检索结果-内蒙古大学图书馆

中华烧伤杂志 2011年第3期27卷 220-222页

作者：王爱丽吴志宏杨平徐顺顾耀辉黄静陈波贾卿上海市第七人民医院烧伤整形科 200137

近年来对于增生性瘢痕形成机制的研究较多，TGF—β信号转导的中介分子Smad家族，位于TGF—β家族配体-受体信号转导系统的下游，通过调控核内靶基因的转录控制创面愈合和病理性瘢痕形成。本研究中，笔者利用小分子RNA干扰技术特异性抑... 详细信息

近年来对于增生性瘢痕形成机制的研究较多，TGF—β信号转导的中介分子Smad家族，位于TGF—β家族配体-受体信号转导系统的下游，通过调控核内靶基因的转录控制创面愈合和病理性瘢痕形成。本研究中，笔者利用小分子RNA干扰技术特异性抑制Smad3基因的表达，观察其对瘢痕增生和Ⅰ、Ⅲ型胶原合成等的影响，为进一步临床应用基因治疗瘢痕提供理论依据和实验基础。

关键词： Smad3基因 RNA干扰技术人增生性瘢痕小分子 Smad家族信号转导系统增生性瘢痕形成病理性瘢痕形成

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JAK-STATs通路对CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化作用的研究

JAK-STATs通路对CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化作用的...

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作者：陶灵第三军医大学

学位级别：博士

增生性瘢痕是烧伤、整形乃至整个创伤修复领域亟待解决的难题之一,成纤维细胞是其发病的关键效应细胞,生长因子对成纤维细胞的增殖、分化具有重要的调控作用。结缔组织生长因子(CTGF)是新近发现的一种具有强烈促纤维化作用的生长因子,... 详细信息

增生性瘢痕是烧伤、整形乃至整个创伤修复领域亟待解决的难题之一,成纤维细胞是其发病的关键效应细胞,生长因子对成纤维细胞的增殖、分化具有重要的调控作用。结缔组织生长因子(CTGF)是新近发现的一种具有强烈促纤维化作用的生长因子,有研究证实[1],CTGF能促进体外增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)增殖及其向肌成纤维细胞(MyoF)的转分化,但其细胞内信号转导机制尚不清楚,未见相关报道。JAK-STATs通路是近几年发现的细胞因子信息内传的非常重要的一条通路,是参与人体内部分生理(如造血)和病理反应(如部分肿瘤、类风湿性关节炎、脑损伤、支气管哮喘等)的共同通路之一,已证实与多种疾病发生发展及防治密切相关[2-5]。目前已知有多种细胞因子(如干扰素-α、β、γ,白细胞介素-2、4、6等)、生长因子(表皮生长因子、血小板衍生生长因子等)、生长激素、瘦素等通过JAK-STATs途径进行信号转导并调控部分细胞的增殖分化过程。鉴于以上原因,我们选择其作为参与CTGF调控人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化过程的信号通路进行筛选鉴定。方法: 本研究通过原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞,将对象分为①对照组:人增生性瘢痕成纤维细胞组;②CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞组。采用Western blot、免疫荧光化学染色、凝胶阻滞电泳(EMSA)、RT-PCR方法,分以下两大部分进行研究,第一大部分为JAK-STATs信号分子的初步筛选,包括①取0min、5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、60 min、90 min八个时相点,采用western-blot方法检测各时相点JAK1、JAK2、JAK3、TYK2、STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5、STAT6十类蛋白活化(磷酸化)情况,并筛选出对CTGF刺激其磷酸化程度呈反应性增高的蛋白(JAK1、STAT1);②对筛选出来的蛋白(STAT1)用免疫荧光化学染色方法观察其胞浆到胞核的核转位的时相变化并比较组间差异;③利用凝胶阻滞电泳(EMSA)方法进一步验证此蛋白(STAT1)与DNA的结合能力及持续时间。第二大部分,将对象分为四组:①STAT1 ASODN+CTGF组;②CTGF刺激组;③STAT1 ASODN转染组;④空白对照组。在上述研究基础上,对筛选出的信号分子(STAT1)应用特异性抑制剂(STAT1 ASODN)进行阻断,用MTT法测定各组间细胞增殖差异, RT-PCR观察α-SMA的表达以反映人增生性瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化情况,以了解STAT1对CTGF调控人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化过程的影响。结果: CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞后JAK-STATs通路所有蛋白(总蛋白以“t-”表示)均以非磷酸化和磷酸化(以“p-”表示)两种形式存在,在起始状态下即出现磷酸化条带,之后其磷酸化程度逐渐增强,在30min左右达峰值,再随时间延长逐渐下降呈一倒抛物线。Western blot显示胞浆及胞核中“p-JAK1/ t-JAK1”比值和“p-STAT1/ t-STAT1”比值随CTGF作用时间延长逐渐增大,至30min时达最强,之后逐渐下降。其余JAK-STATs蛋白虽均有不同程度的磷酸化,但并未随CTGF刺激出现反应性增强趋势。应用免疫荧光化学染色法检测STAT1的核转位,发现磷酸化STAT1蛋白在刺激30min左右达最强,比较组间差异发现:瘢痕成纤维细胞组(++):荧光明亮,胞浆、胞核分布基本一致;CTGF刺激瘢痕成纤维细胞组(+++-++++):荧光闪亮,呈明显的亮绿色,胞核中荧光强度增加,核聚集现象明显;应用凝胶阻滞电泳法,采用不同浓度CTGF刺激时发现检测STAT1与DNA的结合能力呈CTGF浓度依赖趋势,当CTGF 10ng/ml时达到峰值。同时,我们用10ng/ml CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞在不同时相点(0、10、20、30、45、60、90、120min)STAT1与DNA的结合能力及持续时间时发现:当CTGF刺激10min时,SIF已开始活化,45-60min达峰值,之后逐渐减弱,且较对照组明显增强。根据以上结果,初步筛选出JAK1、STAT1蛋白为参与CTGF调控人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化过程的信号分子。为进一步验证上述结论,我们将对象分为四组:①STAT1 ASODN+CTGF组;②CTGF刺激组;③STAT1 ASODN转染组;④空白对照组,观察STAT1对CTGF调控人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化过程的影响。在RT-PCR确定STAT1 ASODN已成功转入的前提下,用MTT测定转染前后细胞增殖程度变化时发现,增生性瘢痕成纤维细胞增殖程度呈②

