检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2024年第5期44卷 947-952页

作者：朱盈名王迎平冯之航陈翔王艳赵光伟西南大学动物医学院重庆荣昌402460 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200135 上海海关上海200135

为制备抗亨德拉病毒(Hendra virus, HeV)特异性单克隆抗体,本试验用原核表达纯化的HeV-N和HeV-G蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛选抗体阳性杂交瘤细胞,经过筛选和3次亚克隆,获得5株阳性杂... 详细信息

为制备抗亨德拉病毒(Hendra virus, HeV)特异性单克隆抗体,本试验用原核表达纯化的HeV-N和HeV-G蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛选抗体阳性杂交瘤细胞,经过筛选和3次亚克隆,获得5株阳性杂交瘤细胞株,其中针对HeV-N蛋白的有3株,命名为2H6、3C2、3G6;针对HeV-G蛋白的有2株,命名为5B8、2A4;利用ELISA方法检测单抗效价2H6与2A4均≥1∶512 000,3G6和5B8效价≥1∶256 000,3C2效价≥1∶128 000;Western blot和间接免疫荧光试验结果显示5株单抗均能与对应抗原发生结合反应;稳定性试验显示细胞传至15代时仍能稳定分泌抗体,稳定性良好;单克隆抗体亚型鉴定结果显示2H6、3C2、3G6均为IgG2b, 5B8和2A4均为IgG1。本试验HeV-N和HeV-G蛋白特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立,为HeV新型诊断方法和诊断试剂的开发奠定前期基础。

关键词：亨德拉病毒单克隆抗体 N蛋白 G蛋白

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亨德拉病毒研究进展

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动物医学进展 2012年第8期33卷 90-92页

作者：陈琦夏炉明刘佩红李维功卢军孙泉云上海市动物疫病预防控制中心上海201103

亨德拉病毒(HeV)是属于副黏病毒科、副黏病毒亚科、亨尼病毒属的一种病毒,可引起马、人类和其他哺乳动物的感染。动物和人类感染该病毒后病死率很高,且缺乏有效的疫苗和治疗方法。不同动物的易感情况、发病机理、病理变化、潜在的传播... 详细信息

亨德拉病毒(HeV)是属于副黏病毒科、副黏病毒亚科、亨尼病毒属的一种病毒,可引起马、人类和其他哺乳动物的感染。动物和人类感染该病毒后病死率很高,且缺乏有效的疫苗和治疗方法。不同动物的易感情况、发病机理、病理变化、潜在的传播途径等情况等仍有待进一步研究。论文就亨德拉病毒自然宿主和实验动物感染等情况进行重点阐述。

关键词：亨德拉病毒流行病学感染

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亨德拉病毒实验活动中安全风险评估

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中国兽医杂志 2018年第4期54卷 104-108页

作者：张媛张一帜李宁王利永万建青中国兽医药品监察所北京海淀100081

高致病性病原微生物实验活动中存在着诸多潜在的危险因素,笔者从生物安全角度出发,选定了亨德拉病毒为研究模型,对高致病性病原微生物实验活动中的安全风险进行评估,按照高等级生物安全实验室风险管理的要求,对感染性因子的特性、实验... 详细信息

高致病性病原微生物实验活动中存在着诸多潜在的危险因素,笔者从生物安全角度出发,选定了亨德拉病毒为研究模型,对高致病性病原微生物实验活动中的安全风险进行评估,按照高等级生物安全实验室风险管理的要求,对感染性因子的特性、实验过程中的生物安全防护、意外安全风险等要素进行了风险评估,并提出了应急措施。为积极推进高等级实验室生物安全风险评估工作的开展,撰写高致病性病原微生物风险评估报告积累了素材。

关键词：亨德拉病毒 BSL-4实验室实验活动风险评估

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新疆伊犁地区牧羊犬脑内亨德拉病毒感染情况

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中国生物制品学杂志 2011年第2期24卷 133-136,145页

作者：王嘉佳冯裕星谢亮张亮何丰孙后超牟君展群岭胡永波朱丹李雷雷谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆市神经生物学重点实验室重庆400016

目的分析新疆伊犁地区草原放养牧羊犬脑内亨德拉病毒(Hendravirus,HeV)的感染情况。方法采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测HeV核蛋白(N)基因片段,并验证该方法的敏感性和特异性。采用该方法对采自新疆伊犁地区草原放养、未接种HeV疫苗的... 详细信息

