检索结果-内蒙古大学图书馆

中华小儿外科杂志 2020年第11期41卷 1031-1036页

作者：马明第宋鑫史满玉李昭铸崔清波哈尔滨医科大学附属第二医院小儿外科 150086

目的以上皮细胞-间充质细胞转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)在胆道闭锁(biliary atresia,BA)肝外胆管纤维化中的作用及其调节机制为切入点,探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对肝外胆管EMT的诱导作用,以及肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)通过调控EMT来改善肝外胆管纤维化的作用机制。方法提取和培养BALb/c小鼠肝外胆管肝外胆管上皮细胞,按照研究目的不同,将第3次传代后的肝外胆管上皮细胞分为不添加生长因子的正常对照组、添加TGF-β1诱导EMT的TGF-β1组、添加HGF+TGF-β1的HGF干预组、仅添加HGF的HGF对照组和添加TGF-β1+HGF+SU11274的HGF抑制组。用蛋白免疫印记实验检测各组上皮细胞标志物CK19、E-cad和间质细胞标志物α-SMA和S100A4的表达情况。结果蛋白印迹实验显示,对照组CK19、E-cad、α-SMA和S100A4的表达量分别为1.31±0.02、0.90±0.05、0.70±0.07和0.81±0.04。与对照组比较,TGF-β1组上皮细胞标志物CK19(0.75±0.05)和E-cad(0.66±0.06)蛋白表达水平下降,同时间质细胞标志物α-SMA(1.47±0.05)和S100A4(1.49±0.06)蛋白表达水平上升,组间比较,各项细胞因子间差异均有统计学意义(P<0.05)。与TGF-β1组比较,HGF干预组CK19(1.20±0.05)和E-cad(1.12±0.06)蛋白表达水平上升,同时α-SMA(0.71±0.04)和S100A4(0.82±0.07)蛋白表达水平下降,组间比较,各项细胞因子间差异均有统计学意义(P<0.05)。与HGF干预组比较,应用HGF抑制剂SU11274后,HGF抑制组CK1(0.81±0.05)和E-cad(0.99±0.06)蛋白表达水平下降,同时α-SMA(1.25±0.05)和S100A4(1.03±0.07)蛋白表达水平上升,组间比较,各项细胞因子间,除E-cad外,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β1可诱导肝外胆管上皮细胞发生EMT,HGF可通过调控TGF-β1诱导的EMT来改善肝外胆管纤维化。

关键词：肝细胞生长因子上皮细胞-间充质细胞转换胆管

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microRNA-29b在TGF-β1诱导的视网膜色素上皮细胞-间充质细胞转换中的作用

microRNA-29b在TGF-β1诱导的视网膜色素上皮细胞-间充质细胞转换...

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第十四届国际眼科学学术会议、第十四届国际视光学学术会议、第三届国际角膜塑形学术大会

作者：李敏李慧刘晓强徐鼎王方同济大学附属第十人民医院

目的:研究miR-29b在TGF-β1诱导的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞-间充质细胞转换(Epithelial-mesenchymaltransition,EMT)的作用及机制。方法:通过microRNA芯片及定量PCR检测TGF-β1诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)与对照组细胞的差异microRNAs:Western blot,q-PCR,免疫荧光及Transwell实验检测miR-29b对上皮细胞及间充质细胞标志物表达影响;生物信息学方法预测miR-29b作用靶基因;双荧光素酶报告基因及质粒Akt2-shRNA

关键词：上皮细胞-间充质细胞转换 miR 靶基因 TGF microRNA-29b

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蟾蜍灵抑制TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞-间充质细胞系转换

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基础医学与临床 2016年第10期36卷 1388-1392页

作者：郭静李善文施会敏张爱青南京医科大学基础医学实验教学中心江苏南京210029 南京医科大学第二附属医院儿童肾内科江苏南京210011

目的探讨蟾蜍灵对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人肾小管上皮细胞-间充质细胞转换的影响。方法将体外培养的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)细胞分为3组:1)对照组;2)TGF-β1组:在细胞培养基中加入TGF-β1(浓度为5μg/L);3)蟾蜍灵+TGF-β1组... 详细信息

