检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2001年第4期33卷 31-32页

作者：苏玉贤赵志伟杨守平赵拥军贾玲娣杨光河南省平顶山市畜牧局河南平顶山467000

鸡传染性喉气管炎(ILT)是由疱疹病毒引起的一种急性传染病.临床症状是呼吸困难、喘气和咳出血样渗出物.本病最早发现于1925年,目前许多国家有该病流行,近几年我国不少地方也发生了该病.1999年9月平顶山市某养鸡场暴发了该病,发病率71%,... 详细信息

鸡传染性喉气管炎(ILT)是由疱疹病毒引起的一种急性传染病.临床症状是呼吸困难、喘气和咳出血样渗出物.本病最早发现于1925年,目前许多国家有该病流行,近几年我国不少地方也发生了该病.1999年9月平顶山市某养鸡场暴发了该病,发病率71%,死亡率23.7%.我们从自然发病鸡的喉气管中分离到一毒株,命名为ILT-PT.1材料和方法

关键词：鸡疾病传染性喉气管炎病毒分离疱疹病毒

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鸡人工感染传染性喉气管炎病毒后气管病理组织学观察

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安徽农业科学 2008年第29期36卷 12710-12711页

作者：石玉祥张登荣王雪敏王哲王艳梅河北工程大学河北邯郸056038 北京化工大学北京100029 河北邯郸县动物防疫监督站河北邯郸056001

[目的]观察鸡人工感染传染性喉气管炎病毒后气管病理组织学变化,为人工制造鸡传染性喉气管炎病例模型方法研究提供参考。[方法]以健康鸡为对照,应用滴鼻、点眼及气管滴入方式同时进行感染,每只鸡接种100 TCID50传染性喉气管炎病毒液0.5 ... 详细信息

[目的]观察鸡人工感染传染性喉气管炎病毒后气管病理组织学变化,为人工制造鸡传染性喉气管炎病例模型方法研究提供参考。[方法]以健康鸡为对照,应用滴鼻、点眼及气管滴入方式同时进行感染,每只鸡接种100 TCID50传染性喉气管炎病毒液0.5 m l,研究感染鸡的病理组织学变化。[结果]结果表明,按上述方法对鸡进行人工感染后,鸡能够产生所报道的病理变化。[结论]该研究的人工感染方式所引起发病的鸡可以作为患传染性喉气管炎鸡的模型。

关键词：鸡人工感染传染性喉气管炎病毒病理组织学

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一种检测传染性喉气管炎病毒的夹心ELISA方法的建立

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中国家禽 2017年第9期39卷 16-19页

作者：张小荣张林刘怡黄海琼吴艳涛扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心江苏扬州225009

通过将传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白g D基因78~600 nt抗原编码区在大肠杆菌中进行高效可溶性表达,以重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选获得2株特异性单克隆抗体4D6和7D9,经亚类鉴定均为IgG1,轻链为κ链。经交叉配... 详细信息

通过将传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白g D基因78~600 nt抗原编码区在大肠杆菌中进行高效可溶性表达,以重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选获得2株特异性单克隆抗体4D6和7D9,经亚类鉴定均为IgG1,轻链为κ链。经交叉配对试验,建立了以7D9为捕获抗体,以HRP偶联7D9(HRP-7D9)作为检测抗体的ILTV抗原检测夹心ELISA方法。经测定,该方法具有良好的特异性和敏感性,对ILTV抗原的最低检测限为10~2TCID_(50)/m L。应用该方法对40份临床样品进行双盲测试,以PCR方法同步检测进行对照,结果显示两种方法之间的符合率为87.5%。

关键词：传染性喉气管炎病毒单克隆抗体夹心ELISA

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表达鸡传染性喉气管炎病毒gD、gE基因的重组马立克氏病毒构建

表达鸡传染性喉气管炎病毒gD、gE基因的重组马立克氏病毒构建

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作者：刘怡扬州大学

学位级别：硕士

鸡传染性喉气管炎(infectious laryngotracheitis, LIT)是由传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)所引起的急性呼吸道传染病。本病由于发病率高,减缓生长和引起产蛋下降等特点给养鸡业造成巨大经济损失。国内... 详细信息

