检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：赵钧馨南昌大学

学位级别：博士

脂肪酶（EC.3.1.1.3）具备催化酯类化合物水解和合成的能力,在食品加工、废物处理、生物燃料、洗涤剂和制药等许多行业具有良好的应用前景。目前已从动植物和微生物等来源中分离获得许多脂肪酶,其中微生物脂肪酶是酶学性质最多样化且具... 详细信息

脂肪酶（EC.3.1.1.3）具备催化酯类化合物水解和合成的能力,在食品加工、废物处理、生物燃料、洗涤剂和制药等许多行业具有良好的应用前景。目前已从动植物和微生物等来源中分离获得许多脂肪酶,其中微生物脂肪酶是酶学性质最多样化且具有巨大工业应用潜力的酶。然而大多数天然微生物脂肪酶的活性低、纯化难度大,且游离形式无法满足苛刻的反应条件,因此只有少量被商业化开发和利用。为应对不断增长的工业需求和克服酶自身缺陷,制备与表征天然和重组微生物脂肪酶以替代传统化学和合成催化剂,并测试其应用潜力已成为当前的研究热点。本研究首先分离得到一株产脂肪酶的地衣芽孢杆菌,对其胞外脂肪酶进行部分纯化和表征,探究该脂肪酶生物降解食品农药残留物2,4-二氯苯氧乙酸丁酯（2,4-D丁酯）的潜力。后续选择部分纯化酶多肽质谱中覆盖率相对较高的地衣芽孢杆菌脂肪酶Lip作为研究对象。首次通过原核表达技术制备重组脂肪酶Lip,并对其进行纯化和酶学性质表征,将脂肪酶Lip应用于增强低脂奶酪脂肪酸风味的释放。以樟树籽壳为基材制备功能化磁性介孔生物碳为载体,通过酶固定化技术改造脂肪酶Lip,表征固定化脂肪酶的生化和结构特性,将其应用于催化樟树籽仁油与紫苏籽油酯交换生产结构脂质。采用分子对接方法研究脂肪酶Lip与底物棕榈酸对硝基苯酯（p-NPP）和三丁酸甘油酯（Tributyrin）间相互作用的途径,并推测其催化作用机理。基于分子识别和酶保守区域的关键残基,尝试通过蛋白质工程技术改造脂肪酶Lip,探究有效定点突变对其酶学性质和结构的影响,结合分子动力学模拟分析突变体活性和性能增强的潜在原因。主要研究结果如下: （1）本研究从腐败的樟树籽仁中分离得到地衣芽孢杆菌NCU CS-5,分离和部分纯化其胞外脂肪酶,其活性为192.98 U/mg,分子量约为27 k Da。该脂肪酶在广泛的温度（5～55℃）和p H（6.0～9.0）范围内具有活性,最适温度和p H值分别为40℃和8.0。酶在各种有机溶剂、金属离子、酶抑制剂和表面活性剂存在下仍具有活性。在商业洗涤剂存在的情况下,粗脂肪酶和部分纯化脂肪酶在5小时后均保持80%以上的活性。分离得到的脂肪酶对中链和长链脂肪酸(C8～C18)底物的活性最高。部分纯化脂肪酶的多肽质谱分析显示与地衣芽孢杆菌脂肪酶家族中Lip有相对较高的序列覆盖率34.80%。此外,它在24小时内将90%以上的食品农药残留物2,4-D丁酯降解为其水解产物2,4-D,表明该脂肪酶可用于生物降解有机酯类食品农药。（2）从野生菌中部分纯化脂肪酶的活性差、纯度低,且由于实验仪器水平有限导致的难度较大。因此选择质谱中相对较高覆盖率的地衣芽孢杆菌脂肪酶Lip为研究模板,在不同大肠杆菌中进行原核表达制备重组脂肪酶Lip。在3-L摇瓶大规模表达12小时后获得了高活性的重组脂肪酶（酶活599.03 U/mg是部分纯化脂肪酶的3.10倍）。重组脂肪酶在40℃和p H 10.0时活性最佳,在p H 9.0～10.0保持80%以上的相对活性,在中温条件下（30～45℃）保持50%以上的相对活性。该脂肪酶在各种有机溶剂和金属离子表现出一定的耐受性,对短、中碳链脂肪酸甘油三酯表现出高度特异性,对p-NPP的结合亲和力最强(Km=0.674m M,Vmax=950.196μM/min)。随后将脂肪酶Lip应用于增强低脂奶酪脂肪酸风味释放的测试,并且发现其与传统的商业脂肪酶Novozyme 435相比可以更加高效地水解低脂奶酪提高丁酸、己酸、辛酸和癸酸的含量。（3）为了改善重组脂肪酶Lip的酶学性质并扩大其应用范围,通过制备聚多巴胺功能化的磁性介孔生物碳（MPCB-DA）作为载体,用于共价固定法制备固定化地衣芽孢杆菌脂肪酶Lip。在优化后的固定化条件下,最大固定化率和效率分别为45%和54%。固定化脂肪酶MPCB-DA-Lipase表现出增强的热稳定性和耐碱性。经过10次循环重复使用后,MPCB-DA-Lipase保留了56%的初始活性;在4或25℃下储存70天后,仍具有超过85%的相对活性。将MPCB-DA-Lipase应用于催化樟树籽仁油与紫苏籽油的酯交换反应中,最高的酯交换效率为46%,所产生的结构脂质属于二中链-单不饱和长链脂肪酸甘油酯（MUM）和单中链-二不饱和中链脂肪酸甘油酯（UMU）,是一种新型的结构脂中长链甘油三酯。（4）深入探究脂肪酶Lip与底物之间结合和水解的反应机制,并为分子改造脂肪酶Lip做铺垫,采用分子对接方法探究脂肪酶Lip和配体间相互作用的途径,并推测脂肪酶Lip的催化作用机理。两种代表性酯类底物p-NPP和Tributyrin都可以与脂肪酶Lip的催化活性中心-催化三联体（由Ser77、Asp129、His152组成）形成稳定的催化构象。根据分子对接结果,对脂肪

