检索结果-内蒙古大学图书馆

陕西医学杂志 2023年第1期52卷 3-6,22页

作者：孙晶莹李研黄晓燕靳占奎徐翠香常乐王建华陕西省人民医院感染与免疫疾病重点实验室陕西西安710068 陕西省细胞免疫工程技术研究中心陕西西安710068 陕西省人民医院骨科陕西西安710068 陕西省人民医院普外二科陕西西安710068

目的:制备链霉亲和素(SA)连接的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)融合蛋白(SA-hGM-CSF),并对其生物学活性进行鉴定。方法:在NCBI数据库中查找SA和hGM-CSF序列,将序列合成后连接入Pet28表达载体中,构建SA-hGM-CSF-Pet28重组表达载... 详细信息

目的:制备链霉亲和素(SA)连接的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)融合蛋白(SA-hGM-CSF),并对其生物学活性进行鉴定。方法:在NCBI数据库中查找SA和hGM-CSF序列,将序列合成后连接入Pet28表达载体中,构建SA-hGM-CSF-Pet28重组表达载体,在BL21(DE3)表达感受态中利用IPTG诱导剂诱导表达,经His镍柱纯化,尿素梯度复性,聚丙烯酰胺凝胶电泳法和蛋白质印迹法(WB)鉴定融合蛋白,通过TF-1细胞检测融合蛋白的生物学活性。结果:SA-hGM-CSF融合蛋白可在BL21(DE3)中高效诱导表达,经His镍柱纯化后该融合蛋白纯度较高。经尿素梯度复性后,细胞学实验验证该融合蛋白具有生物学活性。结论:成功表达具有生物活性的融合蛋白SA-hGM-CSF,该结果为SA-hGM-CSF表面锚定修饰的肿瘤细胞疫苗的研究提供了实验基础。

关键词：人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子链霉亲和素融合蛋白蛋白纯化表达载体构建蛋白活性鉴定

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3D打印阴道模具辅助人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子混悬液热灌注治疗对宫颈癌放射性阴道炎的影响

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西北药学杂志 2025年第2期40卷 194-198页

作者：侯光营毛裔龙苗珺珺胡建伟郜蕾张永侠袁香坤沧州中西医结合医院放化疗二科沧州061000 大连医科大学附属第一医院联合路院区放疗科大连116000

目的分析应用3D打印阴道模具辅助人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子混悬液(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)热灌注治疗宫颈癌放射性阴道炎的疗效,为其临床推广提供理论依据。方法将本院收治的行宫颈癌根治性放疗... 详细信息

目的分析应用3D打印阴道模具辅助人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子混悬液(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)热灌注治疗宫颈癌放射性阴道炎的疗效,为其临床推广提供理论依据。方法将本院收治的行宫颈癌根治性放疗并出现放射性阴道炎的60例患者平均分为对照组和试验组。GM-CSF混悬液的配制方法为:将GM-CSF 400μg溶于30 mL生理盐水。对照组采用GM-CSF混悬液单纯阴道冲洗,试验组采用自研3D打印阴道模具辅助GM-CSF混悬液阴道热灌注治疗,将GM-CSF混悬液置于恒温箱中加热至42℃后行阴道灌注,灌注完成后行微波深部热疗。观察患者的阴道炎症状变化情况;研究者自行拟定满意度调查问卷统计患者的满意度;记录2组患者的阴道pH值、阴道局部体征评分、阴道清洁度评分;记录2组的康复时间、药物不良反应发生情况和使用抗生素的情况。结果试验组的总有效率为86.67%,对照组的总有效率为63.33%,2组比较差异有统计学意义(t=2.223,P<0.05)。问卷调查结果显示试验组很满意和基本满意的患者比例明显高于对照组,不满意的患者比例低于对照组(t=2.476,P<0.05),试验组患者恢复性生活的比例高于对照组。试验组患者合并细菌感染的比例为24.36%,明显低于对照组的47.29%,差异有统计学意义(t=1.327,P<0.05)。对照组治疗前阴道pH值与治疗3个月后阴道pH值比较差异无统计学意义(P>0.05),试验组治疗前阴道pH值与治疗3个月后阴道pH值比较差异有统计学意义(P<0.05);试验组的阴道局部体征评分及阴道清洁度评分均在治疗3个月后明显改善,且与对照组比较差异有统计学意义(P>0.05)。试验组的康复时间为(38.4±14.4)d,对照组的康复时间为(56.2±12.8)d,差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者均未发生明显不良反应。结论3D打印阴道模具辅助GM-CSF混悬液热灌注治疗宫颈癌放射性阴道炎的疗效确切,不良反应轻微,可在临床推广应用。

