检索结果-内蒙古大学图书馆

食品工业 2020年第11期41卷 29-33页

作者：王萍陈丽艳孙银玲任善崇曹阳王伟明黑龙江省中医药科学院哈尔滨150036

通过以蛋白酶和β-葡萄糖苷酶活性的考察指标,对淡豆豉发酵工艺优化,为提高品质和深入研究及产业化提供依据。采用福林酚法测定蛋白酶,以对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷为底物的比色法,测定β-葡萄糖苷酶的活性,评价分别以黄豆或黑豆为基质,... 详细信息

通过以蛋白酶和β-葡萄糖苷酶活性的考察指标,对淡豆豉发酵工艺优化,为提高品质和深入研究及产业化提供依据。采用福林酚法测定蛋白酶,以对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷为底物的比色法,测定β-葡萄糖苷酶的活性,评价分别以黄豆或黑豆为基质,用伞枝梨头霉、米曲霉和枯草芽孢杆菌发酵的淡豆豉品质。结果表明,以枯草芽孢杆菌为发酵菌种,以黑豆为基质制备的淡豆豉,最佳发酵条件为,先经37℃发酵7 d,经42℃发酵6 d,蛋白酶活性较高,为1590.24 IU/g,与黄豆基质的差异不显著。黑豆为基质,以伞枝梨头霉和米曲霉作为联合发酵菌,最佳发酵条件为,先经28℃发酵7 d,经42℃发酵3 d,β-葡萄糖苷酶活性达到47.15 IU/g,优于黄豆基质。发酵菌种、基质和条件不同,对淡豆豉的品质影响较大。多菌种联合发酵对品质提高具有实际意义。

关键词：单菌种双菌种淡豆豉蛋白酶活性 β-葡萄糖苷酶活性

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一种基于刃天青还原的荧光方法对β-葡萄糖苷酶活性的检测

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分析测试学报 2019年第3期38卷 360-363页

作者：程鑫张珩马济美华中农业大学理学院湖北武汉430070

建立了一种简单的荧光分析方法实现了对β-葡萄糖苷酶的定量分析检测。其原理是底物2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)在β-葡萄糖苷酶的水解作用下生成抗坏血酸,后者将刃天青还原生成具有强烈荧光的试卤灵,通过溶液荧光强度的变... 详细信息

建立了一种简单的荧光分析方法实现了对β-葡萄糖苷酶的定量分析检测。其原理是底物2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)在β-葡萄糖苷酶的水解作用下生成抗坏血酸,后者将刃天青还原生成具有强烈荧光的试卤灵,通过溶液荧光强度的变化对β-葡萄糖苷酶活性进行检测。结果发现,抗坏血酸浓度在3～400μmol/L范围内与反应体系在585 nm处的荧光强度呈线性关系,相关系数r^2=0.981。并基于此实现了对β-葡萄糖苷酶活性的定量检测:β-葡萄糖苷酶的浓度在1～30 U/L范围内与溶液在585 nm处的荧光强度呈良好的线性关系,相关系数r^2=0.995,检出限为1.0 U/L。该方法操作简单,反应灵巧,检测范围较宽,可实现对β-葡萄糖苷酶活性的定量分析检测。

关键词： β-葡萄糖苷酶活性刃天青试卤灵抗坏血酸荧光检测

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基于酶触发的点击化学反应测定β-葡萄糖苷酶活性

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有机化学 2018年第10期38卷 2775-2779页

作者：王龙文马济美程鑫李子龙孙林皓曾贞江洪华中农业大学理学院武汉430070

建立了一种新的β-葡萄糖苷酶活性定量检测的方法,其原理是通过β-葡萄糖苷酶对2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸的特异性水解,释放出抗坏血酸来还原Cu(II),原位生成的Cu(I)催化荧光较弱的香豆素和苄基叠氮进行环加成点击反应,产生高荧光... 详细信息

建立了一种新的β-葡萄糖苷酶活性定量检测的方法,其原理是通过β-葡萄糖苷酶对2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸的特异性水解,释放出抗坏血酸来还原Cu(II),原位生成的Cu(I)催化荧光较弱的香豆素和苄基叠氮进行环加成点击反应,产生高荧光强度的三氮唑,从而利用荧光光谱检测体系荧光强度的变化,反映出β-葡萄糖苷酶的活性.实验结果显示,在1～40U/L范围内,荧光强度增强程度与β-葡萄糖苷酶活性呈线性关系,可实现定量检测,其最低检测限为0.456 U/L.

