检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：阮志燕广州中医药大学

学位级别：博士

目的肿瘤尤其是恶性肿瘤的发病机制一直是肿瘤研究中的重点,肿瘤“免疫逃逸”机制则是研究中的重中之重。尽管我们并不清楚确切的肿瘤“免疫逃逸”机制,但是普遍认为调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)与之关系密切。中医药在临床... 详细信息

目的肿瘤尤其是恶性肿瘤的发病机制一直是肿瘤研究中的重点,肿瘤“免疫逃逸”机制则是研究中的重中之重。尽管我们并不清楚确切的肿瘤“免疫逃逸”机制,但是普遍认为调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)与之关系密切。中医药在临床治疗肿瘤的应用中一直有着鲜明的特色和优势,“扶正祛邪”的治疗思想在提高患者生存质量方面明显优于“好坏通杀”的传统放化疗的治疗方式。大黄是中医临床应用较广泛的一种中药,大黄素是其最重要的有效成分,有抗感染、消炎、抗肿瘤等多种免疫药理作用,但是其作用机理在不同疾病不尽相同。不难发现,大黄素治疗的这些疾病都有一个共性：存在炎症,在炎症局部出现特异性免疫细胞的聚集。提示我们,大黄素的治疗策略可能是抗炎。我们推测其抗炎的途径是抑制免疫细胞向局部聚集。例如Tregs在局部失衡的恶性肿瘤,大黄素可能抑制Tregs向肿瘤局部的迁徙。现有研究发现,大黄素具有改变Tregs在局部比例的药理作用,但是其机制阐释不清。本研究以CT26. WT(简称CT26)结肠癌细胞系为研究对象,体内体外观察CT26细胞对CD4+CD25+Tregs迁徙、趋化因子CCL17和CCL22分泌、趋化因子受体CCR4表达的影响,以及大黄素对CT26结肠癌细胞诱导的CD4+CD25+Tregs迁徙的干预作用和机制。研究方法和结果 1.体外实验研究大黄素对CT26结肠癌细胞的抑制作用我们从以下三个方面,观察不同浓度的大黄素对小鼠结肠癌细胞系CT26的抑制作用。①划痕实验检测大黄素对CT26细胞迁移的影响,②Annexin V/PI试剂盒检测大黄素对CT26细胞凋亡的影响,③流式细胞术检测CT26细胞Foxp3表达,④统计学方法分析结果。研究结果显示大黄素显著抑制CT26结肠癌细胞的迁移,促进CT26细胞的凋亡,下调Foxp3在CT26细胞的表达,且这种抑制作用随浓度增加而加强。提示大黄素在体外高浓度条件下以促进结肠癌细胞CT26凋亡为主并抑制肿瘤细胞迁移,同时下调Foxp3在CT26细胞的表达,有影响调节性T细胞的可能。 2.体内实验观察大黄素的免疫药理作用我们主要从三个方面观察大黄素对CT26结肠癌小鼠体内的免疫药理作用： 2.1观察大黄素抑制结肠癌的作用通过建立小鼠CT26结肠癌实体瘤模型,进一步研究大黄素在体内的抑瘤效果。①建立小鼠结肠癌实体瘤模型：每只小鼠右前肢腋下接种2×106个CT26细胞,阴性对照组接种无菌生理盐水;②动物分组及给药：动物分为四组,阴性对照组、荷瘤模型组、大黄素治疗组和FTY720治疗组,依次每天给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液、大黄素(100mg/kg)、FTY720(3mg/kg)和0.5%羧甲基纤维素钠溶液,每天一次灌胃给药,连续14d,末次给药后第2天颈椎脱臼处死小鼠：③计算抑瘤率。研究结果显示建立小鼠结肠癌实体瘤模型成功率超过98%。荷瘤模型组肿瘤重量为(1.01±0.14)g,大黄素治疗组肿瘤重量为(0.26±0.08)g,FTY720治疗组肿瘤大小为(0.34±0.11)g,大黄素治疗组的抑瘤率为74%,FTY720治疗组的抑瘤率为66%,均超过30%,说明大黄素在小鼠模型中具有抑制实体瘤生长的作用(p<0.05)。 2.2观察大黄素对CT26结肠癌模型小鼠CD4+CD25+Tregs迁徙的影响 ①流式细胞术检测不同组别外周血、(肿瘤引流或相同位置)淋巴结及肿瘤局部CD4+CD25+Tregs的比例,②流式细胞术检测CCR4在Tregs的表达,③共聚焦荧光显微镜检测肿瘤组织中趋化因子CCL17和CCL22的表达。研究结果显示：①荷瘤模型组在外周血和淋巴结中的CD4+CD25+Tregs比例与阴性对照组存在显著差异,提示大黄素改变CD4+CD25+Tregs的迁移模式;大黄素治疗组和FTY720治疗组外周血、淋巴结尤其是肿瘤局部CD4+CD25+Tregs比例显著低于荷瘤模型组,提示大黄素和FTY720有减轻肿瘤局部免疫抑制的潜力。②大黄素和FTY720可以显著减少肿瘤局部CCR4-Tregs比例；③大黄素和FTY720显著减少肿瘤组织CCL17的表达。提示大黄素通过下调CCL17/CCR4的趋化作用影响CD4-CD25-Tregs的迁移。 2.3大黄素对结肠癌小鼠Tregs功能的影响 ①流式细胞术检测小鼠不同组织效应细胞CD8+CD3+田胞的比例,②ELISA检测小鼠血清细胞因子IFN-γ、TNT-β1、IL-10的水平,③流式细胞术检测小鼠不同组织T细胞的IFN-γ的分泌,④流式细胞术检测小鼠不同组织CD4+CD25+Tregs IL-1