目的分析新疆伊犁地区草原放养牧羊犬脑内亨德拉病毒(Hendravirus,HeV)的感染情况。方法采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测HeV核蛋白(N)基因片段,并验证该方法的敏感性和特异性。采用该方法对采自新疆伊犁地区草原放养、未接种HeV疫苗的101例牧羊犬脑组织进行HeV N基因片段检测。结果建立的一步法实时荧光定量RT-PCR检测HeV N基因的最低检出浓度为2.6×102 copies/μl;与其他单股负链RNA病毒,如同属且高度同源的尼帕病毒(Nipah virus,NiV)和博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)等无交叉反应;101份牧羊犬脑组织样本HeV N基因的检测结果均为阴性。结论尚未发现我国新疆伊犁地区天然牧场放养牧羊犬中存在HeV感染的证据,该地区短时间内爆发HeV感染的危险性不大。

关键词：亨德拉病毒一步法荧光定量RT-PCR N基因新疆伊犁地区牧羊犬

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基于马亨德拉病毒N、G蛋白间接ELISA检测方法的建立及单克隆抗体制备

基于马亨德拉病毒N、G蛋白间接ELISA检测方法的建立及单克隆抗体...

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作者：朱盈名西南大学

学位级别：硕士

亨德拉病毒(Hendra virus,HeV)属于副粘病毒科(Paramyxoviridae)、亨德拉病毒属(Hennipavirus),是一种较罕见但烈性的人畜共患病原体,感染马时以严重的呼吸道症状与高死亡率为特征。截止至2021年,澳大利亚官方报道共发生65起马感染HeV事... 详细信息

亨德拉病毒(Hendra virus,HeV)属于副粘病毒科(Paramyxoviridae)、亨德拉病毒属(Hennipavirus),是一种较罕见但烈性的人畜共患病原体,感染马时以严重的呼吸道症状与高死亡率为特征。截止至2021年,澳大利亚官方报道共发生65起马感染HeV事件,致105匹马死亡,给马匹养殖行业带来巨大危害。HeV感染引发的症状与其他呼吸道疾病相似,因此建立精准的HeV实验室诊断方法至关重要。RT-PCR为临床病例确诊的实验室推荐诊断技术,可在生物安全二级实验室检测HeV,但对待检动物的HeV接触史难以评价,因此需结合血清学检测方法共同使用。HeV为单股负链RNA病毒,编码6种结构蛋白,G蛋白是HeV唯一位于包膜表面的黏附糖蛋白,通过Ephrin B2/3受体结合宿主细胞,与F蛋白共同启动宿主细胞的吞饮过程,将核衣壳递送至细胞质,是感染途径中重要的锚定蛋白及中和抗体靶标;N蛋白包裹病毒基因组,是表达含量最丰富的的核衣壳蛋白,其C-端结构域与P蛋白作用形成N-P复合体,结合RNA聚合酶,支持病毒的复制与转录,在病毒包膜与宿主细胞膜融合后被释放到细胞质中,具有良好的免疫原性。二者均为开发HeV血清学检测方法的有效靶点。本研究以HeV-N、HeV-G原核重组蛋白为基础,建立针对马HeV抗体的间接ELISA(Indirect ELISA,i ELISA)方法,并制备其鼠源单克隆抗体,具体内容如下:***-N、HeV-G原核重组蛋白的合成表达:本研究对HeV(NC＿001906.3)N、G基因进行了密码子优化,使其在大肠杆菌系统中表达效率更高,将人工合成的目的基因分别克隆至p ET-30a(+)原核表达载体,得到HeV-p ET30a(+)-N、HeV-p ET30a(+)-G重组质粒,测序正确后转化进BL21(DE3)菌株中化学诱导表达,经SDS-PAGE、Western-blot鉴定,镍亲和层析纯化后获得纯化重组蛋白。***检测方法的建立:以100μg/只重组蛋白剂量免疫马匹,3次免疫后收获马血清。包被重组抗原,以免疫后马血清为阳性对照、RT-PCR阴性且无疫苗接种史的马血清为阴性对照。最终确定HeV-N、HeV-G蛋白包被剂量分别为1μg、0.8μg,血清稀释度均为1:1 000,临界值为0.235、0.267。极限稀释法确定HeV-N、HeV-G阳性血清的灵敏度分别大于1:12 800、1:6 400。该方法与9份马的其他病原已知抗体阳性血清无交叉反应,具有良好特异性。批内、批间重复试验证明其变异系数均小于10%,具有良好重复性。利用该方法检测631份不同国家入境的临床马血清样本,其结果均为阴性,与我国动物疾病预防与控制中心公布数据一致。以上结果表明本试验建立的i ELISA检测方法可作为临床检测HeV抗体的血清学技术储备。3.鼠源多克隆抗体、单克隆抗体的制备:以100μg/只重组蛋白剂量免疫BALB/c小鼠,4次免疫后收获与抗原特异性反应的高效价阳性血清,作为后续阳性对照。本试验将HeV N、G基因克隆至pc DNA3.1(+)真核表达载体上,构建pc DNA3.1-N-His、pc DNA3.1-G-His质粒。选取抗体效价高的小鼠解剖取脾淋巴细胞,通过经典杂交瘤细胞融合及i ELISA、Western-blot、IFA鉴定,筛选获得3株稳定针对HeV-N(2H6、3C2、3G6)和2株HeV-G蛋白(5B8、2A4)的单克隆抗体。生物学特性试验结果表明5株单抗效价均大于10～5,与重组蛋白反应性良好。经单克隆抗体亚型鉴定,2H6、3C2、3G6重链均为Ig G2b,5B8、2A4重链为Ig G1。综上所述,本试验成功建立了基于HeV-N、HeV-G蛋白的i ELISA检测方法,为临床上HeV感染的检测提供新思路,并制备了针对该蛋白的单克隆抗体,为后续开展HeV检测靶点研究及开发疫苗提供指导。

