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表达鸡γ-干扰素和传染性支气管病毒S1基因的重组鸡痘病毒疫苗对鸡外周血T淋巴细胞动态分布影响的研究

中国预防兽医学报 2006年第5期28卷 539-543页

作者：孙永科田占成王云峰刘胜旺童光志智海东王玫中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

机体的免疫应答是一个复杂的生物学过程,它以体液和细胞免疫为主,二者相互影响,相互作用,而构成了一个动态整体。本研究通过FACS技术检测SPF鸡接种共表达IBVS1基因和鸡γ-干扰素基因的重组鸡痘病毒疫苗后外周血中CD4+、CD8+和TCRδγ+... 详细信息

机体的免疫应答是一个复杂的生物学过程,它以体液和细胞免疫为主,二者相互影响,相互作用,而构成了一个动态整体。本研究通过FACS技术检测SPF鸡接种共表达IBVS1基因和鸡γ-干扰素基因的重组鸡痘病毒疫苗后外周血中CD4+、CD8+和TCRδγ+三种亚类T淋巴细胞的数量的变化,初步探讨了干扰素对鸡外周血中T淋巴细胞亚类动态分布的影响。结果表明,含有干扰素基因的重组鸡痘病毒能显著增高机体特异性的CD8+和TCRδγ+T淋巴细胞水平,CD4+T淋巴细胞比例则要低于其他的疫苗免疫组。

关键词： T淋巴细胞鸡γ-干扰素传染性支气管病毒重组鸡痘病毒

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传染性支气管炎病毒腺胃青岛株(SD/97/02)核衣壳蛋白基因的克隆与鉴定

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南京农业大学学报 2000年第3期23卷 118-120页

作者：潘杰彦陈德胜王忠田陈溥言蔡宝祥南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095 河南农业大学牧医工程学院郑州450002

传染性支气管炎病毒(IBV)可引起鸡的急性、高度接触性传染病[1].核衣壳蛋白(N蛋白)是IBV的主要结构蛋白之一,为一种磷酸化蛋白,在胞浆基质合成.最近几年的研究发现,核衣壳蛋白与激发机体的细胞免疫有关[2].现普遍认为,核衣壳蛋白基因比... 详细信息

传染性支气管炎病毒(IBV)可引起鸡的急性、高度接触性传染病[1].核衣壳蛋白(N蛋白)是IBV的主要结构蛋白之一,为一种磷酸化蛋白,在胞浆基质合成.最近几年的研究发现,核衣壳蛋白与激发机体的细胞免疫有关[2].现普遍认为,核衣壳蛋白基因比较保守,因此其所诱发的Tc细胞免疫可能具有较广的适用性并在诱发不同血清型的病毒的保护性免疫中起作用.但是核衣壳蛋白基因在不同毒株之间仍有一些变异,而且这种变异对各株T细胞杂交瘤分泌上清的反应性不同[3].这说明核衣壳蛋白基因的变异对其细胞免疫性是有所不同的.

关键词：鸡传染性支气管病毒核衣壳蛋白基因

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鸡传染性支气管炎病毒SY毒株生物学特性及其S1基因分子遗传变异分析

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中国兽医科技 2002年第4期32卷 7-9页

作者：刘明春江国托康丽娟刘思国赵玉军沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110161 大连三仪生物工程研究所辽宁大连116000 大连市畜牧兽医技术服务中心辽宁大连116013 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

通过生物学特性研究 ,验证了分离自沈阳地区的SY毒株确实为 1株鸡传染性支气管炎病毒。病毒中和试验表明 ,SY血清型不同于参考毒株T、H52 、M41及国内其他流行株如HD、XB、DB等 ;S1基因序列分析表明 ,SY核苷酸序列及推导的氨基酸序列与... 详细信息