关键词： CD4CD25调节性T细胞迁徙 CT26.WT结肠癌细胞大黄素

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实用医学概要 1版

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2018年

作者：阮志燕任宏

本书将人体解剖学、生理学、诊断学和临床常见病的诊疗内容按照药学相关类学生对基础医学和临床医学知识的需求重组在一起。首先介绍医学基础知识（包括解剖生理基础、细胞组织和诊断学基础），然后依次介绍各大系统的解剖、生理和相关... 详细信息

ISBN: (纸本)9787122311504

本书将人体解剖学、生理学、诊断学和临床常见病的诊疗内容按照药学相关类学生对基础医学和临床医学知识的需求重组在一起。首先介绍医学基础知识（包括解剖生理基础、细胞组织和诊断学基础），然后依次介绍各大系统的解剖、生理和相关疾病的知识概要，最后介绍常见肿瘤的诊疗?

关键词：临床医学

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日本血吸虫SLP和TCTP基因的克隆及功能的初步鉴定

日本血吸虫SLP和TCTP基因的克隆及功能的初步鉴定

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作者：阮志燕中山大学

学位级别：硕士

研究背景及目的运用生物信息学和分子生物学技术,开展日本血吸虫SLP和TCTP基因克隆及功能鉴定,对于深入了解SjSLP和SjTCTP的生物学特性及其疫苗或新药开发价值有重要意义.研究内容从日本血吸虫cDNA文库中扩增出SLP和TCTP的完整编码区.... 详细信息

