检索结果-内蒙古大学图书馆

中国肿瘤生物治疗杂志 1995年第3期2卷 235-238,217页

作者：胡亮钱关祥沈文红许伟榕张腾飞陈诗书上海第二医科大学人类基因治疗研究中心上海200025

逆转录病毒介导的基因转移技术要过渡到临床应用,主要解决如何使病毒载体具有高滴度而不具有复制活性。本文旨在探索建立一种合适的方法,能产生高滴度而且是安全的逆转录病毒载体。采用带有人肿瘤坏死因子基因的LXSN载体转染PA317包装细... 详细信息

逆转录病毒介导的基因转移技术要过渡到临床应用,主要解决如何使病毒载体具有高滴度而不具有复制活性。本文旨在探索建立一种合适的方法,能产生高滴度而且是安全的逆转录病毒载体。采用带有人肿瘤坏死因子基因的LXSN载体转染PA317包装细胞,建立产病毒的包装细胞株,结果表明:病毒载体滴度受包装培养液体积和胎牛血清浓度影响;包装细胞在32℃产生的病毒滴度比37℃高,而且比较稳定。产病毒包装细胞和被感染的靶细胞经PCR分析显示,被转染和被转导的细胞都有病毒基因的整合,而且包装细胞不会产生具有复制活性的逆转录病毒,因此能进一步用于临床研究。

关键词：包装细胞逆转录病毒 TNF-α基因高滴度病毒载体临床应用转染 PA 基因转移技术复制

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分段删除突变分析PIMAR鉴定共存性增强子

分段删除突变分析PIMAR鉴定共存性增强子

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会

作者：蔡蓉戴冰冰李珂王红洁许伟榕葛盛芳卢健上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室

核基质结合区与增强子均属于重要的远距离调控区,两者在调控特定基因表达时空间位置与生物学功能上均存在一定的协同性。本实验室在PI3Kγ基因最后一个内含子中鉴定发现一长约2kb核基质结合区(PI3Kγ intronic matrix attachment region... 详细信息

核基质结合区与增强子均属于重要的远距离调控区,两者在调控特定基因表达时空间位置与生物学功能上均存在一定的协同性。本实验室在PI3Kγ基因最后一个内含子中鉴定发现一长约2kb核基质结合区(PI3Kγ intronic matrix attachment region,PIMAR)(51411-53475)的基础上,以既往构建的报告基因载体pGL3-PIMAR1-LU(SV40 promoter+2kb PIMAR)为模板,运用PCR技术,分别扩增PI3Kγ基因内51911-53475、52411-53475及52911-53475的片段,构建分别由长度为1564、1064 及564的PIMAR删除突变体片段驱动的报告基因载体pGL3-promoter-PIMAR 1564、pGL3-promoter -PIMAR 1064与pGL3-promoter-PIMAR 564,与pGL3-promoter、pGL3-PIMAR1-LU和pGL3- control(SV40promoter+enhancer)分别瞬时转染Jurkat、K562、U937和HeLa细胞,通过测定萤光素酶的表达活性,观察PIMAR三个删除突变体在不同种类细胞内活性的差异。结果显示。以pGL3-promoter 的活性为阴性对照,以pGL3-control的活性为阳性对照,转录激活性由大至小顺序为pGL3-PIMAR1 -LU>pGL3-promoter-PIMAR 1564≈pGL3-promoter-PIMAR 1064≈pGL3-promoter-PIMAR 564,并且pGL3-promoter-PIMAR 1564、pGL3-promoter-PIMAR 1064和pGL3-promoter-PIMAR 564三者报告基因的活性与pGL3-promoter相比无显著差异,提示PIMAR序列具有瞬时增强外源基因转录活性的作用,PIMAR内可能共存一增强子元件,位于PI3Kγ基因51411-51911之间。PIMAR 及其删除突变体在四种细胞内的转录激活能力由大到小为U937>K562>Jurkat>Hela,提示 PIMAR内共存的增强子具有一定的组织特异性。

关键词：核基质结合区突变体增强子 PIMAR 共存性突变分析

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细胞与分子生物学实验教学整合模式的实践和探索

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中国高等医学教育 2018年第4期 51-52页

作者：黄心智沈文红许伟榕王保国孙岳平上海交通大学基础医学院实验中心上海200025

细胞与分子生物学实验课程于2007年构建而成,是一门面向本科生的整合课程,融合了生化、免疫、遗传、细胞生物学的主要实验教学内容。为提高整合效果,课程的整合模式被进一步优化。实验内容依生物医学研究的基本进程被重新作了归类,既突... 详细信息

