,并对其进行PCR鉴定、转染HEK293细胞,运用Ni—Sepharose 6Fast Flow亲和层析柱纯化。用Western Blot检测纯化前后细胞表达上清的蛋白。结果：PCR鉴定结果显示,插入的克隆基因与GenBank中HSV—1F株gB基因序列一致,证实了重组真核表达质粒pCEP4—gB的构建;Western Blot检测出经重组质粒转染的HEK293细胞明显表达出重组HSV1病毒gB糖蛋白。结论：获得重组HSV1gB胞外区蛋白,为研究预防HSV1的亚单位疫苗奠定一定基础。

关键词：单纯疱疹病毒1型糖蛋白B 真核表达纯化鉴定疫苗免疫

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全血中游离的叶酸受体阳性细胞检测的敏感度及精密度

全血中游离的叶酸受体阳性细胞检测的敏感度及精密度

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2016江苏省病理学学术会议

作者：叶庆杨军张标管文燕濮晓红樊智文南京鼓楼医院 210008

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心肌相关转录因子A通过调控基质金属蛋白酶影响肺癌细胞的迁移和侵袭

心肌相关转录因子A通过调控基质金属蛋白酶影响肺癌细胞的迁移和...

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中华医学会病理学分会第二十三次学术会议暨第七届中国病理年会

作者：樊智文濮晓红杨军管文燕张标叶庆南京市鼓楼医院

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单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D胞外区基因截短形式的真核表达及鉴定

单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D胞外区基因截短形式的真核表达及鉴定

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：李琳王正茂管文燕李越希南京医科大学公共卫生学院南京 210029 南京医科大学公共卫生学院南京 210029 南京军区疾病预防与控制中心医药生物技术研究所南京 210002

通过计算机分析单纯疱疹病毒Ⅰ型gD糖蛋白的全部氨基酸序列,筛选出HSV1病毒gD糖蛋白内的强抗原表位,选用原核及真核均偏爱的密码子,化学合成HSV1病毒的gD糖蛋白含强抗原表位的全新基因片段。将基因片段克隆至质粒pCEP4内的Hind Ⅲ/BamH... 详细信息

通过计算机分析单纯疱疹病毒Ⅰ型gD糖蛋白的全部氨基酸序列,筛选出HSV1病毒gD糖蛋白内的强抗原表位,选用原核及真核均偏爱的密码子,化学合成HSV1病毒的gD糖蛋白含强抗原表位的全新基因片段。将基因片段克隆至质粒pCEP4内的Hind Ⅲ/BamHⅠ位点,构建重组真核表达载体pCEP4—gD1,转染HEK293细胞并表达重组HSV1病毒gD糖蛋白,经Ni2+螯合亲和层析纯化后获得了高纯度的重组蛋白,为制备单纯疱疹病毒亚单位疫苗及HSV1病毒抗体或抗原的检测奠定基础。

关键词：单纯疱疹病毒包膜糖蛋白D 真核表达重组蛋白疫苗免疫

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肌纤维瘤／肌纤维瘤病九例临床病理学分析

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中华病理学杂志 2018年第1期47卷 45-50页

作者：付尧管文燕武海燕吴鸿雁樊智文叶庆孟凡青南京大学医学院附属鼓楼医院病理科 210008 南京医科大学附属南京儿童医院病理科

目的探讨肌纤维瘤/肌纤维瘤病的临床及病理组织学特征、诊断和鉴别诊断.方法回顾性分析2011年8月至2016年11月就诊于南京大学医学院附属鼓楼医院（7例）及会诊病例（2例）共9例肌纤维瘤/肌纤维瘤病患者的临床、病理资料及免疫表型特点,... 详细信息

