检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2025年第03期 825-834页

作者：李晨雨马琦王冰丹王菲冯霞张晓光李红霞马晶郝彦哲李淑英华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室华北理工大学公共卫生学院

本研究开发了一种高效且精准的伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）中和抗体效价检测新方法。通过同源重组和CRISPR-Cas9技术，将桡足纲绿色荧光蛋白（copepod Pontellina plumata Green Fluorescent Protein,copGFP）基因表达盒... 详细信息

本研究开发了一种高效且精准的伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）中和抗体效价检测新方法。通过同源重组和CRISPR-Cas9技术，将桡足纲绿色荧光蛋白（copepod Pontellina plumata Green Fluorescent Protein,copGFP）基因表达盒精确嵌入PRV基因组的UL40/41区域，经过多轮筛选与纯化，成功构建了重组病毒PRV-copGFP。生长特性对比实验表明，PRV-copGFP与野生型PRV-Bartha之间无显著差异（P>0.05）。借助CTL-ImmunoSpot?S6仪器计数表达copGFP的细胞数目，确定了最佳观测时间和最佳病毒滴度。该方法可精确计算中和抗体效价，并通过传统噬斑减少中和试验（Plaque reduction neutralization test, PRNT）进行验证。与传统方法相比，本检测方法将检测窗口缩短至10h，且通量显著提升。本方法在快速评估PRV中和抗体效价方面具有显著优势，可为PRV疫苗研发、疾病防控及相关研究提供有力的技术支持。

关键词：伪狂犬病病毒(PRV) 中和抗体效价桡足纲绿色荧光蛋白(copGFP) 重组病毒快速检测

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猪伪狂犬病毒gB、gC和gD蛋白多抗制备及交叉中和抗体效价测定

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中国预防兽医学报 2016年第1期38卷 73-76页

作者：刘飞童武梁超杨莘郑浩童光志中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

为研究猪伪狂犬病毒（PRv）主要免疫原性基因的抗原变异情况，本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔，对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价... 详细信息

为研究猪伪狂犬病毒（PRv）主要免疫原性基因的抗原变异情况，本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔，对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价的i／n,4定。结果显示，JS．2012和Bartha．K61株的gC蛋白和gD蛋白多抗对PRVJS．2012变异株、SC经典强毒株和Bartha．K61弱毒疫苗株的交叉中和效价均无显著差异；而两个病毒株的2B蛋白多抗对JS．2012和sc株的中和效价较低，分别为1：29．0～56．7和1：56．2～137．0，对Bartha—K61株以及其他毒力基因缺失弱毒疫苗株的中和效价较高，分别为1：75．0--490．0和1：198．6～986．9，差异显著，推测该结果可能与PRV毒力基因缺失有关。本研究为进一步鉴定PRV流行株的抗原变异奠定基础。

关键词：猪伪狂犬病毒多克隆抗体中和抗体效价

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基于补体依赖的水痘-带状疱疹病毒中和抗体效价检测方法的建立及应用

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中国生物制品学杂志 2023年第4期36卷 464-468页

作者：梁慧颖李剑楠刘洪涛夏立新张夫坤徐俊峰长春祈健生物制品有限公司研究室吉林长春130062

目的建立基于补体依赖的水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)中和抗体效价检测方法并进行应用,以提高传统噬斑减少中和试验检测VZV抗体效价的灵敏度。方法将抗原(水痘减毒活疫苗)、抗体(人VZV免疫球蛋白)以不同比例、不同... 详细信息

目的建立基于补体依赖的水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)中和抗体效价检测方法并进行应用,以提高传统噬斑减少中和试验检测VZV抗体效价的灵敏度。方法将抗原(水痘减毒活疫苗)、抗体(人VZV免疫球蛋白)以不同比例、不同时间混合孵育,中和后接种于6孔板培养的人二倍体细胞2BS株培养7~10 d,考马斯亮蓝染色计数噬斑数,通过Karber公式计算50%中和抗体滴度。在最佳中和条件下,通过改变补体(冻干豚鼠血清)添加量来探讨补体对中和试验灵敏度的影响,评估补体的最佳添加剂量。根据确定的中和试验参数,分别采用传统蚀斑法和补体依赖的蚀斑法对12份抗VZV小鼠血清和14份抗VZV人血清进行中和抗体效价检测。结果确定了检测方法的关键参数:VZV标准抗原使用滴度为500~1 000 PFU/mL,补体在抗原抗体中和体系中添加的比例为1∶10(v/v),中和条件为37℃中和1 h。补体依赖的蚀斑法和传统蚀斑法检测抗VZV小鼠血清抗体均为阳性,但传统蚀斑法检测抗体效价普遍偏低,接种2剂水痘减毒活疫苗的小鼠抗体水平显著高于接种1剂水痘减毒活疫苗的小鼠(t=0.45,P <0.05);两种方法检测抗VZV人血清抗体均为阳性。结论建立了补体依赖的VZV中和抗体效价检测方法,补体的添加显著提高了中和抗体检测的灵敏度。用该方法评价不同免疫策略的小鼠血清的中和抗体效价,得出2剂疫苗的免疫效果优于1剂。