研究背景及目的运用生物信息学和分子生物学技术,开展日本血吸虫SLP和TCTP基因克隆及功能鉴定,对于深入了解SjSLP和SjTCTP的生物学特性及其疫苗或新药开发价值有重要意义.研究内容从日本血吸虫cDNA文库中扩增出SLP和TCTP的完整编码区.将其分别克隆入相应的原核和真核表达载体,运用DNA免疫技术,研究SjSLP基因的抗炎作用和SjTCTP基因抗攻击感染的保护性效果以及CpG作为DNA免疫佐剂的效果.研究方法1.根据已知的SjSLP和SjTCTP基因的cDNA序列设计特异性引物,从SjcDNA文库中扩增出SLP和TCTP基因的cDNA全长编码区.2.将两基因的cDNA编码区分别克隆入pET-30a、pcDNA3.0和pEGFP-N1载体,构建pET-SLP和pET-TCTP原核重组质粒,pcDNA3.0-TCTP、pEGFP-SLP和pEGFP-TCTP真核表达质粒.3.将pEGFP-SLP和pEGFP-TCTP真核表达质粒转染Chang Liver细胞,荧光显微镜下观察表达情况.4.以小鼠为动物模型,进行DNA免疫研究,研究分两部分实施:***基因的抗炎症实验,使用LPS进行真皮内注射,造成皮肤炎症的动物模型.实验分三组,***-SLP+LPS组,***-N1+LPS空质粒阳性对照组,***阴性对照组.a组和b组分别在注射LPS的-72 h、-48 h、-24h,0h、24h、36h和72h注射质粒,在注射完毕的36 h后断颈法处死小鼠,取小鼠腹部皮肤lcm×lcm大小,分两部分,一份石蜡切片,镜下观察炎症情况;一份提取总mRNA,反转录观察SLP的表达情况.***基因DNA免疫保护性实验,以CpG作为免疫佐剂,两次免疫后2W进行攻击感染,感染后45d剖杀小鼠,检获成虫和虫卵,小鼠肝脏送病理切片观察虫卵肉芽肿.在免疫前,感染前和剖杀前取血清.检测免疫小鼠血清中IFN-γ水平,初步观察DNA免疫的免疫应答类型;以减虫率和减卵率评价TCTP基因DNA免疫的保护性效果以及CpG作为免疫佐剂的效果.结论运用核酸免疫技术,观察了小鼠模型中SjSLP的抗皮肤炎症的效果和SjTCTP基因DNA免疫引起的免疫应答类型以及抗攻击感染的保护性效果.发现:1)SjSLP有减轻皮肤炎症的作用,具有潜在的抗炎药物开发价值.2)SjTCTP DNA免疫能诱导较明显的保护性Thl免疫应答,并具有一定的减虫和减卵效果,提示SjTCTP具有潜在的疫苗研究开发价值.3)CpG基序可以有效的诱导保护性Thl免疫应答,增强DNA免疫的效果,是一种有效的DNA免疫佐剂.

关键词：日本血吸虫(中国大陆株) Stathmin-like Protein(SLP) 肿瘤翻译控制蛋白(TCTP) 基因 CpG基序 DNA免疫

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大黄素抑制核转录因子-κB在结肠癌细胞的活化

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中国实验方剂学杂志 2014年第14期20卷 155-159页

作者：阮志燕邓向亮周联蔡琳广东食品药品职业学院药学院广州510520 广州中医药大学广州510405

目的:利用小鼠脾淋巴细胞和结肠癌***细胞混合培养体系,研究大黄素对肿瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)途径的影响,探讨其抗肿瘤的可能机制。方法:将密度为1×105/mL的CT26细胞和脾淋巴细胞(SLs)分别按1∶1,1∶2,1∶4比例混合培养24 ... 详细信息

目的:利用小鼠脾淋巴细胞和结肠癌***细胞混合培养体系,研究大黄素对肿瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)途径的影响,探讨其抗肿瘤的可能机制。方法:将密度为1×105/mL的CT26细胞和脾淋巴细胞(SLs)分别按1∶1,1∶2,1∶4比例混合培养24 h后加入大黄素再孵育4 h,大黄素设置5个浓度组:0,10,20,40,80 mmol·L-1。分别检测各组C-C型趋化因子(CCL17)在CT26细胞的表达,C-C型趋化因子受体4(CCR4)在SLs细胞表面的表达比例及CCR4 mRNA表达水平,CT26细胞NF-κB的活化。结果:与单纯CT26组和SLs组比,混合培养各比例组均检测到CCL17(P<0.01);大黄素显著抑制了混合培养组CCL17在CT26细胞的分泌:在1∶1比例组从308 ng·L-1降至124 ng·L-1。单纯SLs组CCR4的表达变化不明显;混合培养组的CD4+CD25+Tregs表达CCR4的细胞比例随着大黄素浓度的增加明显下降(P<0.05),1∶4比例组从44.58%下降到32.86%;相似的CCR4的mRNA表达随大黄素浓度增加出现明显的下调(P<0.05);大黄素显著抑制CT26细胞NF-κB的活化(P<0.05),p65的平均荧光值从358(0 mmol·L-1)降至76(80 mmol·L-1)。结论:大黄素抑制CT26细胞CCL17的分泌,下调CCR4在Treg细胞表面的表达比例和mRNA水平的表达。大黄素抑制结肠癌的机制可能和NF-κB的活化相关。

关键词：核转录因子-κB 大黄素结肠癌细胞

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热带病研究新进展

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热带医学杂志 2002年第4期2卷 396-397页

作者：阮志燕中山大学中山医学院寄生虫学教研室广州510089

一种新型抗疟原虫药物已经被报道,代号G25的这种药物可以阻止红内期的疟原虫构建它的细胞壁.在体外和猴(Owl monkeys)体内的实验显示它和奎宁相比有显著的活性和相对低的毒性[1].

