检索结果-内蒙古大学图书馆

中国细胞生物学学报 2015年第6期37卷 895-905页

作者：储慧玲闫琼宇易静杨洁上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系上海肿瘤微环境和炎症重点实验室上海200025

细胞氧化还原状态(redox status)或氧化还原势能(redox potential)是细胞重要的生理指标之一,它的稳态影响细胞的功能活动和生命活动。氧化还原状态主要指细胞的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,受活性氧生成系统与清除系统共... 详细信息

细胞氧化还原状态(redox status)或氧化还原势能(redox potential)是细胞重要的生理指标之一,它的稳态影响细胞的功能活动和生命活动。氧化还原状态主要指细胞的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,受活性氧生成系统与清除系统共同调控,同时也能够对下游大分子、亚细胞区室及细胞增殖、分化和凋亡等产生影响。虽然对分子及细胞水平的氧化还原调控及其对细胞整体的影响研究相对较多,但对细胞器自身或亚细胞区室水平的关注不多,这些变化在细胞整体应激应答中的贡献也不清楚。该文简介细胞内主要的ROS生成系统与清除系统,并对目前各亚细胞区室的氧化还原状态及其调控的研究和认识进行主要综述,以期能够深入而全面地理解细胞的氧化还原调控及其影响。

关键词： ROS生成系统 ROS清除系统氧化还原状态亚细胞区室

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水分胁迫和ABA处理对玉米叶片不同亚细胞区室中抗氧化防护系统的影响

水分胁迫和ABA处理对玉米叶片不同亚细胞区室中抗氧化防护系统的...

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作者：陆军南京农业大学

学位级别：硕士

本文以玉米农大108为材料,研究了水分胁迫和ABA处理对玉米叶片各亚细胞区室(叶绿体、线粒体、过氧化物酶体、细胞溶质以及质外体)中的抗氧化酶如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活... 详细信息

本文以玉米农大108为材料,研究了水分胁迫和ABA处理对玉米叶片各亚细胞区室(叶绿体、线粒体、过氧化物酶体、细胞溶质以及质外体)中的抗氧化酶如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性及其同工酶以及抗氧化剂抗坏血酸(ASC)、谷胱甘肽(GSH)含量的影响。水分胁迫由PEG6000诱导(-0.7MPa),ABA处理浓度为100μM。试验结果表明,在水分胁迫和ABA处理下,叶绿体中的SOD、CAT、APX和GR的活性从4h开始逐渐上升,到12h时活性最大,24h时下降到对照水平;同时,抗氧化剂ASC和GSH的含量也从4h开始逐渐上升,到12h时含量最高,24h时下降到对照水平。质外体中的SOD、CAT、APX和GR的活性在水分胁迫和ABA处理下也是从4h开始逐渐上升,但是8h和12h这种上升趋势就趋缓了,甚至ABA处理下的GR活性从12h开始就已经下降了;抗氧化剂ASC和GSH的含量从4h开始上升,到8h最高,之后逐渐下降到对照水平。线粒体、过氧化物酶体和细胞溶质中SOD、CAT、APX和GR的活性以及抗氧化剂ASC和GSH含量在水分胁迫和ABA处理下的变化趋势与细胞溶质中的相似,也是先逐渐升高,到12h达最大,之后又逐渐降低到对照水平。这些结果表明,水分胁迫与ABA能够协调不同亚细胞区室中抗氧化防护的能力。研究结果同时也发现,叶绿体的SOD同工酶有四种,其中三种为Cu/Zn-SOD,一种为Fe-SOD,GR同工酶有三种,APX同工酶有两种;在水分胁迫和ABA处理下,各个抗氧化酶同工酶的活性均呈先升后降的趋势。线粒体中有四种SOD同工酶,一种为Cu/Zn-SOD,一种为Fe-SOD,两种为Mn-SOD,GR同工酶有四种,APX同工酶只有一种;在水分胁迫和ABA处理下,各个抗氧化酶同工酶的活性从4h到12h逐渐上升,除APX同工酶在24h活性与对照相近外,其余各抗氧化酶同工酶活性虽较12h低但是仍高于对照。过氧化物酶体中有三种SOD同工酶,一种为Cu/Zn-SOD,两种为Mn-SOD,GR同工酶有两种,APX同工酶只有一种,CAT同上酶有两种;在水分胁迫和ABA处理下,各SOD同工酶活性从4h到12h逐渐上升,Cu/Zn-SOD活性到24h与对照相近,而两种Mn-SOD活性到24h有所下降但还是高于对照,其余各抗氧化酶同工酶的变化趋势也是从4h到12h逐渐上升,到24h活性又有所下降。细胞溶质SOD同工酶有五种,四种为Cu/Zn-SOD,一种为Fe-SOD,GR同工酶有两种,