鸡传染性喉气管炎(infectious laryngotracheitis, LIT)是由传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)所引起的急性呼吸道传染病。本病由于发病率高,减缓生长和引起产蛋下降等特点给养鸡业造成巨大经济损失。国内外的研究表明,目前使用的ILTV弱毒疫苗容易毒力返强,ILT的暴发大多与鸡胚源弱毒疫苗(CEO)的使用有关。因此,研制安全、有效的新型疫苗对于ILT的防控具有重要意义。本研究以ILTV Anhui-2011-2株DNA为模板,采用PCR扩增ILTV gD、gE基因；利用马立克氏病毒(MDV)CVI988/Rispens疫苗株基因组IRS-US连接区同源序列、网状内皮增生症病毒的长末端重复序列(LTR)启动子、绿色荧光蛋白(EGFP)基因,构建含gD、gE基因的转移载体质粒pLTR-EGFP-gD和pLTR-EGFP-gE。以磷酸钙沉淀法将转移载体质粒和MDV CVI988/Rispens基因组DNA共同转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过筛选、纯化得到带EGFP标志的重组病毒rMDV-EGFP-gD和rMDV-EGFP-gE。利用Cre重组酶去除rMDV-EGFP-gD和rMDV-EGFP-gE基因组中EGFP基因,重新转染CEF细胞,经筛选、纯化得到不含EGFP基因的重组病毒rMDV-gD和rMDV-gE。经Western blot分析,重组病毒rMDV-gD和rMDV-gE可分别表达ILTV gD蛋白和gE蛋白。本研究评价了1日龄SPF鸡接种重组病毒rMDV-gD和rMDV-gE后对ILTV Anhui-2011-2株及MDV RB1B强毒株的免疫保护效力。其中,重组病毒对ILT的免疫保护试验设立rMDV-gD免疫组、rMDV-gE免疫组、ILT CEO疫苗免疫组、非免疫攻毒对照组和健康对照组,从发病率、死亡率、临床症状、病理组织学变化、对增重的影响和抗体水平等方面评价免疫效力。rMDV-gD免疫组在ILTV攻毒后的发病率(35%)和死亡率(5%)与非免疫攻毒对照组(发病率100%,死亡率36.8%)存在显著差异(p<0.05)；rMDV-gE免疫组的死亡率(19%)与非免疫攻毒对照组差异不显著(p>0.05)。攻毒前后(42日龄-52日龄)各免疫组增重差异不显著(p>0.05),但CEO疫苗组增重最小(0.113kg)。间接ELISA检测各免疫组攻毒前后的血清抗体效价,结果显示抗体效价的高低与保护效力之间没有相关性。经病理组织学检查,攻毒后rMDV-gD免疫组的气管和肺脏显微病变较ILT CEO疫苗免疫组和rMDV-gE免疫组轻微。在重组病毒对MD的免疫保护试验中,rMDV-gD免疫组和rMDV-gE免疫组对MDV RBIB强毒株攻击能够提供完全保护,与MDV CVI988/Rispens免疫组的效果相当。综上所述,本研究构建的重组病毒rMDV-gD是较理想的LIT新型疫苗候选毒株。

关键词：传染性喉气管炎病毒马立克氏病毒同源重组保护效力

来源：评论

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鸡传染性喉气管炎病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立

鸡传染性喉气管炎病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方...

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作者：张林扬州大学

学位级别：硕士

传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis, ILT)是由传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus, ILTV)引起鸡的一种呼吸道疾病,具有高度的传染性,在世界各地均有流行。该病可引起病鸡呼吸困难、咳出血样分泌物,产蛋... 详细信息

