检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2006年第9期10卷 109-111,i0006页

作者：廖传军郭连瑞李建新谷涌泉俞恒锡汪忠镐张建首都医科大学宣武医院血管外科首都医科大学血管外科研究所北京市100053

目的:构建含有增强绿色荧光蛋白报道基因的人内皮一氧化氮合酶重组质粒,为细胞转染提供实验依据。方法:实验于2005-05/10在首都医科大学宣武医院完成。用EcoRⅠ酶切pBluescriptⅡSK-人内皮一氧化氮合酶质粒,获得人内皮一氧化氮合酶基因... 详细信息

目的:构建含有增强绿色荧光蛋白报道基因的人内皮一氧化氮合酶重组质粒,为细胞转染提供实验依据。方法:实验于2005-05/10在首都医科大学宣武医院完成。用EcoRⅠ酶切pBluescriptⅡSK-人内皮一氧化氮合酶质粒,获得人内皮一氧化氮合酶基因,设计引物进行聚合酶链反应扩增。将人内皮一氧化氮合酶与pMD18-Tsimple平滑载体连接后,行EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切,回收人内皮一氧化氮合酶,然后将其与经过酶切处理的含有增强绿色荧光蛋白报道基因的载体pEGFP-C1进行连接,形成8.4kb的质粒,经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切进行电泳筛选、鉴定和测序。结果:①目的基因片段人内皮一氧化氮合酶cDNA的获得:pBluescriptⅡSK-人内皮一氧化氮合酶质粒经EcoRⅠ酶切后,电泳可见3kb及3.7kb处各出现一条条带,与质粒图谱所示相符,证明质粒正确。加入上下游引物行聚合酶链反应扩增后,电泳可见3.7kb处出现一条条带,证明人内皮一氧化氮合酶cDNA的获取成功。②人内皮一氧化氮合酶cDNA的酶切处理:人内皮一氧化氮合酶与pMD18-Tsimple平滑载体连接后,EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切,电泳分析可见3.7kb和2.7kb处各出现一条条带,证明两者连接成功。③pEGFP-人内皮一氧化氮合酶质粒的筛选:载体pEGFP-C1与人内皮一氧化氮合酶cDNA的连接后,EcoRⅠ单酶切电泳可见8.4kb处出现一条条带,再用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切,电泳可见4.7kb和3.7kb处各出现一条条带,证明连接正确。④pEGFP-人内皮一氧化氮合酶质粒的序列测定:序列测定结果与pEGFP-C1插入点序列及目的基因片段人内皮一氧化氮合酶cDNA两端序列对比相同,证明重组质粒构建成功。结论:pEGFP-人内皮一氧化氮合酶重组质粒的成功构建,可用于细胞转染,为人内皮一氧化氮合酶基因转移治疗在心血管疾病中的应用提供实验基础。

关键词：基因表达一氧化氮合酶/分析内皮/细胞学血管疾病/酶学发光蛋白质类质粒

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一氧化氮合酶3种异构体在豚鼠耳蜗的定位表达及其内耳听觉过程中的作用(英文)

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中国临床康复 2005年第37期9卷 160-161,F0003页

作者：王爱梅汤浩张仲明李连明牟华锦州医学院生理学教研室辽宁省锦州市121001 中国医科大学听力研究室辽宁省沈阳市110001 锦州市第二医院骨科辽宁省锦州市121001 锦州市中心医院耳鼻咽喉科辽宁省锦州市121001

背景:一氧化氮由一氧化氮合酶催化而成,关于一氧化氮合酶的3种异构体在豚鼠耳蜗结构中的确切定位和表达,目前尚存争议。目的:观察一氧化氮合酶3种异构体在豚鼠耳蜗的定位表达情况,探讨一氧化氮在内耳听觉生理和病理生理过程中的作用。设... 详细信息

