检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：刘婷婷上海交通大学

学位级别：硕士

肝脏是机体应激反应非常显著的器官之一,肝脏疾病发生与心理压力有密切的关系,然而运用模式生物学前瞻性地讨论心理应激,尤其是良性心理应激对肝脏病理过程的影响及作用机制的研究仍较少。本课题中,我们首次将丰富生存环境（Enriched en... 详细信息

肝脏是机体应激反应非常显著的器官之一,肝脏疾病发生与心理压力有密切的关系,然而运用模式生物学前瞻性地讨论心理应激,尤其是良性心理应激对肝脏病理过程的影响及作用机制的研究仍较少。本课题中,我们首次将丰富生存环境（Enriched environment,EE）诱导的良性心理应激分别与肝脏大部分切除后肝再生和CCl4引起的肝纤维化动物模型相结合,以期探讨良性心理应激对肝再生和肝纤维化的影响。课题组前期研究发现EE对外周自然杀伤（Natural killer,NK）细胞的数量以及增殖、成熟等功能具有重要的调控作用。由于NK细胞大量存在于肝脏中,并在肝再生和肝纤维化中发挥着重要的作用,本课题将聚焦于NK细胞,进一步深入探讨EE对肝再生和肝纤维化调控作用的潜在机制。第一部分我们探讨EE对肝再生的影响,结果发现EE显著促进小鼠肝脏的再生。对NK细胞的分析发现EE显著增加了再生肝脏的NK细胞比例,而敲除NK细胞后EE的促肝再生作用消失。进一步细胞因子芯片分析发现,EE引起的肝内差异表达细胞因子富集到IL-22信号通路,功能阻断IL-22通路后同样能消除EE促肝再生的作用。鉴于肝内IL-22主要由NK细胞分泌,提示EE通过上调肝内NK细胞/IL-22通路促进小鼠肝再生。第二部分我们探讨EE对肝纤维化的影响,结果发现EE能显著抑制小鼠的肝纤维化进程。机制研究发现EE显著增加肝内NK细胞比例,但随着肝纤维化过程其逐渐被消耗,进一步对其亚型分析发现EE促进了传统NK（conventional NK）细胞的终末成熟,并降低了组织驻留NK（tissue-resident NK）细胞占NK细胞的比例,提示EE可能通过NK细胞抑制小鼠肝纤维化,并且不同亚型NK细胞的作用机制可能不同。同时,我们还发现EE上调了肝纤维化小鼠肝内IL-22和受体的表达。综上,我们首次发现EE可能通过NK细胞/IL-22通路调控肝脏病理过程,为研究良性心理应激在肝病中的作用提供新证据,并为肝病的防控提供了全新的思路。

关键词：丰富生存环境肝再生肝纤维化 NK细胞 IL-22通路

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丰富生存环境通过调节IL-22信号通路抑制小鼠肝纤维化

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肝脏 2019年第5期24卷 553-556,587页

作者：刘婷婷张伟李泽方蒙姿宏屠红甘愉上海交通大学医学院附属仁济医院、上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室 200032 复旦大学上海医学院

目的旨在观察丰富生存环境(Enriched environment,EE)诱导的良性心理应激对小鼠肝纤维化及肝内IL-22信号通路的影响,探讨其对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝纤维化的作用及可能的机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为标准环境... 详细信息

目的旨在观察丰富生存环境(Enriched environment,EE)诱导的良性心理应激对小鼠肝纤维化及肝内IL-22信号通路的影响,探讨其对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝纤维化的作用及可能的机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为标准环境(Standard environment,SE)组、EE组,分别饲养3周后行行为学实验检测小鼠焦虑水平,之后采用腹腔注射四氯化碳(CCl4)方式建立肝纤维化模型,每周2次,并记录小鼠一般情况,于第6周最后一次注射CCl4后1d和5d处死小鼠,分别行ALT血清学检测,石蜡切片HE染色、Sirius Red染色,ELISA法检测肝内IL-22的表达差异,real-time PCR法检测肝内IL-22受体IL-22RA1和IL-10RA2的表达差异。结果与SE相比,EE明显降低了小鼠焦虑水平(P<0.05);EE组小鼠CCl4注射前体重轻于SE组,CCl4注射后期体重重于SE组(P<0.05);血清ALT水平明显降低(P<0.001);组织切片示EE组细胞坏死程度和细胞排列紊乱程度较SE组减轻,并且肝脏胶原纤维沉积程度显著减轻(1d,P<0.001;5d,P<0.01);ELISA结果示EE组IL-22表达量显著增加(P<0.01),RT-PCR结果示IL-22RA1和IL-10RA2表达量均增多(分别P<0.05、P<0.01)。结论EE可能通过激活肝内IL-22信号通路抑制CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化进程,本研究支持了良性心理应激对肝纤维化的发生发展具有重要的调控作用。