关键词：地衣芽孢杆菌脂肪酶原核表达固定化定点突变

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一种表达脂肪酶的山羊葡萄球菌株NCU S6

一种表达脂肪酶的山羊葡萄球菌株NCU S6

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作者：曾哲灵赵钧馨曾诚罗丹余平万冬满 330031 江西省南昌市红谷滩新区学府大道999号

一种表达脂肪酶的山羊葡萄球菌株NCU S6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19356。本发明提供的山羊葡萄球菌株NCU S6能耐中碳链脂肪酸且高效表达脂肪酶，其发酵液的脂肪酶酶活高达4927.3U/mL，... 详细信息

标准号: CN112342152B

一种表达脂肪酶的山羊葡萄球菌株NCU S6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19356。本发明提供的山羊葡萄球菌株NCU S6能耐中碳链脂肪酸且高效表达脂肪酶，其发酵液的脂肪酶酶活高达4927.3U/mL，最适作用pH均为8.0，最适作用温度均为37℃。山羊葡萄球菌株NCU S6表达的脂肪酶能显著提高生物酶法转化樟树籽仁油制备中碳链结构油脂的得率，在生物酶法制备中碳链结构油脂等领域有较强的应用价值，有利于促进我国来源丰富的樟树资源的高值化开发利用。

关键词：脂肪酶葡萄球菌株保藏山羊碳链结构中国微生物菌种中碳链脂肪酸微生物中心樟树籽仁油脂肪酶酶活高效表达生物酶法发酵液生物酶得率樟树制备转化应用开发管理

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一株表达脂肪酶的地衣芽孢杆菌及其发酵产酶方法

一株表达脂肪酶的地衣芽孢杆菌及其发酵产酶方法

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作者：曾哲灵赵钧馨曾诚马毛毛余平万冬满 330031 江西省南昌市红谷滩区学府大道999号

一株表达脂肪酶的地衣芽孢杆菌及其发酵产酶方法，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.20140。地衣芽孢杆菌发酵生产脂肪酶的发酵液酶活高达到32000U/mL；所产脂肪酶最适作用温度范围为30℃‑40℃，最... 详细信息

标准号: CN112375699B

一株表达脂肪酶的地衣芽孢杆菌及其发酵产酶方法，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.20140。地衣芽孢杆菌发酵生产脂肪酶的发酵液酶活高达到32000U/mL；所产脂肪酶最适作用温度范围为30℃‑40℃，最适pH范围为8.5‑9.5，在4℃保温48h后相对酶活为60％，具有广泛的最适作用范围和显著的耐低温性和耐碱性，可应用于不同需求的工业生产中，显著地拓展了脂肪酶的工业应用范围，提高了脂肪酶的应用价值。

