检索结果-内蒙古大学图书馆

植物保护学报 2005年第1期32卷 67-70页

作者：陈之浩程罗根张晓飞李忠英贵州省农业科学院植物保护研究所贵阳550006 南京师范大学生命科学学院南京210097

采用核型分析和代表性差异分析方法,探讨了小菜蛾抗药性的分子遗传机理。结果表明,敏感品系和抗性品系小菜蛾的染色体数目均为2n=30条,两者的核型无明显差异;以敏感品系作为驱赶扩增子,抗溴氰菊酯、抗杀虫双、抗杀螟丹近等基因系分别作... 详细信息

采用核型分析和代表性差异分析方法,探讨了小菜蛾抗药性的分子遗传机理。结果表明,敏感品系和抗性品系小菜蛾的染色体数目均为2n=30条,两者的核型无明显差异;以敏感品系作为驱赶扩增子,抗溴氰菊酯、抗杀虫双、抗杀螟丹近等基因系分别作为检测扩增子进行消减杂交和差异片段的富集。最后随机选取部分差异片段作探针,Southern blot 验证,分别在抗杀虫双、抗溴氰菊酯和抗杀螟丹近等基因系中筛选出2、2和3个特异片段。从研究结果可以看出,与敏感品系相比,三种抗性品系小菜蛾的核型没有发生明显的变化,但在 DNA 水平上存在明显的差异,说明小菜蛾的抗药性与基因组 DNA 的变化有关。

关键词：遗传机理小菜蛾抗药性分子 Southern 代表性差异分析近等基因系敏感品系基因组DNA 抗性品系溴氰菊酯染色体数目 DNA水平核型分析消减杂交 blot 特异片段研究结果杀虫双杀螟丹

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猪Torque teno病毒研究进展

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中国预防兽医学报 2011年第4期33卷 331-334页

作者：伍志伟王红宁四川大学生命科学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室四川成都610064

1997年,Nishizawa等应用运用代表性差异分析（Representational difference analysis,RDA）技术从不明原因的输血后肝炎患者血清中发现一种新的环状单链DNA病毒,并以患者名字将其命名为Torque teno virus（TTV）,又因TTV与输血传播病毒... 详细信息

1997年,Nishizawa等应用运用代表性差异分析（Representational difference analysis,RDA）技术从不明原因的输血后肝炎患者血清中发现一种新的环状单链DNA病毒,并以患者名字将其命名为Torque teno virus（TTV）,又因TTV与输血传播病毒（Transfusion transmitted virus,TTV）巧合,因此被许多科学家亦称为输血传播病毒。

关键词： DNA病毒代表性差异分析 virus 猪输血 TTV 科学家患者

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胸膜肺炎放线杆菌血清1型与5型基因组DNA差异基因的筛选与鉴定

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中国预防兽医学报 2010年第10期32卷 757-761页

作者：谢芳韩文瑜杜崇涛周靓杨舒心雷连成吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了解胸膜肺炎放线杆菌(APP)不同血清型间的差异基因,本研究采用代表性差异分析(RDA)方法,筛选APP血清1型CVCC259株和血清5型CVCC263株的差异基因。经BLAST分析和Southern blot验证,分别获得CVCC259株的8个和CVCC263株的12个特异基因... 详细信息

为了解胸膜肺炎放线杆菌(APP)不同血清型间的差异基因,本研究采用代表性差异分析(RDA)方法,筛选APP血清1型CVCC259株和血清5型CVCC263株的差异基因。经BLAST分析和Southern blot验证,分别获得CVCC259株的8个和CVCC263株的12个特异基因片段。本实验为APP感染和致病机制的研究奠定基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌代表性差异分析差异基因鉴定

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联合抑制消减文库与基因芯片技术筛选胃癌相关基因

联合抑制消减文库与基因芯片技术筛选胃癌相关基因

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作者：吴岚军解放军军事医学科学院

学位级别：博士

代表性差异分析技术是一种以PCR反应为基础的消减杂交方法,其最初是用于对基因组序列进行比较,随后扩展至对差异表达的cDNA进行比较和克隆.该方法不需对单链和双链cDNA进行物理分离,经过筛选和差异性富集大大提高了肖减杂交的效率.RDA... 详细信息