关键词：结缔组织生长因子(CTGF) 人增生性瘢痕成纤维细胞肌成纤维细胞 JAKs STATs 增殖转分化 α-平滑肌肌动蛋白 EMSA MTT IF western-blot RT-PCR

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苦参碱对人增生性瘢痕治疗作用的临床研究

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中国临床康复 2002年第14期6卷 2066-2067页

作者：汤苏阳蔡宝仁马永福许国珍赵晓明李哲解放军第二○五医院辽宁锦州121001

目的研究苦参碱(Matrine,Mat)对人增生性瘢痕治疗中成纤维细胞(fibroblast,FB)增生和凋亡的影响。方法以20例患者深Ⅱ度烧伤创面愈合后增生性瘢痕为研究对象,局部注射Mat后,利用DNA末端标记技术(TdT-mediateddUTPnick-endlabelingmethod... 详细信息

目的研究苦参碱(Matrine,Mat)对人增生性瘢痕治疗中成纤维细胞(fibroblast,FB)增生和凋亡的影响。方法以20例患者深Ⅱ度烧伤创面愈合后增生性瘢痕为研究对象,局部注射Mat后,利用DNA末端标记技术(TdT-mediateddUTPnick-endlabelingmethod,TUNEL),检测其FB的凋亡数量及其标记指数;利用免疫组织化学法检测其FB的增殖细胞核抗原(Proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达和其标记指数。结果增生性瘢痕局部注射Mat后与自身未经Mat治疗的增生性瘢痕对照组比,前者其FB凋亡数量明显增加,凋亡指数14d分别为0.32和0.07,28d分别为0.54和0.11;治疗组PCNA表达明显弱于对照组,PCNA标记指数14d分别为0.28和0.5,28d分别为0.54和0.75。结论Mat明显增加人增生性瘢痕FB的凋亡数量,降低其增殖活性,促进增生性瘢痕FB凋亡,使增生性瘢痕尽早地趋于非增生状态。