背景:一氧化氮由一氧化氮合酶催化而成,关于一氧化氮合酶的3种异构体在豚鼠耳蜗结构中的确切定位和表达,目前尚存争议。目的:观察一氧化氮合酶3种异构体在豚鼠耳蜗的定位表达情况,探讨一氧化氮在内耳听觉生理和病理生理过程中的作用。设计:观察对比实验。单位:锦州医学院生理学教研室、锦州市附属第二医院骨科及锦州市中心医院耳鼻咽喉科。材料:实验于2000-05/11在中国医科大学听力研究室完成。选用健康纯白红目雄性豚鼠10只,体质量250～300g,耳郭反射灵敏。方法:豚鼠经腹腔麻醉后,断头处死,速取听泡。打开圆窗和卵圆窗并缓慢灌流含40g/L多聚甲醛的磷酸盐缓冲液,再将标本浸入该溶液固定2h。100g/L乙二胺四乙酸溶液脱钙1周后,移入250g/L蔗糖溶液中过夜沉淀。包埋耳蜗,制成20μm恒冷冰冻切片用于免疫组织化学染色。主要观察指标:豚鼠耳蜗内一氧化氮合酶3种异构体的定位表达情况。结果:10只豚鼠全部进入结果分析,无脱失。①神经元型和内皮型一氧化氮合酶免疫反应阳性见于耳蜗螺旋器的内、外毛细胞和螺旋神经节细胞。此外,也见于血管纹边缘细胞、螺旋韧带细胞和神经纤维。②诱导型一氧化氮合酶免疫反应活性在生理状态下也见于耳蜗的上述各部位。结论:一氧化氮在哺乳类动物耳蜗神经传导、血流调节及细胞毒性等生理和病理生理过程中可能起重要作用。

关键词：一氧化氮/分析一氧化氮合酶/分析耳蜗/生理学

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针刺足三里和关元穴对老年大鼠脑心肾组织中一氧化氮合酶和抗氧化系统的影响

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中国临床康复 2006年第7期10卷 113-115页

作者：张淑芬李亚东高洪泉李健男黑龙江中医药大学教务处黑龙江省哈尔滨市150040 黑龙江中医药大学基础医学院解剖教研室黑龙江省哈尔滨市150040 牡丹江医学院解剖教研室黑龙江省牡丹江市157011

目的:观察针刺足三里、关元穴对老年大鼠脑心肾组织中一氧化氮合酶、抗氧化系统中谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶以及脂褐质变化的影响,探讨针刺的抗氧化作用。方法:实验于2002-06/08在为黑龙江中医药大学实验中心完成。①选用雄性清洁... 详细信息

目的:观察针刺足三里、关元穴对老年大鼠脑心肾组织中一氧化氮合酶、抗氧化系统中谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶以及脂褐质变化的影响,探讨针刺的抗氧化作用。方法:实验于2002-06/08在为黑龙江中医药大学实验中心完成。①选用雄性清洁级Wistar老年大鼠20只,20月龄;青年大鼠雄性10只,10月龄。将老年大鼠随机分为2组:老年针刺组和老年对照组,每组10只。设10只青年大鼠为青年对照组。老年针刺组:四肢捆绑,固定在固定架上。采用多能脉冲电疗仪每日针刺双侧足三里穴,通电留针15min,采用连续波,频率3次/s,强度以针柄颤动,但能使动物不挣扎嘶叫,保持安静为度。关元穴留针15min。②老年对照组和青年对照组:只做相同捆绑处理15min。3组连续干预28d。③于最后一次针刺24h后处死大鼠。迅速取出脑、心、肾组织,制成组织匀浆,按照由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒操作,通过测量各样品吸光度(A值)计算脑、心、肾组织中一氧化氮合酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶以及脂褐质各项指标含量。④计量资料差异比较采用t检验和方差分析。结果:Wistar老年大鼠20只和青年大鼠10只均进入结果分析。①一氧化氮合酶活性:干预28d后,各年龄组大鼠心组织中最高,其次为脑、肾。老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组(P<0.01),老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组(P<0.01)。②谷胱甘肽过氧化物酶活性:干预28d后,老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组(P<0.01);老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组(P<0.01)。③过氧化氢酶活性活性:干预28d后,各组脑组织中最高,其次心、肾。老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组(P<0.01);老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组(P<0.01)。④脂褐质含量:干预28d后,老年针刺组脑、心、肾组织明显低于老年对照组(P<0.01);老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织明显高于青年对照组(P<0.01)。结论:针刺足三里和关元穴能提高脑、心、肾组织中一氧化氮合酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶的活性,降低脂褐质的含量,能起到抗氧化作用。