传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis, ILT)是由传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus, ILTV)引起鸡的一种呼吸道疾病,具有高度的传染性,在世界各地均有流行。该病可引起病鸡呼吸困难、咳出血样分泌物,产蛋率下降甚至死亡。研制简便、快速、准确的诊断方法对ILT的防治至关重要。本研究制备了抗ILTV gB、gD蛋白的单克隆抗体,建立了ILTV双抗体夹心ELISA抗原检测方法,为ILT的快速检测和诊断提供了一种有效的手段。首先利用原核表达的IL TV gB、gD蛋白为抗原分别免疫6-8周龄的BALB/c小鼠,取血清抗体效价大于104的免疫小鼠脾脏制备的脾细胞与SP2/0细胞融合；利用间接ELISA方法进行杂交瘤细胞的筛选及亚克隆,最终获得能稳定分泌抗ILTV gB和gD蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株各2株,分别命名为5A8、1C1、4D6和7D9。制备腹水后,用protein G层析柱纯化腹水；利用间接ELISA方法对纯化后的腹水进行抗体效价测定,4株杂交瘤细胞诱生的腹水效价都大于1：105；Western Blot试验结果表明,4株单抗都能与其相应的蛋白特异性识别；间接免疫荧光试验检测结果表明,4株单抗均可与感染ILTV的LMH细胞产生特异性荧光反应。然后,进一步利用交叉配对法对单抗及酶标单抗进行试验,最终确定以ILTV单克隆抗体7D9作为包被抗体,以酶标抗体7D9-HRP作为检测抗体,建立了ILTV双抗体夹心ELISA抗原检测方法。试验反应条件优化为：单克隆抗体包被浓度为5μg/mL, 4℃包被过夜;用1%BSA封闭液封闭,37℃孵育120 min；待检抗原37℃孵育60 mmin;酶标抗体工作浓度为2.5μg/mL,37℃孵育60 min。该方法与禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)均无交叉反应,检测ILTV最低病毒量为102TCID50/mL,该方法在批次内、批间内的变异系数均小于8%。用建立的双抗体夹心ELISA检测方法与PCR方法同时对40份临床样品进行检测,结果显示该方法与PCR的符合率为89.2%,说明本研究双抗体夹心ELISA抗原检测方法的特异性、敏感性及重复性均较好,为ILT的流行病学调查及诊断提供了帮助。

关键词：传染性喉气管炎病毒单克隆抗体双抗体夹心ELISA

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表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸭肠炎病毒的构建及免疫效力测定

表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸭肠炎病毒的构建及免疫效...

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作者：黄东明中国农业科学院

学位级别：硕士

鸡传染性喉气管炎是由喉气管炎病毒引起的鸡的一种上呼吸道传染病,该病毒属于α-疱疹病毒科,感染后病鸡主要表现为结膜炎、咳血、呼吸困难等症状,是禽养殖业中重要的疫病之一。目前该病的防治主要是通过接种弱毒疫苗,能够产生较好的免... 详细信息

鸡传染性喉气管炎是由喉气管炎病毒引起的鸡的一种上呼吸道传染病,该病毒属于α-疱疹病毒科,感染后病鸡主要表现为结膜炎、咳血、呼吸困难等症状,是禽养殖业中重要的疫病之一。目前该病的防治主要是通过接种弱毒疫苗,能够产生较好的免疫保护,然而,在临床使用时发现,该弱毒疫苗存在毒力返强现象,造成鸡群周期性感染,造成较大经济损失。随着生物技术的发展,重组病毒活疫苗逐渐成为研究热点。目前,美国已经有两种不同的重组病毒疫苗进入实际临床应用,分别是表达ILTV gB/UL32双基因的鸡痘病毒疫苗,以及表达ILTV g I/g D的HVT重组疫苗,免疫后均能产生特异性保护。在国内,Tong等研发一种表达ILTV gB基因的重组鸡痘病毒,免疫后也能抵抗ILTV的攻击。尽管如此,由于鸡痘病毒在实际临床应用时易受到母源抗体的影响,造成免疫失败,不能抵御病毒入侵。因此,急需研发一种安全、可靠的疫苗。鸭肠炎病毒也是α-疱疹病毒科的成员,其基因组庞大,并含有多个复制非必需基因以及基因间隔区,能够表达多个外源基因,同时该病毒可在鸡成纤维细胞上培养,并释放至上清中,制备简单,容易保存,是一个良好的病毒载体。目前,研究者已经构建了表达多种外源基因的重组鸭肠炎病毒,免疫后均可产生特异性的保护。本研究基于CRISPR/Cas9基因编辑和同源重组技术,获得一株表达鸡传染性喉气管病毒gB基因的重组鸭肠炎病毒,Western blot结果表明gB蛋白正确表达,重组病毒的生长与亲本毒相比无显著差异,连续传20代后外源基因仍然稳定存在。将其免疫SPF鸡,同时设置阴性对照组,第14天时在喉气管内攻毒,结果显示,重组病毒发病率为30%,死亡率为20%,临床指数为0.8,保护指数为77.8%,大部分鸡在攻毒后表现温和,无明显病症,只有两只鸡出现急性死亡,保护效率为80%;而对照组攻毒后,发病率为100%,临床指数为3.7,死亡率为90%。上述实验表明,该重组病毒可作为一株良好的疫苗候选株。本实验成功构建了表达鸡传染性喉气管病毒gB蛋白的重组鸭肠炎病毒,为鸡传染性喉气管炎疫苗研制提供了新思路和技术储备。