关键词： β-葡萄糖苷酶活性测定 2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸点击化学

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贵定鸟王种SNP分析及β-葡萄糖苷酶关联候选基因的验证

贵定鸟王种SNP分析及β-葡萄糖苷酶关联候选基因的验证

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作者：杨慧贵州大学

学位级别：硕士

β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase,EC3.2.1.21)是一种重要的芳香物质合成酶,可以有效地催化糖苷类香气前体的转化,从而产生芳香物质,如芳樟醇、香叶醇等挥发性有机物;这些香气物质不仅影响茶叶的香气品质,而且能有效地抵抗食草性昆虫和细... 详细信息

β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase,EC3.2.1.21)是一种重要的芳香物质合成酶,可以有效地催化糖苷类香气前体的转化,从而产生芳香物质,如芳樟醇、香叶醇等挥发性有机物;这些香气物质不仅影响茶叶的香气品质,而且能有效地抵抗食草性昆虫和细菌等微生物对茶树造成的伤害,也能调节共生菌提高茶树抵御多种外部环境的胁迫。因此挖掘β-葡萄糖苷酶活性关联候选基因,对培育具有高β-葡萄糖苷酶活性茶树品种,促进茶叶品质的形成和增强茶树对环境变化的抗性和适应能力,在理论上和实践上都有重大意义。本研究采用特异性位点扩增片段测序(Specific-Locus Amplified Fragment Sequencing,SLAF-seq)技术对收集的贵定鸟王种95个单株进行简化基因组测序,获得高质量单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP),并对其进行分析。同时测定β-葡萄糖苷酶、过氧化物酶和多酚氧化酶三种内源酶酶活性,与获得的SNP进行全基因组关联分析(Genome-Wide Association Study,GWAS),获得β-葡萄糖苷酶活性、过氧化物酶活性和多酚氧化酶活性关联的候选基因。并在低、中、高三个层次酶活性代表的单株中采用RT-q PCR技术对预测与β-葡萄糖苷酶活性关联候选基因进行定量分析初步验证。得到如下结果:(1)采用SLAF-seq技术对贵定鸟王种95个单株进行简化基因组测序分析,共得到555.17 Mb Reads。通过生物信息学分析,获得1,801,337个SLAF标签,其中多态性的SLAF标签共有64,530个,共得到7,572,089个群体SNP。对得到的SNP进行信息注释,其中SNP变异类型最多的是A/G和C/T,发生转换变异比颠换变异多,表明碱基转换是贵定鸟王种单株中主要的SNP变异类型。基于SNP对贵定鸟王种95个单株进行遗传进化分析,结果表明贵定鸟王种95个单株遗传差异比较小,来源于同一祖先,没有形成明显的种群分化,遗传结构分析的结果与系统进化分析和主成分分析的结果高度吻合。(2)对贵定鸟王种95个单株的β-葡萄糖苷酶、过氧化物酶和多酚氧化酶这三种内源酶活性进行测定并分析,表明同一群体在相同的环境下均表现出丰富的变异,但三个酶活性较高的材料占少数。酶活性不仅受环境因素影响,还受基因型控制。不同叶片大小的三种酶活变异存在一定差异,小叶的β-葡萄糖苷酶活性变幅、平均值、标准差和变异系数均比中叶和大叶的高,而中叶的过氧化物酶活性和多酚氧化酶活性变幅、标准差和变异系数均比小叶和大叶的高。同时筛选出部分酶活性较高的单株材料,可用于后期优质品种的选育。基于EMMAX模型、FASTLMM模型、LM模型和LMM模型四个不同模型对三种酶活性进行GWAS分析,不同模型检测到的位点数目均有所差异,且大部分的显著位点在各模型中均被检测到。通过舒茶早茶树基因组数据分析了关联位点上下游的基因注释、功能预测,同时结合关联区段的连锁不平衡分析,进行了相关候选基因的预测,预测到与β-葡萄糖苷酶活性关联基因有7个,与过氧化物酶活性关联基因有5个,多酚氧化酶活性关联基因有6个。(3)以低、中、高三个酶活性层次的代表性贵定鸟王种12个单株为材料,用RT-q PCR技术对预测与β-葡萄糖苷酶活性关联7个候选基因进行定量分析初步验证。预测到候选基因分别为CSS0028616.1、CSS0024936.1、CSS0030286.1、CSS0012859.1、CSS0022910.1、CSS0005683.1、CSS0026950.1,分析其基因表达量与酶活性的关联。结果发现,关联的7个候选基因表达量与β-葡萄糖苷酶活性变化之间没有呈明显的趋势,各单株表达量各有差异,缺乏明显的变化趋势,其中CSS0012859.1、CSS0022910.1、CSS0005683.1和CSS0026950.1的基因表达量可能是影响编号为C4的NW62单株酶活性较高的关键原因之一。从基因到酶活性之间有着非常复杂的过程,包括基因的翻译、蛋白质的修饰以及酶的活性表现等,虽然这些关联基因的表达量与β-葡萄糖苷酶活性的高低变化没有明显的相关性,但这些基因表达量是影响β-葡萄糖苷酶活性其中的原因之一。