关键词：宫颈癌放射性阴道炎 3D打印阴道模具人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子

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重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子质量肽图分析及二硫键定位

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中国现代应用药学 2023年第16期40卷 2277-2281页

作者：刘冰王莹董衍东邹寒艳重庆市食品药品检验检测研究院重庆401121

目的采用液相色谱-质谱联用技术绘制重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的质量肽图并鉴定二硫键位点。方法重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子原液经变性、还原、烷基化、脱盐、胰蛋白酶和V8酶分别酶解后进行质量肽图分析;原液经变性、烷... 详细信息

目的采用液相色谱-质谱联用技术绘制重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的质量肽图并鉴定二硫键位点。方法重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子原液经变性、还原、烷基化、脱盐、胰蛋白酶和V8酶分别酶解后进行质量肽图分析;原液经变性、烷基化、脱盐、V8酶和V8酶结合胰蛋白酶分别酶解后进行二硫键定位鉴定。结果胰蛋白酶酶切的质量肽图共发现14个匹配肽段,V8酶酶切的质量肽图共发现18个匹配肽段,肽段覆盖率均为100%。经V8酶酶切仅鉴定到1种二硫键匹配方式即Cys55-Cys97,经V8酶结合胰蛋白酶酶切鉴定到2种二硫键匹配方式即Cys55-Cys97和Cys89-Cys122。结论应用液相色谱-质谱联用技术进行质量肽图分析和二硫键定位可作为重组蛋白药物质量控制方法。

关键词：人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子质量肽图二硫键液相色谱-质谱联用

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重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子原液中相关蛋白的定性分析

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华西药学杂志 2023年第2期38卷 172-175页

作者：刘冰重庆市食品药品检验检测研究院重庆401121

目的分析鉴定国产重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子原液中的相关蛋白。方法采用液质联用技术,对产品的相关蛋白进行相对分子量测定及肽图分析,分别从分子量及肽段水平进行鉴定。结果对两家生产企业的原液进行检测,相对分子量测定结果显... 详细信息

目的分析鉴定国产重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子原液中的相关蛋白。方法采用液质联用技术,对产品的相关蛋白进行相对分子量测定及肽图分析,分别从分子量及肽段水平进行鉴定。结果对两家生产企业的原液进行检测,相对分子量测定结果显示:样品中存在的相关蛋白有氧化形式、乙酰化形式。肽图分析结果显示:在第1位、第79位或第80位甲硫氨酸上发生了氧化修饰,在第64位或/和第73位赖氨酸上发生了乙酰化修饰。结论为重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的质量研究提供了依据。

关键词：人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子相关蛋白原液液质联用重组蛋白肽图分子量质量控制

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重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对深II度烧伤创面愈合的疗效观察

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医药前沿 2014年第9期 19-20页

作者：吴燕文王春明张文君南京公安消防医院江苏南京 210008

目的：了解重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）凝胶剂对深I 度烧伤创面的治疗效果。方法试验组52例创面使用rhGM-CSF凝胶剂，对照组39例使用安慰剂。观察其创面愈合情况。结果试验组深I 度创面愈合时间为（17.3±1.6）d... 详细信息

目的：了解重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）凝胶剂对深I 度烧伤创面的治疗效果。方法试验组52例创面使用rhGM-CSF凝胶剂，对照组39例使用安慰剂。观察其创面愈合情况。结果试验组深I 度创面愈合时间为（17.3±1.6）d，较对照组（21.6±1.4）d明显缩短（p<0.01）。试验组10、14、21、28d的平均创面愈合率分别为20.1%、59.8%、89.6%和99.8%，均高于对照组12.4%、40.9%、76.3%和95.3%（p<0.01）。未见与受试药物有关的不良反应。结论 rhGM-CSF凝胶剂能促进烧伤患者I 度创面愈合，并且有一定的安全性。