关键词：热带病研究进展

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大黄素影响调节性T细胞迁徙与抑制小鼠结肠癌发展相关性研究

引用

广州中医药大学学报 2013年第4期30卷 529-532,604页

作者：阮志燕王培训邓向亮王丽虹周联广州中医药大学临床药理研究所广东广州510405 广东食品药品职业学院药学院广东广州510520

【目的】探讨大黄素抑制小鼠结肠癌发展与影响调节性T细胞(Tregs)迁徙的相关性。【方法】选用BALB/c小鼠随机分为阴性对照组、模型组和大黄素组(剂量为100 ***-1.d-1),后2组采用右前肢腋窝皮下接种CT26细胞制备结肠癌模型;采用流式细胞... 详细信息

【目的】探讨大黄素抑制小鼠结肠癌发展与影响调节性T细胞(Tregs)迁徙的相关性。【方法】选用BALB/c小鼠随机分为阴性对照组、模型组和大黄素组(剂量为100 ***-1.d-1),后2组采用右前肢腋窝皮下接种CT26细胞制备结肠癌模型;采用流式细胞仪检测Tregs在结肠癌小鼠外周血、引流淋巴结和肿瘤局部的相对比例,以及趋化因子受体CCR4在Tregs的表达量差异,并研究其与肿瘤大小的相关性。【结果】大黄素组的肿瘤质量显著低于模型组(P<0.05),抑瘤率达74%;大黄素组Tregs在肿瘤局部的比例及其CCR4+Tregs的比例显著低于荷瘤模型组(均P<0.01)。【结论】大黄素抑制小鼠结肠癌的发展与其影响Tregs的迁徙相关,其机制与大黄素降低了CCR4在Tregs上的表达有关。

关键词：大黄素药理学结肠癌中药疗法调节性T细胞疾病模型,动物小鼠

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HMGB1RNAi抑制TGF-β1诱导的A549细胞系EMT

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基础医学与临床 2015年第2期35卷 183-186页

作者：蔡琳阮志燕徐军广东食品药品职业学院国际学院健康管理教研室广东广州510520 呼吸疾病国家重点实验室广州医学院第一附属医院呼吸内科广州呼吸疾病研究所广东广州510120

目的探讨HMGB1在肺泡上皮细胞间质转分化中的作用。方法设计并合成针对HMGB1的小干扰RNA(siRNA),体外培养Ⅱ型肺泡上皮细胞系细胞-A549细胞,将细胞分为4组:1)对照组,2)TGF-β1刺激组,3)RNAi组(TGF-β1+HMGB1 siRNA),4)RNAi阴性对照组(T... 详细信息

目的探讨HMGB1在肺泡上皮细胞间质转分化中的作用。方法设计并合成针对HMGB1的小干扰RNA(siRNA),体外培养Ⅱ型肺泡上皮细胞系细胞-A549细胞,将细胞分为4组:1)对照组,2)TGF-β1刺激组,3)RNAi组(TGF-β1+HMGB1 siRNA),4)RNAi阴性对照组(TGF-β1+siRNA阴性对照);倒置相差显微镜观察细胞形态学;RT-PCR法检测HMGB1和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达;Western blot法检测α-SMA和HMGB1蛋白表达。结果 TGF-β1刺激组细胞HMGB1和α-SMA的mRNA和蛋白表达均较对照组显著增加(P<0.01);RNAi组HMGB1、α-SMA mRNA和蛋白表达均较正常对照组显著下降(P<0.01)。结论 HMGB1可能参与了TGFβ1诱导的肺泡上皮细胞转分化。

