检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：孙惠玲中国农业大学

学位级别：博士

新城疫、传染性喉气管炎和鸡痘均是鸡的主要呼吸道疾病，给养鸡业造成了巨大的损失。尽管传统方法制备的疫苗在疾病的控制上曾经发挥重要的作用，但随着动物疾病清除计划的进行，需要用更加安全的、能够区分野毒感染的新型疫苗来替代常... 详细信息

新城疫、传染性喉气管炎和鸡痘均是鸡的主要呼吸道疾病，给养鸡业造成了巨大的损失。尽管传统方法制备的疫苗在疾病的控制上曾经发挥重要的作用，但随着动物疾病清除计划的进行，需要用更加安全的、能够区分野毒感染的新型疫苗来替代常规疫苗。\n 禽痘病毒载体疫苗以其特有的优势在疾病的控制中起到了重要的作用，以禽痘病毒为载体已经研制出许多种重组病毒疫苗，其中有的已纪商业化。构建表达多个病原体基因的重组禽痘载体疫苗对于面临多种疾病威胁的养禽业来说尤其具有重要的意义。\n 本实验利用同源重组将新城疫病毒(NDV)的F和HN基因、传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因以及报告基因LacZ插入鸡痘病毒(FPV)的017株的复制非必需区，其中NDV的F、HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ是在早晚期启动子LP2EP2的控制下，大肠杆菌报告基因LacZ在晚期启动子P11的控制下。经过10轮蓝斑纯化获得了包含了NDV的F和HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ的重组鸡痘病毒，称为rFPV-F/HN/gB。经PCR方法证明rFPV-F/HN/gB基因组中含有NDV的F基因、HN基因和ILTVgB基因；间接免疫荧光试验和Western-blot试验表明NDV的F、HN蛋白和ILTVgB蛋白在rFPV-F/HN/gB感染的CEF细胞中获得表达。与亲本毒相比，重组病毒在病毒的复制和致鸡胚成纤维细胞的病变方面无显著不同。\n 为了检测重组病毒对SPF鸡的保护效果，将60只四周龄的SPF鸡分为四组，第一组翅下刺种1000PFUrFPV-F/HN/gB(20只)、第二组免疫ND弱毒疫苗(LaSota，10只，0.125ml/只)、第二组免疫ILT弱毒疫苗(10只，0.

关键词：新城疫病毒 F蛋白 HN蛋白传染性喉气管炎病毒 gB蛋白重组禽痘病毒免疫效力

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传染性喉气管炎病毒糖蛋白gC在原核系统中的高效表达

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中国比较医学杂志 2003年第6期13卷 329-331页

作者：郑玉姝智海东王云峰王玫仇华吉童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001

目的　分析传染性喉气管炎病毒 (ILTV)gC蛋白的免疫活性。方法　设计引物扩增编码gC蛋白主要免疫原性区域cDNA ,将其克隆到原核表达载体pGEX_6P_1的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间 ,构建重组质粒r_pGEX_gC。将r_pGEX_gC转化到大肠埃希菌BL2 1(D... 详细信息

目的　分析传染性喉气管炎病毒 (ILTV)gC蛋白的免疫活性。方法　设计引物扩增编码gC蛋白主要免疫原性区域cDNA ,将其克隆到原核表达载体pGEX_6P_1的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间 ,构建重组质粒r_pGEX_gC。将r_pGEX_gC转化到大肠埃希菌BL2 1(DE3)株中。结果　经IPTG诱导后 ,GST gC融合蛋白在重组菌株获得表达 ,表达产物相对分子质量为 6 5× 10 3,与预计相对分子质量大小一致。融合蛋白的表达含量占整个菌体含量的 2 7 8%。West ern_blot结果表明gC蛋白具有良好的反应活性。结论　本研究为传染性喉气管炎诊断抗原研制奠定基础。

关键词：传染性喉气管炎病毒糖蛋白原核系统 ILTV 免疫活性

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串联表达传染性喉气管炎病毒gB、gD抗原表位基因的重组鸡痘病毒转移载体的构建

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吉林农业大学学报 2005年第4期27卷 453-456,460页

作者：刘文波梁成珠徐彪朱来华张素芳陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095 青岛出入境检验检疫局青岛266002

根据已发表的传染性喉气管炎病毒(ILTV)SA-2株基因序列设计并合成2对引物,以烟台分离株为模板,分别扩增其gB和gD的抗原表位基因,并亚克隆到pBluescriptⅡSK(+)中,得到重组质粒pSK-gB-gD,然后再将gB-gD片段亚克隆到鸡痘病毒转移质粒载体p... 详细信息