关键词：丰富生存环境良性心理应激肝纤维化 IL-22信号通路

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丰富生存环境对小鼠NK细胞增殖和终末成熟的影响

丰富生存环境对小鼠NK细胞增殖和终末成熟的影响

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作者：蒙姿宏上海交通大学

学位级别：硕士

心理应激能作用于机体的免疫系统,进而对包括肿瘤在内的多种疾病过程产生重要的影响。然而,对于心理应激影响免疫系统的作用机制,目前仍了解甚少。丰富生存环境（Enriched Environment,EE）是一种可靠的诱导良性心理应激的实验动物模型... 详细信息

心理应激能作用于机体的免疫系统,进而对包括肿瘤在内的多种疾病过程产生重要的影响。然而,对于心理应激影响免疫系统的作用机制,目前仍了解甚少。丰富生存环境（Enriched Environment,EE）是一种可靠的诱导良性心理应激的实验动物模型,探讨EE对免疫效应细胞的调控作用有助于进一步阐明心理应激对免疫系统及相关疾病的影响及机制。近年来的研究发现EE能显著抑制外周肿瘤的生长,而我们课题组的前期研究则证实自然杀伤（Natural Killer,NK）细胞作为抗肿瘤免疫中重要的效应细胞,在EE抑制肿瘤中具有至关重要的作用。然而,对于生理及病理状态下EE对NK细胞的影响及机制尚缺乏研究。由于NK细胞功能（包括抗肿瘤活性）有赖于其自身的终末成熟过程,本课题将在前期实验的基础上,分别探讨正常及荷瘤小鼠中,EE对不同淋巴器官及外周血NK细胞终末成熟过程以及细胞增殖功能的影响。通过流式细胞检测骨髓、外周血、脾脏和淋巴结中未成熟（CD27+CD11b-）、中等成熟（CD27+CD11b+）和成熟（CD27-CD11b+）NK细胞的比例发现,无论是正常小鼠还是荷瘤小鼠,EE均显著上调所有检测组织中成熟NK细胞的比例。与此一致,EE小鼠脾脏总NK细胞中未成熟标志分子Cxcr3的表达水平显著降低,提示EE能促进NK细胞在中枢和外周淋巴器官的终末成熟。同时,体内Ed U掺入实验发现EE能显著提高正常小鼠骨髓中成熟早期NK细胞的增殖水平。然而在荷瘤小鼠中,EE则特异地促进了脾脏中成熟早期NK细胞的增殖。进一步的研究发现,小鼠脾脏切除能消除EE对肿瘤的抑制作用,提示脾脏NK细胞的增殖和终末成熟在EE抑瘤中的重要作用。为了探讨EE对脾脏NK细胞的作用机制,我们对EE及常规饲养的荷瘤小鼠脾脏进行了高通量细胞因子抗体芯片检测,并筛选出28个差异表达的细胞因子,其中泌乳素表达改变最为显著,上调达到3.15倍。KEGG富集分析显示差异细胞因子主要涉及IL-17信号通路,而泌乳素和IL-17信号通路都对NK细胞具有重要的影响。综上所述,本课题证实,EE作为一种良性心理应激,对NK细胞增殖和终末成熟具有重要的促进作用。尤其在荷瘤状态下,EE促进脾脏NK细胞的增殖和成熟在EE抑制肿瘤中具有重要作用,其机制可能与上调泌乳素水平和调节IL-17信号通路有关。

关键词：丰富生存环境 NK细胞增殖终末成熟抗肿瘤免疫

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丰富生存环境通过交感神经增强小鼠NK细胞抗肿瘤免疫的作用及机制研究

丰富生存环境通过交感神经增强小鼠NK细胞抗肿瘤免疫的作用及机制...

