检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：唐妮海南医科大学

学位级别：硕士

研究目的: 射频消融治疗术后肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)复发率较高,这主要与射频消融不完全(Insufficient radiofrequency ablation,IRFA)相关,但其具体机制尚未清楚;本文旨在探讨LncRNA FUNDC2P4作为抑癌基因,如何参与抑制IRFA后HCC残癌发生侵袭、迁移,为防治HCC RFA术后复发提供新的理论依据和潜在治疗靶点。研究方法: 1.利用水浴热诱导方法体外模拟IRFA,构建Huh7-H及HCCLM3-H细胞亚系,并通过q RT-PCR、Western-blot在转录和蛋白水平检测相关基因m RNA及蛋白的表达差异; 2.采用UCSC(Human hg38)数据库对FUNDC2P4基因进行分析,并通过CPAT、Phylo CSF软件分析FUNDC2P4的编码能力;同时通过RNA-FISH、核质分离实验对LncRNA FUNDC2P4进行亚细胞定位; 3.通过RNA-seq技术对过表达FUNDC2P4的Huh7细胞进行RNA转录组测序分析;并通过GO、KEGG、GSEA方法对差异基因进行富集分析; 4.通过Long Target及JASPAR生信分析预测分析FUNDC2P4 TFOs相应CBX7启动子TTSs与HSF1相应CBX7启动子TFBS序列及位置情况,并通过构建以下过表达慢病毒载体(CBX7、HSF1、FUNDC2P4和HSF1共转染)转染Huh7细胞,检测FUNDC2P4、HSF1调控CBX7的表达情况; 5.通过建立CBX7截短突变体并用双荧光素酶报告基因测定确定FUNDC2P4和HSF1在CBX7启动子区内特定序列的竞争性结合的位点; 6.构建过表达CBX7慢病毒载体,并通过q RT-PCR、Western blot验证CBX7与EMT关系; 7.通过CCK-8、Transwell、划痕实验检测FUNDC2P4、HSF1对Huh7-H及HCCLM3-H侵袭、迁移功能的影响。研究结果: ***促进EMT发生并调节LncRNA FUNDC2P4和HSF1的表达。 *** FUNDC2P4不具有编码蛋白质的能力,且lncRNA FUNDC2P4在胞浆和胞核中均有表达,主要集中在胞核。 ***2P4和HSF1通过竞争性结合CBX7启动子调控CBX7转录,并且二者在CBX7启动子区域存在重叠结合区域,即FUNDC2P4的TTS可能位于CBX7启动子区域的1782-1832nt,而HSF1的TFBS可能位于CBX7启动子区域的1790-1804nt。 ***7过表达抑制肝癌细胞EMT。 ***2P4和HSF1竞争性介导CBX7调节IRFA残癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。研究结论: *** FUNDC2P4与HSF1竞争结合CBX7启动子区域,并调节CBX7基因转录,从而调控肝癌细胞EMT和侵袭转移。 ***2P4和HSF1可能是预防和治疗IRFA后HCC复发和转移的潜在治疗靶点。

关键词：肝细胞肝癌长链非编码RNAFUNDC2P4 射频消融不完全上皮细胞-间充质细胞转化 HSF1

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MicroRNA与乳腺癌干细胞的研究进展

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现代肿瘤医学 2020年第13期28卷 2344-2346页

作者：熊尚婉陈琦许文林江苏大学附属第四人民医院江苏镇江212001 江苏大学医学院江苏镇江212013

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,尽管目前治疗手段的多样性,乳腺癌的复发及转移仍不断增加,使临床治疗遇到瓶颈,乳腺癌干细胞理论的提出为其治疗提供新的思路。MicroRNA作为一种非编码RNA,通过与靶基因mRNA结合影响转录及表达。随着... 详细信息

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,尽管目前治疗手段的多样性,乳腺癌的复发及转移仍不断增加,使临床治疗遇到瓶颈,乳腺癌干细胞理论的提出为其治疗提供新的思路。MicroRNA作为一种非编码RNA,通过与靶基因mRNA结合影响转录及表达。随着对MicroRNA和乳腺癌干细胞的进一步研究,MicroRNA在乳腺癌干细胞中的功能日益突出,本文就MicroRNA与乳腺癌干细胞的研究进展及相互作用进行论述。

关键词： MicroRNA 乳腺癌干细胞上皮细胞-间充质细胞转化免疫逃逸凋亡

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干细胞转录因子OCT4在结直肠癌转移和放射抗性调控中的作用及其分子机制的研究

干细胞转录因子OCT4在结直肠癌转移和放射抗性调控中的作用及其分...