细胞与分子生物学实验课程于2007年构建而成,是一门面向本科生的整合课程,融合了生化、免疫、遗传、细胞生物学的主要实验教学内容。为提高整合效果,课程的整合模式被进一步优化。实验内容依生物医学研究的基本进程被重新作了归类,既突出其内在联系,又贴近临床科研实践,以期提高学生的综合实验能力,为科研创新打好基础。

关键词：细胞与分子生物学整合课程实验教学

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问题引导的视频预习对细胞与分子生物学实验教学的影响

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基础医学教育 2017年第10期19卷 780-782页

作者：黄心智沈文红许伟榕王保国孙岳平上海交通大学医学院实验教学中心细胞与分子生物学实验室上海200025

细胞与分子生物学实验对预习的要求较高,但学生往往不能自觉充分地利用操作视频资源,预习效果差。该教学研究设置了针对操作视频的预习问题,在临床八年制学生中安排了实验组和对照组进行教学效果比较。通过对比分析两组小测验成绩和调... 详细信息

细胞与分子生物学实验对预习的要求较高,但学生往往不能自觉充分地利用操作视频资源,预习效果差。该教学研究设置了针对操作视频的预习问题,在临床八年制学生中安排了实验组和对照组进行教学效果比较。通过对比分析两组小测验成绩和调查问卷结果发现,针对操作视频的预习问题能引导学生更充分、高效地利用视频教学资源来做好预习,在没有增加学生负担的前提下取得了更好的教学效果。

关键词：细胞与分子生物学实验教学视频

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过表达PTPα促进K562细胞体外增殖能力和体内致瘤性

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中国生物化学与分子生物学报 2007年第9期23卷 757-763页

作者：王红洁蔡蓉李珂许伟榕乔福峰郑新民卢健上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)在血液肿瘤细胞中的特异性表达,研究过量表达PTPα对人红白血病细胞K562生物学行为的影响及在裸鼠体内致瘤能力的改变.首先应用RT-PCR和Western印迹检测3种不同类型造血系肿瘤细胞(K562、NB4、Jurkat T)... 详细信息

探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)在血液肿瘤细胞中的特异性表达,研究过量表达PTPα对人红白血病细胞K562生物学行为的影响及在裸鼠体内致瘤能力的改变.首先应用RT-PCR和Western印迹检测3种不同类型造血系肿瘤细胞(K562、NB4、Jurkat T)中PTPα的表达水平.根据检测结果,选择K562细胞作为研究对象,利用脂质体将PTPα真核表达载体转染K562细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR和Western印迹验证过表达情况;经MTT法检测细胞增值能力的改变;用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞分化状态;并将阳性克隆细胞皮下接种裸鼠,观察PTPα基因转染前后细胞系在裸鼠体内的致瘤能力及瘤体的组织化学变化.上述实验结果表明,通过G418压力筛选获得了PTPα高表达多克隆细胞系K562-PTPα;经体外增殖实验分析,实验组K562-PTPα细胞与未转染组细胞K562和转染空载体组细胞K562-splice相比,细胞生长速度增快,G2/M期细胞比例增加(P<0.05),而细胞分化状态无明显变化;裸鼠体内致瘤实验显示,K562组、K562-splice组和K562-PTPα组平均瘤重分别为(1.1±0.3)g、(1.3±0.2)g和(2.5±0.5)g;病理切片显示,K562-PTPα组瘤体组织分化程度较对照组低、恶性程度高,细胞的致瘤能力增强(P<0.01).综上所述,过表达PTPα使K562细胞具有更强的体外增殖能力和体内致瘤性,表明PTPα可能在造血系统恶性肿瘤的发生发展中发挥促进作用.

关键词：蛋白质酪氨酸磷酸化蛋白质酪氨酸磷酸酶α 人红白血病 K562细胞

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线性泛素化研究进展

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中国细胞生物学学报 2021年第12期43卷 2409-2420页

作者：周轩平陈欣仪陈鸿翔许伟榕上海交通大学医学院上海200240

线性泛素化是一种新型泛素化修饰方式,不同于赖氨酸介导的多聚泛素化,其主要通过泛素分子的首尾相连对蛋白质进行翻译后修饰,以线性泛素化复合体(LUBAC)作为E3连接酶,参与细胞的抗凋亡、抗病毒作用,以及炎症反应等细胞生命活动。该文主... 详细信息

线性泛素化是一种新型泛素化修饰方式,不同于赖氨酸介导的多聚泛素化,其主要通过泛素分子的首尾相连对蛋白质进行翻译后修饰,以线性泛素化复合体(LUBAC)作为E3连接酶,参与细胞的抗凋亡、抗病毒作用,以及炎症反应等细胞生命活动。该文主要介绍了线性泛素化的组成、对蛋白质进行修饰的主要方式,其参与调控的体内生理活动信号通路,并讨论了其在肿瘤、自身免疫病等发生发展过程中所起到的表观遗传学调控作用。