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第二届中国东西部抗癌痛国际会议暨神经感知与肿瘤调控国际研讨会

作者：甘愉宋艳芳王晴蒙姿宏李国华姚明顾键人屠红上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室

精神心理因素对恶性肿瘤的发生发展具有重要的调控作用,然而其机制目前则研究较少。丰富生存环境(enriched environment,EE)相较于标准饲养条件,提供了更大的空间以及更多感官刺激和社交机会,被证实能诱导实验小鼠的良性心理应激。近年... 详细信息

精神心理因素对恶性肿瘤的发生发展具有重要的调控作用,然而其机制目前则研究较少。丰富生存环境(enriched environment,EE)相较于标准饲养条件,提供了更大的空间以及更多感官刺激和社交机会,被证实能诱导实验小鼠的良性心理应激。近年来,EE 被逐渐用于肿瘤研究领域中,我们与国外的研究小组均证实了EE 能显著抑制肿瘤的生长。

关键词：丰富生存环境 NK细胞抗肿瘤免疫交感神经

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丰富生存环境对肿瘤的抑制作用及其相关基因通路分析

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遵义医学院学报 2015年第2期38卷 111-116,120页

作者：甘愉李国华吴育峰蔡小锦姚明屠红上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室上海200032

目的探讨丰富生存环境(EE)对肿瘤抑制作用及可能机制。方法 EE饲养环境为12只以上小鼠置大空间笼饲养,笼内设有用于小鼠探索、学习和运动的玩具。小鼠置EE环境饲养3周后,皮下接种B16F10恶性黑色素瘤细胞或Panc02胰腺癌细胞,置原环境继... 详细信息

目的探讨丰富生存环境(EE)对肿瘤抑制作用及可能机制。方法 EE饲养环境为12只以上小鼠置大空间笼饲养,笼内设有用于小鼠探索、学习和运动的玩具。小鼠置EE环境饲养3周后,皮下接种B16F10恶性黑色素瘤细胞或Panc02胰腺癌细胞,置原环境继续饲养,比较EE组和常规环境(SE)饲养组小鼠的成瘤率和瘤重。APCMin/+基因突变小鼠3周龄起分别置EE和SE环境饲养,20周龄时处死小鼠,比较两组小鼠小肠腺瘤数量。实验还采用Agilent小鼠全基因组44K表达谱芯片对Panc02胰腺癌细胞移植瘤组织进行基因表达差异分析。结果与SE饲养比较,EE饲养对B16F10恶性黑色素瘤和Panc02胰腺癌皮下瘤的生长均有显著的抑制作用,抑瘤率分别为43.0%(P<0.05)和58.2%(P<0.01);EE对APCMin/+小鼠肠道腺瘤的生成也具有明显的抑制作用(P<0.05)。Panc02胰腺癌细胞移植瘤表达谱芯片结果的KEGG分析显示,有2倍以上表达差异的基因通路富集于细胞粘附和线粒体功能,并与神经退行性疾病和心脏疾病相关基因有交集。结论 EE对肿瘤的发生发展具有广泛的抑制作用,其对肿瘤细胞内线粒体功能的影响及其生物学意义值得深入研究。

关键词：恶性肿瘤丰富生存环境基因表达谱

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丰富生存环境对小鼠肿瘤的抑制作用及其整合生物学研究

丰富生存环境对小鼠肿瘤的抑制作用及其整合生物学研究

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作者：李国华上海交通大学

学位级别：博士

癌症是一种系统性疾病。癌症虽然表现为局部组织细胞的异常生长,但机体的神经、免疫和内分泌系统都伴有相应的改变,并对癌症的发生和发展起着重要的调控作用。环境因素对肿瘤的发生发展的影响传统上局限于理化研究。作为一种良性应激,... 详细信息