关键词：针刺穴,足三里穴,关元一氧化氮合酶/分析脂褐质/分析谷胱甘肽过氧化酶/分析过氧化氢酶/分析

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电针内关穴对心肌缺血再灌注损伤中心肌组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响(英文)

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中国临床康复 2004年第36期8卷 8400-8401页

作者：严洁田岳凤刘健华林亚平易受乡常小荣湖南中医学院针灸经络研究所湖南省长沙市410007

背景:针刺内关可以抑制心肌缺血再灌注损伤的进程,对心肌组织肌酸激酶、丙二醛等有明显的调节作用。目的:探讨针刺内关抗心肌缺血再灌注损伤作用的内在机制。设计:随机对照的实验研究。地点、材料和干预:本实验在湖南中医学院针灸经络... 详细信息

背景:针刺内关可以抑制心肌缺血再灌注损伤的进程,对心肌组织肌酸激酶、丙二醛等有明显的调节作用。目的:探讨针刺内关抗心肌缺血再灌注损伤作用的内在机制。设计:随机对照的实验研究。地点、材料和干预:本实验在湖南中医学院针灸经络研究所实验室完成。实验选用大耳白兔,雌雄不限,随机分为4组:空白组、模型组、针刺内关组、针刺列缺组,每组8只。G6805电针仪电针家兔内关穴、列缺穴各20min。主要观察指标:白兔心肌组织一氧化氮、一氧化氮合酶含量变化。结果:心肌缺血再灌注后模型组一氧化氮及一氧化氮合酶含量明显高于空白组(P<0.01);针刺内关穴组白兔心肌组织一氧化氮及一氧化氮合酶含量犤(0.69±0.15)mmol/g,(0.800±0.150)μkat/g犦明显低于模型组犤(1.67±0.27)mmol/g,(2.434±0.267)μkat/g犦(P<0.01)。针刺列缺组白兔心肌组织一氧化氮和一氧化氮合酶含量与模型组比较,差异无显著性意义(P>0.05)结论:电针内关穴对心肌缺血再灌注损伤心肌的保护作用可能与抑制一氧化氮及一氧化氮合酶的合成、释放,从而减轻其对心肌细胞的损害有关。

关键词：心肌再灌注损伤/针刺疗法穴,内关一氧化氮/分析一氧化氮合酶/分析

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氨基胍对骨关节炎软骨细胞诱导型一氧化氮合酶的影响

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陕西医学杂志 2007年第11期36卷 1469-1471页

作者：杨益民王民赵光辉王莹西安交通大学医学院第一附属医院骨科西安710061

目的:研究氨基胍对骨关节炎软骨细胞诱导型一氧化氮合酶的影响。方法:将32只兔子随机分组,正常组不予任何处理,试验组及对照组行右后肢伸直位管型石膏固定造模,试验组腹腔内注射氨基胍硫酸盐溶液100mg/(kg·d),对照组每天腹腔内注... 详细信息

目的:研究氨基胍对骨关节炎软骨细胞诱导型一氧化氮合酶的影响。方法:将32只兔子随机分组,正常组不予任何处理,试验组及对照组行右后肢伸直位管型石膏固定造模,试验组腹腔内注射氨基胍硫酸盐溶液100mg/(kg·d),对照组每天腹腔内注射相同体积的生理盐水。分别于4周和8周处死动物,切取标本进行后续研究。结果:与对照组相比,试验组在大体形态、HE染色方面更接近于正常组、iNOS表达阳性细胞数较少。结论:氨基胍能有效减少iNOS表达,延缓骨性关节炎的病情发展。

关键词：骨关节炎/药物疗法 @氨基胍一氧化氮合酶/分析软骨细胞兔

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糖尿病肾损害对半乳糖凝集素-3和内皮一氧化氮合酶的影响

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陕西医学杂志 2008年第11期37卷 1451-1454页

作者：董鹏魏动王惠芳邱春娟梁静刘书东西安交通大学第二医院内分泌科西安710004 西安交通大学第一医院

目的:探讨正常和糖尿病肾脏半乳糖凝集素(Galectin)-3和内皮一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达水平改变及其与糖尿病肾病(DN)的关系。方法:选取30只健康成年雄性SD大鼠,随机分为基础对照、正常对照(NC)和糖尿病(DM)组,DM组一次性腹腔注射2%链... 详细信息

