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第二军医大学学报 1996年第S1期17卷 8-11页

作者：戴方平范青源应康潘耀良张素贞方之扬陈玉林葛绳德第二军医大学长海医院烧伤科

目的：探讨外源性基因真核表达的机理及角朊细胞作为基因治疗靶细胞的可能性。方法：选用已构建的ｐＢＫ－ＳｉｇｎａｌＥＧＦ质粒，在脂质体ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ的介导下转染培养成７０％～８０％连片的人角朊细胞；采用逆转录... 详细信息

目的：探讨外源性基因真核表达的机理及角朊细胞作为基因治疗靶细胞的可能性。方法：选用已构建的ｐＢＫ－ＳｉｇｎａｌＥＧＦ质粒，在脂质体ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ的介导下转染培养成７０％～８０％连片的人角朊细胞；采用逆转录ＰＣＲ方法检测外源性基因的转录水平；通过表皮细胞生长因子放免测定法检测外源性基因的翻译水平。结果：（１）外源性人表皮细胞生长因子（ｈＥＧＦ）基因转染角朊细胞后有转录表达；（２）外源性ｈＥＧＦ基因转染角朊细胞后有ＥＧＦ蛋白分泌，以基因转染后４８ｈ分泌水平最高，约２～３ｎｇ／ｍｌ。结论：ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ介导ｐＢＫ－Ｓｉｇｎａｌ－ＥＧＦ质粒转染角朊细胞可获得瞬时表达的ＥＧＦ蛋白。

关键词：基因转染人表皮细胞生长因子质粒脂质体角朊细胞

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人表皮细胞生长因子及其研究进展

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生物技术进展 2011年第2期1卷 122-129页

作者：赵宏刘昱辉中国农业科学院生物技术研究所北京100081

表皮细胞生长因子是人体内一种重要自分泌/旁分泌的生长因子。人表皮细胞生长因子及其受体调控细胞增殖、分化、迁移、生存等与细胞命运密切相关的过程,在细胞发育、伤口愈合、器官发生中发挥重要作用。本文将对人表皮细胞生长因子的合... 详细信息

表皮细胞生长因子是人体内一种重要自分泌/旁分泌的生长因子。人表皮细胞生长因子及其受体调控细胞增殖、分化、迁移、生存等与细胞命运密切相关的过程,在细胞发育、伤口愈合、器官发生中发挥重要作用。本文将对人表皮细胞生长因子的合成、分泌、生化特性、分子结构、家族、受体、信号通路、生物学活性、生理功能、应用及制备方法等方面进行综述。

关键词：人表皮细胞生长因子信号通路活性制备

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一种针对人表皮细胞生长因子受体2（HER2）的肿瘤亲和肽

一种针对人表皮细胞生长因子受体2（HER2）的肿瘤亲和肽

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作者：顾月清黄克帅常琦尹显锐韩智豪许昊然 210009 江苏省南京市鼓楼区童家巷24号

本发明属于生物医学工程领域，具体涉及一种针对人表皮细胞生长因子受体2的肿瘤亲和肽及其应用,所述肿瘤亲和肽包括Leu‑Arg‑Leu‑Ser‑Gly‑Gly‑Hyp‑Gln等6条序列。药效学实验证明本发明的多肽可用于癌症诊断和治疗中。这些高亲和多肽能和... 详细信息

标准号: CN115677833A

本发明属于生物医学工程领域，具体涉及一种针对人表皮细胞生长因子受体2的肿瘤亲和肽及其应用,所述肿瘤亲和肽包括Leu‑Arg‑Leu‑Ser‑Gly‑Gly‑Hyp‑Gln等6条序列。药效学实验证明本发明的多肽可用于癌症诊断和治疗中。这些高亲和多肽能和多种肿瘤细胞特异性结合。利用靶向肽高亲和力特性可用于恶性肿瘤的光学成像和核医学显像。这些高亲和力多肽单体，多肽二聚体或者多肽的多聚体直接或间接的偶联荧光染料可作为肿瘤特异性靶向分子探针，预期能达到对肿瘤边界精准定位的效果，可为术前和术中影像导航带来实时性，具有提高手术精确度的优点。此系列多肽单体，二聚体或者多聚体还可偶联放射性核素在体实时检测恶性肿瘤，以达到疾病诊断或者治疗的目的。

关键词：高亲和力肿瘤亲和多聚体恶性肿瘤多肽可用偶联人表皮细胞生长因子肿瘤特异性靶向分子生物医学工程领域多肽二聚体放射性核素特异性结合药效学实验癌症诊断多肽单体光学成像疾病诊断精准定位实时检测系列多肽荧光染料肿瘤边界肿瘤细胞靶向肽多肽能二聚体核医学实时性探针显像治疗影像应用