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作者：邵明海南京医科大学

学位级别：博士

放射治疗是直肠癌的一种重要治疗手段。然而,在临床治疗中发现放射治疗的效果没有如理论预期一般,尤其是针对晚期直肠癌患者。通过研究发现除了癌细胞的扩散给治疗带来的困难,在放射治疗中癌细胞产生对辐照的耐受性是另一个主要原因。... 详细信息

放射治疗是直肠癌的一种重要治疗手段。然而,在临床治疗中发现放射治疗的效果没有如理论预期一般,尤其是针对晚期直肠癌患者。通过研究发现除了癌细胞的扩散给治疗带来的困难,在放射治疗中癌细胞产生对辐照的耐受性是另一个主要原因。本研究发现结直肠癌细胞在辐照处理后,干细胞转录因子OCT4表达会随之上调。内源性OCT4的表达可赋予结直肠癌细胞耐辐射性的表型,这里结论由克隆形成实验和细胞周期阻滞恢复的实验数据证明。进一步探究发现OCT4能够促进结直肠癌细胞上皮-间充质转化过程(epithelial-mesenchymal transition process,EMT)。OCT4表达的增加不仅增加了间充质指标蛋白Vimentin,下调了上皮细胞指标蛋白E-cadherin,还促进了EMT的重要相关转录因子ZEB1的表达。通过shRNA敲降ZEB1可逆转在结直肠癌SW480细胞中由OCT4诱导而产生的耐辐射性。ZEB1可能参与了OCT4诱导的耐辐射性,同时其表达可被OCT4调控。更有趣的是,OCT4/ZEB1调控轴还上调CHK1,使癌细胞的DNA损伤修复能力增强,这可能是解释OCT4/ZEB1轴为何能促进人类结直肠癌细胞对辐射的耐受性的潜在机制。综上所述,我们的研究结果为人类结直肠癌细胞产生耐辐射提供了一种新的机制并为克服这种耐辐射提供新靶点。

关键词：抗辐射 OCT4 结直肠癌上皮细胞-间充质细胞转化 ZEB1 DNA损伤修复 CHK1

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E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白及波形蛋白在肿瘤转移中应用的研究进展

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肿瘤研究与临床 2016年第2期28卷 132-136页

作者：李蒙吴玖斌张培彤中国中医科学院广安门医院肿瘤科北京100053 中国中医科学院望京医院骨关节二科北京100102

恶性肿瘤侵袭、转移的发生不仅增加了患者的痛苦，还加大了临床治疗的难度，也是导致癌症患者死亡的主要原因。通过研究癌症的转移机制来寻找癌症复发转移的分子生物学标志物及抑制其复发转移的基因靶点，对临床治疗癌症有着重要的指导... 详细信息

恶性肿瘤侵袭、转移的发生不仅增加了患者的痛苦，还加大了临床治疗的难度，也是导致癌症患者死亡的主要原因。通过研究癌症的转移机制来寻找癌症复发转移的分子生物学标志物及抑制其复发转移的基因靶点，对临床治疗癌症有着重要的指导作用。恶性肿瘤的侵袭、转移是个复杂的过程，主要包括癌细胞本身的生物学特性、宿主细胞及细胞外基质与癌细胞的相互作用等。目前，研究上皮间质转化（EMT）在肿瘤发生及演进中的作用已成为肿瘤研究中的热点。而已知的上皮间质化的标志物包括上皮标志蛋白和间质标志蛋白，上皮标志蛋白最主要的是E-钙黏蛋白（E-cadherin），而间质标志蛋白主要有N-钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（vimentin），因此现将这三者近十年的相关研究作一综述。

关键词：上皮细胞-间充质细胞转化肿瘤 E-钙黏蛋白 N-钙黏蛋白波形蛋白

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白藜芦醇对高糖刺激下人肾小管上皮细胞发生EMT的作用

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中国细胞生物学学报 2015年第11期37卷 1522-1527页

作者：吴海江邓新娜史永红郭庆军李宏博彭金凯庞磊崔桂鹏段惠军河北医科大学病理学教研室河北省肾脏病重点实验室石家庄050017 河北省人民医院肿瘤四科石家庄050051 河北医科大学基础医学院石家庄050017

该文研究了白藜芦醇及其下游信号分子沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对高糖培养条件下人肾小管上皮细胞(HK-2)转化的作用和机制。体外常规培养HK-2细胞,采用Western blot检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏... 详细信息

