检索结果-内蒙古大学图书馆

扬州大学学报(农业与生命科学版) 2025年第1期46卷 37-43页

作者：薄宗义胡海韩成昊蒋皓静孟晨晨张小荣吴艳涛曹永忠扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009 扬州大学兽医学院江苏扬州225009 泰兴市济川街道畜牧兽医站江苏泰兴225403 青岛蔚蓝生物股份有限公司山东青岛266101 青岛易邦生物工程有限公司山东青岛266111 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为制备一种耐热且可同时为传染性喉气管炎和新城疫2种重要家禽呼吸道传染病提供保护的候选疫苗株,利用无缝克隆技术将传染性喉气管炎病毒gB基因克隆至具有耐热性的新城疫NDV/rAHR09毒株中,利用Western blot试验验证gB蛋白的表达情况,最... 详细信息

为制备一种耐热且可同时为传染性喉气管炎和新城疫2种重要家禽呼吸道传染病提供保护的候选疫苗株,利用无缝克隆技术将传染性喉气管炎病毒gB基因克隆至具有耐热性的新城疫NDV/rAHR09毒株中,利用Western blot试验验证gB蛋白的表达情况,最后利用耐热性评价试验及致病性评估试验评价重组病毒的生物学特征。结果表明:gB基因成功插入到pNDV/rAHR09中,拯救后重组病毒具有较高的血凝效价;Western blot结果显示重组病毒能成功表达gB蛋白;热稳定性测试结果显示重组病毒在56℃下暴露60 min后仍具有较高血凝活性及病毒滴度;致病性评估数据显示,重组病毒的平均死亡时间为148 h,脑内致病性指数为0,静脉内致病性指数为0.1,表明其具备弱毒株的特征。综上,该研究研制的针对传染性喉气管炎和新城疫的耐热候选疫苗株NDV/rAHR09-ILTV/gB,可为开发针对传染性喉气管炎病毒的活载体疫苗提供新思路。

关键词：传染性喉气管炎病毒 gB基因新城疫病毒耐热重组病毒

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传染性喉气管炎病毒糖蛋白G基因的原核表达、细胞定位及功能研究

引用

科学通报 2005年第18期50卷 1978-1983页

作者：孙照刚张曼夫中国农业大学生物学院动物分子病毒室

克隆测定了传染性喉气管炎病毒(ILTV)北京E3和Zhonghai毒株的糖蛋白G基因(gG)序列,并与多种动物的Ⅰ型α-疱疹病毒gG基因序列作了比对.通过克隆gG基因至原核表达载体pET30a(+)构建pET30a-gG质粒,IPTG诱导表达含pET30a-gG重组质粒的阳性... 详细信息

克隆测定了传染性喉气管炎病毒(ILTV)北京E3和Zhonghai毒株的糖蛋白G基因(gG)序列,并与多种动物的Ⅰ型α-疱疹病毒gG基因序列作了比对.通过克隆gG基因至原核表达载体pET30a(+)构建pET30a-gG质粒,IPTG诱导表达含pET30a-gG重组质粒的阳性宿主菌后,分离纯化得到分子量约35kD的His-GG融合蛋白.利用该融合蛋白制备的纯化的抗His-GG大鼠多抗血清,观测ILTV糖蛋白G的在细胞上的分布,发现糖蛋白G主要存在于宿主细胞的细胞核外周及细胞膜上,在散在细胞内的分布较为分散,而在融合细胞的结合部位分布较为集中.利用抗体中和病毒糖蛋白G的实验结果表明,糖蛋白G可能参与病毒从细胞到细胞的直接感染(CTCS),从而影响病毒复制和噬斑的形成.

关键词：糖蛋白G 原核表达定位功能传染性喉气管炎病毒病毒糖蛋白原核表达载体细胞定位 gG基因功能研究

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传染性喉气管炎病毒WG株Us区基因结构分析

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中国预防兽医学报 2008年第10期30卷 779-784页

作者：韩文雄石星明王云峰兰德松胡文玮王玫曹贵方童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院上海兽医研究所上海200232

根据GenBank中的传染性喉气管炎病毒(ILTV)全序列(NCBI登录号:NC-006623),利用Oligo6.2分析序列并设计6对引物,以ILTVWG株基因组DNA为模板,PCR扩增了长度为13.1kb的区域,得到了完整的WG株的Us区序列,初步鉴定了WG株的Us区基因结构。将W... 详细信息

根据GenBank中的传染性喉气管炎病毒(ILTV)全序列(NCBI登录号:NC-006623),利用Oligo6.2分析序列并设计6对引物,以ILTVWG株基因组DNA为模板,PCR扩增了长度为13.1kb的区域,得到了完整的WG株的Us区序列,初步鉴定了WG株的Us区基因结构。将WG株的Us区序列分别与ILTVUSDA株、BHV-1、CeHV-1、EHV-1、HSV-1、HSV-2、MDV、PrV、HVT、VZV相比较,ILTVWG株与USDA株同源性为99.2%,而与其他疱疹病毒之间的同源性较低,而且Us区大小也不一致;与已发表的ILTVUSDA株Us区基因序列分别比较后发现,两者之间差异较大的基因分别为gJ基因和gD基因。其中,gJ基因在第1983个碱基处比USDA株多出30bp,DNAStar预测这30bp可能形成一个独立的抗原表位;gD基因的长度在不同的ILTV毒株之间差别较大,与其他疱疹病毒具有相似的结构特征。

