检索结果-内蒙古大学图书馆

西南大学学报（自然科学版） 2025年第1期47卷 104-111页

作者：邹安龙吕红吴婵玉李鑫灿宋艳钱虹宇王芝英周作勇西南大学动物医学院重庆荣昌402460

伪结核棒状杆菌(Cp)是羊体表脓肿及干酪样淋巴结炎(CLA)的重要病原,接种疫苗是防控Cp感染致病最有效的手段之一。以Cp万州株(WZ)作为疫苗株,甲醛为灭活剂,ISA 201 VG为佐剂制备灭活苗,对山羊进行免疫,首免后28 d进行二免,二免后30 d以W... 详细信息

伪结核棒状杆菌(Cp)是羊体表脓肿及干酪样淋巴结炎(CLA)的重要病原,接种疫苗是防控Cp感染致病最有效的手段之一。以Cp万州株(WZ)作为疫苗株,甲醛为灭活剂,ISA 201 VG为佐剂制备灭活苗,对山羊进行免疫,首免后28 d进行二免,二免后30 d以WZ株攻毒,连续观察65 d。通过检测免疫和攻毒山羊的增质量、体温、血常规、血清免疫球蛋白G(IgG)水平、淋巴结脓肿数量及载菌量等,综合评价Cp灭活苗的免疫保护效果。结果显示:与对照组相比,受免山羊血清IgG抗体在首免后第3、4周和二免后第2~4周均显著升高,且二免IgG抗体明显高于首免。攻毒发现,对照组山羊体温在攻毒后7 d内均高于免疫组,攻毒后1~8周内对照组山羊增质量均低于免疫组,且免疫组山羊脓肿数量及Cp数均明显少于对照组,提示该灭活苗免疫可缓解因Cp感染引起的山羊体质量下降及体温升高,减少Cp攻毒引起的脓肿数量和淋巴结Cp载菌量。综合表明:所制备Cp灭活苗可提高山羊的免疫水平,对该病原感染具有较好的保护作用。

关键词：伪结核棒状杆菌灭活苗山羊免疫效果

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1株羊源伪结核棒状杆菌的分离鉴定及耐药性分析

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中国畜牧兽医 2025年第3期52卷 1405-1415页

作者：刘泽武樊月圆袁嘉芮格桑卓嘎班旦白卫兵茶金龙四朗玉珍富国文云南农业大学昆明650000 西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所拉萨850000 云南农业职业技术学院昆明650031

【目的】确定云南宜良地区某养殖场疑似患伪结核病病羊的病原,并探究其耐药性及致病性,为该病的诊断和治疗提供理论依据。【方法】通过患病羊临床症状初步判断病因,无菌采集病料,分离纯化病原菌后对其形态特征、培养特性和生化特性进行... 详细信息

【目的】确定云南宜良地区某养殖场疑似患伪结核病病羊的病原,并探究其耐药性及致病性,为该病的诊断和治疗提供理论依据。【方法】通过患病羊临床症状初步判断病因,无菌采集病料,分离纯化病原菌后对其形态特征、培养特性和生化特性进行鉴定;利用PCR扩增分离株16S rRNA基因序列并进行测序比对分析;通过药敏试验、耐药基因检测和小鼠致病性试验探究分离株的耐药性和致病性。【结果】分离株在血琼脂平板上生长状态良好,菌落呈黄白色、不透明样,在普通营养琼脂和普通营养肉汤内生长不良;革兰染色镜检结果显示,菌体为球杆状或棒状,为革兰阳性菌。生化鉴定结果显示,分离株的葡萄糖、尿素试验呈阳性,乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、西蒙氏枸橼酸盐、硫化氢、靛基质、硝酸盐还原试验、甲基红(MR)试验和VP试验均呈阴性。16S rRNA序列比对结果显示,分离株与NCBI数据库中的伪结核棒状杆菌16S rRNA基因序列相似性>99%,鉴定其为伪结核棒状杆菌。药敏试验结果显示,分离株对链霉素、庆大霉素、新霉素表现中介,对氨曲南、头孢他啶、多黏菌素表现耐药。耐药基因检测结果显示,该分离株携带耐药基因Sul2、Sul3、blaTEM及bla CTX-M。动物致病性试验结果显示,腹腔、皮下接种4.4×10^(8) CFU/mL分离菌后可引起小鼠死亡,死亡率达100%。皮下接种96 h后可见小鼠皮下出现脓肿,脓液中可分离出伪结核棒状杆菌。【结论】本试验成功分离鉴定出1株羊源伪结核棒状杆菌,明确了患病羊病原,该分离株对小鼠致病性较强。研究结果为伪结核棒状杆菌感染羊的诊断、流行病学调查以及治疗提供参考依据。