根据已发表的传染性喉气管炎病毒(ILTV)SA-2株基因序列设计并合成2对引物,以烟台分离株为模板,分别扩增其gB和gD的抗原表位基因,并亚克隆到pBluescriptⅡSK(+)中,得到重组质粒pSK-gB-gD,然后再将gB-gD片段亚克隆到鸡痘病毒转移质粒载体pEFgpt12s中。酶切鉴定结果显示已成功构建了重组鸡痘病毒转移质粒载体pEF-gB-gD,可为进一步在细胞中转染并获得串联表达传染性喉气管炎病毒gB及gD主要抗原表位基因的重组鸡痘病毒奠定基础。

关键词：传染性喉气管炎病毒糖蛋白B 糖蛋白D 鸡痘病毒

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鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的扩增及酶切分析

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中国兽医科技 2003年第8期33卷 19-22页

作者：张七斤刘思伽红梅申之义关平原李平安内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018

以从内蒙古区分离的 2株传染性喉气管炎病毒 (ILTV)株的DNA为模板 ,用设计好的 1对引物对这 2株毒株的 gB基因进行了PCR扩增 ,并对扩增产物分别用BglⅡ、PstⅠ、HindⅢ限制性内切酶酶切分析。结果表明 ,2个分离株均能特异性地扩增出该病... 详细信息

以从内蒙古区分离的 2株传染性喉气管炎病毒 (ILTV)株的DNA为模板 ,用设计好的 1对引物对这 2株毒株的 gB基因进行了PCR扩增 ,并对扩增产物分别用BglⅡ、PstⅠ、HindⅢ限制性内切酶酶切分析。结果表明 ,2个分离株均能特异性地扩增出该病毒 gB基因片段 ,片段大小完全一致 ,为 2 .6kb ;扩增产物的酶切图谱与参考株完全一致。

关键词：鸡传染性喉气管炎病毒 gB基因酶切分析 PCR

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CpG DNA对鸡传染性喉气管炎病毒DNA疫苗免疫效果的影响

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中国农业科学 2001年第3期34卷 342-344页

作者：孟松树李曦智海东王云峰王柳童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

将分别构建的含有鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）王岗株ｇＢｇＣ和ｇＤ基因的重组真核表达质粒及ＣＰＧＤＮＡ佐剂分组肌肉注射ＳＰＦ鸡，检测了免疫后的抗体水平，并观测了攻毒后的免疫保护效果。实验结果显示，ＣｐＧＤＮＡ佐剂... 详细信息

将分别构建的含有鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）王岗株ｇＢｇＣ和ｇＤ基因的重组真核表达质粒及ＣＰＧＤＮＡ佐剂分组肌肉注射ＳＰＦ鸡，检测了免疫后的抗体水平，并观测了攻毒后的免疫保护效果。实验结果显示，ＣｐＧＤＮＡ佐剂和ＤＮＡ疫苗联合免疫后的抗体水平比单一使用ＤＮＡ疫苗的要高，而佐剂组的发病率、死亡率均低于非佐剂组，保护率则高于非佐剂组。这表明ＣｐＧＤＮＡ佐剂增强了ＩＬＴＶＤＮＡ疫苗的免疫效果。

关键词：传染性喉气管炎病毒 DNA疫苗 CpG DNA 免疫效果

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传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CG gX基因的克隆与序列分析

传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CG gX基因的克隆与序列分析

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第15届世界禽病大会、中国畜牧兽医学会2007年学术年会

作者：郭小参陈红英崔保安杨明凡张红英李新生河南农业大学牧医工程学院河南农业大学牧医工程学院河南农业大学牧医工程学院河南农业大学牧医工程学院河南农业大学牧医工程学院河南农业大学牧医工程学院

引言与目的：传染性喉气管炎是由传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)引起的高度接触性上呼吸道传染病。初次感染时发病率接近100%,死亡率高达70%,平均为10%～40%,蛋鸡感染后产蛋

关键词：传染性喉气管炎病毒河南株克隆与序列分析 ILTV-CG gX

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鸡传染性喉气管炎病毒的分离与鉴定

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中国家禽 2003年第z1期25卷 53-56页

作者：张七斤刘思伽红梅巴开明王俊平申之义关平原李平安内蒙古农业大学动科院呼和浩特010010 呼和浩特市兽医站内蒙古兽医卫生监督检验所

采用鸡胚传代方法从内蒙古地区两个发病鸡场分离到两株传染性喉气管炎病毒(分别命名为ILTV-NM98a、ILTV-NM98b株),进行了系统的常规生物学特性和部分分子生物学特性鉴定.结果表明,两个分离株对乙醚、氯仿、热均敏感.电镜下可见病毒粒子... 详细信息

采用鸡胚传代方法从内蒙古地区两个发病鸡场分离到两株传染性喉气管炎病毒(分别命名为ILTV-NM98a、ILTV-NM98b株),进行了系统的常规生物学特性和部分分子生物学特性鉴定.结果表明,两个分离株对乙醚、氯仿、热均敏感.电镜下可见病毒粒子近似球形,有囊膜,大小在150～300nm之间.两分离株均能被标准阳性血清中和.接种60日龄抗体阴性鸡的发病率分别为100%和80%,死亡率分别为26.7%和6.7%.以两个分离株及参考株的DNA为模板,gB-1、gB-2为引物,以PCR方法扩增出gB基因片段,片段大小完全一致.扩增产物经Pst Ⅰ、Bg1Ⅱ、HindⅢ内切酶酶切后的酶切图谱与参考株完全一致.