目的探讨肌纤维瘤/肌纤维瘤病的临床及病理组织学特征、诊断和鉴别诊断.方法回顾性分析2011年8月至2016年11月就诊于南京大学医学院附属鼓楼医院（7例）及会诊病例（2例）共9例肌纤维瘤/肌纤维瘤病患者的临床、病理资料及免疫表型特点,7例进行PDGFRB基因外显子第12、14号突变检测,4例应用荧光原位杂交（FISH）检测ETV6-NTRK3融合基因,同时复习相关文献.结果患者男性7例,女性2例.发病年龄3 d至18岁,平均年龄5岁.发病部位：头面部8例,躯干部1例.临床表现多为局部境界清楚的肿块.组织学上,肿瘤可出现浅染区及深染区的双相结构.浅染区由具有嗜酸性胞质的胖梭形细胞构成,肿瘤细胞排列呈结节状、短束状或旋涡状.高倍镜下,细胞核呈细长的圆锥形或雪茄形,并缺乏核异型性.间质可发生程度不同的透明变性.深染区由原始的多边形或圆形的细胞核深染的细胞组成,细胞质淡染,细胞边缘较模糊,有时可见血管外皮瘤样结构,核分裂象可见.免疫组织化学显示：肿瘤浅染区细胞表达波形蛋白和平滑肌肌动蛋白（SMA）弥漫阳性;深染区原始间叶细胞表达波形蛋白弥漫阳性,SMA灶性区弱阳性;肿瘤表达结蛋白、S-100蛋白、h-Caldesmon、CD34、STAT6阴性.PDGFRB基因第12、14号外显子突变检测结果显示：2例伴有第12号外显子点突变c.1681C〉T（p.R561C）,1例伴有第14号外显子点突变c.1998C〉G（p.N666K）.4例3岁以下病例FISH检测ETV6-NTRK3融合基因显示阴性.9例均行外科单纯切除术,术后随访6~68个月,2例复发.结论肌纤维瘤/肌纤维瘤病常发生于2岁以下的婴幼儿,形态学上肿瘤可出现浅染区及深染区的双相结构,分子遗传学可出现PDGFRB外显子突变,可作为疑难病例的辅助诊断指标.

关键词：肌纤维瘤肌纤维瘤病受体血小板源生长因子β 原位杂交荧光

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单纯疱疹病毒Ⅱ型包膜糖蛋白D在哺乳动物细胞中的表达、纯化及生物学活性分析

单纯疱疹病毒Ⅱ型包膜糖蛋白D在哺乳动物细胞中的表达、纯化及生...

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：王正茂李琳管文燕李越希南京军区军事医学研究所医药生物技术研究所苏省医药生物技术重点实验室南京210002

目的：探讨在哺乳动物细胞中表达的截短形式的单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV—2)包膜糖蛋白D(gD)作为单纯疱疹病毒亚单位疫苗候选疫苗的可行性。方法：Anthewin软件分析单纯疱疹病毒Ⅱ型包膜糖蛋白D(gD2)胞外区氨基酸序列,筛选抗原表位富集区,... 详细信息

目的：探讨在哺乳动物细胞中表达的截短形式的单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV—2)包膜糖蛋白D(gD)作为单纯疱疹病毒亚单位疫苗候选疫苗的可行性。方法：Anthewin软件分析单纯疱疹病毒Ⅱ型包膜糖蛋白D(gD2)胞外区氨基酸序列,筛选抗原表位富集区,选用真核细胞及原核细胞均偏爱的密码子,化学合成全新的基因片段。将化学合成的基因gD2克隆到真核表达载体pCEP4中,构建重组质粒pCEP4—gD2,用脂质体转染法转染至CHO细胞中进行筛选、表达。表达的细胞上清上镍柱,用亲和层析的方法纯化表达的蛋白。96孔板包被纯化的gD2蛋白,羊抗HSV1+HSV2多抗检测蛋白抗原性。用纯化的重组蛋白联合福氏佐剂免疫6—8周龄雄性昆明小鼠,常规方法制备血清,间接ELISA检测小鼠体液免疫应答水平。结果：成功构建出真核重组质粒pCEP4—gD2,经测序基因序列完全正确。重组质粒转染至CHO细胞经选择性抗生素筛选后收集细胞上清进行SDS—PAGE电泳检测及WesternBlot检测,gD2蛋白样品在相对分子量46kD处出现特异性蛋白带,分子量符合预期大小,而空质粒载体转染组均没有此相应的蛋白质条带。ELISA检测蛋白抗原性,其OD值与蛋白浓度有良好线性关系,表明蛋白具有较好的抗原性。制备的小鼠抗血清用间接ELISA测抗体效价,结果显示制备的重组蛋白有较好的免疫原性。讨论：利用真核表达系统得到的重组蛋白gD2具有良好的免疫原性及抗原性,为单纯疱疹病毒亚单位疫苗候选疫苗的选择提供了实验依据。