癌症是一种系统性疾病。癌症虽然表现为局部组织细胞的异常生长,但机体的神经、免疫和内分泌系统都伴有相应的改变,并对癌症的发生和发展起着重要的调控作用。环境因素对肿瘤的发生发展的影响传统上局限于理化研究。作为一种良性应激,丰富生存环境(Enriched Environment,EE)被广泛用来研究环境对脑功能的影响,包括对正常动物模型以及各种中枢神经系统损伤模型的研究。关于丰富环境对肿瘤发生发展影响的研究,国内外鲜有报道。为此,本课题拟开展以下两方面的开拓性工作:1.建立丰富生存环境饲养条件下的小鼠移植瘤模型,观察精神行为因素对小鼠肿瘤生长的影响作用;2.在上述动物模型基础上,通过整合生物学研究,探索可能与丰富生存环境抑瘤作用相关的通路及机制。第一部分丰富生存环境肿瘤小鼠模型的建立目的:建立丰富生存环境饲养条件下的小鼠移植瘤模型,观察精神行为因素对小鼠肿瘤生长的影响作用。方法:建立小鼠丰富生存环境及标准饲养环境。EE:在60cm×40cm×20 cm的透明大鼠笼内,铺覆垫料,设置小屋、斜梯、隧道、塑料跑轮、躲避处、棉花、各种形状及颜色的玩具,在小鼠浴室和厕所里分别撒放浴沙和鼠沙。每笼安置12只小鼠,每2～3d清洁并更换笼具及玩具。每周对小鼠进行称重并记录。小鼠标准饲养环境:于30cm×18 cm×25 cm的小鼠笼内,每笼4只小鼠,笼底铺设垫料。环境温度均保持21～23℃,维持12 h照明、12 h黑暗的光照周期,实验动物自由进食、饮水。将C57BL/6雄性小鼠分别置于丰富生存环境和标准饲养环境下饲养3周,皮下接种Panc02胰腺癌、B16F10黑色素瘤和Lewis肺癌细胞,继续在原有环境饲养3-5周,肿瘤生长曲线。动物实验终止时,称量瘤重,计算抑瘤率,并保存小鼠血清、瘤体及各器官组织样本进行后续相关实验。选择C57BL/6雌性小鼠分别建立Panc02胰腺癌和B16F10黑色素瘤模型。选择BALB/c雄性小鼠建立CT-26及CT-26sci结肠癌模型。结果:在C57BL/6雄性小鼠皮下移植瘤模型中,EE对Panc02胰腺癌、B16F10黑色素瘤和Lewis肺癌的抑瘤率分别为58.2%(EE组0.23±0.12g v.s.对照组0.55±0.14g,P<0.001)、43.1%(EE组2.01±2.11g v.s.对照组3.53±2.24g,P=0.05)及36.5%(EE组2.51±0.25g v.s.对照组3.95±0.26g,P<0.01)。免疫组化证实EE小鼠瘤体中PCNA表达较对照小鼠瘤体细胞显著下降,进一步提示了EE对肿瘤细胞的增殖具有抑制作用。在C57BL/6雌性小鼠的Panc02胰腺癌模型中,EE组肿瘤大小与对照组无明显差异(EE组0.94±0.21 vs.对照组0.96±0.23g,P>0.05)。同样,在B16F10黑色素瘤模型中,EE对C57BL/6雌性小鼠的抑瘤作用也无显著意义(EE组1.28±0.27g vs.对照组1.53±0.25g,P=0.497),表明EE对肿瘤的抑制作用具有性别特异性。在BALB/c雄性小鼠的CT26结肠癌模型,丰富环境组小鼠肿瘤重量与对照无显著差异(EE组3.67±1.14g vs.对照组3.16±1.02g,P=0.382)。同样,在BALB/c雄性小鼠的CT26-sci结肠癌模型中,丰富环境组小鼠肿瘤重量与对照组也无显著差异(EE组4.11±0.92g vs.对照组3.40±1.19g,P=0.105),表明EE的抑瘤作用受小鼠品系的影响。为了探索运动、社交等因素是否为EE抑瘤的决定因素,我们设立了单纯运动组(常规饲养笼中加跑轮运动)、单纯社交组(12只小鼠置于没有玩具和运动器材的大笼中饲养)以及社交缺乏组(即2只小鼠置有玩具及运动器材的大笼中饲养),结果显示,社交缺乏组、单纯社交组及单纯运动组与对照组相比,抑瘤率分别为15.5%、17.4%和14.8%。表明EE环境对肿瘤的抑制作用是活动和社交综合作用的结果。结论:丰富生存环境对雄性C57BL/6小鼠移植性肿瘤具有广泛且显著的抑制作用,该作用可能具有性别及种系差异。第二部分丰富生存环境对Panc02胰腺癌生长影响的基因表达谱芯片及定量蛋白质谱分析胰腺癌的发生发展是多信号通路、多机制作用的结果。丰富生存环境可以显著抑制小鼠皮下抑制瘤的生长,其中以对Panc02胰腺癌皮下移植瘤的作用最为显著。为揭示其抑瘤机制,我们对肿瘤细胞进行基因组学及蛋白组学分析。对Panc02胰腺癌瘤体组织的基因水平和蛋白水平的深入研究,有助于阐明丰富生存环境与胰腺癌发生发展的关系,可能对胰腺癌防治提供思路和线索。目的:采用小鼠全基因组表达谱及定量蛋白质谱检测对Panc02胰腺癌瘤体组织进行高通量基因表达及蛋白水平分析,用生物信息学方法探索丰富生存环境

