检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：许伟榕上海交通大学

学位级别：硕士

人PTEN基因是一种抑癌基因，于1997年由三个研究小组同时克隆，该基因定位于第十号染色体，具有双重特异性磷酸酶活性，通过负调控多种信号通路包括三磷酸肌醇激酶(PI3K／AKT)途径、灶性粘连激酶(FAK)途径和丝裂酶原蛋白激酶(MAPK)途径... 详细信息

人PTEN基因是一种抑癌基因，于1997年由三个研究小组同时克隆，该基因定位于第十号染色体，具有双重特异性磷酸酶活性，通过负调控多种信号通路包括三磷酸肌醇激酶(PI3K／AKT)途径、灶性粘连激酶(FAK)途径和丝裂酶原蛋白激酶(MAPK)途径来调节细胞的周期进展、诱导细胞凋亡和抑制肿瘤细胞增殖与转移。在血液系统肿瘤中PTEN的研究较少，已有报道认为PTEN对维持多能血液干细胞的稳定非常重要，丧失PTEN表达的小鼠血液干细胞会异常增殖从而导致其发生白血病，在70％的白血病人中发现有PI3K／AKT途径的过度活化。因此，本研究将对PTEN在白血病细胞株中的表达是否异常、表达异常的机制以及恢复其表达对白血病细胞的生长有何影响进行了初步的研究。检测了PTEN及其下游473位磷酸化（活化）的Akt蛋白在四种血液肿瘤细胞株以及正常人外周血白细胞中的表达。通过RT-PCR发现在四种不同类型造血系肿瘤细胞株（U937、K562、NB4、Jurkat T）中PTEN的mRNA表达水平与正常人外周血细胞相比无明显差异，而在蛋白水平，四种细胞株均呈现出表达水平的低或无，与此相对应的活化的Akt表达水平在NB4及K562细胞中均显著高于正常。上述现象表明，导致PTEN在白血病细胞株中表达缺失的机制值得深究。首先寻找在四种白血病细胞株中有无PTEN的直接突变，发现仅在U937细胞中其磷酸酶活性的核心区域有4个碱基（CCCG）的插入，而在其他细胞株内未发现有突变。该突变国外已有研究报道，并认为其导致了在U937细胞中PTEN翻译的提前终止，接着用DNA甲基化酶抑制剂5’-氮杂-2’-脱氧胞嘧啶以及蛋白酶体抑制剂MG132对细胞分别进行处理，分别观察对PTEN表达的影响，发现在甲基化酶抑制剂处理后PTEN mRNA的表达水平并未发生改变;而在MG132处理后，NB4、K562和Jurkart T细胞中PTEN的蛋白表达水平均有上调，而在K562细胞中最为显著，说明在K562细胞中可能存在对PTEN的泛素化修饰，从而调控蛋白质的稳定性。Co-IP的方法进一步验证了在NB4及K562细胞中均存在PTEN与E3连接酶NEDD4-1直接相互作用，而在K562细胞株中NEDD4-1的表达明显高于正常人外周血细胞。以此初步认为在K562细胞中PTEN的不稳定表达是由于其泛素连接酶的高表达所致。为了进一步了解PTEN在白血病发生发展中的作用，根据实验结果，选择在PTEN低表达而磷酸化Akt高表达的K562细胞中进行PTEN的过表达，研究其对细胞生物学行为影响的研究。利用电转的方法将受强力霉素调控的PTEN基因真核质粒表达系统转染K562细胞，同时以转染pTet-splice空载体和未转染质粒的K562细胞为对照组，G418筛选获得阳性克隆，RT-PCR和Western blot验证过表达情况;收集细胞经MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期分布、细胞凋亡和细胞分化状态;利用软琼脂集落生成实验检测细胞致瘤能力。Western blot结果验证了筛得PTEN高表达多克隆细胞系;K562-PTEN细胞与对照组比较，实验组细胞生长速度减慢，出现细胞周期阻滞;而对细胞分化、凋亡无明显影响;软琼脂集落生成实验结果表明：在过表达PTEN后，K562的致瘤能力显著下降，克隆生成率明显低于对照组。综上所述，本研究以抑癌基因PTEN为研究对象，对其在白血病细胞株中的表达水平及异常表达的机制作了初步探索。证实在四种白血病细胞株中均存在PTEN的低表达，并且其异常表达的机制是多样的，PTEN的高表达会造成K562细胞细胞周期发生阻滞、细胞增殖受到抑制、致瘤能力降低。

关键词：抑癌基因白血病血液肿瘤肿瘤细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

特异AT序列结合蛋白-1促进胰岛素样生长因子结合蛋白-2在K562细胞中的表达

引用

中国生物化学与分子生物学报 2009年第2期25卷 169-176页

作者：乔福锋蔡蓉蔡霞许伟榕卢健上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

探讨过表达特异AT序列结合蛋白-1(special AT-rich sequence binding protein,SATB1)核基质结合区(MAR)结合蛋白对胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP2)基因表达的影响,并对其影响机制进行初步探索.首先用脂质体将SATB1的真核表达载体pcD... 详细信息