目的探讨蟾蜍灵对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人肾小管上皮细胞-间充质细胞转换的影响。方法将体外培养的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)细胞分为3组:1)对照组;2)TGF-β1组:在细胞培养基中加入TGF-β1(浓度为5μg/L);3)蟾蜍灵+TGF-β1组:在细胞培养基中分别加入蟾蜍灵和TGF-β1(浓度为5μg/L),按蟾蜍灵的浓度分为A、B、C 3个亚组:分别为1×10^(-9)、1×10^(-8)和1×10^(-7)mol/L。72 h后,用倒置相差显微镜观察细胞形态;用实时定量PCR、蛋白印迹法和免疫荧光检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。结果 TGF-β1组HK-2细胞从原有典型的铺路石样上皮细胞转变为长梭形肌成纤维细胞;胞质内大量表达α-SMA,同时E-cadherin的表达明显减少(P<0.01);蟾蜍灵处理后TGF-β1诱导的细胞形态学改变减轻,胞质内α-SMA的表达减少(P<0.05),同时E-cadherin的表达明显恢复,且呈剂量依赖性。结论蟾蜍灵能有效抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞转换,对肾脏病治疗具有潜在应用前景。

关键词：蟾蜍灵转化生长因子-β1 上皮细胞-间充质细胞转换

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CTGF及PI3K/Akt信号通路在百草枯致肺泡上皮细胞间充质化改变中的作用

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中华劳动卫生职业病杂志 2024年第6期42卷 401-407页

作者：苏艺伟李广珍方文馨张晋蔚刘移民王致广州市第十二人民医院职业环境与健康重点实验室广州510620 暨南大学基础医学与公共卫生学院广州510632

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)及磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在百草枯(PQ)致肺泡上皮细胞上皮-间充质化(EMT)改变的作用。方法于2023年2月,将RLE-6TN细胞分成2组,设为未染毒组和染毒组(200μmol/L PQ),采... 详细信息

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)及磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在百草枯(PQ)致肺泡上皮细胞上皮-间充质化(EMT)改变的作用。方法于2023年2月,将RLE-6TN细胞分成2组,设为未染毒组和染毒组(200μmol/L PQ),采用细胞划痕实验、qRT-PCR和Western-blot法检测细胞EMT改变、CTGF及PI3K/Akt信号通路相关分子表达情况。利用shRNA干扰技术特异性抑制CTGF的表达,将RLE-6TN细胞分成4组,分别为对照组、PQ组(200μmol/L PQ)、干扰组(转染含shRNA-CTGF质粒+200μmol/L PQ)和空载组(转染含CTGF-scramble质粒+200μmol/L PQ),qRT-PCR和Western-blot法检测细胞EMT改变及PI3K/Akt通路活性相关分子的表达情况。使用PI3K抑制剂LY294002阻断PI3K/Akt信号通路,运用qRT-PCR和Western-blot法检测对照组、PQ组(200μmol/L PQ)、抑制剂组(200μmol/L PQ+20μmol/L LY294002)细胞EMT相关分子表达情况。两组间差异比较采用t检验,多组间差异比较采用方差分析,进一步两两比较采用Bonferroni法。结果细胞划痕实验结果显示,与未染毒组比较,PQ染毒组RLE-6TN细胞迁移速度更快,E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的mRNA和蛋白表达量更低,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CTGF、PI3K、Akt的mRNA和蛋白表达量更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。特异性抑制CTGF表达后,干扰组细胞CTGF、PI3K、Akt、α-SMA的mRNA和蛋白表达量明显低于PQ组和空载组(P<0.05/6),E-Cadherin的mRNA和蛋白表达量高于PQ组和空载组(P<0.05/6)。特异性阻断PI3K/Akt信号通路,抑制剂组细胞PI3K、Akt和α-SMA的mRNA和蛋白表达量较PQ组降低(P<0.05/3),E-Cadherin表达量较PQ组升高(P<0.05/3)。结论CTGF可能通过激活PI3K/Akt信号通路促进PQ致肺泡上皮细胞EMT改变,抑制CTGF的表达或阻断PI3K/Akt信号通路活性,可减轻PQ所致肺泡上皮细胞EMT的程度。

关键词：百草枯结缔组织生长因子上皮细胞-间充质细胞转换信号通路

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阻断JAK2／STAT3信号通路对尿毒症腹膜透析大鼠腹膜组织上皮细胞间充质转分化的影响

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中华肾脏病杂志 2018年第5期34卷 361-369页

作者：肖静李肖肖王晓阳宫亚楠王聪孟婕马爽董奕君张晓雪程根阳刘栋窦艳娜李炎生赵占正郑州大学第一附属医院肾脏病医院肾内科 450052

目的探讨JAK2／STAT3信号通路是否参与了尿毒症腹膜透析（PD）大鼠腹膜间皮细胞上皮细胞-间充质转分化（EMT）。方法Sprague—Dawley雄性大鼠按照随机数字表法被分为6组：正常对照组、假手术组、尿毒症组、腹膜透析组、S3I-201对照组、S... 详细信息

