检索结果-内蒙古大学图书馆

大连理工大学学报 2002年第1期42卷 47-50页

作者：易庆王关林方宏筠大连理工大学化工学院辽宁师范大学生命科学院辽宁大连116029

采用 PCR技术人工合成了一段长约 1 75 bp的人表皮生长因子 ( h EGF)的基因片段 .为了便于克隆 ,在该片段的 5′端设计了 Pst 的酶切位点及与 p US1 86载体 signal sequence相连接的碱基部分 ,在 3′端设计了 Hind 的酶切位点及终止密码... 详细信息

采用 PCR技术人工合成了一段长约 1 75 bp的人表皮生长因子 ( h EGF)的基因片段 .为了便于克隆 ,在该片段的 5′端设计了 Pst 的酶切位点及与 p US1 86载体 signal sequence相连接的碱基部分 ,在 3′端设计了 Hind 的酶切位点及终止密码子 .经 DNA测序分析 ,合成的片段与已发表的 h EGF在序列上完全一致 ;之后将其克隆至枯草杆菌分泌型质粒载体p US1 86上 ,构建重组载体 p USE并转化一株枯草杆菌突变菌株 BS992 0感受态细胞 ;以 PCR法快速筛选重组菌落 ,RIA检测结果表明 BS992 0阳性转化子能够表达和分泌 h

关键词：枯草杆菌人表皮生长因子基因表达 PCR技术基因合成酶切位点尿抑胃素多肽

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人表皮生长因子在凝胶层析中的某些分离性质

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化工学报 2002年第4期53卷 369-372页

作者：童望宇姚善泾朱自强浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

考察了流速、进样体积与柱床高度对人表皮生长因子 (humanepidermalgrowthfactor,hEGF)分离行为的影响 .结果表明 :在实验范围内 ,流速对hEGF的分配系数影响较小 ,hEGF的分配系数随样品体积的增加而上升 ,但柱床高度对hEGF的分配系数几... 详细信息

考察了流速、进样体积与柱床高度对人表皮生长因子 (humanepidermalgrowthfactor,hEGF)分离行为的影响 .结果表明 :在实验范围内 ,流速对hEGF的分配系数影响较小 ,hEGF的分配系数随样品体积的增加而上升 ,但柱床高度对hEGF的分配系数几乎无影响 .在流速小于 6cm·h-1时 ,hEGF的标准偏差下降显著 ,而高流速对其影响较小 .当进样量小于 3ml时 ,hEGF的标准偏差上升较缓 ;当进样量大于 3ml时 ,hEGF的标准偏差显著上升 .在柱床高度小于 8cm时 ,hEGF的标准偏差下降较快 ;当柱床高度高于 8cm时。

关键词：人表皮生长因子多肽凝胶过滤层析生化分离

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人表皮生长因子(hEGF)基因在蓝藻中的表达

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Acta Botanica Sinica 2001年第12期43卷 1260-1264页

作者：戴溦施定基张卉钟晖冉亮彭国宏甘人宝陈素娟连慕兰中国科学院植物研究所北京100093 解放军301医院东亚免疫研究所北京100853 中国科学院海洋研究所青岛266071 中国科学院生物化学研究所上海200031 北京师范大学生命科学学院北京100875

人表皮生长因子 (hEGF)是由 5 3个氨基酸组成的蛋白 ,在临床上内服与外敷可促进内外表皮细胞的生长。将人工合成的hEGF基因连接到质粒pRL_489上 ,位于启动子psbA下游。验证连接成功后 ,用三亲接合转移方法将载体pRL_hEGF导入聚球藻Synec... 详细信息

人表皮生长因子 (hEGF)是由 5 3个氨基酸组成的蛋白 ,在临床上内服与外敷可促进内外表皮细胞的生长。将人工合成的hEGF基因连接到质粒pRL_489上 ,位于启动子psbA下游。验证连接成功后 ,用三亲接合转移方法将载体pRL_hEGF导入聚球藻Synechococcussp .PCC 70 0 2和鱼腥藻Anabaenasp .PCC 712 0。由于pRL_hEGF没有能在单细胞蓝藻中自主复制的复制子 ,通过筛选 ,hEGF在聚球藻 70 0 2中是整合到蓝藻染色体上进行表达的。用PCR扩增的方法在两种转基因藻中均检测到hEGF基因的存在。放射免疫分析证明 ,hEGF基因在两种转基因藻中均得到了表达。而且 ,在聚球藻 70 0

关键词：人表皮生长因子鱼腥藻聚球藻载体转基因蓝藻三亲接合转移

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人表皮生长因子在转基因番茄中成功表达

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中国药理学通报 2007年第5期23卷 692-695页

作者：智庆文张凤英柴敏于新惠孙曼霁军事医学科学院毒物药物研究所北京100850 中国人民解放军防化指挥工程学院北京102205 北京市农林科学院蔬菜研究中心北京100097 淄博师范高等专科学校山东淄博255100