该文研究了白藜芦醇及其下游信号分子沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对高糖培养条件下人肾小管上皮细胞(HK-2)转化的作用和机制。体外常规培养HK-2细胞,采用Western blot检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)及信号蛋白SIRT1、过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1α,PGC-1α)的蛋白表达,采用细胞免疫荧光对SIRT1的表达进行检测。与高糖刺激0 h组相比,高糖刺激12,24,48 h均导致HK-2细胞SIRT1蛋白明显减少,且随时间呈下降趋势;低糖培养细胞0,12,24,48 h的SIRT1蛋白表达没有明显差异。白藜芦醇明显提高高糖培养条件下HK-2细胞的SIRT1表达,而SIRT1特异性抑制剂EX527能够减弱白藜芦醇的作用。进一步的研究表明,白藜芦醇能够明显增加HK-2细胞中E-钙黏着蛋白的表达,抑制高糖导致的α-SMA表达升高,而EX527对高糖诱导的HK-2细胞转分化没有显著影响。此外,研究发现,白藜芦醇能够明显增加高糖刺激下HK-2细胞PGC-1α蛋白表达。该研究结果提示,白藜芦醇可能通过SIRT1和PGC-1α信号通路抑制了高糖诱导的HK-2细胞转化过程。

关键词：白藜芦醇肾小管上皮细胞 HK-2细胞上皮细胞-间充质细胞转化 SIRT1 PGC-1α

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肾间质纤维化中肌成纤维细胞来源的研究进展

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临床荟萃 2015年第3期30卷 349-352页

作者：姜莹莹杜玄一哈尔滨医科大学附属第二医院肾内三病房黑龙江哈尔滨150086

作为判断肾功能损伤程度及评估疾病预后的最重要指标,肾间质纤维化(RIF)是多种慢性肾脏病发展至终末期肾衰竭的共同途径。肌成纤维细胞作为细胞外基质的主要来源细胞在RIF的进程中起到了关键性的作用。我们就RIF中肌成纤维细胞的来源进... 详细信息

作为判断肾功能损伤程度及评估疾病预后的最重要指标,肾间质纤维化(RIF)是多种慢性肾脏病发展至终末期肾衰竭的共同途径。肌成纤维细胞作为细胞外基质的主要来源细胞在RIF的进程中起到了关键性的作用。我们就RIF中肌成纤维细胞的来源进行综述。

关键词：纤维化肾间质纤维化肌成纤维细胞上皮细胞-间充质细胞转化周细胞

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丹芪合剂下调糖尿病肾病大鼠肾组织Akt1的表达

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中国实验方剂学杂志 2013年第7期19卷 259-262页

作者：余红石明隽肖瑛刘瑞霞王园园桂华珍郭兵张国忠贵阳医学院贵阳550004

目的:观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶B(PKB/Akt1)表达的影响,探讨其保护肾脏的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病丹芪合剂组(2 ***-1)和依那普利组(10 ***-1)。单次尾静脉注射链脲佐菌素复制糖尿病... 详细信息

目的:观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶B(PKB/Akt1)表达的影响,探讨其保护肾脏的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病丹芪合剂组(2 ***-1)和依那普利组(10 ***-1)。单次尾静脉注射链脲佐菌素复制糖尿病模型。生化方法检测血糖、尿蛋白和血肌酐。免疫组化检测肾组织Akt1、E-钙黏素(E-cadherin)、纤维连接蛋白(FN)蛋白表达;Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白水平;RT-PCR检测Akt1 mRNA水平。结果:丹芪合剂明显降低DM大鼠肾组织Akt1蛋白和mRNA表达(P<0.01);同时上调E-cadherin蛋白表达并下调α-SMA表达,使FN沉积减少(P<0.01);降低DM大鼠血肌酐和尿蛋白水平(P<0.05)。丹芪合剂组与依那普利组之间无统计学差异。结论:丹芪合剂可能通过抑制Akt信号分子,进而抑制上皮细胞-间充质细胞转化,减少FN沉积,对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。

关键词：糖尿病肾病 Akt1 上皮细胞-间充质细胞转化丹芪合剂依那普利

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ALDH1可作为鼻咽癌干细胞功能性标记物和临床预后的指标

ALDH1可作为鼻咽癌干细胞功能性标记物和临床预后的指标

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作者：吴爱兵南方医科大学

学位级别：博士

研究背景与目的干细胞(stem cells, SC)是一类具有自我复制能力(self-renewaling)的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段把干细胞分为胚胎干细胞(embryonic stem cells)和成体干细胞(progenito... 详细信息