目的探讨JAK2／STAT3信号通路是否参与了尿毒症腹膜透析（PD）大鼠腹膜间皮细胞上皮细胞-间充质转分化（EMT）。方法Sprague—Dawley雄性大鼠按照随机数字表法被分为6组：正常对照组、假手术组、尿毒症组、腹膜透析组、S3I-201对照组、S3I-201组，每组均8只。构建5／6肾切除尿毒症腹膜透析大鼠模型，腹膜透析组、S3I-201对照组、S3I-201组每天经腹透管注人4．25％葡萄糖腹膜透析液（3ml／100g体重），S3I—201组大鼠隔天经腹透管注入STAT3抑制剂S3I-201（2．5mg/kg），同时S3I-201对照组经腹透管注入等量的S3I-201溶剂。透析28d后分别检测腹膜功能、腹膜病理变化和毛细血管密度（MVD），血液和腹透液中的肌酐值和IL-6浓度，大鼠腹膜组织中p-JAK2、p-STAT3的活化状态，以及E—cadherin、α-SMA和VEGFmRNA和蛋白的表达。结果与正常对照组相比，尿毒症组和腹膜透析组大鼠腹膜功能呈现超滤衰竭状态，腹膜厚度和MVD增加，透析液和血清中IL-6浓度升高，E—cadherin表达降低，α-SMA、VEGF、p—JAK2和P—STAT3的表达升高。与尿毒症组相比，腹膜透析组腹膜功能进一步恶化，腹膜厚度和MVD增加（均P〈0．01），透析液和血清中IL-6浓度升高（均P〈0．01），E—cadherin表达降低，α-SMA、VEGF、p-JAK2和p-STAT3的表达升高。S3I-201对照组与腹膜透析组相比较，各指标差异均无统计学意义（均P〉0．05）。与S3I-201对照组相比，S3I-201组腹膜功能得到改善，腹膜厚度和MVD减少（均P〈0．01），透析液和血清中IL-6浓度降低，*** mRNA和蛋白表达增加（均P〈0．05），α-SMA、VEGF、p-JAK2和p-STAT3mRNA和蛋白的表达降低（均P〈0．05）。结论抑制STAT3后，腹膜透析大鼠腹膜厚度、血管新生和IL-6浓度均降低，EMT也被抑制，腹膜功能得到改善。因此，JAK2／STAT3信号通路可能通过调节IL-6的表达参与尿毒症腹膜透析大鼠腹膜组织EMT。

关键词：腹膜透析上皮细胞-间充质细胞转换纤维化 JAK2/STAT3信号通路白细胞介素6

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萝卜硫素通过Traf6/TAK1通路调节肾小管上皮细胞间充质转分化

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国际泌尿系统杂志 2020年第2期40卷 305-309页

作者：李霖唐俊恩施土家族苗族自治州中心医院护理部恩施445000 恩施土家族苗族自治州中心医院肾病风湿内科恩施445000

目的探讨萝卜硫素对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)间充质转分化的影响及其对Traf6/TAK1信号通路活化的作用。方法体外培养HK-2细胞,并将其分为正常组、LPS诱导组(100 ng/mL)、LPS+萝卜硫素低剂量组(10μmol/L)、LPS+萝卜硫素... 详细信息

目的探讨萝卜硫素对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)间充质转分化的影响及其对Traf6/TAK1信号通路活化的作用。方法体外培养HK-2细胞,并将其分为正常组、LPS诱导组(100 ng/mL)、LPS+萝卜硫素低剂量组(10μmol/L)、LPS+萝卜硫素中剂量组(20μmol/L)、LPS+萝卜硫素高剂量组(40μmol/L)。培养12、24、48 h后,采用CCK8法检测细胞增殖情况,ELISA法检测细胞上清中IL-6、IL-1β及TNF-α含量,Western blot方法检测E-cadherin、α-SMA、Traf6、TAK1及p-TAK1蛋白的表达量。结果LPS诱导组相对于正常组HK-2细胞增殖能力、炎症因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)水平、蛋白(α-SMA、Traf6及p-TAK1)表达量均升高,而E-cadherin蛋白表达水平降低;然而不同浓度萝卜硫素处理细胞后细胞增殖能力、炎症因子分泌量、蛋白(α-SMA、Traf6及p-TAK1)表达量均降低,E-cadherin蛋白表达水平升高,表现一定剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论萝卜硫素能够抑制LPS诱导的HK-2细胞增殖能力及炎症因子的产生,发挥抑制肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转变的纤维化过程,其机制可能与抑制Traf6/TAK1信号通路活化有关。

