检索结果-内蒙古大学图书馆

中华生物医学工程杂志 2009年第1期15卷 65-68页

作者：崔杰峰唐建华刘银坤复旦大学中山医院肝癌研究所教育部癌变与侵袭重点实验室上海200032

传统的单层平面培养技术在肿瘤体外细胞模型建立、肿瘤细胞生物学行为分析中一直发挥着主导作用，但限于单层平面培养方法本身及肿瘤细胞传代次数的制约，细胞的形态、极性、基因表达乃至功能状态与体内肿瘤细胞的实际病理生理状况经常... 详细信息

传统的单层平面培养技术在肿瘤体外细胞模型建立、肿瘤细胞生物学行为分析中一直发挥着主导作用，但限于单层平面培养方法本身及肿瘤细胞传代次数的制约，细胞的形态、极性、基因表达乃至功能状态与体内肿瘤细胞的实际病理生理状况经常相距甚远，而基于两维培养的肿瘤细胞模型在肿瘤分子病理机制探讨中也开始受到越来越多的挑战。近些年，三维培养技术的发展及对肿瘤细胞生物学特性研究的深入，使得模拟体内组织细胞生长环境方面具有明显优势的立体培养，在肿瘤细胞生物学特性解析、药物疗效的评估中受到普遍的关注。

关键词：肿瘤细胞生物学三维培养技术细胞生物学特性体外细胞模型分子病理培养的肿瘤行为分析传代次数

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蓝光诱导猪视网膜色素上皮细胞复制衰老的实验研究

蓝光诱导猪视网膜色素上皮细胞复制衰老的实验研究

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中华医学会第十二届全国眼科学术大会

作者：陈松崔兰君韩泉洪天津市眼科医院天津市眼科医院天津市眼科医院

目的：观察蓝光对猪 RPE 细胞复制衰老过程中衰老相关—β—半乳糖苷酶(SA—β—Gal)的影响,为探讨蓝光损伤和复制衰老在 AMD 发病细胞生物学相关机制方面提供理论根据。方法：将猪 RPE 细胞置于自制蓝光发光二极管(LED)

关键词：复制衰老 RPE 传代次数光照强度光诱导

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谬误:不射精能延年益寿

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健康博览 2007年第1期 49-49页

作者：马晓年清华大学玉泉医院

有个人在来信中说：“一次聊天时，我听人说性生活射精会缩短寿命。说是生殖细胞的传代次数和寿命有关，所以射精次数越多，寿命越短。此后，我又问过许多人，大都模棱两可，有的还赞同这种说法。从此，我便产生恐惧心理，夫妻之间不敢... 详细信息

有个人在来信中说：“一次聊天时，我听人说性生活射精会缩短寿命。说是生殖细胞的传代次数和寿命有关，所以射精次数越多，寿命越短。此后，我又问过许多人，大都模棱两可，有的还赞同这种说法。从此，我便产生恐惧心理，夫妻之间不敢进行性生活，更不敢射精，并由此发生阳痿。现特向您求教，您说我该怎么办？”

关键词：不射精益寿延年谬误传代次数生殖细胞射精次数恐惧心理

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端粒酶活性对人表皮干细胞分化影响的实验研究

端粒酶活性对人表皮干细胞分化影响的实验研究

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第四届全国烧伤救治专题研讨会

作者：谢晓繁贾赤宇陈璧郝晓凤韩军涛西安第四军医大学西京医院烧伤科西安第四军医大学西京医院烧伤科西安第四军医大学西京医院烧伤科西安第四军医大学西京医院烧伤科西安第四军医大学西京医院烧伤科

目的通过重建端粒酶活性延长人表皮干细胞寿命,为组织工程皮肤修复提供理想种子细胞。方法用差速黏附法分离获得人表皮干细胞(human epithemal stem cells,hESCs,),以 TRAPeze ELISA 法

关键词：人表皮干细胞端粒酶活性传代次数

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影响小鼠体细胞脂质体法转染效率的因素

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实验生物学报 2005年第5期38卷 404-410页

作者：于建宁苗德强马所峰谭秀文袁继红谭景和山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

本实验主要研究脂质体量、质粒量、细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间、细胞传代次数以及细胞种类对转基因效率的影响.首先研究了脂质体量、质粒量和细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间对小鼠胎儿成纤维细胞(MFFC)的绿色荧光蛋白(GFP)... 详细信息