关键词：丰富生存环境小鼠肿瘤基因表达谱蛋白质组学

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“形神共养”对大鼠认知功能、突触素、微管相关蛋白-2及锥体细胞的影响

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中国康复医学杂志 2017年第4期32卷 384-390页

作者：郝赤子王娟廖维靖武汉大学中南医院康复医学科武汉430071 湖北省中西医结合医院康复医学科

目的:探讨"形神共养"的丰富生存环境对正常大鼠认知功能、突触素(SYN)、微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达及大脑m PFC区锥体细胞的影响。方法:健康雄性SD大鼠48只,随机分为"形养"组(EE1),"神养"组(EE2),"... 详细信息

目的:探讨"形神共养"的丰富生存环境对正常大鼠认知功能、突触素(SYN)、微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达及大脑m PFC区锥体细胞的影响。方法:健康雄性SD大鼠48只,随机分为"形养"组(EE1),"神养"组(EE2),"形神共养"组(EE3)和标准养组(SE),每组12只,分别进行形养、神养、形神共养的丰富生存环境训练及标准养。训练结束后进行水迷宫实验,水迷宫结束后用免疫组织化学方法检测海马区SYN、MAP-2的表达;用Golgi-Cox染色观察大脑内侧前额叶区锥体细胞树突的变化。结果:水迷宫测试的第5天,EE3组大鼠的潜伏期明显短于SE组(P<0.05);4组大鼠在目标象限停留的时间无明显差异(P>0.05)。SE组的SYN表达最低,而EE1组和EE3组之间的表达无明显差异且均高于EE2组。SE组的MAP-2表达最低,而EE3组的表达高于EE1组和EE2组。m PFC区锥体细胞树突交点总数4组组间比较差异无显著性意义(P>0.05)。棘密度EE3组最大,其次是EE1组,SE组与EE2组之间无区别且较EE1和EE3组低。结论:"形神共养"的丰富生存环境可提高正常大鼠的认知功能,并促进SYN及MAP-2免疫表达及锥体细胞树突生长。

关键词：形神共养丰富生存环境突触素微管相关蛋白-2 高尔基染色

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丰富环境对脑缺血大鼠行为学恢复及神经丝蛋白、突触素表达的影响

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中国康复医学杂志 2017年第7期32卷 763-767页

作者：薛丽廖维靖蔺俊斌章鑫陈修平徐换武汉大学中南医院康复医学科武汉大学脑血管病研究中心武汉430071 武汉大学中南医院康复医学科

目的:研究"形神共养"对脑缺血大鼠行为学恢复及神经丝蛋白(NF)、突触素(SYN)表达的影响。方法:制作线栓法大鼠脑缺血模型(MCAO),随机分为"形养"组、"神养"组、"形神共养"组、"标准养"... 详细信息

