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南方医科大学学报 2010年第8期30卷 1813-1816页

作者：郑奇辉李国才方芳吴中海焦永钢南方医科大学生理教研室广东广州510515

目的探讨ⅱ组代谢性谷氨酸受体在延髓离体脑片基本节律性呼吸放电调节中的作用。方法以改良Kreb＇s液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠（03d）离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连的舌下神经根的呼吸节律性放电活动（RRDA）后,第一组分别... 详细信息

目的探讨ⅱ组代谢性谷氨酸受体在延髓离体脑片基本节律性呼吸放电调节中的作用。方法以改良Kreb＇s液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠（03d）离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连的舌下神经根的呼吸节律性放电活动（RRDA）后,第一组分别给予不同浓度ⅱ组代谢性谷氨酸受体的特异性激动剂2R,4R-4-aminopyrrolidine-2,4-dicarboxylate（APDC）（10、20、50μmol/L）,观察各浓度舌下神经根RRDA的变化;第二组给予特异性拮抗剂（2S）-α-ethylglutamicacid（EGLU）（300μmol/L）,观察舌下神经根RRDA的变化;第三组先给予50μmol/LAPDC持续灌流10min后再给予50μmol/LAPDC＋300μmol/LEGLU灌流10min,观察各时间点舌下神经根RRDA的变化。结果单独给予APDC后,呼吸周期和呼气时程延长、吸气时程缩短、吸气放电积分幅度降低,且有浓度依赖性;单独给予EGLU后,呼吸周期及呼气时程缩短,对吸气时程和放电积分幅度没有影响,且APDC的作用可以被EGLU部分逆转。结论ⅱ组代谢性谷氨酸受体参与了哺乳动物基本呼吸节律的调节。

关键词： ⅱ组代谢性谷氨酸受体延髓舌下神经根呼吸节律

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ⅱ组代谢性谷氨酸受体在新生鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电及呼吸神经元电活动中的作用

Ⅱ组代谢性谷氨酸受体在新生鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电及呼吸...

引用

作者：郑奇辉南方医科大学

学位级别：硕士

目的：　　谷氨酸受体广泛分布在中枢神经系统内,谷氨酸受体分为两类:亲离子型受体和亲代谢型受体,亲离子型受体对节律性呼吸的影响现已明了,但是关于代谢性谷氨酸受体对基本节律性呼吸的调节机理目前仍旧不明了。故本实验选取其中Ⅱ... 详细信息