研究背景与目的干细胞(stem cells, SC)是一类具有自我复制能力(self-renewaling)的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段把干细胞分为胚胎干细胞(embryonic stem cells)和成体干细胞(progenitor somatic stem cells)。胚胎干细胞即全能干细胞,能分化成机体的所有细胞。成体干细胞(如血液干细胞、间充质干细胞等)具有定向的分化功能和不对称分裂的特性,一个子代细胞和母代完全一样,另一个显示组织分化的特点。干细胞因此获得了自我更新、增殖及分化能力。随着对干细胞基础理论研究与应用的不断深入,人们设想肿瘤组织中可能存在一种极小量的肿瘤细胞,这类细胞具有无限增殖、自我更新和多向分化潜能,是肿瘤发生、增殖、转移和复发的根源,而其他的大多数肿瘤细胞并不具有这种能力；这一小部分细胞叫做肿瘤干细胞或肿瘤起始细胞(cancer stem cell、CSC, tumor initial cells、TIC)。最先证明存在的是白血病干细胞。在人急性髓性白血病(AML)患者中分离CD34+/CD38-表型的ALM细胞,将这类细胞接种于非肥胖型糖尿病/严重免疫缺血(non-diabetic/severe combined immunodeficiency, NOD/SCID)小鼠,可以产生类似人类的白血病,而CD34-/CD38+表型的白血病细胞却不易形成肿瘤。近些年来,越来越多的实体瘤肿瘤干细胞的存在被得到证实。AI-Hajj等证明乳腺癌Lin-ESA+CD44+CD24-/low细胞比Lin-ESA-CD44+CD24-/low细胞在NOD/SCID小鼠体内的成瘤能力更强。Singh等发现仅用100个CD133+脑肿瘤细胞接种于NOD/SCID小鼠就可以形成肿瘤,且这些肿瘤细胞的表型及分化程度与原发肿瘤相似,而接种了(5-10)×104个CD133-脑肿瘤细胞的NOD/SCID小鼠只是在注射部位形成一条胶质瘢痕。在其它实体肿瘤中如,黑色素瘤、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、头颈部癌、大肠癌中也发现肿瘤干细胞。正常干细胞和肿瘤干细胞均是非常稀少的一个亚群,这给相关研究工作带来很大困难,如何分离和富集干细胞,是人们在一直关注的焦点。关于鼻咽癌干细胞的研究已有一些报告,Zhang等利用Brdu标记滞留细胞证实鼻咽黏膜基底部有散在干细胞同时也发现了散在标记滞留细胞。BrdU标记的鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma, NPC)细胞株5-8F接种到裸鼠皮下,8周后也可发现散在标记滞留细胞。Wang等利用Hoechst 33342染料在鼻咽癌细胞株CNE2中分离出类似干细胞的侧群细胞,且认为CK19是鼻咽癌干细胞标志物。到目前为止,鼻咽癌干细胞还没有确切的标记物。虽然SP细胞可以富集鼻咽癌干细胞,但是有明显局限性。所以寻找鼻咽癌干细胞确切的标记物对研究鼻咽癌干细胞具有重要意义。乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1, ALDH1, ALDH1A1或RALDH 1)是乙醛脱氢酶(ALDH)家族之一,是催化细胞内乙醛氧化为乙酸的细胞溶质酶。广泛在正常组织的发育和内环境稳定中表达,也表达在免疫细胞中。人类的ALDH1基因表达存在于细胞质中,其基因克隆和定位在9q2l染色体,由53×103个碱基对构成,包含13个外显子,共编码501个氨基酸序列,无重复序列,N’端为蛋氨酸M (Met),具有一个谷氨酸(Glu)和一个半胱氨酸(Cys)激活位点,其基因启动区包含一个ATA盒和一个CCAAT盒,分别位于转录起始部位上游的32 bp和74 bp处。最近学者们发现ALDH1可作为肿瘤干细胞的标记物。最先在造血细胞中发现ALDH1可作为肿瘤干细胞的标记物,在实体瘤中,2007年Ginestier等首次利用ALDH1为标记物在乳腺癌实体组织中发现了乳腺癌干细胞。ALDH1+乳腺癌细胞只占乳腺癌细胞总数的5%,但具有自我更新、少数细胞致瘤、多向分化的潜能。他们用ALDH1+细胞进行肿瘤形成实验,只用500个ALDH1+细胞就能形成肿瘤,而即使用50000个ALDH1-细胞也不会形成肿瘤,说明ALDH1+细胞具有很高的致瘤能力。证明ALDH1是乳腺癌干细胞的标记物之一,并且还发现ALDH1也可作为乳腺癌临床预后指标。随后研究证明,ALDH1也可作为头颈部鳞状细胞癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、眼癌、结直肠等实体瘤肿瘤干细胞的标记物。 ALDH1在鼻咽癌中的研究在国内外还没见报道,本实验主要研究ALDH1的体内外生物学功能以及与鼻咽癌患者临床预后的关系。研究内容与方法 1.鼻咽癌5-8F细