代表性差异分析技术<'[12]>是一种以PCR反应为基础的消减杂交方法,其最初是用于对基因组序列进行比较,随后扩展至对差异表达的cDNA进行比较和克隆<'[13]>.该方法不需对单链和双链cDNA进行物理分离,经过筛选和差异性富集大大提高了肖减杂交的效率.RDA虽然是一种改良的消减杂交方法,但对于低丰度转录子的筛选效率仍很低,而且需进行多次杂交和PCR,操作繁琐.SSH方法具有快速、简便易行、所需mRNA量较少(1~2μg)以及假阳性率低、重复性好等优点,近年来成为分离羞基因的有效工具.<'[10-12] >.通过SSH方法可获得50-1000bp的差异片段克隆,经过筛选后,样品之间羞的片段得到富集,对那些在细胞或组织中普遍表达的看家基因则被筛去,提高了特异基因的筛出率,某些稀少丰度表达的mRNA可望被检测出.该课题研究内容如下:一、胃癌组织和正常组织的消减cDNA文库的构建;二、基因芯片技术对文库中的克隆进行筛选;三、测序及生物信息学分析.

关键词： cDNA消减杂交技术代表性差异分析基因芯片技术 DNA序列胃癌

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秋茄盐胁迫应答基因的克隆及其表达模式研究

秋茄盐胁迫应答基因的克隆及其表达模式研究

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作者：黄薇西安交通大学

学位级别：博士

利用改进的代表性差异分析技术,从红树植物秋茄中分离了6个受盐胁迫诱导表达的基因片段和5个受盐抑制表达的基因片段.在6个盐胁迫诱导表达的基因片段中两个与已知基因或蛋白没有明显的同源性,推测为未知蛋白,其余4个与已知蛋白的氨基酸... 详细信息

利用改进的代表性差异分析技术,从红树植物秋茄中分离了6个受盐胁迫诱导表达的基因片段和5个受盐抑制表达的基因片段.在6个盐胁迫诱导表达的基因片段中两个与已知基因或蛋白没有明显的同源性,推测为未知蛋白,其余4个与已知蛋白的氨基酸序列一致性达到60-95%,推测其分别代表不同种类的低分子量热激蛋白和ADP核糖基化因子;5个盐抑制表达的基因片段与已知蛋白的氨基酸序列一致性达到62-91%,推测其分别代表液泡膜内在蛋白,亲环素蛋白,早期光诱导蛋白和60s核糖体蛋白.该实验中一系列基因的表达状况在盐胁条件下发生了改变.这些改变涉及了多种耐盐机制,如TIP对细胞内水分的平衡,sHSPs阻止蛋白变性对蛋白的保护等,说明红树植物秋茄有着与其它植物共同的耐盐机制.同时,TIP和cyclophilin在红树不同种中的表达也表明红树植物的不同种对盐胁迫有着多种应答反应和耐盐机制.但某些基因表达状况的特殊变化,如cyclophilin、ELIP等的下调表达在秋茄盐胁迫应答中的作用还不清楚,但这有助于探讨秋茄植物的特殊耐盐机制.

关键词：红树秋茄代表性差异分析盐胁迫应答基因耐盐性

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糖尿病大鼠早期肾脏病变相关基因的筛选及其新基因结构、功能研究

糖尿病大鼠早期肾脏病变相关基因的筛选及其新基因结构、功能研究

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作者：杨架林上海交通大学

学位级别：博士

该课题首先建立近似成人普通2型糖尿病及其早期肾脏病变的大鼠模型并建立代表性差异分析(cDNA RDA)技术平台,然后对2型糖尿病大鼠肾脏病变相关基因进行筛选和新基因全长cDNA克隆、结构、功能推测及其染色体定位.一、采用长期高饮食结合... 详细信息