关键词：苦参碱人增生性瘢痕成纤维细胞细胞增殖细胞凋亡免疫组织化学法增殖细胞核抗原

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人增生性瘢痕瘙痒症状与局部5-羟色胺的含量

人增生性瘢痕瘙痒症状与局部5-羟色胺的含量

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第八届全国烧伤外科学年会

作者：赵李平利天增祁少海徐盈斌谢举临柯昌能中山大学附属第一医院

目的测定不同程度瘙痒的瘢痕组织和正常皮肤中5-羟色胺水平,评价5-羟色胺在增生性瘢痕瘙痒症状中的作用。方法实验于2002-09/2004-12在中山大学附属第一医院烧伤科和外科实验室完成。取瘢痕和正常皮肤标本89例(每例患者均有1处瘢痕)。... 详细信息

目的测定不同程度瘙痒的瘢痕组织和正常皮肤中5-羟色胺水平,评价5-羟色胺在增生性瘢痕瘙痒症状中的作用。方法实验于2002-09/2004-12在中山大学附属第一医院烧伤科和外科实验室完成。取瘢痕和正常皮肤标本89例(每例患者均有1处瘢痕)。男48例,女41例。其中增生性瘢痕68例,非增生性瘢痕21例。两组病例中各取8例正常皮肤组织作为对照。应用荧光法测定不同程度瘙痒的瘢痕组织和正常皮肤中5-羟色胺水平,并分析其与瘢痕瘙痒程度(分级:0级:无瘙痒感;1级:瘙痒很轻,轻抓可缓解;2级:瘙痒令人烦恼,需较强烈的搔抓方可缓解,可以耐受;3级: 瘙痒影响工作或不能耐受,需长时间不断搔抓,无语言表达能力的儿童表现为吵闹不安)的关系。结果①5-羟色胺含量:增生性瘢痕明显高于非增生性瘢痕和正常皮肤[(467.82±38.92),(382.79± 34.36),(378.65±29.98)ng/g,P<0.01犦。②不同瘙痒级别的瘢痕组织中5-羟色胺含量:3级和2级显著高于10级和0级[(479.32±40.16),(470.33±39.12),(393.37±37.56),(381.25± 32.09)ng/g,P<0.01③瘢痕部位瘙痒程度与局部5-羟色胺含量的关系呈正相关 (t=0.918,p<0.01)。结论瘢痕中、重度瘙痒组织中5-羟色胺含量显著高于轻度瘙痒和无瘙痒组织;增生性瘢痕组织中的5-羟色胺含量显著高于非增生性瘢痕和正常皮肤。提示5-羟色胺在瘢痕的中、重度瘙痒症状中起重要作用。

关键词：人增生性瘢痕正常皮肤瘢痕组织

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CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞STATs蛋白活化的状况

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中国美容医学 2008年第4期17卷 521-523页

作者：陶灵李世荣刘剑毅戴霞李喆覃霞毋巨龙第三军医大学西南医院整形外科重庆400038

目的:探讨CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞STATs蛋白活化的情况。方法:原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞,将其分为:①对照组:人增生性瘢痕成纤维细胞组;②增生性瘢痕成纤维细胞外源性重组CTGF刺激组。取0min、5min、10min、20min、30min... 详细信息

目的:探讨CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞STATs蛋白活化的情况。方法:原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞,将其分为:①对照组:人增生性瘢痕成纤维细胞组;②增生性瘢痕成纤维细胞外源性重组CTGF刺激组。取0min、5min、10min、20min、30min、45min、60min、90min八个时相点,分别采用MTT检测细胞增殖,western-blot检测各组之间a-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)的变化趋势以及各时相点STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5、STAT6蛋白活化(磷酸化)情况。结果:在确定成纤维细胞增殖以及a-SMA表达变化趋势以②-①组顺序递减的前提下(P<0.05),用western-blot观测两组STATs蛋白活化情况,发现:STAT1蛋白磷酸化水平以②-①组顺序递减(P<0.01);STAT2-6均有不同程度的磷酸化,但不以②-①组顺序递减。结论:STAT1可能在CTGF促进人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和分化过程中可能发挥着重要作用,以上研究结果为抑制瘢痕纤维化及挛缩提供了新的研究方向。

关键词： CTGF 人增生性瘢痕成纤维细胞 STATs

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苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

