本发明公开了一种高产普鲁兰酶的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法。所述高产普鲁兰酶的重组枯草芽孢杆菌通过如下方法构建获得:将用于表达普鲁兰酶的人工操纵子BPB构建重组质粒pGE‑BPB;所述人工操纵子BPB的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示...
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标准号:
CN104694452B
本发明公开了一种高产普鲁兰酶的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法。所述高产普鲁兰酶的重组枯草芽孢杆菌通过如下方法构建获得:将用于表达普鲁兰酶的人工操纵子BPB构建重组质粒pGE‑BPB;所述人工操纵子BPB的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;将前述构建的重组质粒pGE‑BPB转化至枯草芽孢杆菌感受态细胞中,通过二次重组使人工操纵子BPB原位替代枯草芽孢杆菌感受态细胞中的中性蛋白酶基因nprE。本发明从优化原始菌株的耐酸热普鲁兰酶基因开始,利用合成生物学的方法,将多种可以提高基因转录水平的分子元件组装成一个人工操纵子,构建得到重组枯草芽胞杆菌,该重组菌株可发酵高产普鲁兰酶,单位酶活达到或超过300U/ml。
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