关键词：肾小管上皮细胞-间充质细胞转换萝卜硫素

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β﹣连环素核易位在甲状腺肿瘤干细胞向钠碘转运体功能性表达细胞分化中的抑制作用

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中华医学杂志 2019年第24期99卷 1904-1910页

作者：兰玲邓微崔岱陈海翎霍丽丽左庆瑶李伟张国英罗勇北京积水潭医院内分泌科北京100035 南京医科大学第一附属医院内分泌科南京210029 首都医科大学附属北京安贞医院泌尿外科北京100029

目的确认肿瘤干细胞(CSC)发生β-连环素(0-catenin)核易位能否分化出钠碘转运体(NIS)膜表达缺失、对治疗抵抗的甲状腺癌细胞。方法从人甲状腺滤泡癌细胞KrC 133中分选侧群干细胞(SP),并进行细胞“干性”鉴定;对FTC133来源的SP细胞进行β... 详细信息

目的确认肿瘤干细胞(CSC)发生β-连环素(0-catenin)核易位能否分化出钠碘转运体(NIS)膜表达缺失、对治疗抵抗的甲状腺癌细胞。方法从人甲状腺滤泡癌细胞KrC 133中分选侧群干细胞(SP),并进行细胞“干性”鉴定;对FTC133来源的SP细胞进行β-catenin转染,再将其促分化培养,并收集分化细胞。应用Western印迹、Transwell、MTT方法,验证分化细胞的上皮细胞间质转化(EMT)属性及体外增殖侵袭能力的变化;应用免疫荧光染色和细胞摄碘试验,观察分化细胞的N1S功能性表达及摄碘能力的变化;应用分化细胞建立严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠皮下瘤模型,观察瘤体对"T体内治疗的反应,并应用免疫组化技术初步检测治疗相关功能蛋白的表达变化。结果FTC133中侧群干细胞约0.03%。应用3-catenin转染FTC133源SP细胞后.其分化细胞中出现了典型EMT转化,其中上皮属性蛋白(E钙黏素和细胞角蛋白18)表达缺失,间质属性蛋白(波形蛋白、纤连蛋白、尿激酶型纤溶酶原激活因子)反常表达;与未转染组和空质粒转染组相比,转染组SP细胞分化细胞体外增殖能力分别增强了约85.4%和81.0%(均P<0.01),侵袭能力则上升了78.8%和84.4%(均戸<0.01)0免疫荧光染色显示,β-catenin转染SP细胞后,其分化细胞出现明显的B-catenin核易位,同时伴随NIS蛋白由膜表达向浆表达的显著转变;体外摄碘率则分别下降约52.8%和45.2%(均P<0.01)。动物实验进一步显示,β-catenin转染SP细胞后,其分化细胞体现了很强的肿瘤生长促进能力和对抗治疗的能力(均P<0.05)。结论干细胞发生β-catenin核易位可能分化为对治疗抵抗的甲状腺癌细胞。

关键词：甲状腺肿瘤肿瘤干细胞 β连环素上皮细胞-间充质细胞转换钠碘转运体

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肺泡Ⅱ型上皮细胞过表达OC-STAMP诱导肌动蛋白细胞骨架重塑促进上皮-间质转化的机制

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中华劳动卫生职业病杂志 2023年第11期41卷 801-807页

作者：耿菲蔡玉浩赵莹魏中秋徐洪杨方华北理工大学公共卫生学院医学实验技术系河北省器官纤维化重点实验室唐山063000 华北理工大学基础医学院病理学系河北省慢性疾病重点实验室唐山063000

目的:探讨过表达破骨细胞刺激性转膜蛋白(osteoclast stimulatory transmembrane protein,OC-STAMP)对上皮-间质转化的作用及机制。方法:于2021年4月,将小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12细胞分为过表达对照组(NC组)、 Ocstamp过表达组(over- ... 详细信息