关键词： ALDH1 肿瘤干细胞鼻咽癌临床预后风险因子上皮细胞-间充质细胞转化

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特发性肺纤维化中肌成纤维细胞来源的研究进展

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国际呼吸杂志 2009年第18期29卷 1127-1131页

作者：冯彦华肖莉中国医科大学北京顺义医院高压氧科 101300 中国医科大学附属盛京医院急诊科沈阳110004

在特发性肺纤维化发病过程中，肌成纤维细胞是主要效应细胞，具有促进细胞外基质沉积、肺顺应性下降，肺组织结构破坏以及分泌多种炎性细胞因子的功能。因此，研究肌成纤维细胞的来源对于阐明特发性肺纤维化的发病机制以及寻求有效的分... 详细信息

在特发性肺纤维化发病过程中，肌成纤维细胞是主要效应细胞，具有促进细胞外基质沉积、肺顺应性下降，肺组织结构破坏以及分泌多种炎性细胞因子的功能。因此，研究肌成纤维细胞的来源对于阐明特发性肺纤维化的发病机制以及寻求有效的分子治疗靶点具有非常重要的意义。迄今为止，肌成纤维细胞的来源集中在3个方面：肺内的成纤维细胞、肺组织上皮细胞和骨髓源性细胞或纤维细胞。本文对近年来的相关文献进行整理，加以阐述。

关键词：特发性肺纤维化肌成纤维细胞成纤维细胞上皮细胞-间充质细胞转化

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肺纤维化形成中整合素相关激酶的表达与上皮-间充质细胞转化

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中国组织化学与细胞化学杂志 2007年第4期16卷 428-433页

作者：施维张劲农汪铮徐清华中科技大学附属协和医院呼吸病研究室武汉430022

目的观察整合素相关激酶(ILK)在博莱霉素致小鼠肺纤维化中的动态表达,探讨其在肺纤维化中与上皮-间充质细胞转化(EMT)的关系。方法将32只小鼠随机分成正常对照组,博莱霉素(BLM)致肺纤维化组。后者以博莱霉素腹腔注射致肺纤维化,正常对... 详细信息

目的观察整合素相关激酶(ILK)在博莱霉素致小鼠肺纤维化中的动态表达,探讨其在肺纤维化中与上皮-间充质细胞转化(EMT)的关系。方法将32只小鼠随机分成正常对照组,博莱霉素(BLM)致肺纤维化组。后者以博莱霉素腹腔注射致肺纤维化,正常对照组仅在相同处理条件下注射生理盐水。治疗的第28天和40天处死动物取出肺组织,用苏木精-伊红(HE)和Massontrichrome染色,分别观察实验动物肺炎症和纤维化的程度,以样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸的量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ILK mRNA表达、免疫组化检测不同实验组小鼠ILK,并同时检测间充质细胞标记物α-平滑肌肌蛋白(α-SMA)和上皮细胞标记物上皮钙粘附素(E-Cad)的表达。结果组织学结果显示小鼠肺组织胶原含量在第28d明显增加,第40d达高峰,羟脯氨酸测定动态增高。与正常对照组比较,肺纤维化组中ILK、α-SMA蛋白表达增高(P<0.01),E-Cad的蛋白表达降低(P<0.01)。RT-PCR结果显示肺纤维化组ILKmRNA的表达显著增高(P<0.01)。ILK的表达不仅与羟脯氨酸的含量成正相关(r分别为0.867、0.886,P均小于0.05),也与α-SMA/E-Cad比值成正相关(r分别为0.830、0.844,P均小于0.05);α-SMA与E-Cad成负相关(r分别为-0.820、-0.833,P均小于0.05)。结论ILK在小鼠肺纤维化中表达与纤维化的程度呈正相关增高,表明其可能是肺纤维化形成的促进因子,且由于ILK与α-SMA/E-Cad比值成正相关,推测ILK在肺纤维化形成中的机制可能与促进EMT有关。

关键词：整合素相关激酶肺纤维化上皮细胞-间充质细胞转化博莱霉素

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