关键词：传染性喉气管炎病毒鸭肠炎病毒 CRISPE/Cas9 同源重组免疫效力

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鸡传染性喉气管炎病毒DNA疫苗免疫效果观察

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中国预防兽医学报 2000年第3期22卷 179-181页

作者：孟松树张绍杰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

将分别构建的含有鸡传染性喉气管炎病毒王岗株gB、gC和gD基因的重组真核表达质粒及空载体质粒分组肌肉注射雏鸡 ,攻毒后观察免疫保护效果。结果表明 ,重组质粒诱导了免疫应答 ,免疫保护率为 79% 。

关键词：鸡传染性喉气管炎病毒 DNA疫苗免疫应管

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抗传染性喉气管炎病毒中药的筛选及其防治效果的研究

抗传染性喉气管炎病毒中药的筛选及其防治效果的研究

引用

作者：白挨泉山西农业大学

学位级别：硕士

该文用细胞培养法对42种中药进行抗传染性喉气管炎病毒(ILTV)的筛选试验.并以筛选的中药组成方剂,对人工感染ILT病鸡进行防治,进一步验证药效.

关键词：中药抑制试验防治效果传染性喉气管炎病毒鸡瘟病毒

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表达新城疫病毒F蛋白传染性喉气管炎病毒gC缺失株的构建及评价

表达新城疫病毒F蛋白传染性喉气管炎病毒gC缺失株的构建及评价

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作者：魏潇中国农业科学院

学位级别：硕士

鸡传染性喉气管炎(Infectious laryngotracheitis,ILT)是由鸡的传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)引起鸡的一种急性上呼吸道病毒性疾病。该病的防控主要依靠疫苗免疫,但是商品弱毒活疫苗存在毒力返强的问题... 详细信息