目的以转基因番茄生产人表皮生长因子(hEGF)。方法构建hEGF基因的表达载体pCAM-35S-hEGF,通过电激法转化到农杆菌菌株C58中,采用叶盘法转化番茄品系cg2002-14。结果子叶经发芽及生根诱导培养后得到了再生植株。PCR分析表明,hEGF基因已... 详细信息

目的以转基因番茄生产人表皮生长因子(hEGF)。方法构建hEGF基因的表达载体pCAM-35S-hEGF,通过电激法转化到农杆菌菌株C58中,采用叶盘法转化番茄品系cg2002-14。结果子叶经发芽及生根诱导培养后得到了再生植株。PCR分析表明,hEGF基因已整合到番茄的基因组中。放射免疫法(RIA)测得hEGF在果实中平均含量为3.78ng·g-1。结论成功构建了hEGF基因的表达载体,获得了表达hEGF的转基因番茄植株。

关键词：转基因番茄人表皮生长因子

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人表皮生长因子融合蛋白在干酪乳杆菌中的表达

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华中农业大学学报 2018年第4期37卷 70-77页

作者：汪舒庆葛向阳陈正军华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

以干酪乳杆菌作为传递载体,构建表达人表皮生长因子的重组干酪乳杆菌,探讨原位表达特定蛋白的可行性。采用SOE PCR合成人表皮生长因子序列,克隆到干酪乳杆菌表达载体pELWH,构建pELWHhEGF重组质粒,将该质粒电转化干酪乳杆菌宿主,采用West... 详细信息

以干酪乳杆菌作为传递载体,构建表达人表皮生长因子的重组干酪乳杆菌,探讨原位表达特定蛋白的可行性。采用SOE PCR合成人表皮生长因子序列,克隆到干酪乳杆菌表达载体pELWH,构建pELWHhEGF重组质粒,将该质粒电转化干酪乳杆菌宿主,采用Western blot及间接免疫荧光检测目的蛋白的表达,并通过细胞增殖实验验证目的蛋白的生物学活性。结果表明:在重组菌的细胞表面及培养液上清中均检测到SlpA-hEGF融合蛋白,分子质量约55ku;细胞增殖实验显示SlpA-hEGF融合蛋白及干酪乳杆菌上清均能显著促进NIH/3T3细胞的增殖。

关键词：干酪乳杆菌人表皮生长因子 SlpA-hEGF融合蛋白细胞增殖

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人表皮生长因子基因的克隆及其真核表达载体的构建

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军事医学科学院院刊 1999年第3期23卷 237-239页

作者：范青源戴方平谢毅应康林卿陈玉林第二军医大学长海医院上海200433

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人表皮生长因子融合蛋白的表达及纯化工艺的优化

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中国生物工程杂志 2010年第3期30卷 74-78页

作者：张海淼刘孝菊田海山万晓珊邓林李校堃吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心长春130118 吉林农业大学生命科学学院长春130118 吉林大学公共卫生学院长春1300021

探讨了在大肠杆菌中生产小分子泛素样修饰蛋白与人表皮生长因子(SUMO-hEGF)的最佳表达及纯化条件。将重组表达载体pET3c-SUMO-hEGF转化到大肠杆菌BL21(AI)中,以阿拉伯糖为诱导剂,对诱导表达参数进行优化,并进一步通过离子交换层析,Ni-NT... 详细信息

探讨了在大肠杆菌中生产小分子泛素样修饰蛋白与人表皮生长因子(SUMO-hEGF)的最佳表达及纯化条件。将重组表达载体pET3c-SUMO-hEGF转化到大肠杆菌BL21(AI)中,以阿拉伯糖为诱导剂,对诱导表达参数进行优化,并进一步通过离子交换层析,Ni-NTA亲和层析及分子筛层析等进行纯化分析。结果表明:SUMO-hEGF在BL21(AI)中的最佳诱导表达温度为37℃,诱导剂阿拉伯糖的最佳浓度为5.0g/L,最佳诱导表达时间为4h,表达量约为20.2%,Western blot分析证实,纯化后的蛋白是hEGF,为进一步开发hEGF基因工程药物奠定了基础。

关键词：人表皮生长因子阿拉伯糖小分子泛素样修饰蛋白纯化

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人表皮生长因子对脂多糖诱导小肠上皮细胞损伤的保护作用

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中国临床药理学杂志 2021年第13期37卷 1668-1671页

作者：何潜邵继华樊强陈喆武汉市第八医院肛肠科

目的研究人表皮生长因子（EGF）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠小肠上皮IEC-6细胞损伤的保护作用和潜在机制。方法用噻唑蓝（MTT）法分别检测脂多糖和人表皮生长因子对IEC-6细胞存活率的影响。将细胞分为对照组（不做任何处理）、模型组(1μ... 详细信息