通过生物学特性研究 ,验证了分离自沈阳地区的SY毒株确实为 1株鸡传染性支气管炎病毒。病毒中和试验表明 ,SY血清型不同于参考毒株T、H52 、M41及国内其他流行株如HD、XB、DB等 ;S1基因序列分析表明 ,SY核苷酸序列及推导的氨基酸序列与参考毒株Beau、M41、H12 0 、N1 62、Gray、6/ 82和Ark99等毒株的同源率都低于 80 % ,进化关系与各参考毒株也相距甚远 ,糖基化位点出现 3个新位点 ,氨基酸疏水性区域也存在差异。

关键词： SY毒株分子遗传变异分析鸡传染性支气管病毒生物学特性 S1基因序列分析

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鸡传染性支气管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究

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东北农业大学学报 2015年第10期 57-63页

作者：李广兴杜威威韩溪潘龙王新白妍洪琴马玲任晓峰杨贵君东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 东北农业大学动物医学学院，哈尔滨 150030 上海药明康德新药开发有限公司，上海 200131

文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒（IBV）HH06株M全长基因，经抗原性和亲水性分析，将M部分序列成功亚克隆于pET-30a（+）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化E. coli Rosetta （DE3）感受态细胞，诱导表达获得20 ku重... 详细信息

文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒（IBV）HH06株M全长基因，经抗原性和亲水性分析，将M部分序列成功亚克隆于pET-30a（+）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化E. coli Rosetta （DE3）感受态细胞，诱导表达获得20 ku重组M蛋白。Western blot检测表明，重组蛋白能够与IBV参考阳性血清反应。以纯化重组M蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体，其ELISA效价达到1??218；Western blot结果证实，其具有良好的反应性和特异性。间接免疫荧光试验表明，抗M蛋白多克隆抗体可检测到PVAX-M1转染BHK-21细胞表达的M蛋白，与IBV HH06毒株具有很好的特异性反应。病毒感染抑制试验表明，多抗血清对IBV Beaudette株的抑制率可达到25.9%。为IBV检测及M蛋白功能的研究奠定基础。

关键词：传染性支气管病毒膜蛋白多克隆抗体间接免疫荧光试验免疫印迹试验

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鸡传染性支气管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究

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东北农业大学学报 2014年第10期45卷 57-63页

作者：李广兴杜威威韩溪潘龙王新白妍洪琴马玲任晓峰杨贵君东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 上海药明康德新药开发有限公司上海200131

文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒(IBV)HH06株M全长基因,经抗原性和亲水性分析,将M部分序列成功亚克隆于pET-30a(+)和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化*** Rosetta(DE3)感受态细胞,诱导表达获得20 ku重组M蛋白。Wester... 详细信息

文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒(IBV)HH06株M全长基因,经抗原性和亲水性分析,将M部分序列成功亚克隆于pET-30a(+)和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化*** Rosetta(DE3)感受态细胞,诱导表达获得20 ku重组M蛋白。Western blot检测表明,重组蛋白能够与IBV参考阳性血清反应。以纯化重组M蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,其ELISA效价达到1:218;Western blot结果证实,其具有良好的反应性和特异性。间接免疫荧光试验表明,抗M蛋白多克隆抗体可检测到PVAX-M1转染BHK-21细胞表达的M蛋白,与IBV HH06毒株具有很好的特异性反应。病毒感染抑制试验表明,多抗血清对IBV Beaudette株的抑制率可达到25.9%。为IBV检测及M蛋白功能的研究奠定基础。

关键词：传染性支气管病毒膜蛋白多克隆抗体间接免疫荧光试验免疫印迹试验

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鸡传染性支气管炎病毒HH06株囊膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能检测

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中国畜牧兽医 2016年第8期43卷 1967-1974页

作者：白妍赵蕾杜威威潘龙黄小丹杨贵君李广兴东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030

采用RT-PCR方法扩增鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）HH06株E基因全长,经抗原性和亲水性分析,将E基因部分序列（193~327bp）亚克隆于pET-32a（＋）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET-32a-E1转化*** Rosetta（DE3）感受态细胞,诱导表达获得大小约为23ku的重组截短E1蛋白,Western blotting检测重组蛋白与IBV全病毒多克隆抗体能特异性反应。以纯化后的E1蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗体效价达到220;Western blotting分析表明,E1多克隆抗体与重组表达蛋白具有良好的反应性;间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到PVAX-E1转染Hela细胞表达的E1蛋白和感染鸡胚肾细胞（CEK）中的HH06株IBV,抗E蛋白多克隆抗体的制备为E蛋白功能的深入研究奠定了基础。