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中国美容医学 2001年第1期10卷 6-8,F003页

作者：汤苏阳蔡宝仁黄高升艾玉峰张琳西沈阳军区205医院烧伤整形科辽宁锦州121001 第四军医大学病理教研室第四军医大学西京医院整形外科中心

目的 :研究苦参碱 (Matrine,简称 Mat)对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。　方法 :将 Mat以不同浓度梯度作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞 ,测MTT反应的 A0值及 L DH值 ,用免疫组织化学检测 Mat用药前后的细胞核内增殖性抗原 (p... 详细信息

目的 :研究苦参碱 (Matrine,简称 Mat)对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。　方法 :将 Mat以不同浓度梯度作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞 ,测MTT反应的 A0值及 L DH值 ,用免疫组织化学检测 Mat用药前后的细胞核内增殖性抗原 (proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。　结果 :增生性瘢痕成纤维细胞在 Mat0 .2 5～ 10 0 m g/m l范围内呈剂量依赖性增殖抑制 ,但 L DH值无明显改变 ;PCNA的表达 ,在 Mat作用后明显减弱。　结论 :Mat在体外能明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖而不引起细胞坏死性改变。

关键词：苦参碱人增生性瘢痕成纤维细胞细胞增殖细胞核内增殖性抗原免疫组织化学检测

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苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期和DNA含量的影响

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中华医学美学美容杂志 2002年第1期8卷 30-32页

作者：汤苏阳徐获荣王强卢丙仑王远征林方解放军第205医院烧伤整形科锦州121001 第四军医大学西京医院整形外科锦州医学院第一附属医院老干病房

目的　研究苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期和DNA含量的影响。方法　将不同浓度梯度苦参碱作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞 ,计算其群体倍增时间 ,通过流式细胞仪检测其细胞周期、DNA相对含量。结果　不同浓度梯度的苦参... 详细信息

目的　研究苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期和DNA含量的影响。方法　将不同浓度梯度苦参碱作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞 ,计算其群体倍增时间 ,通过流式细胞仪检测其细胞周期、DNA相对含量。结果　不同浓度梯度的苦参碱作用增生性瘢痕成纤维细胞 ,其群体倍增时间与苦参碱浓度呈正相关 ;随着苦参碱作用细胞的时间逐渐延长 ,出现G0 /G1期数量增加 ,S期、G2 M细胞数量逐渐减少 ,DNA相对含量无明显变化。结论　苦参碱能明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的有丝分裂。

关键词：苦参碱成纤维细胞细胞周期 DNA含量人增生性瘢痕

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丹参酮ⅡA对人增生性瘢痕作用的实验研究

丹参酮ⅡA对人增生性瘢痕作用的实验研究

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中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会

作者：蒙诚跃周淑芳广西医科大学第一附属医院烧伤整形外科广西壮族自治区江滨医院

目的:探讨丹参酮ⅡA对人增生性瘢痕组织生长的影响。方法:收集烧伤后人增生性瘢痕组织标本6例作成纤维细胞(FB)培养,将第3～6代传代细胞分二组进行实验观察,在实验组传代细胞培养中(6例)加入不同剂量丹参酮ⅡA(0.05,0.075,0.10,0.125,0.... 详细信息

目的:探讨丹参酮ⅡA对人增生性瘢痕组织生长的影响。方法:收集烧伤后人增生性瘢痕组织标本6例作成纤维细胞(FB)培养,将第3～6代传代细胞分二组进行实验观察,在实验组传代细胞培养中(6例)加入不同剂量丹参酮ⅡA(0.05,0.075,0.10,0.125,0.15 mg/ml)共同培养;对照组(6例)培养中不加丹参酮ⅡA。采取噻唑蓝法(MTT)检测成纤维细胞成活率,蛋白质印迹法(Western blotting)检测FB合成转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响;RT-PCR测定TGF-β1 mRNA及胶原蛋白(collagen)mRNA的表达;通过图象处理和数据统计方法进行结果分析。结果:实验组传代细胞在不同剂量丹参酮ⅡA培养中,成纤维细胞细胞生长均受到抑制,其抑制程度呈剂量依赖性,当药物剂量达0.15mg/ml时,成纤维细胞增殖率降至40.5%(P<0.05);成纤维细胞合成TGF-β1有两种不同结果:当药物剂量低于0.15mg/ml时,TGF-β1合成轻度增加(P>0.05),药物剂量达到0.15mg/ml时,TGF-β1合成率显著下降(59.3%,P<0.05);TGFβ1mRNA和collagen mRNA的表达随着药物剂量增大而下降:药物剂量低于0.15mg/ml,TGFβ1 mRNA和collagen mRNA表达轻度下降(P>0.05),药物剂量达到0.15mg/ml时分别下降41.8%和35.9%(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA抑制人增生性瘢痕组织中成纤维细胞的增殖,减少TGF-β1蛋白合成及抑制TGFβ1mRNA、collagen mRNA的表达,本实验结果显示丹参酮ⅡA具有抑制人增生性瘢痕生长的作用。