关键词：水痘-带状疱疹病毒中和抗体效价补体中和试验

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DF-1细胞替代CEF细胞测定IBDV液抗原含量和血清中和抗体效价的研究

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黑龙江畜牧兽医 2021年第15期 90-92,97页

作者：李林沈佳史爱华赵蕾习硕姜北宇张建伟章振华北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100097

为了探讨DF-1细胞替代鸡胚成纤维(chicken embryo fibroblast,CEF)细胞作为培养基质用于测定鸡传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)液抗原含量及血清中和抗体效价的可行性,试验以DF-1细胞和CEF细胞作为培养基质测定... 详细信息

为了探讨DF-1细胞替代鸡胚成纤维(chicken embryo fibroblast,CEF)细胞作为培养基质用于测定鸡传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)液抗原含量及血清中和抗体效价的可行性,试验以DF-1细胞和CEF细胞作为培养基质测定了6批次IBDV BJQ902株病毒液抗原含量和用不同剂量ND、IB、IBD三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+BJQ902株)免疫SPF鸡血清和未免疫SPF鸡血清的中和抗体效价。结果表明:6批次病毒液病毒含量为1×10^(7.7)~1×10^(8.1)TCID50/0.1 mL,两种细胞对同一批次病毒样品的测定结果一致,重复测定无差异;IBDV阳性血清样品中和抗体效价为8~17 lb,两种细胞对同一血清样品中和抗体效价的检测结果无差异。说明DF-1细胞可以替代CEF细胞作为培养基质,用于IBDV液抗原含量及血清中和抗体效价的测定。

关键词： DF-1细胞 CEF细胞鸡传染性法氏囊病毒抗原含量中和抗体效价

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献浆员中呼吸道合胞病毒中和抗体效价分布及高效价血浆筛选

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中国生物制品学杂志 2016年第9期29卷 990-992页

作者：李曼管利东王威赵卉孙思才侯继锋中国食品药品检定研究院北京100050

目的分析献浆员中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)中和抗体效价分布情况,筛选高效价RSV中和抗体血浆,用于制备特异性RSV免疫球蛋白。方法对600份血浆进行倍比稀释,采用微量中和试验法对血浆中的RSV中和抗体效价进行检... 详细信息

目的分析献浆员中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)中和抗体效价分布情况,筛选高效价RSV中和抗体血浆,用于制备特异性RSV免疫球蛋白。方法对600份血浆进行倍比稀释,采用微量中和试验法对血浆中的RSV中和抗体效价进行检测,选择合适稀释度作为大规模血浆检测稀释点。以单一稀释度对2 976份血浆的RSV中和抗体进行检测,并对高效价混合血浆进行检测和评价。结果 600份血浆中,血浆RSV抗体效价≥1∶64占65.5%,≥1∶180占18.3%,≥1∶256占11.2%。以1∶200稀释度对2 976份血浆进行筛选,共筛选出463份血浆,占15.5%。463份混合血浆的RSV中和抗体效价达到普通混合血浆的4倍。结论经本方法筛选出高效价的血浆,用于制备特异性RSV免疫球蛋白是可行的。

关键词：呼吸道合胞病毒中和抗体效价血浆筛选

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柯萨奇B_(3m)病毒致低硒鼠心肌病变检出率与病毒中和抗体效价的关系

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中国地方病防治 1999年第4期14卷 200-202页

作者：张邻杰周令望刘红高彦辉刘阳迟月明修英霞曾宪惠张昕宇哈尔滨医科大学第二医院哈尔滨医科大学克山病研究所哈尔滨市第九医院

5周龄BALB/C雄性鼠经低硒、常硒合成饲料喂养5周后,腹腔注射CoxsackieB_(3m)病毒(CVB_(3m))1000TCD_(50)0.1ml,对照组注射1640营养液0.1ml,7天后处死,取心脏常规切片,HE染色光镜下检查心肌病变。取血清测定CVB_(3m)病毒中和抗体效价。... 详细信息