关键词：传染性喉气管炎病毒分离鉴定

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鸡传染性喉气管炎病毒内蒙古地方毒株的分离与鉴定

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中国兽医杂志 2004年第11期40卷 16-18页

作者：张七斤刘思伽红梅申之义关平原李平安内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特010018

传染性喉气管炎(ILT)是由传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的一种急性呼吸道传染病.近年来,ILT已成为我国养鸡业的主要疫病之一,给养鸡业造成了巨大的经济损失.在内蒙古地区的部分鸡场,也时有ILT的发生.因为ILT恢复鸡及疫苗免疫鸡有长期带... 详细信息

传染性喉气管炎(ILT)是由传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的一种急性呼吸道传染病.近年来,ILT已成为我国养鸡业的主要疫病之一,给养鸡业造成了巨大的经济损失.在内蒙古地区的部分鸡场,也时有ILT的发生.因为ILT恢复鸡及疫苗免疫鸡有长期带毒现象,一旦形成疫区则很难清除.故此我们对内蒙古地区的两个疑似发病鸡场进行了ILT病原的分离、鉴定,以期为内蒙古地区有效地诊断和防制本病提供科学的依据.

关键词：鸡传染性喉气管炎传染性喉气管炎病毒内蒙古地方毒株分离鉴定

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鸡传染性喉气管炎病毒PCR诊断方法的建立与应用

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畜牧与兽医 2010年第12期42卷 22-25页

作者：李兆龙程晓霞朱小丽王劭陈仕龙林锋强陈少莺福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心

根据GenBank登录的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列设计并合成1对特异性引物,以ILTV疫苗株DNA为模板,建立了检测ILTV TK基因的PCR方法。应用该方法能从临床分离毒株和疫苗株中扩增到长为427 bp的目的片段;但不能从新城疫病毒(NDV... 详细信息

根据GenBank登录的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列设计并合成1对特异性引物,以ILTV疫苗株DNA为模板,建立了检测ILTV TK基因的PCR方法。应用该方法能从临床分离毒株和疫苗株中扩增到长为427 bp的目的片段;但不能从新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、H9亚型禽流感病毒(H9-AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原中扩增出阳性条带;敏感性试验表明其DNA最小检出量为4.9 ng;应用该方法和病毒分离法对2份临床病例和人工感染鸡的检测,两者符合率为100%。上述结果表明该PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。

关键词：传染性喉气管炎病毒 TK PCR

来源：评论

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鸡传染性喉气管炎病毒长葛株gE全基因的克隆与序列分析

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安徽农业科学 2007年第28期35卷 8902-8904页

作者：王岩杨明凡崔保安张素梅陈红英郑州牧业工程高等专科学校医药系河南郑州450011 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

[目的]防治鸡传染性喉气管炎,减少该病对养鸡业造成的损失。[方法]参考GenBank收录的传染性喉气管炎病毒gE基因序列设计并合成1对引物,以ILTV河南长葛株DNA为模板,PCR扩增出一条1 550 bp的特异性条带,并克隆至pGEM-T载体上。经PCR扩增... 详细信息

[目的]防治鸡传染性喉气管炎,减少该病对养鸡业造成的损失。[方法]参考GenBank收录的传染性喉气管炎病毒gE基因序列设计并合成1对引物,以ILTV河南长葛株DNA为模板,PCR扩增出一条1 550 bp的特异性条带,并克隆至pGEM-T载体上。经PCR扩增、酶切鉴定,得到含gE基因重组质粒,并对重组阳性质粒进行序列测定。[结果]与GenBank收录的传染性喉气管炎病毒gE基因和其他部分疱疹病毒gE基因序列进行比较,发现传染性喉气管炎病毒间的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.9%、99.8%;与其他动物疱疹病(MDV、CHV、PRV、EHV的gE基因)毒核苷酸的同源性分别为25.6%、23.9%、28.3%、26.1%。[结论]不同ILTV毒株之间gE基因差异甚小,gE基因比较保守,但与其他动物疱疹病(MDV、CHV、PRV、EHV的gE基因)毒核苷酸的同源性较低。该研究为gE基因的功能研究提供了依据。

关键词：传染性喉气管炎病毒 gE基因克隆序列分析

来源：评论

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