关键词：丹参酮Ⅱ 不同剂量实验组 TGF 成纤维细胞人增生性瘢痕

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P物质对人增生性瘢痕中肥大细胞组胺释放的影响

P物质对人增生性瘢痕中肥大细胞组胺释放的影响

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第四届全国烧伤救治专题研讨会

作者：陈亮流沙李世荣丛林毋巨龙王珍祥重庆第三军医大学西南医院整形外科重庆第三军医大学西南医院整形外科重庆第三军医大学西南医院整形外科重庆第三军医大学西南医院整形外科重庆第三军医大学西南医院整形外科重庆第三军医大学西南医院整形外科

目的定量分析 SP 对人 HS 中 MC 组胺释放的影响,探讨 HS 中二者的相互作用及作用方式。方法人 HS 活体组织块切下后立即处理,修剪成0．5-1mm大小,测定在不同浓度的 SP、不同 SP 作用时间、不同浓度 Ca作用条件下,MC 的脱颗粒情况。荧... 详细信息

目的定量分析 SP 对人 HS 中 MC 组胺释放的影响,探讨 HS 中二者的相互作用及作用方式。方法人 HS 活体组织块切下后立即处理,修剪成0．5-1mm大小,测定在不同浓度的 SP、不同 SP 作用时间、不同浓度 Ca作用条件下,MC 的脱颗粒情况。荧光法测定后用上清液中组胺含量,计算组胺释

关键词：人增生性瘢痕组胺释放肥大细胞

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Wnt-1/β-catenin通路在亚硒酸钠抑制人增生性瘢痕成纤维细胞体外增殖过程中表达研究

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中国医学创新 2018年第9期15卷 135-137页

作者：杨陆涛张守忠潘拥军曾元临江西省九江市第一人民医院江西九江332000 南昌大学第一附属医院

目的:研究Wnt-1/β-catenin信号通路在亚硒酸钠抑制人增生性瘢痕(Hypertrophic scar,HS)成纤维细胞(Fibroblasts,FB)体外增殖的过程中的作用。方法:培养HSFB,设置试验组与对照组,试验组分为5组(A、B、C、D、E组),分别加入等量含2.5、5... 详细信息

目的:研究Wnt-1/β-catenin信号通路在亚硒酸钠抑制人增生性瘢痕(Hypertrophic scar,HS)成纤维细胞(Fibroblasts,FB)体外增殖的过程中的作用。方法:培养HSFB,设置试验组与对照组,试验组分为5组(A、B、C、D、E组),分别加入等量含2.5、5、10、20、40μmol/L浓度的亚硒酸钠10%胎牛血清的培养基,对照组加入等量的10%胎牛血清培养基(即0μmol/L浓度的亚硒酸钠),在24 h后进行细胞免疫组化检测Wnt-1和β-catenin蛋白在不同浓度亚硒酸钠的作用下在FB表达情况。结果:细胞免疫组化显示亚硒酸钠在0~40μmol/L,随着浓度的递增,FB内Wnt-1和β-catenin表达的阳性细胞数逐渐减少(P<0.05)。在未加入亚硒酸钠培养的HSFB中Wnt-1和β-catenin蛋白呈现强阳性表达。结论:亚硒酸钠在抑制HSFB的增殖过程中,对Wnt-1/β-catenin信号通路的抑制起到关键性的作用。

关键词： Wnt-1/β-catenin通路亚硒酸钠人增生性瘢痕成纤维细胞

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