关键词：山羊伪结核棒状杆菌分离鉴定耐药性

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山羊源伪结核棒状杆菌的分离鉴定及其生物学特性分析

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中国预防兽医学报 2025年第1期47卷 23-30页

作者：林龙华许秋马彩萍柴霁芸侯杰孙宏飞杜素素范翠龙祝瑶张万江中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室/动物细菌病创新团队黑龙江哈尔滨150069 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 东北林业大学野生动物与自然保护地学院黑龙江哈尔滨150006

为鉴定引起黑龙江省齐齐哈尔市某山羊养殖场山羊体表脓肿的病原,并分析其生物学特性,本实验无菌采集40份体表患有脓肿的山羊脓液进行细菌的分离鉴定、革兰氏染色;采用PCR扩增分离菌16S rRNA基因并测序,基于细菌16S rRNA基因序列构建分... 详细信息

为鉴定引起黑龙江省齐齐哈尔市某山羊养殖场山羊体表脓肿的病原,并分析其生物学特性,本实验无菌采集40份体表患有脓肿的山羊脓液进行细菌的分离鉴定、革兰氏染色;采用PCR扩增分离菌16S rRNA基因并测序,基于细菌16S rRNA基因序列构建分离菌的系统进化树;通过微量肉汤稀释法分析细菌对7类代表性抗菌药的敏感性;通过Illumina PE 150对细菌全基因组测序,并利用ResFinder数据库预测细菌的相关耐药基因,利用VFDB数据库预测细菌的毒力基因;通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)对细菌分型鉴定;通过小鼠致病性试验分别对分离菌和ATCC 19410株的致病性进行评价。结果显示:分离菌在血琼脂平板上可形成狭窄的β溶血环,革兰氏染色可见蓝紫色、球杆状的细菌;16S rRNA基因的测序鉴定结果显示引起山羊体表脓肿的病原为伪结核棒状杆菌,经统计从40份病料样品中分离出10株伪结核棒状杆菌。16SrRNA系统进化树结果显示,分离菌和伪结核棒状杆菌聚为同一分支,与谷氨酸棒状杆菌、肾棒状杆菌等处于临近分支,表明分离菌为伪结核棒状杆菌。药敏试验结果显示,10株分离菌对所测试的6种抗菌药均敏感,1-1、24两株分离菌对庆大霉素敏感,其余8株分离菌对庆大霉素均耐药。耐药基因预测结果显示10株分离菌均未检测到耐药基因。毒力基因预测结果显示10株分离菌均检测到与黏附性、铁摄取与调节、毒素相关的毒力相关基因21个。PFGE将10株分离菌分为两种谱型,表明至少有两种谱型的伪结核棒状杆菌正流行于该羊场。小鼠致病性试验结果显示,将毒力最强的3-1菌株对小鼠进行腹腔感染后,最高剂量组死亡小鼠剖检可见肠道充血肿胀、肝脾肿大、边缘出血梗死;低剂量组死亡小鼠剖检可见腹腔脏器出现黄白色脓肿,其产生的病变与ATCC 19410标准株感染小鼠产生的病变一致,前两个高剂量3-1菌株感染小鼠组的存活率为0,两个低剂量3-1菌株感染小鼠的存活率均为100%。经计算3-1菌株对小鼠的LD50为8.5×105 cfu。本研究确定了引起该山羊养殖场山羊体表脓肿的病原为伪结核棒状杆菌,并对其进行生物学特性分析,为山羊场羊伪结核病的防治提供实验依据,为后续伪结核棒状杆菌的进一步研究奠定了实验基础。

关键词：伪结核棒状杆菌耐药基因毒力基因脉冲场凝胶电泳致病性

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伪结核棒状杆菌pld基因无痕缺失株构建及其生物学特性及致病性研究

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微生物学报 2022年第9期62卷 3387-3398页