关键词：贵定鸟王种 SNP分析 β-葡萄糖苷酶活性 GWAS分析

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黑豆脂氧合酶的制备及其酶学活性的鉴定

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食品科学 2016年第9期37卷 155-159页

作者：李茹崔晓东李玉英李晨王转花山西大学生命科学学院山西太原030006 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西太原030006

从黑豆种子中分离纯化1种黑豆脂氧合酶——bs LOX,对其酶学活性及降解花色苷等性质进行初步研究。采用缓冲液抽提、硫酸铵沉淀、透析、阳离子交换层析及凝胶层析等方法纯化出具有β-葡萄糖苷酶活性的bs LOX;分别以亚油酸钠和对硝基苯基-... 详细信息

从黑豆种子中分离纯化1种黑豆脂氧合酶——bs LOX,对其酶学活性及降解花色苷等性质进行初步研究。采用缓冲液抽提、硫酸铵沉淀、透析、阳离子交换层析及凝胶层析等方法纯化出具有β-葡萄糖苷酶活性的bs LOX;分别以亚油酸钠和对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p-nitrophenylβ-D-glucopyranoside,p NPG)为反应底物鉴定bs LOX的脂氧合酶活性和β-葡萄糖苷酶活性。从黑豆种子中纯化获得的bs LOX在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)图谱显示单一条带,分子质量约为95 k D。酶活性分析表明,纯化的bs LOX以亚油酸钠为底物时,酶活力为13 U/m L;当以p NPG为底物在405 nm波长处检测到了对硝基苯酚的生成,从而推测bs LOX具有β-葡萄糖苷酶活性。高效液相色谱实验结果表明bs LOX可以降解花色苷(矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷)为花色素(矢车菊素、矮牵牛素)。由于降解作用不完全,继而发现花色素能抑制bs LOX的酶活性。bs LOX是黑豆中的一种兼具β-葡萄糖苷酶功能的蛋白质,而花色素可能是天然的bs LOX抑制剂。

关键词：黑豆脂氧合酶 β-葡萄糖苷酶活性花色苷花色素

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黑豆脂氧合酶的制备及其酶学性质的鉴定

黑豆脂氧合酶的制备及其酶学性质的鉴定

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作者：李茹山西大学

学位级别：硕士

黑豆具有乌发、补肾、解毒、延年益寿等功效。现代中医学也表明黑豆可乌发、活血解毒、明目、软化血管、治疗不孕等。从营养学角度看,黑豆富含蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等多种营养成分,同时又具有多种生物活性物质,如异黄酮,皂苷... 详细信息