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一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法

一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法

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作者：王菊芳马毅李杉吴少敏余结莹 510640 广东省广州市天河区五山路381号

本发明公开一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法。该方法是通过构建表达载体pET21a‑hEGF‑Mxe‑SUMO，实现了不带任何外源氨基酸的hEGF蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效可溶表达。本发明为促进外源蛋白在大肠杆菌... 详细信息

标准号: CN106244610B

本发明公开一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法。该方法是通过构建表达载体pET21a‑hEGF‑Mxe‑SUMO，实现了不带任何外源氨基酸的hEGF蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效可溶表达。本发明为促进外源蛋白在大肠杆菌可溶表达提供了一种有效的思路和方法，SUMO标签融合到目的蛋白C端，能够有效地提高融合蛋白的功能性表达效率，进一步在融合蛋白中间加入可以自剪切的内含肽，在还原环境中切除融合蛋白的内含肽和SUMO蛋白，获得不带任何外源氨基酸序列且具有生物学活性的人表皮细胞生长因子。本方法为复杂的真核生物蛋白质在原核表达系统的高效生产提供了理论基础与设计新思路。

关键词：大肠杆菌融合蛋白人表皮细胞生长因子功能性表达内含肽可溶外源氨基酸序列真核生物蛋白质构建表达载体原核表达系统设计新思路生物学活性外源氨基酸高效生产还原环境理论基础目的蛋白外源蛋白剪切有效地切除蛋白融合

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一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法

一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法

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作者：王菊芳马毅李杉吴少敏余结莹 510640 广东省广州市天河区五山路381号

标准号: CN106244610A

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皮肤细胞增殖效果得到增加的热稳定性人表皮细胞生长因子-蜘蛛毒融合蛋白及包含其作为有效成分的用于改善皮肤皱纹及维持弹性的化妆料组合物

皮肤细胞增殖效果得到增加的热稳定性人表皮细胞生长因子-蜘蛛毒...

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作者：李宣敎柳汉凤李星兰崔钟南金兑炫崔泰元郑泰和权亨一韩国首尔

本发明涉及由SEQ ID NO：2的氨基酸序列组成的皮肤细胞增殖效果得到增加的热稳定性人表皮细胞生长因子‑蜘蛛毒融合蛋白；编码由大肠杆菌密码子优化的SEQ ID NO：1的碱基序列组成的人表皮细胞生长因子‑蜘蛛毒融合蛋白的基因；包含所述基... 详细信息

标准号: CN108137663A

本发明涉及由SEQ ID NO：2的氨基酸序列组成的皮肤细胞增殖效果得到增加的热稳定性人表皮细胞生长因子‑蜘蛛毒融合蛋白；编码由大肠杆菌密码子优化的SEQ ID NO：1的碱基序列组成的人表皮细胞生长因子‑蜘蛛毒融合蛋白的基因；包含所述基因的重组载体；由所述重组载体转化的宿主细胞；通过使用所述重组载体转化宿主细胞来生产人表皮细胞生长因子‑蜘蛛毒融合蛋白的方法；以及包含人表皮细胞生长因子‑蜘蛛毒融合蛋白作为有效成分的用于改善皮肤皱纹及维持皮肤弹性的化妆料组合物；本发明的化妆料组合物具有热稳定性优异，并且能够增强改善皮肤皱纹及维持皮肤弹性的效果，因此，今后能够有效使用于功能性化妆品领域或美容整形领域中。

关键词：人表皮细胞生长因子融合蛋白蜘蛛毒重组载体皮肤弹性皮肤皱纹热稳定性化妆料大肠杆菌密码子功能性化妆品皮肤细胞增殖转化宿主细胞氨基酸序列碱基序列宿主细胞基因整形美容优化转化生产

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皮肤细胞增殖及抗氧化效果得到增加的肉毒杆菌毒素-人表皮细胞生长因子融合蛋白及含有其作为有效成分的用于皮肤再生及改善皱纹的化妆料组合物

皮肤细胞增殖及抗氧化效果得到增加的肉毒杆菌毒素-人表皮细胞生...