关键词：亨德拉病毒单克隆抗体间接ELISA N蛋白 G蛋白

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小反刍兽疫病毒、非洲猪瘟病毒、西尼罗病毒、亨德拉病毒及尼帕病毒并联荧光定量PCR方法建立

小反刍兽疫病毒、非洲猪瘟病毒、西尼罗病毒、亨德拉病毒及尼帕病...

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作者：苗富春吉林农业大学

学位级别：硕士

小反刍兽疫(peste des petits ruminants, PPR)、非洲猪瘟(African swine fever, ASF)由于其高感染性以及高死亡率引起了各国的高度重视,而本研究中的其他3种疫病——亨德拉病(Hedra disease)、尼帕病(Nipha disease)和西尼罗河热(West ... 详细信息

小反刍兽疫(peste des petits ruminants, PPR)、非洲猪瘟(African swine fever, ASF)由于其高感染性以及高死亡率引起了各国的高度重视,而本研究中的其他3种疫病——亨德拉病(Hedra disease)、尼帕病(Nipha disease)和西尼罗河热(West nile fever disease)是近几十年新发现的人畜共患的烈性传染病。2007年7月我国西藏阿里地区发生了小反刍兽疫,这是我国首次报道有PPR的发生,作为OIE法定报告的动物疾病之一,PPR严重威胁着我国畜牧业的发展,是需要采取严厉控制和预防的动物疫病之一。非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是一种致使猪只发生100%死亡率的高热性疫病,非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)是目前发现的唯一一种虫媒DNA病毒。该病自首次报道以来迅速扩大传播范围,目前已波及非洲、欧洲、美洲的多个国家和地区,其传播速度之快、感染率及死亡率之高令人瞠目结舌,加之尚无疫苗可以预防,一旦发生疫情就会给所在国家和地区造成不可估量的损失,我国接壤国家俄罗斯间隔几年就会暴发ASFV,因此,我国要做好预防措施,谨防其传入我国。亨德拉病毒(Hedra virus, HeV)于1994年发现于昆士兰布利斯班郊区的亨德拉镇,1999年在马来西亚的尼帕小镇又发现了一种与亨德拉病毒极其相似的病毒——尼帕病毒(Nipha virus, NiV),由于其与副黏病毒科中其他属成员有显著不同,因此将其独立列为一个属——亨尼帕病毒属。西尼罗病毒(West nile virus, WNV)属黄病毒科、黄病毒属成员,与日本乙型脑炎病毒、墨累河谷脑炎病毒、圣路易斯脑炎病毒和昆津病毒同属日本脑炎病毒群,该病毒属虫媒病毒,分布广泛。该病毒可感染成人和鸟类等,并可导致死亡,是目前被世界各国广泛重视的烈性人畜共患传染病。由于HeV、NiV和WNV均为人畜共患传染病,且造成人的死亡率很高而被各国广泛重视。除PPRV的传播途径为直接接触传播或通过飞沫短距离传播外,其他4种病毒均通过中间的传播媒介进行传播,ASFV的传播媒介为蜱类,HeV和NiV的传播媒介是蝙蝠,WNV的传播媒介为蚊子(特别是库蚊),这些传播媒介在我国均有分布,且种类繁多,因此,这几种病毒传入我国的风险较大,建立一种快速、简单、特异并同时检测这5种病毒的方法十分必要。本研究根据GenBank中登录的相关病毒基因序列,通过分析比较在其保守区域(PPRV的N基因,ASFV的P72基因,HeV和NiV的H基因以及WNV的PrM基因)各设计了两套引物和Taqman探针,通过特异性试验、灵敏性试验和重复性试验各筛选出了一套引物和探针。同时通过对45份蝙蝠样品、38份猪脏器样品和20份小反刍兽分泌物等临床样品的检测显示,除阳性标准品外,其他均与空白对照一致,说明本研究中建立的Taqman模式的并联荧光定量PCR检测方法具有特异性好的特点,可以作为临床检测这5种病原体的参考方法。