关键词： RNA干扰高迁移率族蛋白B1 α平滑肌肌动蛋白上皮间质转分化

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日本血吸虫肺期童虫收集方法的实验研究

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中国人兽共患病杂志 2005年第2期21卷 173-175页

作者：孟玮吴忠道余新炳彭寨玉阮志燕袁竹青山东滨洲医学院免疫微生物教研室滨州256603 中山大学中山医学院病原生物学部

目的建立一种收集纯净肺期童虫的方法。方法用日本血吸虫尾蚴感染昆明小鼠,分别于感染后第1、2、3、4、5、6、7、10、12、14、21天解剖,从皮肤、肺脏、肠系膜静脉及肝门静脉处收集童虫。结果肺期童虫出现的高峰期为感染后第3天,获得最... 详细信息

目的建立一种收集纯净肺期童虫的方法。方法用日本血吸虫尾蚴感染昆明小鼠,分别于感染后第1、2、3、4、5、6、7、10、12、14、21天解剖,从皮肤、肺脏、肠系膜静脉及肝门静脉处收集童虫。结果肺期童虫出现的高峰期为感染后第3天,获得最佳收获肺期童虫的时间,建立了回收大量纯净童虫的方法。

关键词：日本血吸虫肺期血吸虫童虫

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大黄[庶虫]虫丸抑制趋化因子配体17表达对CT26小鼠结肠癌的影响

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中药新药与临床药理 2021年第1期32卷 44-49页

作者：阮志燕任宏徐哲赖满香苏新国广东食品药品职业学院药学院广东广州510520

目的观察大黄[庶虫]虫丸对趋化因子配体17(CCL17)在CT26结肠癌小鼠模型中表达的影响,研究其可能的抗肿瘤作用机制。方法复制CT26结肠癌小鼠模型,将模型小鼠随机分为模型组,大黄[庶虫]虫丸高、中、低剂量组(48、24、12 g·kg^-1·... 详细信息

目的观察大黄[庶虫]虫丸对趋化因子配体17(CCL17)在CT26结肠癌小鼠模型中表达的影响,研究其可能的抗肿瘤作用机制。方法复制CT26结肠癌小鼠模型,将模型小鼠随机分为模型组,大黄[庶虫]虫丸高、中、低剂量组(48、24、12 g·kg^-1·d-1),另设正常组。计算各组小鼠结肠癌的抑瘤率;用流式细胞术和免疫荧光法分别检测外周血、肿瘤归巢淋巴结和肿瘤组织细胞中调节性T细胞(Tregs)百分比,肿瘤组织中CCL17的表达,趋化因子受体4(CCR4)在外周血和肿瘤组织细胞表面的表达百分比和肿瘤组织细胞核转录因子κB(NF-κB)p65的表达。结果大黄[庶虫]虫丸能明显抑制小鼠结肠癌的生长,且呈剂量依赖性;大黄[庶虫]虫丸各剂量组肿瘤组织中Tregs明显减少(P<0.05),肿瘤组织中CCL17的荧光强度明显下降(P<0.05);模型组的CCR4+Tregs百分比和CCL17荧光强度最高,大黄[庶虫]虫丸各剂量组随着用药浓度增加,CCR4+Tregs百分比和CCL17荧光强度均表现为依次降低(P<0.05);大黄[庶虫]虫丸能显著抑制结肠癌细胞NF-κB的活化(P<0.05),NF-κB p65的荧光比例显著降低。结论大黄[庶虫]虫丸可通过减少肿瘤组织中Tregs的聚集,降低肿瘤组织中CCL17的表达,下调CCR4在Treg细胞表面的表达比率,降低结肠癌细胞NF-κB p65在细胞内的表达,从而抑制CT26小鼠结肠癌细胞的生长。

关键词：大黄[庶虫]虫丸趋化因子配体17 CT26小鼠模型结肠癌

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血吸虫疫苗研制的进展和前景

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中国热带医学 2002年第1期2卷 64-65页

作者：阮志燕吴忠道中山大学医学院寄生虫学教研室，广州市510089

发展血吸虫病疫苗是血吸虫病防治的实际需要。本文回顾了近10多年来有关血吸虫病疫苗研究进展,并对疫苗发展的前景进行了讨论。

关键词：血吸虫病疫苗化学治疗防治免疫接种

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