关键词：传染性喉气管炎病毒 WG株 Us区基因序列分析

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传染性喉气管炎病毒gD基因重组禽痘病毒的制备、纯化及初步鉴定

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中国生物制品学杂志 2009年第4期22卷 351-353页

作者：杨明凡崔保安陈红英王学斌魏战勇河南农业大学牧医工程学院郑州450002

目的制备传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD基因重组禽痘病毒,并进行纯化及初步鉴定。方法将含有ILTV河南长葛株gD基因的禽痘病毒转移载体转染禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞,采用蓝色蚀斑筛选纯化重组禽痘病毒,并经PCR及间接免疫荧光试验(IFA... 详细信息

目的制备传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD基因重组禽痘病毒,并进行纯化及初步鉴定。方法将含有ILTV河南长葛株gD基因的禽痘病毒转移载体转染禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞,采用蓝色蚀斑筛选纯化重组禽痘病毒,并经PCR及间接免疫荧光试验(IFA)进行鉴定。结果经过5轮蚀斑筛选纯化,获得1株重组禽痘病毒rFPV-ILTV-gD,其PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,可见约1400bp的ILTVgD特异性条带。IFA检测显示重组禽痘病毒中的ILTVgD基因得到了表达。结论已成功制备并纯化了ILTVgD基因重组禽痘病毒,为预防ILT提供了新的途径。

关键词：传染性喉气管炎病毒 gD基因重组禽痘病毒

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传染性喉气管炎病毒gB基因的主要免疫原片段在大肠杆菌中的表达

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中国预防兽医学报 2006年第2期28卷 156-159页

作者：张晶王云峰智海东王玫童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

利用DNASIS等软件分析传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株的gB蛋白抗原性,筛选出一段抗原性较强的片段,该片段位于gB蛋白的403位至686位氨基酸残基之间。设计引物,引入双酶切位点EcoRⅠ,SalⅠ,将目的片段t-gB插入原核表达载体pET30a(+),得到... 详细信息

利用DNASIS等软件分析传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株的gB蛋白抗原性,筛选出一段抗原性较强的片段,该片段位于gB蛋白的403位至686位氨基酸残基之间。设计引物,引入双酶切位点EcoRⅠ,SalⅠ,将目的片段t-gB插入原核表达载体pET30a(+),得到重组表达质粒pET-tgB并转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导后,表达分子量为37Ku的融合蛋白His-tgB,表达量占菌体蛋白的40.6%。Westernblot分析表明,His-tgB具有免疫反应性。重组蛋白免疫兔之后可以产生针对ILTVgB的特异性抗体。

关键词：传染性喉气管炎病毒糖蛋白B(gB) 表达

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传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因在重组禽痘病毒中共表达

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生物工程学报 2004年第6期20卷 963-966页

作者：智海东王云峰童光志王玫张绍杰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

在重组禽痘病毒中表达多个禽类病原的主要免疫原基因是构建多价基因工程疫苗的前提 ,但相关研究很少。在表达传染性喉气管炎病毒 (ILTV)gB基因重组禽痘病毒的转移载体的基础上 ,构建了含有ILTVgB基因和新城疫病毒 (NDV)F基因的重组禽痘... 详细信息

在重组禽痘病毒中表达多个禽类病原的主要免疫原基因是构建多价基因工程疫苗的前提 ,但相关研究很少。在表达传染性喉气管炎病毒 (ILTV)gB基因重组禽痘病毒的转移载体的基础上 ,构建了含有ILTVgB基因和新城疫病毒 (NDV)F基因的重组禽痘病毒转移载体pSY gB F ,采用脂质体转染禽痘病毒感染的鸡胚成纤维 (CEF)细胞后 ,通过蓝斑试验筛选出重组禽痘病毒 (rFPV gB F) ,并进行了 6轮蚀斑纯化。Western blot试验和间接免疫荧光试验证明ILTVgB基因和NDVF基因在rFPV gB F感染的CEF细胞中获得表达。为传染性喉气管炎、新城疫与鸡痘活载体多价疫苗的研制奠定基础。

关键词：传染性喉气管炎病毒糖蛋白B 新城疫病毒融合蛋白重组禽痘病毒

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传染性喉气管炎病毒北京E2株gC基因的克隆及其部分序列测定

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华南农业大学学报 2000年第4期21卷 71-73页

作者：吴红专刘福安朱道中陈义为梁志清华南农业大学动物医学系广东广州510642 香港大学动物学系

根据传染性喉气管炎病毒美国 6 32株和英国Thorne株gC基因的序列设计 1对引物 ,以北京E2株为模板 ,用PCR方法扩增得到长度为 1 9kb的片段 ,并将其克隆至质粒pA T中 .用碱小量法制备质粒DNA ,以酶切和质粒PCR的方法对其进行了鉴定 ,并以... 详细信息