鸡传染性喉气管炎(Infectious laryngotracheitis,ILT)是由鸡的传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)引起鸡的一种急性上呼吸道病毒性疾病。该病的防控主要依靠疫苗免疫,但是商品弱毒活疫苗存在毒力返强的问题,而表达ILTV免疫原基因的活载体疫苗有着免疫起效时间长且保护不完全的缺点。ILTV基因缺失疫苗具有弱毒活疫苗同样的免疫原性,同时可以表达其他病毒抗原,有较好的应用前景。新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的新城疫(Newcastle disease,ND)是禽的另外一种烈性呼吸道传染病。该病遍布全世界,疫苗免疫是控制该病的主要措施。目前应用的活疫苗虽然能够对所有的NDV强毒株感染提供临床保护,但是如果免疫鸡群感染其他基因型强毒株,强毒株会在鸡体内的复制并排毒,造成生物安全隐患。中国目前流行的NDV主要是基因Ⅶ型病毒,因此研发针对该型病毒的疫苗具有重要意义。本研究以本实验室分离的ILTV弱毒株ck/CH/LHLJ/120305(LHLJ/120305)作为亲本毒,采用同源重组技术,首先利用增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)替换ILTV的gC蛋白基因,构建基因缺失株,命名为ILTV-ΔgC-EGFP。应用该毒株感染细胞后,在荧光显微镜下可见明显绿色荧光,表明重组病毒感染细胞后可以有效表达外源蛋白。本研究进一步以ILTV-ΔgC-EGFP株为基础,利用中国流行的NDV Ⅶ型ck/CH/LHLJ/01/06(LHLJ/01/06)F蛋白基因替换EGFP基因,构建了一株表达NDV F蛋白的重组病毒,命名为ILTV-?gC-F株,并对重组病毒的生物学特性进行了研究。在此基础上,为了评价ILTV-ΔgC-F株的致病性和免疫原性,将重组病毒人工接种无特定病原体(Specific pathogen-free,SPF)鸡,接种后20d未见临床症状,证明了ILTV-ΔgC-F株对SPF鸡无致病性,具有较好的安全性。通过酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测SPF鸡抗体产生情况,结果表明重组病毒可以诱导SPF鸡产生ILTV特异性血清抗体,抗体水平与亲本病毒LHLJ/120305基本一致。在免疫后21 d用ILTV WG株攻毒后观察20 d,未见任何临床症状,ITPI评分为0。应用荧光定量PCR检测攻毒后排毒和靶器官病毒复制情况,结果表明仅仅有少数的SPF鸡在感染早期检测到呼吸道的病毒排毒和靶器官病毒复制,但对强毒ILTV的攻击提供了完全的临床保护作用。对免疫鸡进行NDV抗体水平检测和NDV强毒株LHLJ/01/06的攻毒保护试验,应用rRT-PCR检测攻毒后排毒和靶器官病毒复制情况。结果表明,ILTV-ΔgC-F株单次免疫后产生的NDV血清抗体水平较低(40%),但是却能提供完全的临床保护。而且免疫组鸡咽肛拭子和靶器官中的病毒载量明显低于对照组鸡。综上所述,本次试验成功构建的ILTV-ΔgC-F株免疫SPF鸡可以抵抗NDV和ILTV强毒株的攻击,ILTV-ΔgC-F株可以作为NDV和ILTV二联活载体疫苗的候选毒株。在理论上可以同时区分NDV和ILTV疫苗株和野毒株,具有区分感染动物和疫苗接种动物策略(Differentiating infected from vaccinated animals,DIVA)疫苗的功能。

关键词：传染性喉气管炎病毒 gC 新城疫病毒基因Ⅶ型二联候选疫苗

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表达鸡传染性喉气管炎病毒gB、gD、gI蛋白耐热重组新城疫病毒的构建与评价

表达鸡传染性喉气管炎病毒gB、gD、gI蛋白耐热重组新城疫病毒的构...

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作者：孟晨晨扬州大学

学位级别：硕士

鸡传染性喉气管炎(Infectious laryngotracheitis,ILT)是由传染性喉气管炎病毒(Infectiouslaryngotracheitisvirus,ILTV)引起的以鸡呼吸困难、气喘、咳出带血粘液及产蛋下降为特征的重要传染病,给家禽生产带来较大经济损失。以新城疫病... 详细信息