关键词：脂肪酶保藏地衣芽孢杆菌发酵生产脂肪酶中国微生物菌种发酵液酶活微生物中心发酵产酶工业应用耐低温性耐碱性最适pH 酶活保温应用拓展管理

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一种表达脂肪酶的山羊葡萄球菌株NCU S6

一种表达脂肪酶的山羊葡萄球菌株NCU S6

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作者：曾哲灵赵钧馨曾诚罗丹余平万冬满 330031 江西省南昌市红谷滩新区学府大道999号

标准号: CN112342152A

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一株表达脂肪酶的地衣芽孢杆菌及其发酵产酶方法

一株表达脂肪酶的地衣芽孢杆菌及其发酵产酶方法

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作者：曾哲灵赵钧馨曾诚马毛毛余平万冬满 330031 江西省南昌市红谷滩区学府大道999号

标准号: CN112375699A

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HPLC同时检测肉制品中9种亚硝胺

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食品科技 2018年第10期43卷 352-356页

作者：肖付刚赵钧馨孙军涛王德国巴红杰刘燕许昌学院食品与生物工程学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室许昌461000 河南省产品质量监督检验院郑州450047

建立同时检测肉制品中9种亚硝胺(NDMA、NDEA、NDBA、NDPA、NMEA、NDPhA、NPIP、NPYR、NMOR)的HPLC检测方法,考察不同型号的色谱柱对检测分离效果的影响。结果表明:在浓度(0.2～20)ng/mL范围内,9种亚硝胺标准曲线的相关系数R2均在0.9968... 详细信息

建立同时检测肉制品中9种亚硝胺(NDMA、NDEA、NDBA、NDPA、NMEA、NDPhA、NPIP、NPYR、NMOR)的HPLC检测方法,考察不同型号的色谱柱对检测分离效果的影响。结果表明:在浓度(0.2～20)ng/mL范围内,9种亚硝胺标准曲线的相关系数R2均在0.9968以上,方法相对标准偏差小于6%,检出限低于0.045 ng/mL。用此方法对市售28种肉制品进行筛查,其中19种样品检出亚硝胺,最高含量(NDMA)为1.77μg/kg。

关键词：火腿肠高效液相色谱亚硝胺

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HPLC法检测肉制品中2-氨基-3-甲基咪唑并[4,5-f]喹啉

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食品科技 2018年第9期43卷 333-336页

作者：肖付刚赵钧馨孙军涛王德国郭志慧刘燕许昌学院食品与生物工程学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室许昌461000 河南省产品质量监督检验院郑州450047

为了筛查市售高温肉制品中杂环胺的含量,建立了肉制品中2-氨基-3-甲基咪唑并[4,5-f]喹啉(2-amoin-3-methy benzimidazole and [4,5-f] quinoline,IQ)的高效液相色谱(HPLC)检测方法。IQ在(0.0004~0.25)mg/mL范围内,标准曲线线性良好,回归方程为y=95723x—573.24,相关系数(R^2)为0.9962,该方法的检出限为0.00015mg/mL。用此方法对市售28种肉制品进行了检测,其中5种检出IQ,最高含量为48.017μg/kg。

关键词： 2-氨基-3-甲基咪唑并[4,5-f]喹啉火腿肠高效液相色谱

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一种坐卧防跌防拉约束装备

一种坐卧防跌防拉约束装备

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作者：戚吉妮邹珍友张菊芳周心怡郦琳陆馨雨李晓琴张绮哲吕超杰刘吉丹赵钧周圳滔周玥徐伟力蒋宙男 310000 浙江省杭州市上城区浣纱路261号

本实用新型公开了一种坐卧防跌防拉约束装备，包括手部约束带和躯干约束带，所述躯干约束带的两侧设有连接结构，所述躯干约束带两侧通过连接结构与病床相连。针对现有的约束装置防护效果差，存在安全隐患的技术问题，本实用新型提供了... 详细信息

标准号: CN216628855U

本实用新型公开了一种坐卧防跌防拉约束装备，包括手部约束带和躯干约束带，所述躯干约束带的两侧设有连接结构，所述躯干约束带两侧通过连接结构与病床相连。针对现有的约束装置防护效果差，存在安全隐患的技术问题，本实用新型提供了一种坐卧防跌防拉约束装备，它能约束患者的手部和躯干，同时在保证防坠床的前提下允许患者在病床上能自行翻身，增加了患者的舒适度。

关键词：躯干约束带本实用新型连接结构防跌防拉手部坐卧病床躯干安全隐患防护效果约束装置舒适度约束带防坠翻身保证

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