探讨过表达特异AT序列结合蛋白-1(special AT-rich sequence binding protein,SATB1)核基质结合区(MAR)结合蛋白对胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP2)基因表达的影响,并对其影响机制进行初步探索.首先用脂质体将SATB1的真核表达载体pcDNA3.1-SATB1转染至K562细胞,通过6周G418的筛选获得阳性克隆,RT-PCR、实时PCR及Western印迹验证过表达情况,对阳性克隆细胞中IGFBP2的表达用RT-PCR、实时PCR及Western印迹方法进行检测;然后用RNAi的方法干扰阳性细胞中SATB1的表达后,同样用上述3种方法再次检测IGFBP2的表达状况;用生物信息学方法对IGFBP2基因进行MAR序列与SATB1结合位点搜索分析,寻找SATB1影响IGFBP2基因表达的机制.结果显示,在稳定转染的情况下,实验组K562-SATB1细胞与转染空载体pcDNA3.1的K562-3.1细胞和未转染细胞K562相比,IGFBP2 mRNA水平上调了近7倍,而蛋白水平变化不明显.RNA干扰后,IGFBP2的表达在mRNA水平也相应下调,蛋白水平的变化同样不明显.通过生物信息学分析发现,IGFBP2第1个内含子中可能存在2.5 kb MAR样序列,且MAR样序列上存在多个SATB1的潜在结合位点.综上所述,过表达SATB1可以使K562细胞中IGFBP2 mRNA表达水平提高,而且其调控机制可能与SATB1直接和IGFBP2基因中的MAR样序列结合有关.

关键词：特异AT序列结合蛋白-1 核基质结合区胰岛素样生长因子结合蛋白-2 K562细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用实验课程加强与大学生科研培训的衔接

引用

南方医科大学学报 2021年

作者：黄心智许伟榕沈文红王保国孙岳平上海交通大学医学院

为适应社会经济发展对人才的需要,大学教育更应注重大学生综合素质的培养,特别是科研创新能力的培养,目前许多院校都开展了科研训练科目,如何利用已有课程做好与科研训练的衔接,更好地实现培养目标是摆在大家面前的问题。本研究利用《... 详细信息

为适应社会经济发展对人才的需要,大学教育更应注重大学生综合素质的培养,特别是科研创新能力的培养,目前许多院校都开展了科研训练科目,如何利用已有课程做好与科研训练的衔接,更好地实现培养目标是摆在大家面前的问题。本研究利用《细胞与分子生物学实验》课程在课程时间安排、实验内容设置方面与科研训练项目能较好匹配的既有优势,在教学过程中增加了文献阅读、实验设计和论文撰写等创新性教学内容,以期在基础实验教学阶段加强学生的科研思维训练、科研实践能力培养,做好与后期科研训练教学的衔接工作,让学生能够尽快适应科学研究任务,同时也加强了基础实验教学的实用性。

关键词：细生实验科研培训衔接

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用实验课程加强与大学生科研培训的衔接撤回

引用

南方医科大学学报 2018年

作者：黄心智许伟榕沈文红王保国孙岳平上海交通大学医学院

关键词：细生实验科研培训衔接

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RBL课程带教的实践与思考

引用

中国高等医学教育 2013年第9期 50-50,74页

作者：蔡蓉许伟榕上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系上海200025 上海交通大学医学院基础医学实验教学中心上海200025

探究为基础的学习(RBL,research based learning),是上海交通大学医学院自2005年以来开展的一种教学模式的改革尝试。在此总结了RBL教学过程中的一些思索与体会。经过近十年的摸索和实践,证明这种教学模式对大学生创新性思维的培养和科... 详细信息

探究为基础的学习(RBL,research based learning),是上海交通大学医学院自2005年以来开展的一种教学模式的改革尝试。在此总结了RBL教学过程中的一些思索与体会。经过近十年的摸索和实践,证明这种教学模式对大学生创新性思维的培养和科研能力的系统训练,有着良好的推动作用。

关键词：探究为基础的学习教学改革收获科研能力训练

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TRAIL耐药的研究进展

引用

中国细胞生物学学报 2016年第6期38卷 750-758页

作者：谢悠扬林睿明许伟榕上海交通大学医学院基础医学实验教学中心细胞与分子生物学教学实验室上海200025

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)能选择性地诱导肿瘤细胞凋亡,因此作为抗肿瘤药物备受瞩目,现已进入II期临床试验,尽管有报道称部分肿瘤细胞对TRAIL耐药,导致治疗效果不... 详细信息