鸡传染性喉气管炎(Infectious laryngotracheitis,ILT)是由传染性喉气管炎病毒(Infectiouslaryngotracheitisvirus,ILTV)引起的以鸡呼吸困难、气喘、咳出带血粘液及产蛋下降为特征的重要传染病,给家禽生产带来较大经济损失。以新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)为载体构建基因工程重组疫苗是生产上预防ILT的重要方法之一,但传统NDV弱毒株存在不耐热、不利于保存运输等缺点,因此构建新型耐热NDV基因工程重组载体疫苗毒株具有重要意义。本实验室前期分离鉴定到一株耐热的NDV强毒株NDV/HR09,在此基础上构建了一株热稳定的新型嵌合病毒NDV/cHR-DT-CI,其F基因被替换为基因Ⅶ型毒株的F基因,并将F蛋白裂解位点序列突变为112ERQER↓L117(属于NDV Class I)。本研究以该NDV耐热弱毒株为母本病毒,利用反向遗传技术构建表达ILTV gB、gD和gI蛋白的3株重组疫苗候选株,并对其生物学特性进行鉴定,为ILT疫苗研发提供重要的技术基础。1.耐热新城疫病毒外源基因表达载体的构建本研究利用NDV/cHR-DT-CI反向遗传技术平台,在分析病毒全基因组序列的基础上,将Pme Ⅰ酶切位点引入NDV基因组P和M基因间的非编码区,构建含Pme Ⅰ酶切位点的NDV全基因组转录载体pNDV/rAHR09-Ⅶ-PI;将构建的转录载体与3个辅助质粒(pCI-NP、pCI-P和pCI-L)共转染BSR细胞,进行病毒拯救及鉴定。结果显示,接种转染细胞及上清的SPF鸡胚尿囊液血凝结果为阳性,表明含PmeⅠ酶切位点的表达载体pNDV/rAHR09-Ⅶ-PI构建成功。为验证载体pNDV/rAHR09-Ⅶ-PI是否能够用于外源基因的表达,本研究将增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Flurescent Protion,EGFP)基因通过无缝克隆技术重组到NDV表达载体pNDV/rAHR09-Ⅶ-PI的Pme Ⅰ酶切位点,构建含EGFP基因和NDV全基因的转录载体pNDV/rAHR09-Ⅶ-EGFP。经病毒拯救,在转染48h后,在荧光倒置显微镜下可以观察到绿色荧光,说明重组病毒构建成功,将获救的重组病毒命名为 NDV/rAHR09-Ⅶ-EGFP。为探究重组病毒的生物学特性,首先将重组病毒NDV/rAHR09-Ⅶ-EGFP在鸡胚上连续传20代,对不同代次重组病毒中的EGFP基因进行PCR扩增。结果显示,各代次重组病毒均能鉴定到EGFP基因,且测序结果正确,说明重组病毒具有较好的遗传稳定性;利用Western Blot方法对重组病毒中的EGFP进行鉴定,结果表明构建的重组病毒能够正常表达EGFP。然后,为探究外源基因的插入是否会影响重组病毒的耐热性能,将重组病毒置于 56℃分别处理 10 min、20 min、30 min、40 min、50 min 和 60 min,血凝结果显示耐热处理后重组病毒的血凝效价能够一直保持在8log2,证明重组病毒具有良好的热稳定性;最后,本研究对重组病毒对鸡胚的感染能力和毒力进行评价。结果显示该重组病毒对鸡胚的感染能力为108EID50/0.2mL,MDT值为148h,符合NDV弱毒株特征,证明外源EGFP基因的插入对NDV的毒力不产生影响。以上结果表明,本研究成功构建了一种含PmeⅠ插入位点的NDV表达载体,该载体能够成功表达外源基因。同时,外源基因的插入不影响重组病毒的耐热性和毒力。2.表达ILTV gB、gD和gI蛋白耐热重组新城疫病毒的构建以构建的表达载体pNDV/rAHR09-Ⅶ-PI为基础,在Pme Ⅰ酶切位点处分别插入ILTV的gB、gD和gI基因,构建表达ILTV gB、gD和gI蛋白的耐热重组新城疫病毒。经病毒拯救,将成功获救的3株病毒命名为NDV/rAHR09-Ⅶ/ILTV-gB、NDV/rAHR09-Ⅶ/ILTV-gD 和 NDV/rAHR09-Ⅶ/ILTV-gI。以制作的 gB、gD 和 gI 蛋白多克隆抗体为一抗,对3株重组病毒外源蛋白表达进行Western Blot鉴定,结果显示3株重组病毒均能表达外源蛋白。为评价3株重组病毒的遗传稳定性,首先将3株重组病毒在SPF鸡胚上连续传20代,分别收集0代、5代、15代和20代的病毒尿囊液进行gB、gD和gI基因扩增鉴定,结果均能鉴定到对应的外源基因,且基因序列正确,表明外源基因均能在构建NDV重组病毒中稳定遗传。随后,对3株重组病毒进行耐热性的评价,选择HA效价相同的重组病毒于56℃分别处理10min、20min、30min、40min、50min和60min,结果发现3株重组病毒在处理60 min后HA效价仍不低于6log2,而相同处理条件下

关键词：传染性喉气管炎病毒新城疫病毒载体热稳定性 ILTV抗原蛋白

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