目的:探讨过表达破骨细胞刺激性转膜蛋白(osteoclast stimulatory transmembrane protein,OC-STAMP)对上皮-间质转化的作用及机制。方法:于2021年4月,将小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12细胞分为过表达对照组(NC组)、 Ocstamp过表达组(over- Ocstamp组)、法舒地尔(Fasudil)干预组(over- Ocstamp+Fasudil组)、沉默对照组(si-NC组)、 Ocstamp沉默组(si- Ocstamp组)。采用蛋白免疫印迹(Western blotting)法、免疫细胞化学染色法检测OC-STAMP、上皮标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、间质标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ras基因家族成员A(Ras homolog gene family member A,RhoA)、Rho GDP解离抑制因子α(Rho GDP dissociation inhibitor α,Rho GDIα)、Rho相关蛋白激酶(Rho-associated protein kinase,ROCK)、磷酸化肌球蛋白磷酸酶(phosphate myosin phosphatase,p-MYPT)蛋白表达,采用鬼笔环肽法检测细胞骨架肌动蛋白(filamentous actin,f-actin)的变化。采用 t检验比较两组间各蛋白的相对表达量。结果:Western blotting及免疫细胞化学染色法结果显示,与NC组比较,over- Ocstamp组E-cad蛋白表达下调,α-SMA、Rho GDIα、RhoA、ROCK、p-MYPT蛋白表达增加,F-actin表达增强,差异均有统计学意义( P<0.05);与si-NC组比较,si- Ocstamp组E-cad和α-SMA蛋白表达差异均无统计学意义( P>0.05);与over- Ocstamp组比较,over- Ocstamp+Fasudil组E-cad蛋白表达上调,α-SMA、Rho GDIα、RhoA、ROCK、p-MYPT蛋白表达下降,F-actin表达减弱,差异均有统计学意义( P<0.05)。结论:肺泡Ⅱ型上皮细胞过表达OC-STAMP,可能通过激活Rho GDIα/RhoA/ROCK信号通路,诱导肌动蛋白细胞骨架重塑,进而促进上皮-间质转化。

关键词：肌动蛋白上皮细胞-间充质细胞转换破骨细胞刺激性转膜蛋白矽肺

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Kindlin-2诱导胆囊癌细胞上皮间质转化促进其侵袭转移的实验研究

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中华外科杂志 2018年第8期56卷 617-622页

作者：陆旭周闯李仁锋叶健文翟文龙郑州大学第一附属医院肝胆胰外科河南省消化器官移植重点实验室 450052

目的探讨黏着斑蛋白Kindlin-2对胆囊癌细胞生物学行为的影响及相关分子机制.方法收集2012年9月至2013年5月在郑州大学第一附属医院肝胆胰外科接受手术切除的30例胆囊癌组织和癌旁组织标本.使用real-time PCR和免疫组化方法检测胆囊癌... 详细信息

目的探讨黏着斑蛋白Kindlin-2对胆囊癌细胞生物学行为的影响及相关分子机制.方法收集2012年9月至2013年5月在郑州大学第一附属医院肝胆胰外科接受手术切除的30例胆囊癌组织和癌旁组织标本.使用real-time PCR和免疫组化方法检测胆囊癌组织和癌旁组织标本中Kindlin-2表达水平;通过构建质粒和转染使胆囊癌细胞株GBC-SD、SGC-996过表达Kindlin-2,应用细胞黏附实验观察胆囊癌细胞与胞外基质的黏附能力,通过Transwell侵袭实验及细胞划痕实验观察胆囊癌细胞的侵袭迁移能力改变;采用免疫印迹法检测过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞上皮间质转化相关标记蛋白的变化.分别使用t检验和 χ2检验对计量资料和计数资料进行统计学分析.结果real-time PCR和免疫组化检测结果显示,Kindlin-2在人胆囊癌组织中表达水平高于癌旁组织（t=4.372,P=0.001;t=7.477,P=0.000）,肿瘤组织Kindlin-2表达水平与Nevin分期密切相关（χ2=5.932,P=0.035）;细胞黏附实验结果显示,过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞株GBC-SD、SGC-996与细胞外基质分子纤连蛋白Fibronectin的黏附能力较对照组增强（1. 66±0.03比1.07±0.22,t=2.710，P＝0.041;2.66±0.24比1.03±0.02,t=6.610，P＝0,020)；Transwell侵袭实验结果显示，过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞株GBC-SD、 SGS-996穿过Transwell小室基质的细胞数较对照组明显增多（116.1±13.9比54.7±8.4,t=3.781,P=0.0194;136.3±7.5比64.3±6.4,t=7.302, P=0.002) ；细胞划痕实验结果显示，过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞株GBC-SD12h和24h划痕修复率高于对照组[（42.9±2.2)%比（29.7±1.7)%,t=4.690,P=0.009;(65.0±2.4)％比（40.4±2.0)%,t=7.945,P=0.001]，过表达Kindlin-2后胆囊癌细胞株SGC-996l2h和24h划痕修复率高于对照组[（32.9±1.3 )％比（24.1±1.5)%,t=4.518,P=0.011;(51.3±1.1)％比（39.2±1.1)%,t=8.001,P=0.001〕；免疫印迹法检测结果显示，过表达 Kindlin-2后胆囊癌细胞间质化表型神经钙豁素、波形蛋白表达上调而上皮化表型上皮钙茹素表达降低。结论 Kindlin-2在胆囊癌组织中表达水平升高，且可通过诱导上皮细胞间质转化促进胆囊癌细胞与胞外基质豁附、侵袭迁移等恶性行为。