目的：　　谷氨酸受体广泛分布在中枢神经系统内,谷氨酸受体分为两类:亲离子型受体和亲代谢型受体,亲离子型受体对节律性呼吸的影响现已明了,但是关于代谢性谷氨酸受体对基本节律性呼吸的调节机理目前仍旧不明了。故本实验选取其中ⅱ组代谢性谷氨酸受体为研究对象,拟通过观察ⅱ组代谢性谷氨酸受体对新生大鼠离体延髓脑片标本面神经后核内侧区(the medial region of the nucleusretrofacialis,mNRF)呼吸节律性放电活动的影响来探讨该受体在基本节律性呼吸发生和调节中的可能作用。　　 1)应用新生大鼠离体延髓脑片标本,记录与之相连的舌下神经呼吸节律性放电活动(respiratory rhythmical discharge activity,RRDA),观察受体特异性拮抗剂和激动剂对RRDA的影响,从而探讨Ⅱ组mGluRs在节律性呼吸产生和调节中的作用;2)在新生大鼠离体延髓脑片标本上,同步记录舌下神经根和mNRF区的吸气神经元(inspiratory neurons,Ⅰ-neurons)细胞外的放电活动,观察受体特异性拮抗剂,激动剂对吸气神经元放电活动的影响,进一步探讨该受体在基本节律性呼吸发生和调节中的可能作用。　　方法：　　选用新生SD大鼠(0～3d),雌雄不拘。参照并改良Suzue的方法制作离体延髓脑片标本,该脑片结构中主要包含面神经后核内侧区,前包氏复合体(Pre-B(o)tzinger Complex,PBC),腹侧呼吸组(ventral respiratory group,VRG)以及舌下神经核,并完整保留舌下神经根。1)用玻璃吸附电极记录舌下神经根放电作为呼吸活动的指标。实验动物分为3组:第1组(不同浓度的APDC组)将 APDC配成10、20、50μmol/L,标本随机分为Ⅳ小组(n=6),稳定记录舌下神经根节律性放电后,Ⅰ组为对照组,灌流MKS液,Ⅱ-Ⅳ组为实验组,依次分别灌流APDC10、20、50μmol/L,持续灌流15min,依次记录改灌前,改灌后1min,5min,10min舌下神经根RRDA的变化,并作出 APDC对RRDA的影响的量效曲线,选择观察最佳时间和最佳药物浓度。第2组(EGLU组)该组为6只SD新生乳鼠,方法同上,稳定记录舌下神经根的放电活动后,将此段作为对照组,以300μmol/L EGLU持续灌流15 min,观察改灌前及改灌后10min时RRDA中各项指标的变化。第3组(APDC和APDC+EGLU组),该组为6只新生鼠,方法同上,稳定记录舌下神经根放电活动后,以此段为对照,先加入50μmol/L APDC灌流10min,后加入50μmol/L APDC+300μmol/L EGLU持续灌流10min,分别记录各时间点对RRDA各项指标的影响;2)同步记录舌下神经根和mNRF吸气神经元细胞外放电活动,为了记录呼吸神经元,以微操纵器固定玻璃微电极,并通过控制微推进器作延髓面神经后核内侧区细胞外记录,记录时,每次推进10μm,直到记录到与脑片舌下神经根呼吸节律性放电具有位相关系的细胞外放电我们定义为吸气神经元放电(inspiratory neuron,I-neurons)。待稳定记录到吸气神经元的放电活动后,先以50μmol/L APDC灌流脑片10 min,洗脱APDC,待放电基本恢复后,再以300μmol/L EGLU灌流10min。通过灌流给药,观察给药前后不同药物对吸气神经元放电活动的影响。　　结果：　　 1.ⅱ组代谢性谷氨酸受体对延髓脑片呼吸节律性放电活动的影响:　　 1)灌流不同浓度的APDC(10,20,50μmol/L)记录灌流前,灌流后1min,5min,10min,各时间点RRDA的变化。不同的浓度组加药后随着时间的延长RC,TE逐渐延长,加药前RC,TE最短,第10min后达最长,提示给予APDC后对RRDA中RC,TE的抑制作用随时间延长而增加;同时加药后随时间延长TI缩短,IA降低,10min达最明显(RC:F=3.388,P=0.038),(TE:F=3.738,P=0.028),(IA:F=4.371,P=0.016),(TI:F=4.851,P=0.011)。不同时间点各浓度组之间比较:随着APDC浓度的增大,RC,TE逐渐延长,50μmol/L时最明显,同时TI,IA也随着浓度的增加而缩短,降低,在50μmol/L时达最大。在50μmol/L灌流10min后,RC,TE分别显著延长45.66％,50.21％,TI缩短25.49％,IA降低18.30％(P<0.05)。用300μmol/L EGLU灌流脑片10 min,与MKS灌流对照比较,RC和TE分别缩短了16.73％、17.43％,有统计学差异(P<0.0

关键词： ⅱ组代谢性谷氨酸受体面神经后核内侧区呼吸节律吸气神经元放电活动动物实验

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ⅱ组代谢性谷氨酸受体对延髓脑片吸气神经元电活动的影响

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数理医药学杂志 2012年第3期25卷 272-275页

作者：郭谦郑奇辉吴中海中国人民解放军驻香港部队医院深圳518048 南方医科大学基础医学院生理教研室广州510515 兰州大学第二医院手术麻醉科兰州730030

目的:探讨ⅱ组代谢性谷氨酸受体对延髓脑片面神经后核内侧区(mNRF)吸气神经元放电活动的调制作用。方法:制作新生大鼠离体延髓脑片标本,主要包含mNRF,并完整保留舌下神经根,以改良Kreb's液灌流脑片,同步记录舌下神经根呼吸节律性放... 详细信息