目的:研究"形神共养"对脑缺血大鼠行为学恢复及神经丝蛋白(NF)、突触素(SYN)表达的影响。方法:制作线栓法大鼠脑缺血模型(MCAO),随机分为"形养"组、"神养"组、"形神共养"组、"标准养"组及假手术组。术后第3、10、17、24、30天进行平衡木行走试验及倾斜板试验,干预结束后进行免疫组织化学检测大鼠梗死周围皮质及海马区NF、SYN的表达。结果:平衡木行走试验和倾斜板试验:三个治疗组大鼠评分均优于"标准养"组(P<0.05)。免疫组化检测:"形养"、"神养"、"形神共养"组大鼠梗死周围皮质及海马区NF、SYN表达均高于标准养组,"形神共养"组表达高于其他两组(P<0.05)。结论:"形神共养"的丰富生存环境可促进脑缺血大鼠行为学恢复,其机制可能与促进NF及SYN的表达有关。

关键词：形神共养丰富生存环境脑缺血再灌注神经丝蛋白突触素

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丰富生存环境对大鼠大脑海马老年性改变作用的研究

丰富生存环境对大鼠大脑海马老年性改变作用的研究

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作者：师晓燕重庆医科大学

学位级别：博士

第一部分雌性大鼠大脑白质及其内有髓神经纤维老年改变侧别差异的研究目的:运用新的体视学方法探讨雌性大鼠左、右大脑半球白质及其内有髓神经纤维是否存在显著性侧别差异及两侧大脑半球白质及其内有髓神经纤维的老年性改变是否一致,以... 详细信息

第一部分雌性大鼠大脑白质及其内有髓神经纤维老年改变侧别差异的研究目的:运用新的体视学方法探讨雌性大鼠左、右大脑半球白质及其内有髓神经纤维是否存在显著性侧别差异及两侧大脑半球白质及其内有髓神经纤维的老年性改变是否一致,以期进一步认识雌性大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维的老年改变。方法:雌性Long-Evans大鼠,年轻组(6月龄) 5只,中老年组(18月龄)5只,老年组(28月龄)5只。运用透射电子显微镜和体视学方法分别对年轻组、中老年组和老年组雌性大鼠左、右大脑半球白质体积及白质内有髓神经纤维总长度、总体积和平均直径进行定量研究。结果:Long-Evans雌性大鼠年轻组、中老年组及老年组左、右大脑半球白质体积及白质内有髓神经纤维总长度、总体积及平均直径均不存在显著性差异。与年轻组和中老年组相比,老年组雌性大鼠左半球白质有髓神经纤维总长度均显著性下降,右半球白质有髓神经纤维总长度虽然各自下降34.5%和42.8%,但均不具有统计学显著意义。结论:我们的研究结果表明,正常年轻、中老年和老年Long-Evans雌性大鼠左、右大脑半球的白质体积及其内有髓神经纤维均不存在显著性侧别差异。Long-Evans雌性大鼠左、右大脑半球白质内有髓神经纤维的老年性改变不完全相同,与年轻组和中老年组相比,老年组雌性大鼠左侧半球白质有髓神经纤维总长度均显著性下降,但是右侧半球白质有髓神经纤维总长度并没有显著性下降。第二部分短期丰富生存环境对老年雌性大鼠海马及海马内有髓神经纤维的影响目的:探讨短期丰富生存环境干预对老年雌性大鼠海马及海马内有髓神经纤维的影响。方法:将20只24月龄的雌性SD大鼠随机分为丰富生存环境组和对照组各10只,对丰富生存环境组的动物给予4个月短期丰富生存环境干预,对照组于普通标准环境下饲养;然后采用Morris水迷宫对大鼠的空间学习能力进行测试;每组各随机选取5只,运用透射电子显微镜和新的体视学方法分别对大鼠大脑海马及其内有髓神经纤维进行定量研究。结果:短期丰富生存环境组老年雌性大鼠与空白对照组相比,其空间学习能力不存在显著差异;短期丰富生存环境组与空白对照组相比,大脑海马总体积、海马内有髓神经纤维总长度、海马内有髓神经纤维总体积和海马内有髓神经纤维直径均无显著改变。结论:4个月短期丰富生存环境的干预对于28月龄雌性大鼠空间记忆和学习能力、海马内有髓神经纤维均没有产生显著性影响。本研究结果为进一步研究丰富生存环境手段干预海马衰老进程提供了科学依据。第三部分丰富生存环境对中老年雌性大鼠海马神经元数量和突触数量的影响目的:研究丰富生存环境对老年大鼠空间记忆能力的作用,并首次运用无偏体视学方法研究丰富生存环境对中老年雌性大鼠海马神经元和突触数量老年性改变的影响。方法:24只14月龄SD中老年雌性大鼠,随机分为丰富生存环境干预组(12只)和标准环境组(12只)。饲养4个月后,用Morris水迷宫进行连续5天的空间记忆能力的测试。行为学测试后,从每组大鼠中随机抽取5只大鼠进行体视学研究。随机抽取一侧大脑半球进行石蜡包埋后切取14μm厚的冠状连续切片。根据均匀系统随机抽样的原则,在包含海马的连续切片中均匀随机地抽取切片。将抽取的一组切片进行神经元的组织化学染色,以计数神经元的数目;将抽取的另外一组切片进行突触的免疫组织化学染色,以计数突触的数目。在体视学设备下,计数大鼠海马CA1和DG的神经元数目和大鼠海马CA1、CA1放射层(CA1sr)、齿状回内分子层(DGiml)和齿状回外分子层(DGoml)的突触数目。结果:中老年雌性丰富生存环境组大鼠的寻台时间明显短于标准环境组大鼠(p<0.05)。与对照组相比,中老年雌性丰富生存环境组大鼠大脑海马内CA1和DG的神经元数目并没有显著性增加,但是大鼠海马CA1、CA1sr、DGiml和DGoml内的突触数目分别显著性增加78.8%、90.8%、50.3%、106.0%。结论:短期丰富生存环境干预可以明显改善中老年雌性大鼠空间记忆能力,丰富生存环境组大鼠海马CA1、CA1sr、DGiml和DGoml的突触数目显著性增加。丰富生存环境干预所致的海马突触数量的改变可能是丰富生存环境干预改善老年大鼠空间记忆能力的重要结构基础之一。