关键词：小反刍兽疫病毒非洲猪瘟病毒亨德拉病毒尼帕病毒西尼罗病毒 Taqman探针

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亨德拉病毒感染

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预防医学情报杂志 2008年第8期24卷 626-628页

作者：于慧娜蒋铭敏王磊军事医学科学院卫生勤务与医学情报研究所北京100850

亨德拉病毒感染是20世纪90年代在澳大利亚发现的一种新发传染病,病原体亨德拉病毒属于副粘病毒科的亨尼帕病毒属。亨德拉病毒感染是一种人兽共患病,可以引起动物和人类致病并可导致死亡。因该病毒有可能被用于生物恐怖袭击,因此引起广... 详细信息

亨德拉病毒感染是20世纪90年代在澳大利亚发现的一种新发传染病,病原体亨德拉病毒属于副粘病毒科的亨尼帕病毒属。亨德拉病毒感染是一种人兽共患病,可以引起动物和人类致病并可导致死亡。因该病毒有可能被用于生物恐怖袭击,因此引起广泛关注。本文就亨德拉病毒感染的流行史、病原学特征、流行病学特征、临床表现以及防治措施几方面进行综述。

关键词：亨德拉病毒流行病学诊断

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亨德拉病毒概况

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中国畜牧兽医 2007年第4期34卷 96-98页

作者：龙贵伟宋桂强聂福平廖金于福先邱薇李作生范泉水云南农业大学动科院昆明650201 成都军区疾控中心昆明650032

亨德拉病毒(hendra virus,HeV)是一种新的人畜共患病毒性疾病病毒,于1994年～1995年在澳大利亚昆士兰州布里斯班郊区的亨德拉首次被发现,引起严重的呼吸道疾病并导致了14匹马和1人死亡.后来用该病的发病地名命名为亨德拉病(henda disease).

关键词：亨德拉病毒 virus 病毒性疾病呼吸道疾病人畜共患昆士兰州澳大利亚地名命名

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亨德拉病毒研究进展

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兽医导刊 2023年第4期 12-16页

作者：程子刚富艳玲广东永顺生物制药股份有限公司广东广州511356 天津融汇生物技术有限公司天津300381

亨德拉病毒(Hendra virus,HeV)旧称马麻疹病毒,是一种烈性的人畜共患病病原。马感染此病毒后,会出现高热、呼吸急促、行动迟缓、鼻腔流出泡沫等诸多临床症状,死亡率极高,人也可感染该病毒且死亡率较高,世界动物卫生组织(OIE)将其列入生... 详细信息

亨德拉病毒(Hendra virus,HeV)旧称马麻疹病毒,是一种烈性的人畜共患病病原。马感染此病毒后,会出现高热、呼吸急促、行动迟缓、鼻腔流出泡沫等诸多临床症状,死亡率极高,人也可感染该病毒且死亡率较高,世界动物卫生组织(OIE)将其列入生物安全4级的病原体。本文对亨德拉病毒的分类地位、感染风险因素、诊断方法和疫苗研究进展进行详细阐述,旨在为预防和控制该病毒感染提供理论依据。

关键词：亨德拉病毒研究进展病原学流行病学

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新疆伊犁地区马匹亨德拉病毒脑内感染情况调查

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中国微生态学杂志 2011年第1期23卷 28-31,37页

作者：冯裕星何丰孙后超张亮徐红波胡子成牟君展群岭徐鸣明胡永波李雷雷谢鹏重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的检测新疆伊犁地区天然牧场放养马群脑组织中亨德拉病毒(Hendra Virus,HeV)的核酸片段,调查该地区马群中枢神经系统HeV感染流行状况。方法针对HeV高度保守区核蛋白(N)基因设计特异性引物和探针,采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测中... 详细信息

目的检测新疆伊犁地区天然牧场放养马群脑组织中亨德拉病毒(Hendra Virus,HeV)的核酸片段,调查该地区马群中枢神经系统HeV感染流行状况。方法针对HeV高度保守区核蛋白(N)基因设计特异性引物和探针,采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测中枢神经系统感染样本中低浓度HeV RNA的方法,检测新疆伊犁草原地区天然放养且未接种HeV疫苗的183例马匹脑组织。结果最低特异性检出浓度可低至2.6×102copies/μL,与其他单股负链RNA病毒如同属的尼帕病毒(NiV)无交叉反应,对183例马脑组织进行一步法实时荧光定量RT-PCR检测,未检出阳性样本。结论初步流行病学研究尚未发现我国新疆伊犁地区天然牧场放养马匹中存在HeV感染的证据,提示该地区短时间内爆发亨德拉病毒感染的可能性小。

关键词：亨德拉病毒 N基因一步法荧光定量RT—PCR 新疆伊犁地区马

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