作者：赵夏薇李晓霞袁永丰宋艳杨睿易文毅谭静梅宋振辉王芝英周作勇西南大学动物医学院重庆402460 重庆市畜牧科学院重庆402460 重庆市兽医科学工程研究中心重庆402460 西南大学医学院免疫研究中心重庆402460

伪结核棒状杆菌是一种可以感染多种动物和人的兼性胞内寄生病原,主要引起被感染动物慢性化脓性炎症反应。【目的】为进一步评价磷脂酶D基因(pld)在伪结核棒状杆菌感染致病中的作用。【方法】本研究采用同源重组技术,在不引入外源基因情... 详细信息

伪结核棒状杆菌是一种可以感染多种动物和人的兼性胞内寄生病原,主要引起被感染动物慢性化脓性炎症反应。【目的】为进一步评价磷脂酶D基因(pld)在伪结核棒状杆菌感染致病中的作用。【方法】本研究采用同源重组技术,在不引入外源基因情况下,构建伪结核棒状杆菌pld无痕缺失株。通过比较pld缺失株和野生株的菌落形态及生长曲线、体外对巨噬细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放及其在胞内的繁殖情况以及体内感染小鼠致死率及促炎细胞因子分泌水平,研究pld与该病原感染致病之间的关系。【结果】无痕缺失pld对伪结核棒状杆菌的菌落形态及生长无明显影响。与野生株ATCC19410和XH02相比,ATCC19410Δpld和XH02Δpld失去了与马红球菌ATCC6939的协同溶血功能,所感染巨噬细胞的LDH释放水平显著下降,胞内细菌数量显著降低;体内试验发现ATCC19410Δpld对小鼠的致死率、肝脏和脾脏载菌量以及腹水及脏器促炎细胞因子水平均低于ATCC19410。【结论】成功构建了伪结核棒状杆菌pld无痕缺失株。证实pld在该病原体外感染引发巨噬细胞死亡以及体内感染小鼠致病中具有重要作用。

关键词：伪结核棒状杆菌 pld无痕缺失巨噬细胞小鼠致病性炎症因子

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伪结核棒状杆菌感染影响巨噬细胞IL-1α表达、成熟及分泌的机制研究

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微生物学报 2022年第10期62卷 3947-3956页

作者：王晓涵田尚全邹安龙谭静梅易文毅王芝英周作勇西南大学动物医学院重庆402460 重庆市兽医科学工程研究中心重庆402460 西南大学医学院免疫研究中心重庆402460

【目的】伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染动物常引起内脏和体表淋巴结脓肿,以被感染部位炎性细胞因子大量增加为特征。研究Cp感染小鼠巨噬细胞对IL-1α成熟分泌的影响及机制。【方法】采用荧光定量PCR、ELIS... 详细信息

【目的】伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染动物常引起内脏和体表淋巴结脓肿,以被感染部位炎性细胞因子大量增加为特征。研究Cp感染小鼠巨噬细胞对IL-1α成熟分泌的影响及机制。【方法】采用荧光定量PCR、ELISA和Western blotting等方法,首先检测Cp(ATCC19410、XH02)及其磷脂酶D基因(pld)缺失株(ATCC19410Δpld、XH02Δpld)感染巨噬细胞对IL-1α表达及成熟分泌的影响,进而以Ca^(2+)螯合剂(EDTA、EGTA+Mg^(2+)和BAPTA-AM)、calpain抑制剂(calpain inhibitorⅢ、calpain inhibitorⅣ和EST)处理巨噬细胞,观察对Cp感染介导IL-1α成熟分泌的影响。【结果】Cp感染巨噬细胞后,IL-1αmRNA表达及分泌显著增加,与ATCC19410、XH02感染巨噬细胞相比,ATCC19410Δpld、XH02Δpld感染细胞IL-1α表达及分泌显著下降。Cp感染引起巨噬细胞内Ca^(2+)浓度显著增加,calpain活性增强,而缺失pld的Cp感染巨噬细胞内Ca^(2+)浓度显著下降,calpain活性降低。EDTA、EGTA+Mg^(2+)、BAPTA-AM、calpain inhibitorⅢ、calpain inhibitorⅣ处理Cp感染的巨噬细胞,巨噬细胞的IL-1α表达及分泌显著下降。【结论】Cp感染可激活巨噬细胞IL-1α表达和成熟分泌,磷脂酶D参与Cp感染巨噬细胞介导的IL-1α成熟分泌。Cp感染巨噬细胞介导IL-1α成熟与分泌与胞内Ca^(2+)浓度增加、激活钙蛋白酶有关。

