检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2002年第4期18卷 450-455页

作者：周继勇丁红梅程丽琴沈行燕浙江大学动物预防医学研究所杭州310029

核衣壳蛋白基因 (N基因 )是传染性支气管炎病毒的重要结构基因 .根据已报道的序列设计引物 ,利用RT PCR技术从病毒RNA中扩增和克隆到了N基因的cDNA ,并测定了核苷酸序列 .克隆的N基因片段ORF全长 12 30bp ,编码 4 0 9个氨基酸 .将该片... 详细信息

核衣壳蛋白基因 (N基因 )是传染性支气管炎病毒的重要结构基因 .根据已报道的序列设计引物 ,利用RT PCR技术从病毒RNA中扩增和克隆到了N基因的cDNA ,并测定了核苷酸序列 .克隆的N基因片段ORF全长 12 30bp ,编码 4 0 9个氨基酸 .将该片段序列与其他IBV病毒株比较 ,核苷酸的同一性为 87 0 %～ 98 6 %,氨基酸的同一性为 91 0 %～ 98 1%.将该cDNA亚克隆到pBV2 2 0表达载体 ,转化大肠杆菌DH5α菌株 ,Western印迹检测 ,获得了分子量约 4

关键词：禽病毒传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆 E.coli 表达

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传染性支气管炎病毒地方分离毒株S1基因的RT-PCR方法研究

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南京农业大学学报 2000年第3期23卷 85-88页

作者：陈德胜潘杰彦贾立群戴亚斌蔡宝祥陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095 新疆畜牧兽医总站乌鲁木齐830000

以传染性支气管炎病毒 (IBV)标准毒株M41为材料 ,根据Genbank公开序列自行合成一对特异引物 ,用于扩增IBV的完整S1基因。建立了针对IBV基因组RNA特点的RT PCR方法。对反应体系中的重要反应物Mg2 +、dNTP和引物浓度进行优化 ,确定其浓度... 详细信息

以传染性支气管炎病毒 (IBV)标准毒株M41为材料 ,根据Genbank公开序列自行合成一对特异引物 ,用于扩增IBV的完整S1基因。建立了针对IBV基因组RNA特点的RT PCR方法。对反应体系中的重要反应物Mg2 +、dNTP和引物浓度进行优化 ,确定其浓度值分别为 1 5mmol/L ,2 0 0 μmol/L和 40 μmol/L。使用此反应体系对国内IBV地方分离毒株JS/95 / 0 3 ,SD/ 97/ 0 1等 10多个毒株的S1基因进行扩增 ,均扩增出预期 1 7kb的完整S1基因。

关键词：传染性支气管炎病毒地方分离株 S1基因鸡

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传染性支气管炎病毒RT-LAMP检测方法的建立

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中国兽医科学 2012年第11期42卷 1163-1167页

作者：范瑾谭磊仇旭升孟春春包世俊胡美容何随彬郭小琴于圣青陈书明丁铲山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 国家家禽工程技术研究中心上海200331

为建立一种快速、灵敏、特异的检测传染性支气管炎病毒(IBV)的逆转录-环介导等温扩增方法(RT-LAMP),针对IBV毒株保守性N蛋白设计4对LAMP特异性引物,以RNA为模板,在Bst DNA聚合酶作用下恒温反应,对不同型IBV、新城疫病毒、禽流感病毒和... 详细信息

为建立一种快速、灵敏、特异的检测传染性支气管炎病毒(IBV)的逆转录-环介导等温扩增方法(RT-LAMP),针对IBV毒株保守性N蛋白设计4对LAMP特异性引物,以RNA为模板,在Bst DNA聚合酶作用下恒温反应,对不同型IBV、新城疫病毒、禽流感病毒和鸡滑液支原体进行特异性分析,并与普通RT-PCR进行灵敏性比较。结果表明RT-LAMP法在30min就能够特异性鉴定出不同型别的IBV,且灵敏度是普通RT-PCR的107倍,反应结果可眼观判断。本研究建立的IBV RT-LAMP检测方法具备耗时短、灵敏度高、简单易行等特点,在实验室快速诊断中是一种检测IBV的有效方法。