关键词：玉米水分胁迫脱落酸亚细胞区室抗氧化酶抗氧化剂

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活细胞内亚细胞结构蛋白质组学研究新技术——几种邻近标记策略的应用及比较

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生物化学与生物物理进展 2019年第7期46卷 641-653页

作者：杜阳春唐菁兰王友军张晓嫣北京师范大学生命科学学院细胞所细胞增殖及调控生物学教育部重点实验室北京100875 北京师范大学生命科学学院遗传与发育生物所抗性基因资源与分子发育北京市重点实验室北京100875 清华大学附属中学国际部北京100084

真核细胞内多种无膜及有膜细胞器为各种生物学过程的发生提供场所.被膜细胞器通过它们之间的膜接触位点所进行的信息交流和物质交换是维持生命活动所必需的.绘制活细胞中细胞器或膜接触位点等处的蛋白质组图谱,将有助于解析这些部位的... 详细信息

真核细胞内多种无膜及有膜细胞器为各种生物学过程的发生提供场所.被膜细胞器通过它们之间的膜接触位点所进行的信息交流和物质交换是维持生命活动所必需的.绘制活细胞中细胞器或膜接触位点等处的蛋白质组图谱,将有助于解析这些部位的生物学功能及作用机制,并为研究细胞器相互作用提供基础.但由于无膜细胞器或膜接触位点很难分离纯化,传统的生化方法难以系统解析其中的蛋白质组.最近报道的几种基于酶类的蛋白质邻近标记技术,则为系统分析上述空间受限的蛋白质组这一难题提供了有效的解决方案.通过将能催化产生活性自由基(最常见的是生物素及其衍生物的自由基)的酶连接到目标蛋白上,可对其邻近的蛋白质组进行共价标记,从而使后者的分离和鉴定成为可能,并可以运用于活细胞中的动态标记.我们在此综述了几种最新的邻近标记策略的原理及应用,并对它们的优势与局限性进行了比较,以期为细胞器互作的蛋白质组学研究提供参考.

关键词：细胞器蛋白质组膜接触位点亚细胞区室蛋白质相互作用邻近标记 BirA APEX BioID TurboID

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区室化工程改造解脂耶氏酵母生产红没药烯的应用研究

区室化工程改造解脂耶氏酵母生产红没药烯的应用研究

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作者：朱坤天津科技大学

学位级别：硕士

红没药烯是一种发现于植物中的重要天然产物,具有多种生物学功能,在食品、化妆品生产以及医药、能源等方面有着巨大的实际使用价值,市场需求增长迅猛。解脂耶氏酵母是一种非常规的产油酵母,线粒体内含有大量合成红没药烯时所必需的重要... 详细信息