关键词：烧伤创面愈合人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子重组

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重组人GM—CSF基因在昆虫细胞中的表达

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1995年第5期27卷 559-564页

作者：施晓青秦浚川朱洁朱德煦宓怡德吴祥甫南京大学生物化学系中国科学院上海生物化学研究所

利用苜蓿夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）带β－Ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ基因标记的非融合蛋白基因转移载体ｐＢｌｕｅＢａｃ将人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）基因成功地插入病毒ＡｃＮＰＶ的基因组中．ｈＧＭ－... 详细信息

利用苜蓿夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）带β－Ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ基因标记的非融合蛋白基因转移载体ｐＢｌｕｅＢａｃ将人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）基因成功地插入病毒ＡｃＮＰＶ的基因组中．ｈＧＭ－ＣＳＦ基因在感染重组病毒的草地夜蛾（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）培养细胞Ｓｆ９中得到表达，感染后的Ｓｆ９细胞培养液能刺激人骨髓细胞在体外形成典型的集落，表达水平可达２．７×１０５５ＣＦＵ／ｍｌ。以ｈＧＭ－ＣＳＦ单抗所作的ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ表明，表达的ｈＧＭ－ＣＳＦ对是３种糖基化程度不同的产物，分子量分别约为１５ｋｄ，１８ｋｄ和２０ｋｄ。

关键词：人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子重组杆状病毒草地夜蛾细胞

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家蚕生物反应器表达人GM-CSF的研究

家蚕生物反应器表达人GM-CSF的研究

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作者：陈健浙江大学

学位级别：博士

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子是一种在体外调控粒细胞、单核／巨噬细胞分化、增殖和存活的造血性糖蛋白细胞因子。本研究成功地利用家蚕核型多角体杆状病毒表达系统在家蚕蛹中表达并纯化出重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子。通过... 详细信息

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子是一种在体外调控粒细胞、单核／巨噬细胞分化、增殖和存活的造血性糖蛋白细胞因子。本研究成功地利用家蚕核型多角体杆状病毒表达系统在家蚕蛹中表达并纯化出重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子。通过RT-PCR技术，我们利用一对特异引物从人胚纤维原细胞中扩增到人GM-CSF基因。将扩增的GM-CSF PCR产物用EcoRI和BamHI酶切后插入到同样酶切的家蚕杆状病毒转移载体pUBM-4中，从而构成了重组载体pBM-CSF。将该质粒与线性化的Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞BmN，在培养的贴壁细胞中挑出空斑，经过3轮纯化，获得重组病毒vBm-CSF。我们利用重组病毒vBm-CSF感染家蚕蛹来表达重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子。经SDS-PAGE和Western blotting鉴定表明在重组病毒感染的家蚕蛹体内存在重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子。表达产物分子量约为29kDa，在蚕蛹中的表达量约为97μg／蛹;在蚕蛹粗提物中的rhGM-CSF生物活性约为6.8×10cfu／mg。与以前在家蚕细胞和幼虫中分泌表达的hGM-CSF相比，我们在家蚕蛹表达的hGM-CSF表现出较大的差异：分子量较大、表达量和生物活性偏低，这可能与蛋白的翻译后修饰有关。因而，有必要对蚕蛹表达的hGM-CSF进行大量表达和纯化以鉴定该表达产物的相关理化性质。为此，我们将重组病毒接种了大量的蚕蛹来表达hGM-CSF。通过硫酸铵分级沉淀、凝胶排阻过滤和离子交换层析多步纯化，最终我们以10.5％的得率从700头接种重组病毒的家蚕蛹中获得3.5mg纯度达97％的蚕蛹表达产物Bm-hGM-CSF。经检测，高纯度的表达产物Bm-hGM-CSF生物活性达约8.4×10cfs／mg。对纯化的表达产物进行理化性质分析。等电聚焦电泳表明，家蚕蛹表达产物Bm-hGM-CSF等电点约为5.1，与家蚕细胞和幼虫中表达hGM-CSF很接近;肽谱分析发现，Bm-hGM-CSF与原核hGM-CSF在肽谱的表现上非常相似;去糖基化分析表明，Bm-hGM-CSF带有高甘露糖型糖链。这些情况表明，高度的高甘露糖化导致了Bm-hGM-CSF表现出较大差异。

关键词：人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子家蚕蛹家蚕杆状病毒表达生物反应器

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