关键词：传染性支气管炎病毒逆转录-环介导等温扩增检测

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传染性支气管炎病毒广西分离株S1基因高变区Ⅰ的序列分析

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2006年第3期27卷 5-9页

作者：磨美兰韦正吉韦平韦宁耀张庆兰盛宇明蒙振邦韦天超广西大学动物科技学院广西南宁530005

对7个传染性支气管炎病毒广西分离株的S1基因高变区Ⅰ(HVRⅠ)进行RT-PCR扩增和序列分析,并用DNA star软件将这7个分离毒株与我国常用疫苗毒株、国际上其他血清型的代表参考毒株分别进行核苷酸和氨基酸系统发生进化关系分析。核苷酸与氨... 详细信息

对7个传染性支气管炎病毒广西分离株的S1基因高变区Ⅰ(HVRⅠ)进行RT-PCR扩增和序列分析,并用DNA star软件将这7个分离毒株与我国常用疫苗毒株、国际上其他血清型的代表参考毒株分别进行核苷酸和氨基酸系统发生进化关系分析。核苷酸与氨基酸序列分析结果表明:7个广西分离毒株可形成2个分支,第1分支与疫苗株H 120、H 52、M a5和参考株M 41、B eaudette的亲缘关系较近,第2分支则与疫苗株H 120、H 52、M a5的亲缘关系较远,但与欧洲分离株4/91的亲缘关系较近。结果提示广西的流行毒株变异较大,实际免疫中要根据流行毒株的特性来生产和选择合适的疫苗株。

关键词：传染性支气管炎病毒广西分离株基因高变区序列分析

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传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因的真核表达及免疫原性检测

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中国兽医学报 2005年第3期25卷 241-243页

作者：刘兆球姜世金常维山山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

为了探讨S1基因在DNA免疫防制传染性支气管炎(IB)中的免疫原性,将IBVZ株S1基因插入到真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中,构建了真核表达质粒pcDNAIBVZS。在脂质体作用下将pcDNAIBVZS转染CEF细胞,用间接免疫荧光试验检测,在CEF细胞中... 详细信息

为了探讨S1基因在DNA免疫防制传染性支气管炎(IB)中的免疫原性,将IBVZ株S1基因插入到真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中,构建了真核表达质粒pcDNAIBVZS。在脂质体作用下将pcDNAIBVZS转染CEF细胞,用间接免疫荧光试验检测,在CEF细胞中可见有大量S1蛋白表达。将重组质粒以100μg/只的剂量肌注免疫SPF雏鸡,经间接ELISA试验检测二免前后的血清,结果显示,pcDNAIBVZS基因可在SPF鸡体内诱导相应抗体的产生,具有特定的免疫原性。

关键词：传染性支气管炎病毒免疫原性 S1基因 pcDNA3.1 真核表达质粒间接免疫荧光试验检测 SPF雏鸡 ELISA 免疫防制基因插入蛋白表达重组质粒 SPF鸡 CEF IBV 脂质体 S基因细胞肌注抗体

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传染性支气管炎病毒与低致病性禽流感病毒共感染增强鸡支气管堵塞的研究

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中国家禽 2022年第12期44卷 104-110页

作者：张建军陆小龙刘开拓王晓泉胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院动物传染病实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 国药集团扬州威克生物工程有限公司江苏扬州225009

为明确鸡支气管堵塞的发病原因,通过建立H9N2亚型、H7N9亚型低致病性禽流感病毒(LPAIV)以及传染性支气管炎病毒(IBV)单独或共感染SPF鸡的动物模型,对其临床症状、死亡率和组织病理变化进行分析。结果显示:H9N2和H7N9亚型LPAIV分别单独... 详细信息