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作者：李宣敎柳汉凤李星兰崔钟南崔泰元金兑炫郑泰和权亨一韩国首尔

本发明涉及由SEQ ID NO：2的氨基酸序列组成的皮肤细胞增殖及抗氧化效果得到增加的肉毒杆菌毒素‑人表皮细胞生长因子融合蛋白、由大肠杆菌密码子优化的SEQ ID NO：1的碱基序列组成的编码肉毒杆菌毒素‑人表皮细胞生长因子融合蛋白的基因... 详细信息

标准号: CN108350042A

本发明涉及由SEQ ID NO：2的氨基酸序列组成的皮肤细胞增殖及抗氧化效果得到增加的肉毒杆菌毒素‑人表皮细胞生长因子融合蛋白、由大肠杆菌密码子优化的SEQ ID NO：1的碱基序列组成的编码肉毒杆菌毒素‑人表皮细胞生长因子融合蛋白的基因、包含所述基因的重组载体、由所述重组载体转化的宿主细胞、用所述重组载体转化宿主细胞来生产肉毒杆菌毒素‑人表皮细胞生长因子融合蛋白的方法及包含肉毒杆菌毒素‑人表皮细胞生长因子融合蛋白作为有效成分的用于改善皮肤皱纹及维持皮肤弹性的化妆料组合物，本发明的化妆料组合物具有能够增强皮肤皱纹的改善及皮肤再生效果的效果，因此今后能够有效地使用于功能性化妆品领域或美容整形领域中。

关键词：人表皮细胞生长因子肉毒杆菌毒素融合蛋白重组载体皮肤皱纹化妆料大肠杆菌密码子功能性化妆品皮肤细胞增殖转化宿主细胞氨基酸序列碱基序列皮肤弹性皮肤再生宿主细胞基因抗氧化有效地整形美容优化转化生产

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利用人工油体和植物油体表达人表皮细胞生长因子hEGF

利用人工油体和植物油体表达人表皮细胞生长因子hEGF

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作者：赵宏中国农业科学院

学位级别：硕士

人表皮细胞生长因子(human epidermal growth factor,hEGF)是存在于唾液、胃液、血液、尿液中的一种分泌肽,由53个氨基酸组成,分子量为6221Da,等电点为4.6,对热稳定,根据分泌方式可分为旁分泌和自分泌两种。人表皮细胞生长因子含3个分... 详细信息

人表皮细胞生长因子(human epidermal growth factor,hEGF)是存在于唾液、胃液、血液、尿液中的一种分泌肽,由53个氨基酸组成,分子量为6221Da,等电点为4.6,对热稳定,根据分泌方式可分为旁分泌和自分泌两种。人表皮细胞生长因子含3个分子内二硫键,这3个二硫键对其结构稳定和功能发挥起重要作用。hEGF与其受体的相互作用,介导了细胞内一系列至关重要的生理功能,调控细胞增殖、分化、迁移、生存等与细胞命运密切相关的过程,在细胞发育、伤口愈合、器官发育中发挥重要作用。hEGF在促进伤口和溃疡愈合方面具有显著作用,因此被广泛应用于医药和化妆品领域,但hEGF组织提取和化学合成都存在严重的不足,目前临床上应用的hEGF主要是利用基因工程表达和生产的。植物油体表达体系的原理是将目的蛋白的编码基因插在油体膜蛋白OLEOSIN基因的3’端,编码OLEOSIN-目的蛋白的基因会在转基因植物种子的油体上特异表达,利用油体亲脂疏水的特性,转基因植物种子经简单的粉碎-离心-回收上层油相-去油,即可获得重组的油体蛋白。植物油体表达体系具有融合蛋白易于分离,提取工艺简单,重组蛋白可在种子中长期稳定贮存、易于运输,无动物病毒污染,蛋白后修饰系统完善等诸多优点。国内外已利用该体系在转基因植物种子中表达了GUS、载脂蛋白A1,胰岛素和降钙素等。但植物油体表达体系作为植物生物反应器,仍然受到植物生长周期长的限制。近年来人们发现,油体的三个组成成分TAGs,PLs和OLEOSIN-s,可在体外重组形成稳定的人工油体,人工油体在结构和稳定性上与植物来源的油体无显著差别。将目的蛋白编码基因插入oleosin的3’端,在大肠杆菌中表达的重组OLEOSIN-目的蛋白,与磷脂和三酰甘油在体外重组形成人工油体,利用重组人工油体相经简单离心即可与水相分开的特性,可以实现目的蛋白的快速分离。人工油体表达系统的主要优点是目的蛋白生产周期短、蛋白易于纯化,可用于乳化剂和固定化酶生产等,但一方面该系统缺少蛋白后加工修饰系统,另一方面OLEOSIN是一种碱性、强疏水蛋白,OELOSIN与目的蛋白重组形成的新融合蛋白能否具有生物学功能,能否在***中成功表达,并在体外重组形成人工油体,人工油体与植物油体是否有差异等均尚需实验研究。为此本论文以hEGF为目的蛋白,研究利用人工油体表达系统和植物油体表达系统,表达和生产目的蛋白的可行性,主要内容和结果包括:(1)按照植物偏爱密码子人工合成了hEGF的编码基因; (2)构建了3个hEGF的***表达载体:hEGF/pET32a、OLEOSIN-hEGF/pET28a、OLEOSIN-hEGF/pET32a;构建了1个植物油体表达载体pESCV2301;(3) SDS-PAGE和Western分析发现:a. hEGF/pET32a [Rosetta-gamiTM2(DE3) pLysS ] IPTG诱导后,可检测到目的蛋白的表达,表达的hEGF蛋白主要以可溶形式存在; b. OLEOSIN-hEGF/pET28a[Rosetta 2(DE3)] IPTG诱导后,未检测到目的蛋白的表达;c. OLEOSIN-hEGF/pET32a[Rosetta-gamiTM2(DE3)pLysS]IPTG诱导后,可检测到OLEOSIN-hEGF融合蛋白的表达,表达的蛋白主要以包涵体形式存在。(4)利用AKATA亲和层析,分离获得hEGF蛋白,蛋白纯度大于80%,MTT法“细胞增殖实验”结果表明表达的hEGF蛋白可显著促进细胞增殖,具有生物学活性,活性与Sigma公司销售的hEGF基本相同;(5)人工油体体外重组实验结果表明***中表达OLEOSIN-hEGF融合蛋白可在pH7.5的磷酸钠缓冲液中与橄榄油、磷脂酰胆碱重组形成油体,显微镜检发现,重组油体与油菜中提取获得的油体在结构,稳定性上无显著差别;(6)用农杆菌介导法,将OLEOSIN-hEGF融合蛋白基因转入油菜中双4号,获得转基因油菜3株,转基因油菜的分子检测正在进行,收获种子后可对转基因油菜中和***中表达的OLEOSIN?hEGF进行各项比较。