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)能选择性地诱导肿瘤细胞凋亡,因此作为抗肿瘤药物备受瞩目,现已进入II期临床试验,尽管有报道称部分肿瘤细胞对TRAIL耐药,导致治疗效果不如预期,但TRAIL用于肿瘤治疗的前景依旧被人们看好。通过对TRAIL耐药机理的研究将有助于寻找逆转肿瘤细胞耐药的靶点,并通过联合用药来调节相关的信号分子以获得更好的抗肿瘤效应。该文将介绍TRAIL及其介导的细胞凋亡通路并总结近年来TRAIL耐药机理及逆转其耐药方面的研究进展。

关键词： TRAIL TRAIL耐药肿瘤细胞凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

MAR共存性增强子活化人PI3Kγ基因转录调控的机制的初步研究

MAR共存性增强子活化人PI3Kγ基因转录调控的机制的初步研究

引用

华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会

作者：蔡霞蔡蓉许伟榕卢健上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室

PI3Kγ是一种信号分子,属于I B型磷脂酰肌醇3激酶(Phosphoiositide 3-Kinase,PI3K),主要在白细胞和T淋巴细胞中表达,在红系及非血液系统细胞中无表达,其表达水平随着免疫细胞的分化成熟逐渐增加。

关键词：基因转录调控增强子 MAR 初步研究共存性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丝氨酸缺乏及p53调控肿瘤氧化应激的研究进展

引用

上海交通大学学报（医学版） 2014年第12期34卷 1839-1844页

作者：张硕徐冰聪陈立畅王飞扬许伟榕上海交通大学基础医学院细胞与分子生物学实验室上海200025

肿瘤细胞的快速增殖表现为以糖酵解为主要供能方式的能量代谢异常,肿瘤细胞的生物合成依赖丝氨酸。丝氨酸缺乏可导致肿瘤细胞氧化应激,激活p53基因促进肿瘤细胞的生存。丝氨酸缺乏与p53基因的关系为代谢靶向治疗肿瘤提供了新思路。本文... 详细信息

肿瘤细胞的快速增殖表现为以糖酵解为主要供能方式的能量代谢异常,肿瘤细胞的生物合成依赖丝氨酸。丝氨酸缺乏可导致肿瘤细胞氧化应激,激活p53基因促进肿瘤细胞的生存。丝氨酸缺乏与p53基因的关系为代谢靶向治疗肿瘤提供了新思路。本文就丝氨酸缺乏与p53调节肿瘤细胞氧化应激的研究进展作一综述。

关键词：丝氨酸缺乏 p53 氧化应激

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PTP的结构与功能

引用

医学分子生物学杂志 2007年第2期4卷 158-160,163页

作者：许伟榕卢健上海交通大学医学院生物化学和分子生物学教研室人类基因治疗研究中心上海市200025

蛋白质分子中酪氨酸残基的可逆性磷酸化作为真核生物信号转导的一个重要组成部分,参与了多种细胞功能调节,包括细胞增殖、迁移以及细胞间相互作用等。目前认为这种可逆性的磷酸化调节主要是受控于蛋白酪氨酸激酶(PTK)及蛋白酪氨酸磷酸酯... 详细信息

蛋白质分子中酪氨酸残基的可逆性磷酸化作为真核生物信号转导的一个重要组成部分,参与了多种细胞功能调节,包括细胞增殖、迁移以及细胞间相互作用等。目前认为这种可逆性的磷酸化调节主要是受控于蛋白酪氨酸激酶(PTK)及蛋白酪氨酸磷酸酯酶(PTP)这两种酶活性的动态平衡。因此,与PTK一样,PTP对于体内各种生命活动起着非常重要的生物学作用。文章综述了近年来PTP在信号转导中的调控作用,特别是其在肿瘤发生、发展过程中的作用、以及其本身的结构与调控的研究进展。

关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶可逆性磷酸化信号转导

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

微RNA调控肿瘤多药耐药机制的研究进展

引用

上海交通大学学报（医学版） 2016年第5期36卷 776-781页

作者：张平辰盛小楠林正钰程雨龙许伟榕上海交通大学基础医学院细胞与分子生物学教学实验室上海200025

微RNA(mi RNA)作为真核生物重要的基因表达调控分子,是肿瘤耐药调控机制中的重要构成部分。mi RNA对靶基因的异常调控可以通过膜受体介导药物外排、药物靶点改变、细胞凋亡途径受阻、DNA修复能力改变等多种方式参与多药耐药调控机制。此... 详细信息

微RNA(mi RNA)作为真核生物重要的基因表达调控分子,是肿瘤耐药调控机制中的重要构成部分。mi RNA对靶基因的异常调控可以通过膜受体介导药物外排、药物靶点改变、细胞凋亡途径受阻、DNA修复能力改变等多种方式参与多药耐药调控机制。此外,mi RNA调控肿瘤干细胞生长分化与通过激发保护性自噬来诱导多药耐药的研究领域也有重要进展。该文就mi RNA调控肿瘤细胞多药耐药机制的研究进展作一综述。

关键词：微RNA 肿瘤多药耐药

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：