红没药烯是一种发现于植物中的重要天然产物,具有多种生物学功能,在食品、化妆品生产以及医药、能源等方面有着巨大的实际使用价值,市场需求增长迅猛。解脂耶氏酵母是一种非常规的产油酵母,线粒体内含有大量合成红没药烯时所必需的重要前体物质——乙酰辅酶A。此外,解脂耶氏酵母还拥有其他酵母所不具备的特质,就是它可以利用各种廉价的疏水和亲水碳源来满足自身生长的需要,并通过自身的代谢机制将其转化为高价值的产品。近年来,研究人员利用代谢工程和合成生物学技术已经在解脂耶氏酵母细胞中成功构建了红没药烯生物合成路径,达到了微生物合成法生产该产品的目的。但是从经济角度来看,目前通过该方法所获得的红没药烯产量距离实现工业化大规模生产仍然具有较大的差距,且其生产成本远远高于化工生产。因此,提高解脂耶氏酵母细胞工厂产物合成能力、降低发酵成本是目前实现微生物法工业化生产红没药烯的迫切需要。本研究我们利用亚细胞定位技术首先将解脂耶氏酵母细胞质中内源存在的法尼烯基合成路径和来自北美冷杉的异源α-红没药烯合酶定位到解脂耶氏酵母的线粒体中,从而成功构建出了能够合成红没药烯的线粒体亚细胞合成工厂。之后分别从多个角度出发,探索了不同改造策略对线粒体工程菌株生产效率的影响,包括增加乙酰辅酶A的供给、调控细胞质和线粒体两个亚细胞域中存在的中间产物产量供应以及调控线粒体的形态和生理性能,还有引入外源的萜类转运蛋白等。其中,调控线粒体融合调控蛋白MGM1p的策略最为有效,α-红没药烯的摇瓶产量达到了257.40 mg/L。最后,为降低发酵成本,将获的线粒体工程菌株在以厨房废油代替葡萄糖作为唯一碳源的条件下进行发酵培养,α-红没药烯的摇瓶产量达到了765.09 mg/L。本研究利用线粒体区室化工程策略实现了在解脂耶氏酵母线粒体中高效合成α-红没药烯的目标,并在此基础上,充分挖掘了线粒体作为亚细胞工厂合成红没药烯的潜力。同时,本研究的成功也为今后开发线粒体作为亚细胞工厂利用厨房废油合成其他高价值萜烯类产品奠定了基础。

关键词：解脂耶氏酵母红没药烯代谢工程线粒体亚细胞区室细胞工厂厨房废油

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利用真空渗入法在烟草植物叶片中表达异胡豆苷合酶(英文)

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生物化学与生物物理学报 2002年第6期34卷 703-706页

作者：王淼李秋荣中国科学院沈阳应用生态研究所沈阳军区总医院沈阳110016

异胡豆苷合酶为萜烯类吲哚生物碱合成代谢途径初始反应步骤的关键酶 ,它催化色胺 (tryptamine)和裂环马钱子(secologanin)缩合生成异胡豆苷的反应。应用真空渗入法将异胡豆苷合酶的编码基因标定在烟草植物不同亚细胞区室内进行表达 ,它... 详细信息

异胡豆苷合酶为萜烯类吲哚生物碱合成代谢途径初始反应步骤的关键酶 ,它催化色胺 (tryptamine)和裂环马钱子(secologanin)缩合生成异胡豆苷的反应。应用真空渗入法将异胡豆苷合酶的编码基因标定在烟草植物不同亚细胞区室内进行表达 ,它的体外酶活性分析采用间接荧光法检测色胺在反应体系中的消耗。Western印迹和酶活性测定表明 ,通过真空渗入法异胡豆苷合酶可在烟草植物叶绿体、液泡和内质网中功能性表达。

关键词：异胡豆苷合酶真空渗入亚细胞区室烟草

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基于邻近标记技术的RNA亚细胞定位研究进展

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生命的化学 2024年第9期44卷 1737-1744页

作者：王子源刘嘉鹏韩硕中国科学院分子细胞科学卓越创新中心上海生物化学与细胞生物学研究所核糖核酸功能与应用重点实验室中国科学院大学上海200031

RNA在细胞内的异质性分布对细胞形态功能的调节甚至命运决定都具有重要的影响。为了研究RNA的亚细胞定位,科学家开发了多种技术,包括传统的生化分离分析和基于荧光原位杂交的各种原位标记技术等。然而,这些方法各有局限,难以实现高通量... 详细信息

RNA在细胞内的异质性分布对细胞形态功能的调节甚至命运决定都具有重要的影响。为了研究RNA的亚细胞定位,科学家开发了多种技术,包括传统的生化分离分析和基于荧光原位杂交的各种原位标记技术等。然而,这些方法各有局限,难以实现高通量检测。近年来迅速发展的邻近标记技术,通过对特定亚细胞区域的RNA进行高时空分辨率的生物素化标记和体外富集,进一步结合RNA测序技术,为研究解析RNA亚细胞分布的异质性及其与其他大分子或亚细胞结构间的动态互作提供了强大的技术工具。本文详细介绍了近年来开发的若干种通过酶介导或光活化的针对RNA的邻近标记技术,分析总结了各邻近标记技术的原理和优缺点,并对RNA邻近标记技术在植物细胞研究中的应用前景进行了展望。

关键词： RNA定位亚细胞区室邻近标记技术时空转录组

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