目的:探讨ⅱ组代谢性谷氨酸受体对延髓脑片面神经后核内侧区(mNRF)吸气神经元放电活动的调制作用。方法:制作新生大鼠离体延髓脑片标本,主要包含mNRF,并完整保留舌下神经根,以改良Kreb's液灌流脑片,同步记录舌下神经根呼吸节律性放电活动(RRDA)和吸气神经元的放电活动。待放电活动稳定后,在灌流液中分别单独给予该受体的特异性激动剂APDC和特异性拮抗剂EGLU,并分别观察其对吸气神经元放电活动的影响。结果:给予受体激动剂APDC后,吸气神经元的吸气时程(TI)缩短,放电的积分幅度(IA)减小,单位放电频率(PFn)变慢,呼吸周期(RC)和呼气时程(TE)延长。给予其拮抗剂EGLU后,吸气神经元的TE和RC缩短,PFn明显增加,IA和TI无明显变化。结论:ⅱ组代谢性谷氨酸受体对离体延髓脑片吸气神经元放电活动有调节作用,其可以通过作用吸气神经元的电活动来参与节律性呼吸的调控。

关键词： ⅱ组代谢性谷氨酸受体面神经后核内侧区呼吸节律吸气神经元脑片

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cAMP-PKA通路参与ⅱ组代谢性谷氨酸受体对新生鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电的调节

引用

生理学报 2011年第3期63卷 233-237页

作者：郑奇辉李国才程静方芳吴中海南方医科大学生理教研室广州510515 广东省中医院麻醉科广州510120

本研究旨在探讨cAMP-PKA通路在ⅱ组代谢性谷氨酸受体对离体延髓脑片呼吸节律性放电的影响中的作用。制作新生大鼠离体延髓脑片标本,主要包含延髓面神经后核内侧区(medial region of the nucleus retrofacialis,mNRF),并完整保留舌下神经... 详细信息

本研究旨在探讨cAMP-PKA通路在ⅱ组代谢性谷氨酸受体对离体延髓脑片呼吸节律性放电的影响中的作用。制作新生大鼠离体延髓脑片标本,主要包含延髓面神经后核内侧区(medial region of the nucleus retrofacialis,mNRF),并完整保留舌下神经根,以改良Kreb’s液(modified Kreb’s solution,MKS)恒温灌流脑片,用吸附电极记录舌下神经根呼吸节律性放电活动(respiratory rhythmical discharge activity,RRDA)。待放电活动稳定后,第1组灌流ⅱ组代谢性谷氨酸受体特异性拮抗剂(2S)-α-ethylglutamic acid(EGLU)10min,第2组先给予cAMP-PKA通路激动剂Forskolin灌流10min,而后MKS洗脱至正常,灌流cAMP-PKA通路抑制剂Rp-cyclic3’,5’-hydrogen phosphorothioate adenosine triethylammonium salt(Rp-cAMPS)10min,第3组首先给予Rp-cAMPS10min,洗脱后联合Rp-cAMPS+EGLU持续灌流10min,记录各组各时间点RRDA的变化。结果显示,给予ⅱ组代谢性谷氨酸受体拮抗剂EGLU后,呼吸周期(respiratory cycle,RC)缩短,放电积分幅度(integralamplitude,IA)和吸气时程(inspiratory time,TI)没有变化;Forskolin兴奋呼吸,缩短RC,增加IA,延长TI;Rp-cAMPS则延长RC,降低IA,缩短TI;并且cAMP-PKA通路被阻断之后,EGLU缩短RC的效应也被抑制。这些结果提示在离体延髓水平上,cAMP-PKA通路参与了ⅱ组代谢性谷氨酸受体对脑片呼吸节律性放电的调节。

关键词：延髓呼吸节律 ⅱ组代谢性谷氨酸受体 cAMP-PKA通路

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