关键词：有髓神经纤维白质侧别差异老年改变雌性大鼠体视学空间记忆和学习能力海马有髓神经纤维老年雌性大鼠丰富生存环境 Morris水迷宫体视学神经元突触海马老年雌性大鼠丰富生存环境体视学

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丰富生存环境对中老年雌性大鼠大脑有髓神经纤维及少突胶质细胞的作用

丰富生存环境对中老年雌性大鼠大脑有髓神经纤维及少突胶质细胞的...

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作者：赵圆宇重庆医科大学

学位级别：博士

目的:研究丰富生存环境对中老年雌性大鼠空间学习、记忆能力的作用,并运用无偏体视学方法研究短期丰富生存环境是否能延缓大脑胼胝体以及胼胝体内有髓神经纤维老年性改变的进程。方法:将中老年（14月龄）雌性SD大鼠24只,随机分为丰富生... 详细信息

目的:研究丰富生存环境对中老年雌性大鼠空间学习、记忆能力的作用,并运用无偏体视学方法研究短期丰富生存环境是否能延缓大脑胼胝体以及胼胝体内有髓神经纤维老年性改变的进程。方法:将中老年（14月龄）雌性SD大鼠24只,随机分为丰富生存环境干预组（12只）和标准环境组（12只）,饲养时间为4个月。干预结束后,用Morris水迷宫对两组大鼠空间学习、记忆能力进行连续5天的测试,分别记录两组大鼠的寻台时间。行为学测试后,分别从两组大鼠随机抽选5只大鼠,将其大脑制成1 mm厚的冠状连续脑片,用卡瓦列里原理计算每只大鼠胼胝体的体积。每只大鼠按等距随机的原则抽选4个脑片,从抽取的脑片中随机抽取4个胼胝体组织块。将抽选的组织块运用isector包埋法制作电镜切片,每张切片随机抽选4个视野,每个视野间无任何重叠,放大至6 000倍拍照,运用体视学方法测量并计算大鼠大脑胼胝体内有髓神经纤维和髓鞘的总体积、有髓神经纤维的总长度和平均直径。结果:丰富生存环境组大鼠隐藏平台实验的寻台时间显著短于标准环境组大鼠（p = 0.001）,显露平台实验的寻台时间无显著性差异（p = 0.069）。与标准环境组大鼠相比,丰富生存环境大鼠大脑胼胝体总体积显著性增加34.5%（p = 0.017）,胼胝体内有髓神经纤维和髓鞘的总体积分别显著性增加60.8%（p = 0.007）和57.7%（p = 0.008）,有髓神经纤维总长度显著性增加82.5%（p = 0.016）,而有髓神经纤维的平均直径显著性下降9.3%（p = 0.045）。丰富生存环境组大鼠大脑胼胝体内有髓神经纤维的增加以直径小于1μm,尤其是0.4 ~ 0.6μm的细小直径有髓神经纤维增加为主。结论:短期丰富生存环境干预能明显改善中老年雌性大鼠空间、学习记忆能力。本实验首次运用无偏体视学方法研究了短期丰富生存环境对中老年雌性大鼠胼胝体以及胼胝体内有髓神经纤维的作用。