目的:探讨正常和糖尿病肾脏半乳糖凝集素(Galectin)-3和内皮一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达水平改变及其与糖尿病肾病(DN)的关系。方法:选取30只健康成年雄性SD大鼠,随机分为基础对照、正常对照(NC)和糖尿病(DM)组,DM组一次性腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ),72h后测定随机血糖如大于16.7mmol/L,则稳定1周确定成模;NC组注射等量的枸橼酸液;于4、8周末提取肾脏总RNA作逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),凝胶图谱成像分析系统分析mRNA表达结果。结果:1Galectin-3 mRNA在糖尿病组8周时开始表达,与正常组和糖尿病4周时有显著差异;2eNOS mRNA在正常和糖尿病肾脏均有表达且存在显著性差异,但随DN病程进展表达无明显增加。结论:Galectin-3和eNOS的表达是DN发病过程中机体的适应性改变,可能会延缓血糖对肾脏的损害。

关键词：糖尿病肾病/病理生理学糖基化终产物/分析 @半乳糖凝集素3 一氧化氮合酶/分析大鼠

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老年大鼠肾缺血再灌注后肺损伤一氧化氮合酶的变化与意义

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陕西医学杂志 2010年第4期39卷 411-413页

作者：张伟夏晓红王燕凌王惠娟苗智慧华北煤炭医学院生理教研室唐山063000

目的:研究大鼠肾缺血/再灌注后急性肺损伤时,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及其在急性肺损伤发生中的作用。方法:采用夹闭双侧肾动、静脉45min后恢复血流的方法制作RIRI模型,免疫组织化学方法检测肺组织中i... 详细信息

目的:研究大鼠肾缺血/再灌注后急性肺损伤时,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及其在急性肺损伤发生中的作用。方法:采用夹闭双侧肾动、静脉45min后恢复血流的方法制作RIRI模型,免疫组织化学方法检测肺组织中iNOS和eNOS的表达,同时检测肺组织中MDA、MPO、W/D和NO2-/NO3-值,肺组织形态学观察以评价肺损伤的程度。结果:与control组比较,I/R组eNOS表达增强,iNOS表达减弱,MDA、MPO、W/D和NO2-/NO3-值增加,肺组织充血、炎细胞浸润,肺泡腔渗液;与I/R组比较,L-Arg组eNOS表达增强,iNOS表达减弱,NO2-/NO3-增加,MDA、MPO、W/D降低,肺组织损伤有减轻趋势,AG组eNOS表达无明显变化,iNOS活性降低,NO2-/NO3-减少,MDA、MPO、W/D降低,肺组织损伤有减轻趋势。结论:肾缺血/再灌注急性肺损伤过程中,eNOS表达增加,NO生成增多,在肺损伤发生中有一定的保护作用。

关键词：再灌注损伤/病理生理学肾疾病/并发症肺/损伤一氧化氮合酶/分析大鼠

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用免疫细胞化学显示一氧化氮合酶的中枢神经系统的表达

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解剖学杂志 1998年第6期21卷 115-116页

作者：顾红玉王|JIE| 刘才栋彭裕文上海上海医科大学解剖学教研室 200032

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针刺足三里和关元穴对衰老小鼠睾丸组织抗氧化作用和超微结构的影响

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中国临床康复 2006年第27期10卷 85-87,F0003页

作者：张国威李亚东李健男周迎春王晓源黑龙江中医药大学临床医学院黑龙江省哈尔滨市150040 黑龙江中医药大学基础医学院解剖教研室黑龙江省哈尔滨市150040 黑龙江中医药大学实验中心黑龙江省哈尔滨市150040

目的:通过对衰老小鼠足三里和关元穴进行针刺,观察针刺对睾丸抗氧化功能的影响。方法:实验于2003-06/08在黑龙江中医药大学实验中心(省级重点实验室)完成。①实验动物:选用雄性清洁级昆明种小鼠50只,其中青年组40只,2月龄,老年组10只,20... 详细信息