该课题首先建立近似成人普通2型糖尿病及其早期肾脏病变的大鼠模型并建立代表性差异分析(cDNA RDA)技术平台,然后对2型糖尿病大鼠肾脏病变相关基因进行筛选和新基因全长cDNA克隆、结构、功能推测及其染色体定位.一、采用长期高饮食结合小剂量链脲佐霉素(Streptozocin, STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型.二、cDNA RDA是以PCR为基础的消减杂交技术,是差异表达基因筛查的重要技术.三、应用cDNA RDA技术对2型糖尿病大鼠腹腔指肪组织、肾脏组织差异表达基因进行筛查,结果在大鼠腹腔组织中,发现6个新EST,1个已知基因(大鼠脂蛋白脂酶,LPL),并且发现该基因在2型糖尿病及高脂饮食组大鼠腹腔脂肪组织表达上调.四、在国际上,应用in cilico克隆技术首次对大鼠Dmrs91基因进行全长cDNA克隆,其生长1434bp,单链分子量4344 Daltons,编码区位于45-130l,其长度为1257bp.

关键词：糖尿病肾脏病变代表性差异分析基因结构表达序列标签生物信息学

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花生根结线虫致病相关基因的克隆与鉴定及分支酸变位酶基因功能的研究

花生根结线虫致病相关基因的克隆与鉴定及分支酸变位酶基因功能的...

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作者：龙海南京农业大学

学位级别：博士

根结线虫(Meloidogyne spp．)是世界范围内的重要植物病原物，在中国，根结线虫从南到北都有分布，侵染多种作物品种，造成的损失高达70％。目前，防治根结线虫的主要手段有，农药防治和抗性基因的筛选和应用。已经从多种植物中鉴定到... 详细信息

根结线虫(Meloidogyne spp．)是世界范围内的重要植物病原物，在中国，根结线虫从南到北都有分布，侵染多种作物品种，造成的损失高达70％。目前，防治根结线虫的主要手段有，农药防治和抗性基因的筛选和应用。已经从多种植物中鉴定到了抗根结线虫的基因。其中最有效的抗性基因是Mi基因，它可以有效地抗三种主要的根结线虫，花生根结线虫(***)、南方根结线虫(***)和爪哇根结线虫(***)。抗性的表型是在线虫侵入点附近产生过敏性坏死反应。Mi基因是从野生番茄品种Lycopersicon peruvianum中得到的，目前国外种植的抗性番茄品种都含有这一抗性基因。但是随着栽种面积的不断扩大和时间的积累，逐渐出现了能克服抗性基因的毒性根结线虫群体。目前，对于其中的分子机理研究的很少。在植物和微生物中，分支酸变位酶位于莽草酸代谢途径的末端，催化分支酸转化成预石炭酸盐，为苯丙氨酸和酪氨酸的合成提供前体。分支酸是许多复合物(Chorismate-derived complexes，CDCs)的前体，包括和植物防卫相关的水杨酸，芳香族氨基酸，吲哚乙酸和许多次级代谢产物。线虫的分支酸变位酶对这些生理途径的干扰可能会破坏一般的植物防卫反应，改变CDCs的水平，如水杨酸或吲哚乙酸，甚至破坏植物细胞壁的结构。第一个动物源的分支酸变位酶(Mj-cm-1)来自爪哇根结线虫(***)，它在线虫的食道腺中表达。在大豆的须根中表达MJ-CM-1蛋白，限制维管束细胞的分化和侧根的形成，但是具体机制尚不明了。源自大豆胞囊线虫(Heterodera glycines)的分支酸变位酶Hg-cm-1显示出和毒性相关的多态性。研究表明，Hg-cm-1等位基因帮助大豆胞囊线虫适应特定的大豆寄主。最近，分别从南方根结线虫，大豆胞囊线虫和马铃薯胞囊线虫(Globodera rostochiensis)中克隆到了分支酸变位酶。但是目前尚无有关花生根结线虫分支酸变位酶的研究报道，分支酸变位酶在植物寄生线虫和寄主互作中的具体作用尚未得到清楚的阐明。鉴于以上所述原因，本文主要开展了以下研究工作。 1．利用抑制差减杂交(Suppression Subtractire Hybridization，SSH)方法分离致病相关基因以一对***无毒和毒性近等基因系(near-isogenic lines，NIL)为材料，用抑制差减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridization，SSH)建立