黑豆具有乌发、补肾、解毒、延年益寿等功效。现代中医学也表明黑豆可乌发、活血解毒、明目、软化血管、治疗不孕等。从营养学角度看,黑豆富含蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等多种营养成分,同时又具有多种生物活性物质,如异黄酮,皂苷,花色苷,花色素等。本研究以黑豆种子为原材料,分离纯化得到黑豆脂氧合酶(black soybean lipoxygenase,bsLOX),同时发现bsLOX还具有β-葡萄糖苷酶活性,可以将黑豆种皮中的花色苷水解为等分子花色素和葡萄糖,进而,水解的花色素可以抑制脂氧合酶及糖苷酶活性,这为深入研究脂氧合酶的生物学功能及寻找天然的脂氧合酶抑制剂提供了理论基础。黑豆脂氧合酶的纯化采用缓冲液浸提、硫酸铵沉淀、透析、阳离子交换层析及凝胶层析等方法进行;纯化的蛋白分别以亚油酸钠和对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(β-Nitrophenylβ-D-glucopyranoside,pNPG)为反应底物鉴定其脂氧合酶活性和β-葡萄糖苷酶活性;荧光光谱分析了三种花色素(矢车菊素、矮牵牛素和飞燕草素)对bsLOX结构和酶活性的影响;高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)分析了bsLOX对花色苷(矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷、飞燕草素葡萄糖苷)的水解作用;花色素对bsLOX的β-葡萄糖苷酶活性的影响。实验结果表明,采用上述方法分离纯化获得了一种兼有β-葡萄糖苷酶活性的脂氧合酶(bsLOX)。纯化的bsLOX在十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)图谱显示单一条带,根据SDS-PAGE计算其分子质量约为95kDa。酶活性分析表明,纯化的bsLOX以亚油酸钠为底物时,酶活力为13 U;当以pNPG为底物在405 nm波长处检测到了对硝基苯酚的生成,从而推测bsLOX具有β-葡萄糖苷酶活性;荧光分析显示花色素(矢车菊素、矮牵牛素和飞燕草素)与bsLOX能够相互结合;高效液相色谱实验结果表明bsLOX可以降解花色苷(矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷)为花色素(矢车菊素、矮牵牛素),由于降解作用不完全,继而发现花色素能抑制bsLOX的酶活性。综上所述,我们提出,bsLOX是黑豆中的一种兼具β-葡萄糖苷酶活性的蛋白质,而花色素可能是天然的bsLOX抑制剂。

关键词：黑豆脂氧合酶 β-葡萄糖苷酶活性花色苷花色素

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库尔勒香梨果实细胞壁和水解酶活性变化

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中国果业信息 2016年第2期33卷 55-55页

作者：高敏

据《果树学报》2015年第32期《“库尔勒香梨”果实发育中细胞壁组分和水解酶活性的变化》（作者许娟）报道，为揭示“库尔勒香梨”果实发育期质地变化机理，定期检测果实发育期细胞壁含量、细胞壁组成物质含量、果胶酶、纤维素酶和β-... 详细信息

据《果树学报》2015年第32期《“库尔勒香梨”果实发育中细胞壁组分和水解酶活性的变化》（作者许娟）报道，为揭示“库尔勒香梨”果实发育期质地变化机理，定期检测果实发育期细胞壁含量、细胞壁组成物质含量、果胶酶、纤维素酶和β-葡萄糖苷酶活性等指标。

关键词：细胞壁组分库尔勒香梨水解酶活性活性变化梨果实 β-葡萄糖苷酶活性果实发育期细胞壁组成

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人工合成异源六倍体小麦β-葡萄糖苷酶活性的变化

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安徽农业科学 2009年第34期37卷 17244-17245,17248页

作者：王霞庞劲松亓宝胡兰娟袁慧吉林农业科技学院生物工程系吉林吉林132101 东北师范大学生命科学学院表观遗传学实验室吉林长春130024

[目的]研究小麦多倍化初期β-葡萄糖苷酶活性的变化。[方法]以生长17d的人工合成异源六倍体小麦(第五代)及其父本粗山羊草、母本硬粒小麦的叶片为材料,采用pNPG法测定β-葡萄糖苷酶的活性,采用分光光度法测定可溶性蛋白含量,进而研究了... 详细信息