根据传染性喉气管炎病毒美国 6 32株和英国Thorne株gC基因的序列设计 1对引物 ,以北京E2株为模板 ,用PCR方法扩增得到长度为 1 9kb的片段 ,并将其克隆至质粒pA T中 .用碱小量法制备质粒DNA ,以酶切和质粒PCR的方法对其进行了鉴定 ,并以正向和反向引物测定其两翼序列 ,结果正向引物测出 498个碱基 ,反向引物测出 499个碱基 ,将所得序列输入GenBank与其他毒株进行比较 ,结果发现其与美国 6 32株的同源性为 94 6 %～ 98 9% ,与英国Thorne株UL44的同源性为 5 5 1% .目前该基因序列已在GenBank中注册 ,代码分别为AF16 10 6 5和AF16 10 6 6 .

关键词：传染性喉气管炎病毒 gC基因序列测定克隆鸡

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传染性喉气管炎病毒烟台株TK基因序列测定及TK蛋白功能初步分析

引用

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2005年第10期33卷 75-79页

作者：刘文波周斌黄兵张秀美张素芳陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095 山东省农科院家禽研究所山东济南250023

根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)美国632株TK基因序列设计并合成1对引物,以ILTV烟台株DNA为模板扩增了TK基因,并对其进行了序列测定.将ILTV烟台株的TK基因和TK蛋白分别与ILTV美国632株,英国Thorne株,Beijing E2株,BHV-1,EHV-1,EHV-2,FHV-1... 详细信息

根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)美国632株TK基因序列设计并合成1对引物,以ILTV烟台株DNA为模板扩增了TK基因,并对其进行了序列测定.将ILTV烟台株的TK基因和TK蛋白分别与ILTV美国632株,英国Thorne株,Beijing E2株,BHV-1,EHV-1,EHV-2,FHV-1,HHV-1,HHV-2,HHV-3,HHV-4,HVT,MDV-1,MDV-2,PRV和SHV-2的TK基因和TK蛋白比较后发现,其TK基因的核苷酸和TK蛋白的氨基酸同源性分别为24.6%～99.5%和15.1%～98.9%,表明不同ILTV毒株之间TK基因和TK蛋白相对保守,但与其他α-疱疹病毒的TK基因和TK蛋白同源性则较低.

关键词：传染性喉气管炎病毒烟台株 TK基因同源性分析

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传染性喉气管炎病毒烟台株gE基因的克隆与序列分析

引用

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2005年第8期33卷 26-30页

作者：刘文波黄兵马秀丽张素芳张秀美陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095 山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023

根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)gE基因序列设计并合成1对引物,以烟台株为模板,用PCR法扩增出1条1.5 kb的基因片段,并将其克隆至pMD18-T载体中.经电泳分析、酶切鉴定,将得到的重组质粒命名为pMD-gE并进行序列测定.将测序结果与ILTV美国标... 详细信息

根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)gE基因序列设计并合成1对引物,以烟台株为模板,用PCR法扩增出1条1.5 kb的基因片段,并将其克隆至pMD18-T载体中.经电泳分析、酶切鉴定,将得到的重组质粒命名为pMD-gE并进行序列测定.将测序结果与ILTV美国标准攻毒毒株和中国王岗株,BHV-1,EHV-1,FHV-1,HHV-2,HHV-3,HVT,MDV-1,MDV-2,PRV的gE基因比较,发现核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.7%～11.9%和99.4%～15%.结果表明,不同ILTV毒株之间gE基因还是比较保守的,但不同疱疹病毒之间,gE基因的同源性较低.

关键词：传染性喉气管炎病毒烟台株 gE基因克隆序列分析

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传染性喉气管炎病毒WG株糖蛋白gJ基因的克隆与表达

引用

中国预防兽医学报 2008年第2期30卷 118-121页

作者：何来王云峰石星明崔红玉韩文雄兰德松王玫童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

根据GenBank中已发表的传染性喉气管炎病毒全基因组序列(NC006233)设计引物,以传染性喉气管炎病毒WG株基因组为模板,PCR扩增糖蛋白gJ基因,并对其进行序列分析。用DNAStar软件分析gJ蛋白的抗原性,选择抗原性强的140aa～483aa片段,克隆并... 详细信息

根据GenBank中已发表的传染性喉气管炎病毒全基因组序列(NC006233)设计引物,以传染性喉气管炎病毒WG株基因组为模板,PCR扩增糖蛋白gJ基因,并对其进行序列分析。用DNAStar软件分析gJ蛋白的抗原性,选择抗原性强的140aa～483aa片段,克隆并连接到原核表达载体pET-32a(+)中,转化BL21(DE3)菌株。经IPTG诱导后,获得大小为65.2ku的重组蛋白,命名为r-gJ,表达量占菌体蛋白总量的60.8%;Western blot分析表明r-gJ具有较强的抗原性。

关键词：传染性喉气管炎病毒糖蛋白J(gJ) 序列分析表达抗原性

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