5周龄BALB/C雄性鼠经低硒、常硒合成饲料喂养5周后,腹腔注射CoxsackieB_(3m)病毒(CVB_(3m))1000TCD_(50)0.1ml,对照组注射1640营养液0.1ml,7天后处死,取心脏常规切片,HE染色光镜下检查心肌病变。取血清测定CVB_(3m)病毒中和抗体效价。结果表明:低硒鼠感染CVB_(3m)病毒组(Ⅰ组)及常硒鼠感染CVB_(3m)病毒组(Ⅱ组)对照组(Ⅲ组),心肌病变检出率分别为75％、35％、,Ⅲ组末见病变。x^2检验(Ⅰ组)病变检出率显著高于Ⅱ组(P<0.05)。血清中CVB_(3m)病毒中和抗体效价Ⅰ组为1:256,Ⅱ组为1:1024,Ⅰ组中和抗价显著低于Ⅱ组。提示Ⅰ组心脏病变检出率显著高于Ⅱ组,且病变重。除其他因素外,低硒鼠感染病毒后体内产生病毒中和抗体效价降低,导致Ⅰ组鼠体内清除病毒能力下降,有一定的关系。

关键词：柯萨奇B3m病毒低硒中和抗体效价心肌病变

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微量细胞病变法检测人巨细胞病毒中和抗体效价的方法建立

微量细胞病变法检测人巨细胞病毒中和抗体效价的方法建立

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中国输血协会第七届输血大会

作者：吴燕张佩周兰贞张运佳吴开永丁玉江郭采平张战深圳市卫光生物制品股份有限公司

目的建立人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)中和抗体效价微量细胞病变检测方法。方法建立检测HCMV中和抗体效价的微量细胞病变法,确定该方法细胞密度、病毒剂量和观察时间,采用Karber法计算样品中和效价,并对该方法进行线性、... 详细信息

目的建立人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)中和抗体效价微量细胞病变检测方法。方法建立检测HCMV中和抗体效价的微量细胞病变法,确定该方法细胞密度、病毒剂量和观察时间,采用Karber法计算样品中和效价,并对该方法进行线性、准确性、精密度和耐用性方法学验证。结果感染HCMV的MRC-5细胞出现典型细胞病

关键词：中和抗体效价人巨细胞病毒细胞病变法方法建立

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一种高通量快速检测汉滩病毒中和抗体效价的方法

一种高通量快速检测汉滩病毒中和抗体效价的方法

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作者：张芳琳马宏炜雷迎峰张亮程林峰陈何嵩石静琦韩佩君叶伟吴兴安徐志凯 710032 陕西省西安市长乐西路169号

本发明公开了一种高通量快速检测汉滩病毒中和抗体效价的方法。本发明的特征在于利用In‑cell Western(ICW)法简便、直观地检测被HTNV感染的细胞。该方法检测灵敏度高(可检测5g的目的蛋白)、周期短(72小时)、结果判读客观、可重复性好、... 详细信息

标准号: CN106706582A

本发明公开了一种高通量快速检测汉滩病毒中和抗体效价的方法。本发明的特征在于利用In‑cell Western(ICW)法简便、直观地检测被HTNV感染的细胞。该方法检测灵敏度高(可检测5g的目的蛋白)、周期短(72小时)、结果判读客观、可重复性好、高通量、方法可标准化，便于实验室间推广，特别可针对无细胞病变效应病毒检测其感染力。本发明同时公布了上述方法在HTNV感染力测定(TCID₅₀)、HTNV中和抗体效价测定、抗HTNV分子筛选和鉴定、人HTNV疫苗免疫保护性评价等方面的应用。

关键词：中和抗体效价高通量检测灵敏度病变效应病毒检测分子筛选汉滩病毒结果判读可重复性快速检测目的蛋白疫苗免疫可检测无细胞标准化直观细胞感染检测应用

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一种高通量快速检测汉滩病毒中和抗体效价的方法

一种高通量快速检测汉滩病毒中和抗体效价的方法

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作者：张芳琳马宏炜雷迎峰张亮程林峰陈何嵩石静琦韩佩君叶伟吴兴安徐志凯 710032 陕西省西安市长乐西路169号

标准号: CN106706582B

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一种rVSVΔG-HV在检测血清中和抗体效价中的应用

一种rVSVΔG-HV在检测血清中和抗体效价中的应用

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作者：张芳琳张惠叶伟刘赫程林峰党亚美张亮柏银兰 710032 陕西省西安市长乐西路169号

本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种rVSVΔG‑HV在检测血清中和抗体效价中的应用，rVSVΔG‑HV可以检测血清中和抗体效价，且HFRS患者恢复期血清对HTNV与rVSVΔG‑HV的中和能力相似，rVSVΔG‑HV可以代替HTNV检测血清中的中和抗体效价... 详细信息

标准号: CN114966058A

本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种rVSVΔG‑HV在检测血清中和抗体效价中的应用，rVSVΔG‑HV可以检测血清中和抗体效价，且HFRS患者恢复期血清对HTNV与rVSVΔG‑HV的中和能力相似，rVSVΔG‑HV可以代替HTNV检测血清中的中和抗体效价。本发明中的rVSVΔG‑HV可以代替HTNV检测血清中的中和抗体效价。

关键词：血清血清中和抗体中和抗体效价检测效价生物技术领域中和能力应用

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