我们发现:短期丰富生存环境能显著增加大鼠大脑胼胝体总体积、胼胝体内有髓神经纤维和髓鞘的总体积、胼胝体内有髓神经纤维的总长度。短期丰富生存环境干预所致的胼胝体内有髓神经纤维的改变可能是短期丰富生存环境干预对中老年大鼠空间、学习记忆能力改善的重要结构基础之一。这些结果为进一步寻找延缓大脑衰老进程的手段提供了重要的科学依据。目的:研究丰富生存环境对中老年雌性大鼠空间学习、记忆能力的作用,并运用无偏体视学方法研究短期丰富生存环境对中老年大脑胼胝体内成熟型少突胶质细胞的作用。方法:实验动物分组与行为学测试同第一部分。行为学测试后,分别从两组大鼠随机抽选5只大鼠,将其大脑制成2 mm厚的冠状连续脑片,将所有脑片进行石蜡包埋并切片,切片厚度为14μm,每只动物等距随机抽选13 ~ 15张切片。采用CNPase标记成熟型少突胶质细胞,苏木精复染细胞核。利用体视学测试系统计数每张切片胼胝体内阳性细胞数量,利用光学分合法计算每只动物胼胝体内CNPase+细胞总数。结果:丰富生存环境组大鼠隐藏平台实验的寻台时间显著短于标准环境组大鼠（p = 0.002）,显露平台实验的寻台时间无显著性差异（p = 0.371）。与标准环境组大鼠相比,丰富生存环境大鼠大脑胼胝体内CNPase+细胞的总数显著性增加343.6%（p < 0.001）。结论:丰富生存环境干预能明显改善中老年雌性大鼠空间学习、记忆能力,能显著增加大鼠胼胝体内成熟型少突胶质细胞的总数。丰富生存环境干预所致的胼胝体内成熟型少突胶质细胞的改变可能是丰富生存环境干预改善中老年大鼠胼胝体内有髓神经纤维的原因之一。目的:研究丰富生存环境对中老年雌性大鼠空间学习、记忆能力的作用,并运用无偏体视学方法研究丰富生存环境对中老年大脑海马内成熟型少突胶质细胞的作用。方法:实验动物分组与行为学测试同第一部分。行为学测试后,分别从两组大鼠随机抽选5只大鼠,将其大脑制成2 mm厚的冠状连续脑片,将所有脑片进行石蜡包埋并切片,切片厚度为14μm,每只动物按等距随机原则抽选15 ~ 20张切片。采用免疫组织化学染色,采用CNPase标记成熟型少突胶质细胞,苏木精复染细胞核。利用体视学测试系统计数每张切片整个海马内、海马CA1区、齿状回内阳性细胞的数量,利用光学分合法计算每只动物大脑海马以及海马各亚区内CNPase+细胞的总数。结果:行为学测试结果同第二部分。与标准环境组大鼠相比,丰富生存环境大鼠大脑海马内CNPase+细胞的总数显著性增加113%（p = 0.008）,海马CA1区和齿状回内CNPase+细胞的总数显著性增加127%（p = 0.005）和127%（p = 0.006）。结论:短期丰富生存环境干预能显著增加大鼠大

关键词：胼胝体有髓神经纤维中老年大鼠丰富生存环境体视学胼胝体少突胶质细胞中老年大鼠丰富生存环境体视学海马少突胶质细胞中老年大鼠丰富生存环境体视学

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