关键词：单纯疱疹病毒Ⅱ型包膜糖蛋白D 哺乳动物细胞真核表达抗原性免疫原性疫苗免疫

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BRAF^(V600E)突变检测在BSRTCⅠ、Ⅲ类甲状腺结节中的诊断价值

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中华核医学与分子影像杂志 2023年第3期43卷 166-170页

作者：管文燕郑金榆聂岭杨军崔晓宾苗淑莹南京大学医学院附属鼓楼医院病理科南京210008

目的探讨B-Raf原癌基因丝/苏氨酸蛋白激酶(BRAF)V600E突变检测在Bethesda甲状腺细胞病理学报告系统(BSRTC)Ⅰ、Ⅲ类结节良恶性诊断中的价值。方法回顾性收集2019年1月至2020年12月间共263例患者(男79例、女184例,中位年龄46岁)的264个结... 详细信息

目的探讨B-Raf原癌基因丝/苏氨酸蛋白激酶(BRAF)V600E突变检测在Bethesda甲状腺细胞病理学报告系统(BSRTC)Ⅰ、Ⅲ类结节良恶性诊断中的价值。方法回顾性收集2019年1月至2020年12月间共263例患者(男79例、女184例,中位年龄46岁)的264个结节,均在南京大学医学院附属鼓楼医院行BRAF^(V600E)突变检测和细针穿刺细胞学检查(FNAC),并实施甲状腺结节切除术,其中12例患者的13个结节有重复穿刺样本,51个结节用术后切除标本进行甲状腺癌多基因检测验证。以术后组织病理结果为"金标准",同时比较术后多基因检测结果、重复穿刺样本BRAF^(V600E)突变检测结果,分析BRAF^(V600E)突变检测的诊断效能。结果264个结节中230个为甲状腺乳头状癌(PTC),34个为良性结节;BSRTCⅠ类(未诊断)、Ⅲ类(滤泡性病变)结节数分别为58、206个。BRAF^(V600E)突变检测在BSRTCⅠ、Ⅲ类结节中的诊断灵敏度分别为77.1%(37/48)、78.0%(142/182),特异性为9/10、91.7%(22/24),阳性预测值为97.4%(37/38)、98.6%(142/144),阴性预测值为45.0%(9/20)、35.5%(22/62),准确性为79.3%(46/58)、79.6%(164/206)。51个术前BRAF^(V600E)为野生型但术后病理证实为PTC的结节经术后多基因检测验证,手术前后BRAF^(V600E)突变检测的一致性达90.2%(46/51);通过重复穿刺样本的检测结果分析,BRAF^(V600E)突变检测的诊断一致性为11/13。结论对于无法准确判断良恶性的BSRTCⅠ、Ⅲ类结节,BRAF^(V600E)突变检测是有效的辅助诊断手段。

关键词：甲状腺结节原癌基因蛋白质B-raf 突变活组织检查,细针

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髋关节外展操治疗GrafⅡa型髋关节发育不良分析

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中国康复 2015年第2期30卷 135-136页

作者：陈智博王加宽管文燕王玉欢扬州市妇幼保健院江苏扬州225002

目的:分析探讨髋关节外展操对GrafⅡa型髋关节发育不良患儿的治疗效果。方法:将GrafⅡa型髋关节发育不良患儿62例70髋随机分为干预组34例和对照组28例,对照组仅予以指导使用宽尿布片、骑跨抱等基本健康教育,干预组在此基础上予以髋关节... 详细信息

目的:分析探讨髋关节外展操对GrafⅡa型髋关节发育不良患儿的治疗效果。方法:将GrafⅡa型髋关节发育不良患儿62例70髋随机分为干预组34例和对照组28例,对照组仅予以指导使用宽尿布片、骑跨抱等基本健康教育,干预组在此基础上予以髋关节外展操治疗。干预前后检查髋关节B超,观察其α角和β角的变化。结果:干预2个月后,2组均发现其α角较干预前增加(P<0.05),β角较干预前降低(P<0.05),且干预组α角增加幅度及β角减少幅度均高于对照组(P<0.05)。结论:髋关节外展操能有效促进GrafⅡa型发育不良髋关节转化为正常髋关节。

关键词：发育性髋关节发育不良髋关节外展操患儿 B超

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