关键词：人工油体植物油体表达体系人表皮细胞生长因子

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一种从基因工程水稻种子中分离纯化重组人表皮细胞生长因子的方法

一种从基因工程水稻种子中分离纯化重组人表皮细胞生长因子的方法

引用

作者：杨代常占全 430000 湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号

本发明公开了一种基因工程水稻种子中分离纯化重组人表皮细胞生长因子的层析方法。具体步骤以重组人表皮细胞生长因子基因工程水稻种子为原料，将稻米粉碎后提取，得到含重组人表皮细胞生长因子的粗提液；将获得的含重组人表皮细胞生长... 详细信息

标准号: CN111285929B

本发明公开了一种基因工程水稻种子中分离纯化重组人表皮细胞生长因子的层析方法。具体步骤以重组人表皮细胞生长因子基因工程水稻种子为原料，将稻米粉碎后提取，得到含重组人表皮细胞生长因子的粗提液；将获得的含重组人表皮细胞生长因子的粗提液经阳离子交换层析，获得含重组人表皮细胞生长因子的初级产物I；将初级产物I经过阴离子交换层析，获得含重组人表皮细胞生长因子的中级产物II；将中级产物II经过疏水层析或分子筛层析，获得纯化的重组人表皮细胞生长因子的目标物。本发明的提取纯化方法工艺简单，经济且高效，适宜工业生产应用。

关键词：人表皮细胞生长因子初级产物基因工程水稻种子粗提液阳离子交换层析阴离子交换层析分子筛层析分离纯化疏水层析提取纯化后提取目标物层析稻米应用

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重组人表皮细胞生长因子促进深Ⅱ度烧伤创面愈合的临床观察

引用

中国当代医药 2013年第24期20卷 99-10页

作者：杨伯明重庆市合川区中医院烧伤科重庆401520

目的探讨重组人表皮细胞生长因子(rhEGF)在治疗深Ⅱ度烧伤中的应用价值。方法将本院2011年1月～2013年1月收治的60例深Ⅱ度烧伤患者按不同治疗方式随机均分为对照组(常规治疗)和实验组(常规治疗+rhEGF),对两组患者的创面愈合情况及不良... 详细信息

目的探讨重组人表皮细胞生长因子(rhEGF)在治疗深Ⅱ度烧伤中的应用价值。方法将本院2011年1月～2013年1月收治的60例深Ⅱ度烧伤患者按不同治疗方式随机均分为对照组(常规治疗)和实验组(常规治疗+rhEGF),对两组患者的创面愈合情况及不良反应情况进行综合比较。结果实验组患者创面愈合90%、100%的时间明显低于对照组患者(P<0.05);实验组患者换药时疼痛程度明显轻于对照组患者(P<0.05);实验组患者不良反应发生率(0)明显低于对照组患者(36.7%)(P<0.05)。结论 rhEGF有促进深Ⅱ度烧伤患者创面愈合的作用,并且无不良反应。

关键词：深Ⅱ度烧伤人表皮细胞生长因子创面愈合

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