关键词：胆囊肿瘤上皮细胞-间充质细胞转换 Kindlin-2

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尼日菌素对人上皮性卵巢癌细胞的抑制作用及其机制研究

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肿瘤研究与临床 2018年第9期30卷 597-602,606页

作者：王稳田翔宇赵燕崔秀娟姚淑娟张师前山东省滕州市中心人民医院妇产科 277599 山东省滕州市中心人民医院医学影像中心 277599 山东省临沂市人民医院妇产科 276003 山东大学齐鲁医院妇产科济南250012

目的探讨尼日菌素对人上皮性卵巢癌（EOC）A2780和SKOV3细胞的抑制作用，以及尼日菌素抑制细胞迁移和侵袭可能的分子机制。方法用不同浓度（0．3125、0．625、1．25、2．5、5、10、20、40、80汕mol／L）尼日菌素分别作用于A2780和SKOV... 详细信息

目的探讨尼日菌素对人上皮性卵巢癌（EOC）A2780和SKOV3细胞的抑制作用，以及尼日菌素抑制细胞迁移和侵袭可能的分子机制。方法用不同浓度（0．3125、0．625、1．25、2．5、5、10、20、40、80汕mol／L）尼日菌素分别作用于A2780和SKOV3细胞，二甲基亚砜（DMSO）处理细胞作为对照组，通过CCK-8法检测不同浓度的尼日菌素对EOC细胞增殖的影响。将A2780和SKOV3细胞分别分为3组：尼日菌素5、10、20p,mol／L处理组，同时以DMSO处理作为对照组，通过Transwell实验分析尼日菌素对EOC细胞迁移及侵袭能力的影响。采用蛋白质印迹法检测经不同浓度尼日菌素处理后上皮细胞．间充质细胞转化（EMT）过程中上皮细胞标志物E-eadherin、间叶细胞标志物Vimentin以及相关转录因子Slug、Snail和Twist的表达，并分析Wnt-β-catenin信号通路相关蛋白Gsk-3β、pGsk-3β和β-catenin的表达变化情况。结果CCK-8实验结果发现，尼日菌素对A2780细胞[半抑制浓度（IC50）（16．19±0．26）／μmol／L]和SKOV3细胞[‰（11．87±0．21）μmol／L]具有细胞毒性作用（P〈0．05）。Transwell迁移实验结果显示，随着尼日菌素作用浓度（5、10、20μmol／L）的增加，穿膜的A2780和SKOV3细胞数较对照组减少[（121±9）、（92±7）、（59±5）个／高倍视野和（120．4±2．6）、（91．8±5．5）、（80．0±4．0）个／高倍视野，均P〈0．05]；Transwell侵袭实验显示，A2780和SKOV3细胞的侵袭能力同样随着尼日菌素作用浓度的增加而受到抑制，并呈浓度依赖性下降[（61．2±3．7）、（43．2±4．3）、（23．64-2．1）个／高倍视野和（85．2±7．0）、（65．2±4．6）、（45．6±4．4）个／高倍视野，均P〈0．05]。E-cadherin的表达随着尼日菌素作用浓度（5、10、20μmol／L）的增加而升高，而Vimentin、Slug、Snail、Twist、***3B、***的表达呈浓度依赖性减少（P〈0．05）。结论尼日菌素可能通过激活Wnt-β-catenin信号通路诱导EOC细胞发生EMT，从而促进EOC细胞的迁移和侵袭。

关键词：卵巢肿瘤尼日菌素上皮细胞-间充质细胞转换细胞迁移细胞侵袭

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