目的研究人表皮生长因子（EGF）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠小肠上皮IEC-6细胞损伤的保护作用和潜在机制。方法用噻唑蓝（MTT）法分别检测脂多糖和人表皮生长因子对IEC-6细胞存活率的影响。将细胞分为对照组（不做任何处理）、模型组(1μg·mL-1脂多糖处理细胞24 h)和低(先后用1μg·mL-1脂多糖和100 ng·mL-1人表皮生长因子处理24 h)、高浓度实验组(先后用1μg·mL-1脂多糖和150 ng·mL-1人表皮生长因子处理24 h)。用MTT法、流式细胞术和蛋白质印迹法分别检测IEC-6细胞存活率、凋亡率以及酪氨酸激酶1/信号转导与转录激活子3（JAK1/STAT3）通路相关蛋白表达。结果对照组、模型组和低、高浓度实验组细胞的存活率分别为（99.37±0.76）%,（65.52±4.97）%,（87.19±4.35）%和（75.94±3.60）%;凋亡率分别为（4.24±0.61）%,（12.37±2.06）%,（5.98±0.94）%,（8.15±1.13）%,p-JAK1的相对表达量分别为0.42±0.05,0.93±0.04,0.36±0.03,0.39±0.04,p-STAT3的相对表达量分别为0.73±0.06,0.94±0.05,0.32±0.02,0.44±0.03。模型组与对照组比较,差异有统计学意义;低、高浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论一定浓度人表皮生长因子可以修复脂多糖诱导的小肠上皮细胞IEC-6的损伤,人表皮生长因子可能通过JAK1/STAT3信号通路保护肠道上皮细胞。

关键词：人表皮生长因子小肠上皮细胞细胞凋亡酪氨酸激酶1/信号转导与转录激活子3信号通路

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人表皮生长因子基因转染HaCaT细胞构建人皮肤替代物治疗大鼠全层皮肤烧伤的研究

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中华烧伤杂志 2012年第5期28卷 399-400页

作者：胡大海张战凤张彦刚张万福王洪涛蔡维霞白晓智朱华宇石继红汤朝武第四军医大学西京医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

截至目前，许多人工皮肤均由体外培养包皮等组织来源的KC构建而成。其不足是体外培养的KC扩增能力有限，且易于老化。此外，由于KC源自不同个体，致使构建的人工皮肤存在个体差异。通过永生化细胞构建人工皮肤可避免类似问题。HaCaT细... 详细信息

截至目前，许多人工皮肤均由体外培养包皮等组织来源的KC构建而成。其不足是体外培养的KC扩增能力有限，且易于老化。此外，由于KC源自不同个体，致使构建的人工皮肤存在个体差异。通过永生化细胞构建人工皮肤可避免类似问题。HaCaT细胞是一种永生化人KC，在体外具有完整的表皮细胞分化能力和较强增殖能力，且无致瘤性。目前已有报道通过HaCaT细胞成功构建人皮肤替代物，表明该细胞是一种可用于皮肤组织工程的潜在种子细胞。

关键词： HaCaT细胞皮肤替代物细胞构建人表皮生长因子皮肤烧伤基因转染全层大鼠

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人表皮生长因子受体2在表皮生长因子受体突变中晚期肺腺癌中的表达及其意义

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肿瘤研究与临床 2017年第5期29卷 304-307页

作者：魏崴吴华振罗志明李凯恒孟江周华平薛兴阳广州医科大学附属肿瘤医院胸外科 510095 广东省惠州市中心人民医院胸外科 516001 广东药科大学中药学院广州510006

目的检测人表皮生长因子受体2（HER-2）在表皮生长因子受体（EGFR）突变的中晚期肺腺癌中的表达情况,初步探讨其成为治疗EGFR突变患者耐药的潜在靶点的可能性.方法选取84例EGFR突变的中晚期肺腺癌石蜡组织切片,应用免疫组织化学方法检... 详细信息

目的检测人表皮生长因子受体2（HER-2）在表皮生长因子受体（EGFR）突变的中晚期肺腺癌中的表达情况,初步探讨其成为治疗EGFR突变患者耐药的潜在靶点的可能性.方法选取84例EGFR突变的中晚期肺腺癌石蜡组织切片,应用免疫组织化学方法检测HER-2蛋白表达情况,分析其与患者临床病理特征的关系.结果 HER-2蛋白在EGFR突变的中晚期肺腺癌中主要分布于细胞膜.HER-2蛋白在EGFR突变患者组织中的过表达率为33.3%（28/84）.HER-2蛋白在年龄〉50岁患者中的过表达率为40.3%（27/67）,明显高于年龄≤50岁患者的5.9%（1/17）,两者差异有统计学意义（χ2=7.227,P=0.007）.在高分化患者中的过表达率[44.4%（8/18）]较中低分化患者[30.3%（20/66）]有增高趋势,但差异无统计学意义（χ2=1.273,P=0.259）.携带EGFR 21外显子突变患者的HER-2蛋白过表达率[40.5%（17/42）]较EGFR 19外显子突变患者[25.0%（10/40）]有增高趋势,但差异无统计学意义（χ2=2.222,P=0.136）.结论 HER-2蛋白在EGFR突变的中晚期肺腺癌患者中过表达率较高,且与患者年龄和肿瘤分化程度相关.HER-2有望成为EGFR突变患者耐药的潜在治疗靶点.

关键词：肺肿瘤腺癌受体表皮生长因子突变免疫组织化学人表皮生长因子受体2

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