为明确鸡支气管堵塞的发病原因,通过建立H9N2亚型、H7N9亚型低致病性禽流感病毒(LPAIV)以及传染性支气管炎病毒(IBV)单独或共感染SPF鸡的动物模型,对其临床症状、死亡率和组织病理变化进行分析。结果显示:H9N2和H7N9亚型LPAIV分别单独感染组在感染后仅引起轻微的一过性临床症状,未出现呼吸道症状,未观察到试验鸡的死亡;而IBV单独感染组及与LPAIV(H9N2 AIV、H7N9 AIV)共感染组均能引起鸡的呼吸困难、张口喘、支气管堵塞等严重的呼吸道症状,并造成鸡死亡。IBV与LPAIV共感染组鸡的死亡率(IBV+H9N2AIV:40%;IBV+H7N9 AIV:45%)明显高于IBV单独感染组(15%)。临床剖检病死鸡均可观察到组织学病变,其中共感染组发病鸡支气管堵塞更加严重。研究结果揭示了IBV与LPAIV共感染增强鸡支气管堵塞的现象,对鸡呼吸道感染的科学防控具有参考意义。

关键词：鸡支气管堵塞传染性支气管炎病毒低致病性禽流感病毒共感染动物模型

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传染性支气管炎病毒中国和东南亚分离株的分子流行病学

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中国兽医学报 2003年第5期23卷 417-421页

作者：蒋贻海陈溥言南京农业大学动物医学院江苏南京210095

对 2 4个鸡传染性支气管炎病毒中国和东南亚分离株的 S1基因 5′端 (含 HVR 和 HVR )和 N基因 3′端进行了扩增和序列分析 ,通过与公开的其他毒株序列间的比较和分析 ,对分离毒株的分子流行病学进行了研究。结果表明 ,2 4个分离毒株分... 详细信息

对 2 4个鸡传染性支气管炎病毒中国和东南亚分离株的 S1基因 5′端 (含 HVR 和 HVR )和 N基因 3′端进行了扩增和序列分析 ,通过与公开的其他毒株序列间的比较和分析 ,对分离毒株的分子流行病学进行了研究。结果表明 ,2 4个分离毒株分属于美洲、亚洲和欧洲 3个基因群。其中一些毒株形成一相对独立的亚洲基因群 ,提示 IBV在亚洲已存在相当长时间 ;另一些毒株则可能来源于欧洲和美洲或来源于不同毒株 (包括疫苗株 )

关键词：传染性支气管炎病毒中国分离株东南亚分离株分子流行病学 S1基因 N基因基因变异鸡病毒

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传染性支气管炎病毒Holte株S1基因的克隆及鉴定

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中国兽医学报 1999年第2期19卷 118-120页

作者：宋延华刘福安华南农业大学动物医学系

为给鸡传染性支气管炎（ＩＢ）基因工程疫苗的研制提供基因储备，通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增出ＩＢＶＨｏｌｔｅ株Ｓ１基因ｃＤＮＡ，其长度与理论值１７６２ｂｐ相符；Ｓ１基因内部位点经ＨａｅⅢ酶切所产生的片段，亦与理论值５４９、３４... 详细信息

为给鸡传染性支气管炎（ＩＢ）基因工程疫苗的研制提供基因储备，通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增出ＩＢＶＨｏｌｔｅ株Ｓ１基因ｃＤＮＡ，其长度与理论值１７６２ｂｐ相符；Ｓ１基因内部位点经ＨａｅⅢ酶切所产生的片段，亦与理论值５４９、３４３、３２４、１９１、１８０、１７１ｂｐ６个片段大小一致。将Ｓ１基因ｃＤＮＡ克隆入ｐＵＣ１８，并对Ｓ１基因两翼进行了序列分析。结果表明，所克隆的Ｓ１基因与ＧｅｎＢａｎｋ中收录的ＩＢＶＨｏｌｔｅ株Ｓ１基因完全相符。

关键词：传染性支气管炎病毒 S1基因克隆鉴定

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传染性支气管炎病毒(IBV)国内分离毒株的分子流行病学分析