本实验主要研究脂质体量、质粒量、细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间、细胞传代次数以及细胞种类对转基因效率的影响.首先研究了脂质体量、质粒量和细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间对小鼠胎儿成纤维细胞(MFFC)的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响.结果表明,在本实验条件下,用传至3代的MFFC,24孔培养板中每孔接种4-10×104个细胞,70%-90%贴满程度,当脂质体(LipofectAMINE)4μg、质粒(pEGFP-N1)0.3μg,复合物作用时间为6h时获得的转染效率最高,为30.7%.用此方案比较不同传代次数的MFFC转染效率结果表明,原代细胞的转染效率为10.0%,3代为28.9%,到15代降到7.2%.说明随着传代次数的增加,转染效率逐渐降低.将MFFC、小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和小鼠颗粒细胞(MGC)分别传至3代,采用上述方案进行转染,转染效率分别是27.8%、13.7%和14.2%.可见不同种类细胞的转染效率不同.细胞周期检测表明,无论是不同代次的细胞还是不同种类的细胞,其转染效率高低与M期所占比例的多少有关.这为如何提高转染效率提供了有利的依据.

关键词：基因转移脂质体小鼠体细胞传代次数细胞周期转染效率脂质体法体细胞小鼠绿色荧光蛋白(GFP)

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脂质体法转染小鼠体细胞的研究

脂质体法转染小鼠体细胞的研究

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作者：于建宁山东农业大学

学位级别：硕士

转染效率低是脂质体转染法存在的主要问题,制约了它的广泛应用。本文以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因研究了影响脂质体法转染小鼠体细胞效率的因素及转染对小鼠体细胞的影响,以期提高脂质体转染效率,为转基因克隆打下基础。首先... 详细信息

转染效率低是脂质体转染法存在的主要问题,制约了它的广泛应用。本文以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因研究了影响脂质体法转染小鼠体细胞效率的因素及转染对小鼠体细胞的影响,以期提高脂质体转染效率,为转基因克隆打下基础。首先研究了脂质体量、质粒量和细胞在脂质体—质粒复合物中暴露时间对小鼠胎儿成纤维细胞(MFFC)的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响。在此优化的实验条件下,研究不同传代次数的MFFC对脂质体转染效率的影响及不同小鼠体细胞种类对脂质体转染效率的影响。接着,进行了细胞周期同步化方法的筛选并以筛选出的方法研究了细胞周期对脂质体转染效率的影响。结果如下: 1.在本实验条件下,用传至3代的MFFC,24孔培养板中每孔接种4-10×10～4个细胞,当脂质体(LipofectAMINE)41μg、质粒(pEGFP-N1)0.3μg,复合物作用时间为6h时获得的转染效率最高,为30.7%。 2.用此方案比较不同传代次数的MFFC转染效率结果表明,原代细胞的转染效率为10.0%,3—6代为28%,到15代为7.2%。表明3—6代转染效率最高,随着传代次数的增加,转染效率逐渐降低。 3.将MFFC、小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和小鼠颗粒细胞(MGC)分别传至3代,采用上述方案进行转染,转染效率分别是27.8%、13.7%和14.2%。可见不同种类细胞的转染效率不同。细胞周期检测表明,无论是不同代次的细胞还是不同种类的细胞,其转染效率高低与M期所占比例的多少有关。 4.低温(5℃)的最好同步化结果是处理5h获得的G0/G1期同步化比例为74.1%,细胞凋亡比例3.5%。Roscovitine(Ros)的最好同步化方案是10μM作用24h,结果是G0/G1期84.2%,细胞凋亡比例9.4%。由于低温同步化程度较Ros低,而Ros对细胞的损伤较大,所以将两种同步化联合使用。结果表明,低温5h后37.5℃,10μM Ros再培养12h(LTR2)所获得的G0/G1期同步化比例为83.6%,细胞凋亡比例是3.6%。血清饥饿48h G0/G1期为79.7%,细胞凋亡比例为8.0%;秋水仙素与噻咹酯呐唑同步于G2/M期效率分别是34.7%和32.4%,细胞凋亡比例分别是25.3%和21.9%。因此,较好的同步化方法是低温5h、Ros10μM作用24h、LTR2和血清饥饿48h。同步方法解除后放开,每间隔4h取样检测,血清饥饿并没有获得高比例的S期和G2/M期,而其它三种方法均获得了高比例的S期和G2/M期。 5.采用筛选出的三种同步化方法,分别在G0/G1期、S期和G2/M期进行脂质体转染结果表明,在G2/M期转染时获得的表达GFP细胞数和克隆数最高。 6.从细胞形态看,转染后不如转染前的形态规则健康;转染后细胞的凋亡比例显著高于转染前(P<0.05);处于G0/G1期的比例显著增多(P<0.05);染色体倍性转染前与转染后差异不显著(P>0.05)。因此,综上所述,采用低温法、Ros法、LTR2细胞周期同步法均可获高的脂质体转染效率,其中LTR2要优于其它两种方法。

关键词：脂质体法 GFP 转染效率传代次数细胞种类细胞周期凋亡低温 Roseovitine

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选用黑木耳菌种七注意