关键词：线性泛素化 LUBAC 去泛素化酶

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生物化学与分子生物学实验教学方法改革初探

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实验室研究与探索 2010年第11期29卷 125-127页

作者：许伟榕程枫沈文红张怡平王保国卢健上海交通大学医学院基础医学院细胞与分子生物学实验室上海200025

生化与分子生物学实验是一门实践性很强的学科,对学生综合素质及创新能力的培养有着很重要的作用。以实验教学中心成立,学科整合为契机,通过优化实验内容,丰富教学手段,改进实验考评等方式对生化与分子生物学实验教学进行了系统的改进... 详细信息

生化与分子生物学实验是一门实践性很强的学科,对学生综合素质及创新能力的培养有着很重要的作用。以实验教学中心成立,学科整合为契机,通过优化实验内容,丰富教学手段,改进实验考评等方式对生化与分子生物学实验教学进行了系统的改进与探索。经过初步的实践,调动了学生学习兴趣,提高学生分析、思考、解决问题能力,在学生的信息反馈调查中得到了良好的评价。

关键词：生化与分子生物学实验教学教学改革

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逆转录病毒介导的基因治疗中的安全性检测

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上海免疫学杂志 1997年第2期17卷 103-107页

作者：陆劲松许伟榕徐铿钱关祥陈诗书上海第二医科大学生化教研室上海200025

逆转录病毒介导的基因治疗中安全性的最大危险是产生有复制能力的逆转录病毒（RCR）。本实验对经3T3扩增的样品进行 S^+L^-分析、标记拯救分析和PCR扩增方法检测RCR。比较三种方法,标记拯救分析比S^+L^-分析结果容易判断,且PCR可以从10~... 详细信息

逆转录病毒介导的基因治疗中安全性的最大危险是产生有复制能力的逆转录病毒（RCR）。本实验对经3T3扩增的样品进行 S^+L^-分析、标记拯救分析和PCR扩增方法检测RCR。比较三种方法,标记拯救分析比S^+L^-分析结果容易判断,且PCR可以从10~5个无病毒基因的细胞中检测出一个带有病毒基因的细胞。3T3扩增可提高灵敏度约10倍。安全性是基因治疗首要考虑的问题,本方法为其提供了保证。

关键词： PCR 基因治疗安全性逆转录病毒介导 3T3扩增

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动画式微课制作工具Focusky在实验教学中的应用示例

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当代教育实践与教学研究 2022年第20期 37-39页

作者：邹倩王晓琳许伟榕黄心智沈文红王保国孙岳平上海交通大学医学院上海交通大学医学院上海交通大学医学院基础医学实验教学中心基础医学实验教学中心基础医学实验教学中心基础医学实验教学中心

使用Focusky动画演示大师可以制作精美的动画式微课视频，该软件直观、简单、易操作。以具体的微课制作实例，对如何使用Focusky动画演示大师进行微课视频制作进行了详细解说，以期能更好地为广大教师提供技术帮助。

关键词：微课 Focusky 动画制作

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维甲酸抑制人胃癌细胞株层粘素受体基因和原癌基因C-Ha-ras mRNA的表达

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胃肠病学 2001年第1期6卷 14-16页

作者：孙月霞许伟榕朱敏何震平陈诗书上海第二医科大学生化教研室 200025

目的：研究维甲酸（ＲＡ）对人胃癌细胞株（ＳＧＣ７９０１）层粘素受体（ＬＮＲ）基因和原癌基因Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ表达的影响。方法：应用原位杂交方法标记ＬＮＲ探针和Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ探针，对人胃癌细胞（分为经ＲＡ处理及未经ＲＡ... 详细信息

目的：研究维甲酸（ＲＡ）对人胃癌细胞株（ＳＧＣ７９０１）层粘素受体（ＬＮＲ）基因和原癌基因Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ表达的影响。方法：应用原位杂交方法标记ＬＮＲ探针和Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ探针，对人胃癌细胞（分为经ＲＡ处理及未经ＲＡ处理两组）中ＬＮＲ和Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因的ｍＲＮＡ表达进行检测。结果：经ＲＡ处理的人胃癌细胞ＬＮＲｍＲＮＡ表达较未经ＲＡ处理者显著降低（Ｐ＜０．０１～０．００１）；Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ转录水平亦显著降低（Ｐ＜０．０１～０．００１）。结论：ＲＡ可显著抑制人胃癌细胞ＬＮＲ和Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因的表达。

关键词：胃肿瘤细胞系维甲酸层粘连蛋白受体 RAS基因原癌基因 P2蛋白 mRNA

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