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病毒学报 2003年第2期19卷 149-153页

作者：陈德胜潘杰彦曹瑞兵戴亚斌陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

选择9个来自我国不同地区的传染性支气管炎病毒(IBV)地方毒株,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增出它们的完整S1基因,再将各扩增产物与T载体连接转化,筛选出相应毒株的阳性克隆,采用双脱氧链终止法测定基因序列。将这些国内分离毒... 详细信息

选择9个来自我国不同地区的传染性支气管炎病毒(IBV)地方毒株,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增出它们的完整S1基因,再将各扩增产物与T载体连接转化,筛选出相应毒株的阳性克隆,采用双脱氧链终止法测定基因序列。将这些国内分离毒株、我国常用疫苗毒株和国际上其他血清型的代表参考毒株一起,用DNAstar软件分别进行基因与氨基酸系统发生进化关系分析,结果将这些毒株分成3群:Ⅰ群内的毒株与疫苗毒株H120和M41的同源性很高,Ⅱ群内的毒株与其他毒株的同源性较低,Ⅲ群内的毒株与疫苗毒株有一定的同源性。3个群的毒株以疫苗毒株H120为核心,形成进化距离的梯度,提示弱毒疫苗的使用可能是我国IBV流行毒株的主要来源之一。分析结果还显示,我国IBV的分离毒株没有明显的时间和地理分布规律可循。

关键词：传染性支气管炎病毒 IBV 国内分离毒株分子流行病学序列发生进化关系冠状病毒

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传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因变异及在大场杆菌中的表达(英文)

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2003年第1期29卷 1-9页

作者：周继勇丁红梅程丽琴 Jimmy Kwang 浙江大学动物预防医学研究所浙江杭州310029 Laboratory of Animal Health Biotechnology Institute of Molecular Agrobiology The National University of Singaporesingapore117604

核衣壳蛋白 (N)是传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白之一。以前的研究结果显示 IBV- ZJ971毒株以引起腺胃肿大为特征 ,IBV- X和 N毒株以引起肾炎为特征。为了探讨不同组织嗜性传染性支气管炎病毒 N基因的变异 ,我们依据已发表的 IBV- Be... 详细信息

核衣壳蛋白 (N)是传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白之一。以前的研究结果显示 IBV- ZJ971毒株以引起腺胃肿大为特征 ,IBV- X和 N毒株以引起肾炎为特征。为了探讨不同组织嗜性传染性支气管炎病毒 N基因的变异 ,我们依据已发表的 IBV- Beaudette毒株 N基因的序列设计和合成引物 ,RT-PCR扩增 IBV- ZJ971、N、X和 H5 2的核衣壳蛋白基因 ,并测序、分析和在 ***中进行表达。结果显示 :IBV- ZJ971、N、X和 H5 2毒株的 N基因的 ORF由 12 30 bp组成 ,编码 4 0 9个氨基酸。与来源于 Gen Bank中的 IBV毒株比较 ,IBV- ZJ971、N、X和 H5 2与其它 IBV毒株的核苷酸同源性分别是 87.0 - 98.6 %、86 .6 - 99.7%、86 .3- 99.7%、87.2 % - 98.5 % ,氨基酸的同源性分别是 90 .0 - 97.8%、 90 .5 - 98.8%、 90 .0 -98.8%、 91- 98%。IBV- ZJ971毒株的 N蛋白不同于其他 IBV的独特变异是 111,117,14 2 ,171和 4 0 1位点上的氨基酸改变 ,IBV- N和 X毒株的 N蛋白不同与其它 IBV的独特变异是 4 6 ,4 8,189,190 ,2 2 0 ,2 2 3,2 36 ,2 37,2 4 0 ,2 86 ,2 99,30 1334,335 ,336 and35 1位点上的氨基酸改变。说明 IBV嗜腺胃毒株(ZJ971)和嗜肾毒株 (N和 X)的 N基因以散在的点突变为特征。将 IBV- ZJ971毒株的 N基因在 E.

关键词：传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因变异基因表达大肠杆菌

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