目的:通过对衰老小鼠足三里和关元穴进行针刺,观察针刺对睾丸抗氧化功能的影响。方法:实验于2003-06/08在黑龙江中医药大学实验中心(省级重点实验室)完成。①实验动物:选用雄性清洁级昆明种小鼠50只,其中青年组40只,2月龄,老年组10只,20～24月龄。将青年小鼠数字表法随机分为4组,空白组、模型组、生理盐水组、针刺组,每组10只。设10只老年小鼠为老年对照组。各组小鼠常规喂养1周后,模型组:每天颈背部皮注射5g/LD-半乳糖0.5mL/只,持续6周。针刺组:每天颈背部皮注射5g/LD-半乳糖0.5mL/只,每天清晨手持小鼠,使其处于仰卧位,用0.5寸长毫针(1cm),在小鼠的关元穴进针3～5mm,双侧足三里穴进针5～7mm,采用补法,留针15min,持续6周。生理盐水组:每天颈背部皮下注射0.5mL生理盐水/只,持续6周。②空白组和老年对照组再常规喂养6周。③针刺结束24h后脱颈椎处死小鼠,取出睾丸组织,按照由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒操作,通过测量各样品吸光度(A值)计算小鼠睾丸一氧化氮,一氧化氮合酶,超氧化物歧化酶,过氧化氢酶,过氧化脂质,丙二醛各项指标含量。结果:昆明种青年小鼠40只和老年小鼠10只均进入结果分析。①干预42d后,各组小鼠睾丸组织中一氧化氮,一氧化氮合酶,超氧化物歧化酶,过氧化氢酶活性比较:模型组、老年对照组明显低于空白组、生理盐水组、针刺组(P<0.01);针刺组与空白组、生理盐水组比较差异无显著性意义(P>0.05)。②干预42d后,过氧化脂质、丙二醛含量比较:模型组和老年对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);针刺组明显低于模型组、老年对照组(P<0.01);模型组、老年对照组明显高于针刺组、空白组、生理盐水组(P<0.01)。③干预42d后睾丸超微结构电镜结果:模型组支持细胞间隙增宽,核周隙增大,并且出现细胞内外水肿的现象。老年对照组中出现支持细胞连接消失,细胞水肿的现象。空白组小鼠的支持细胞的缝隙连接紧密。生理盐水组和空白组、针刺组之间未见差别。结论:针刺足三里和关元穴能提高致衰小鼠睾丸组织中一氧化氮、一氧化氮合酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性,降低过氧化脂质、丙二醛的含量;并能明显改善小鼠睾丸组织的超微结构,从而延缓睾丸的衰老进程。

关键词：针刺一氧化氮/分析一氧化氮合酶/分析超氧化物歧化酶/分析过氧化氢酶/分析过氧化脂质/分析丙二醛/分析睾丸超微结构

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微波照射预处理对兔肝内源性一氧化氮影响的实验研究

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中国误诊学杂志 2006年第13期6卷 2454-2457页

作者：程仁洪刘吉佳郑海涛倪铭孔谢文彪南京军区福州总医院急救中心福建福州350025 南华大学附属第二医院肿瘤外科湖南衡阳421001 山东省立医院普通外科山东济南250021

目的:观察微波照射对兔肝脏缺血再灌注损伤中的肝功能ALT、A ST、LDH、肝组织匀浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NO S)的变化,并探讨其保护机制。方法:32只新西兰大白兔被随机分为A、B、C、D共4组。各组于术后2h、4 h抽血查ALT、A ST、LD... 详细信息

目的:观察微波照射对兔肝脏缺血再灌注损伤中的肝功能ALT、A ST、LDH、肝组织匀浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NO S)的变化,并探讨其保护机制。方法:32只新西兰大白兔被随机分为A、B、C、D共4组。各组于术后2h、4 h抽血查ALT、A ST、LDH。实验结束处死获取肝脏标本,检测各组的NO、NO S并行HE染色。结果:B、C、D三组的ALT、A ST、LDH显著高于A组。而C、D组的NO、NO S显著低于A、B两组,其中D组又显著低于C组。C组病理改变明显轻于D组。结论:适宜条件的微波照射预处理能明显改善缺血再灌注损伤的肝功能,减轻肝细胞损伤,而NO是该保护机制中的一个重要因素。

关键词：微波/治疗应用缺血预处理肝/化学一氧化氮/分析一氧化氮合酶/分析

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