关键词：传染性支气管病毒囊膜蛋白多克隆抗体免疫印迹试验间接免疫荧光试验

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干扰素诱导跨膜蛋白对传染性支气管炎病毒感染宿主的作用研究

干扰素诱导跨膜蛋白对传染性支气管炎病毒感染宿主的作用研究

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作者：李豪四川大学

学位级别：硕士

传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）是一种鸡群中广泛流行的冠状病毒,每年给世界范围内的家禽养殖业带来巨大经济损失。干扰素诱导跨膜蛋白（Interferon-induced transmembrane proteins,IFITMs）是近年来发现的一... 详细信息

传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）是一种鸡群中广泛流行的冠状病毒,每年给世界范围内的家禽养殖业带来巨大经济损失。干扰素诱导跨膜蛋白（Interferon-induced transmembrane proteins,IFITMs）是近年来发现的一类具有广谱抗病毒作用的小蛋白家族,但其在IBV感染过程中的作用尚不清楚。本研究测定了不同IBV毒株感染雏鸡各组织中ch IFITM1/2/3的表达谱;在细胞水平研究了ch IFITM1/2/3在IBV感染中的作用,并对其发挥作用的机制进行了初探。首先,分别使用三种不同的IBV毒株（M41、QX、Beaudette）感染一周龄的雏鸡,在第1、3、7、14 d,通过RT-q PCR对感染鸡十二种组织（直肠、肺、腺胃、心、脾、空肠、肾、十二指肠、盲肠扁桃体、气管、法氏囊、肝）中的病毒载量以及ch IFITM1/2/3表达量进行测定。结果表明:IBV感染组织中ch IFITM1/2/3表达量发生了不同程度的上调,提示ch IFITM1/2/3在体内参与了对IBV感染的调控。其次,构建ch IFITM1/2/3真核表达质粒（p CDNA3.1-ch IFITM1/2/3）,并转染HD11、DF-1、LMH三种宿主细胞系,感染IBV后,通过TCID50、RT-q PCR、Western Blot方法分别测定IBV的毒价、N基因及N蛋白的表达水平。结果显示:ch IFITM1/2/3显著抑制了IBV在HD11细胞中的增殖（P<0.01）。在DF-1细胞中,ch IFITM2显著抑制了IBV的增殖（P<0.05）,而ch IFITM1/3无显著差异性（P>0.05）;在LMH细胞中,ch IFITM1/2/3对IBV感染无抑制作用,且ch IFITM1促进了IBV在LMH细胞中的复制。最后,通过测定吸附与进入过表达ch IFITM1/2/3细胞中的IBV量,并通过激光共聚焦显微镜观测ch IFITM1/2/3蛋白与内体标志ch Rab5a/7a蛋白在不同细胞模型中的共定位情况,通过免疫沉淀与质谱联用（IP-MS）对不同细胞模型中与ch IFITM1互作的蛋白进行测定。结果表明:ch IFITM1/2/3通过抑制IBV进入细胞来抑制其进一步感染;HD11与LMH细胞中ch IFITM1/2/3定位大体相同;ch IFITM1在不同的细胞模型中可能与不同的下游蛋白互作,进而影响IBV的感染。综上所述,本研究证实了IBV感染组织中ch IFITM1/2/3会不同程度上调,ch IFITM1/2/3在体内参与了对IBV感染的调节;ch IFITM1/2/3可通过抑制IBV入胞来抑制其感染宿主细胞,而这种抑制效果与细胞类型及其下游蛋白密切相关。这些结果为以ch IFITMs为靶点的广谱抗IBV药物及新型疫苗的研发奠定了基础,也为其它冠状病毒的研究提供了参考。