[目的]研究小麦多倍化初期β-葡萄糖苷酶活性的变化。[方法]以生长17d的人工合成异源六倍体小麦(第五代)及其父本粗山羊草、母本硬粒小麦的叶片为材料,采用pNPG法测定β-葡萄糖苷酶的活性,采用分光光度法测定可溶性蛋白含量,进而研究了六倍体小麦多倍化初期β-葡萄糖苷酶活性的变化。[结果]二倍体父本TQ27中β-葡萄糖苷酶的比活力略高于四倍体母本TTR04,但差异不显著。人工合成六倍体小麦AT5中β-葡萄糖苷酶的比活力最低,与其父本TQ27、母本TTR04中β-葡萄糖苷酶比活力差异显著。TQ27、TTR04和AT5中β-葡萄糖苷酶的平均比活力分别为62.36、64.66和24.15U/(μg.h)。[结论]异源多倍化初期六倍体小麦的β-葡萄糖苷酶活性较其双亲显著降低。

关键词：人工合成六倍体小麦异源多倍化初期 β-葡萄糖苷酶活性

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亳菊花中β-葡萄糖苷酶的提取和酶学性质研究

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安徽中医药大学学报 2015年第5期34卷 83-86页

作者：左亚锋张伟吴德玲俞年军金传山刘劲松朱月健闫攀安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽省现代中药重点实验室安徽合肥230012 安徽省中医药科学院药物化学研究所安徽合肥230012 安徽济人药业有限公司安徽亳州236000

目的测定亳菊花中β-葡萄糖苷酶的活性，研究亳菊花中β葡萄糖苷酶的基本酶学性质。方法采用对硝基苯酚-β-D葡萄糖苷（4-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside，pNPG）法考察亳菊花中β-葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件及其酶学性质。结果当... 详细信息

目的测定亳菊花中β-葡萄糖苷酶的活性，研究亳菊花中β葡萄糖苷酶的基本酶学性质。方法采用对硝基苯酚-β-D葡萄糖苷（4-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside，pNPG）法考察亳菊花中β-葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件及其酶学性质。结果当0．2mL酶液、20mmol／L pNPG0．2mL、0．6mL pH值为4．0的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液在温度为50℃的水浴中反应45min时，酶活性最高。在此条件下对亳菊花的粗酶液中8I葡萄糖苷酶的基本酶学性质进行初步研究，结果表明该酶在30～50℃时，随着温度升高，酶活力有上升趋势，其热稳定性较好；pH值在3．2～5．4之间时，相对酶活性均在80％以上；酶在4℃下的保存稳定性较好。结论本研究所测定的亳菊花中β葡萄糖苷酶活性的最佳条件及酶学性质可为亳菊花炮制原理研究奠定基础。

关键词：亳菊花对硝基苯酚-β—D葡萄糖苷法 β-葡萄糖苷酶活性

来源：评论

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甘肃河西走廊葡萄酒产区高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株筛选

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食品科学 2014年第23期35卷 139-143页

作者：侯晓瑞王婧杨学山盛文军祝霞韩舜愈甘肃农业大学食品科学与工程学院甘肃兰州730070 甘肃省葡萄与葡萄酒工程学重点实验室甘肃兰州730070 甘肃省葡萄酒产业技术研发中心甘肃兰州730070 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

以甘肃河西走廊葡萄酒产区成熟葡萄浆果自然发酵过程中分离得到的115株酵母菌株为出发菌株,采用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷为底物的平板初筛,摇瓶复筛,对高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株进行WL营养培养基和赖氨酸培养基初步分类以及26S r ... 详细信息

以甘肃河西走廊葡萄酒产区成熟葡萄浆果自然发酵过程中分离得到的115株酵母菌株为出发菌株,采用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷为底物的平板初筛,摇瓶复筛,对高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株进行WL营养培养基和赖氨酸培养基初步分类以及26S r DNA D1/D2区序列分析。结果表明:6株酵母β-葡萄糖苷酶活性与商业酵母ICV-D254酶活性相似,酶活力可达(51.40±4.74)m U/m L,其中菌株QLFE、MQFEH-1、MQFSC-3、MQFEH-2和MQFSM-3为酿酒酵母属,菌株QLFE-4为梅奇酵母属,与分子鉴定结果一致。

关键词：酵母筛选 β-葡萄糖苷酶活性鉴定 26S rDNA D1/D2区序列分析

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