关键词：花生根结线虫(Meloidogyne arenaria) 致病相关基因分支酸变位酶抑制差减杂交代表性差异分析 cDNA末端快速扩增

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苯并(a)芘代谢物BPDE诱导人上皮细胞恶性转化相关基因的克隆

苯并(a)芘代谢物BPDE诱导人上皮细胞恶性转化相关基因的克隆

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作者：蒋义国华中科技大学

学位级别：博士

苯并(a)芘是一种广泛存在的环境污染物,其致癌机制尤其是分子机制尚不明确.该研究以苯并(a)芘体内代谢活化的终致癌物BPDE(反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘)诱导人支气管上皮细胞16HBE,构建恶性转化细胞模型,通过cDNA代表性差异分析技术... 详细信息

苯并(a)芘是一种广泛存在的环境污染物,其致癌机制尤其是分子机制尚不明确.该研究以苯并(a)芘体内代谢活化的终致癌物BPDE(反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘)诱导人支气管上皮细胞16HBE,构建恶性转化细胞模型,通过cDNA代表性差异分析技术分离细胞恶变相关基因,并经基因序列分析及同源性检索,寻找与恶性转化密切相关的基因,以阐明苯并(a)芘致癌的分子机制.结论:***可诱导人支气管上皮细胞恶性转化,构建理想的恶性转化细胞模型.***代表性差异分析是筛选和克隆化学致癌相关基因的有效方法.3.克隆出的8条具有同源序列的cDNA以及5条新基因可能与BPDE诱导恶变密切相关,后续工作将对这些基因序列的生物学特性和功能进行鉴定.该研究创新之处:1.首次将cDNA代表性差异分析方法引入到环境医学及毒理学相关研究领域.2.在国内率先开展环境化学污染物致癌相关新基因的克隆工作.3.提出采用客观又简单的软琼脂细胞集落形成率作为人上皮细胞恶性转化程度的评价指标.

关键词：苯并(a) BPDE 人支气管上皮细胞恶性转化克隆 cDNA 代表性差异分析恶性转化相关基因

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抑制消减杂交(SSH)技术的研究与应用

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黑龙江畜牧兽医 2008年第2期 24-26页

作者：杨霞孙建义钱利纯浙江大学饲料研究所动物分子营养学教育部重点实验室浙江杭州310029

随着人类基因组计划的完成及后基因组计划的启动,差异基因表达就成了一项热门的技术.由于分子生物学及相关技术的迅猛发展,在转录水平研究差异基因表达的方法也层出不穷.

关键词： mRNA差异显示技术抑制消减杂交技术基因表达系列分析应用 cDNA微阵列技术人类基因组计划代表性差异分析后基因组计划

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差异表达基因分离技术的研究进展

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生物技术通报 2009年第6期25卷 71-74页

作者：高雪韩山师范学院生物系潮州521041

分离并克隆差异表达基因是生命科学的研究热点。近年来,以差示筛选、扣除杂交等基本方法为基础,先后出现了抑制差减杂交,微阵列技术等多种分析差异表达基因的技术,使差异表达基因分离方法不断完善。对这些方法的优缺点、发展趋势及应用... 详细信息

分离并克隆差异表达基因是生命科学的研究热点。近年来,以差示筛选、扣除杂交等基本方法为基础,先后出现了抑制差减杂交,微阵列技术等多种分析差异表达基因的技术,使差异表达基因分离方法不断完善。对这些方法的优缺点、发展趋势及应用前景进行了简要综述。

关键词：差异表达基因差示筛选扣除杂交 mRNA差异显示技术 RNA指纹图谱技术代表性差异分析抑制差减杂交微阵列技术

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