关键词：冠状病毒传染性支气管病毒干扰素诱导跨膜蛋白 LMH HD11

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鸡传染性支气管炎病毒(IBV)地方SF株弱毒疫苗免疫期检验

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中兽医医药杂志 2009年第5期28卷 32-34页

作者：朱岩丽陈秀梅密晓霞李咏红李明义山东农业大学动物科技学院山东泰安271000 山东临沂市郯城县畜牧局码头兽医站山东临沂市罗庄区付庄办事处山东临沂市郯城县畜牧局农业部动物检疫所青岛易邦生物工程公司研究开发中心实验室

禽传染性支气管炎(IB)是由冠状病毒科禽传染性支气管病毒引起的一种常见多发的急性高度接触性传染病,本病由Schalk等首次在美国报道,其病原血清型众多,同毒株之间又有组织亲嗜性的差异,表现为呼吸型、肾型、肠型、腺胃型等阻”。自1982... 详细信息

禽传染性支气管炎(IB)是由冠状病毒科禽传染性支气管病毒引起的一种常见多发的急性高度接触性传染病,本病由Schalk等首次在美国报道,其病原血清型众多,同毒株之间又有组织亲嗜性的差异,表现为呼吸型、肾型、肠型、腺胃型等阻”。自1982年以来,肾型传染性支气管炎在我国广泛流行,[第一段]

关键词：鸡传染性支气管炎病毒弱毒疫苗肾型传染性支气管炎免疫期传染性支气管病毒检验 F株接触性传染病

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鸡传染性支气管炎病毒的检测方法研究进展

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家禽科学 2006年第8期 44-47页

作者：亓丽红艾武山东省农科院家禽研究所济南250023

鸡传染性支气管炎（Avian Infectious ***）是由鸡传染性支气管病毒OBV）引起的一种急性、高度接触性、传染性病毒性传染病。本病主要侵害鸡的呼吸道、泌尿生殖道、消化道等，所造成的产品质量和生产效益的下降通常比死亡还要严重，因... 详细信息

鸡传染性支气管炎（Avian Infectious ***）是由鸡传染性支气管病毒OBV）引起的一种急性、高度接触性、传染性病毒性传染病。本病主要侵害鸡的呼吸道、泌尿生殖道、消化道等，所造成的产品质量和生产效益的下降通常比死亡还要严重，因此具有重要的经济意义。南于IBV血清型多，不同血清型缺乏有效的交叉保护，新的变异株不断出现，造成免疫效果的下降，

关键词：鸡传染性支气管炎病毒传染性支气管病毒检测病毒性传染病生产效益产品质量交叉保护免疫效果血清型接触性

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鸡传染性支气管炎病毒的分子生物学研究进展

引用

家禽科学 2005年第7期 45-48页

作者：亓丽红李晓红王春玲王辉山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023 济南市农业学校泰安市岱岳区畜牧局

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis，IB)是由鸡传染性支气管病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性、传染性病毒性传染病。主要侵害鸡的呼吸道、泌尿生殖道、消化道等。感染可引起鸡的增重和饲料报酬降低。给不同日龄的鸡造... 详细信息

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis，IB)是由鸡传染性支气管病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性、传染性病毒性传染病。主要侵害鸡的呼吸道、泌尿生殖道、消化道等。感染可引起鸡的增重和饲料报酬降低。给不同日龄的鸡造成不同程度的危害。雏鸡感染后。出现呼吸道症状，甚至引起死亡，同时可引起生殖系统受损伤．造成输卵管永久性退化，导致生产力下降：产蛋鸡感染会引起产蛋数量品质下降，死淘率增加；肉鸡感染，尤其混合感染引起气囊炎使肉鸡在加工过程中被淘汰：所造成的产品质量和生产效益的下降通常比死亡还要严重，因此具有重要的经济意义。由于IBV血清型多，不同血清型缺乏有效的交叉保护，新的变异株不断出现。造成免疫效果的下降。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展传染性支气管病毒病毒性传染病呼吸道症状饲料报酬不同日龄生殖系统品质下降生产效益产品质量加工过程混合感染经济意义交叉保护免疫效果血清型接触性生殖道

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