关键词：伪结核棒状杆菌巨噬细胞 IL-1α 磷脂酶D 钙蛋白酶

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伪结核棒状杆菌试验感染家兔的临床与病理学变化

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中国兽医科学 2013年第3期43卷 299-303页

作者：兰宇李一经唐丽杰葛俊伟王瑞翀姜艳平崔文乔薪瑗东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省疾病控制中心黑龙江哈尔滨150030

为了系统掌握伪结核棒状杆菌人工感染实验动物后的发病情况、临床特征及主要病理学变化,为实验室诊断提供科学的基础数据,利用伪结核棒状杆菌标准强毒株ATCC19410按不同剂量感染3只家兔,观察其临床及病理学变化,从病料中分离病原菌,对... 详细信息

为了系统掌握伪结核棒状杆菌人工感染实验动物后的发病情况、临床特征及主要病理学变化,为实验室诊断提供科学的基础数据,利用伪结核棒状杆菌标准强毒株ATCC19410按不同剂量感染3只家兔,观察其临床及病理学变化,从病料中分离病原菌,对其形态及培养特性进行观察。结果显示,家兔接种15d后,接种部位皮肤开始肿胀,随着时间的延长,肿块表面皮肤开始破溃,有白色而黏稠的脓汁排出,排脓后破溃创口逐渐结痂愈合,无其他明显临床症状;剖检可见肝、胃部大网膜有白色散在的化脓灶,两侧腋浅前淋巴结肿大,切开后有干酪样脓汁;病理组织学观察可见,皮肤感染局部病灶由典型的中央坏死区和周围纤维素性肉芽肿组成,其他各主要脏器组织均有充血、出血等现象;从病料中成功分离到了病原菌,镜下形态及培养特性均与感染所用标准毒株一致。结果表明,家兔人工感染伪结核棒状杆菌后主要形成局灶性脓肿,并有特征性的具有诊断意义的组织学病理变化。

关键词：伪结核棒状杆菌临床特征病理变化诊断

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伪结核棒状杆菌毒力因子的研究进展

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中国人兽共患病学报 2017年第12期33卷 1115-1119页

作者：周作勇李和贤杨浩钺王芝英西南大学动物科学学院荣昌校区荣昌402460 重庆市兽医科学工程研究中心荣昌402460

人兽共患病原伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis)引起的慢性传染病干酪样淋巴结炎杆菌(Caseous lymphadenitis,CLA)呈全世界流行,极难防制。该病原感染致病的机理与其毒力因子密切相关,本文就伪结核棒状毒力因子研究... 详细信息

人兽共患病原伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis)引起的慢性传染病干酪样淋巴结炎杆菌(Caseous lymphadenitis,CLA)呈全世界流行,极难防制。该病原感染致病的机理与其毒力因子密切相关,本文就伪结核棒状毒力因子研究情况进行综述,提出进一步鉴定和解析不同毒力因子在该病原感染致病中的作用及相互关系,对深入了解该病原的致病机制和候选疫苗研究具有重要的指导意义。

关键词：伪结核棒状杆菌毒力因子磷脂酶D 分枝菌酸

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伪结核棒状杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

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动物医学进展 2021年第7期42卷 1-6页

作者：刘刚尹峥李晨露徐海玲王晶晶张琪许信刚杨增岐西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

为建立伪结核棒状杆菌(Cp)血清抗体间接ELISA检测方法,以热灭活处理的不同的浓度Cp菌株作为固相抗原包被酶标板,用不同封闭液封闭,设置不同的封闭时间,再用不同稀释度的待检血清和不同稀释度的酶标二抗与之反应,以此优化间接ELISA反应条... 详细信息

为建立伪结核棒状杆菌(Cp)血清抗体间接ELISA检测方法,以热灭活处理的不同的浓度Cp菌株作为固相抗原包被酶标板,用不同封闭液封闭,设置不同的封闭时间,再用不同稀释度的待检血清和不同稀释度的酶标二抗与之反应,以此优化间接ELISA反应条件,确定阳性临界值。对间接ELISA方法的特异性和重复性进行试验,并在此基础上对采集的临床样本进行检测。结果显示,最佳抗原包被量为OD600 nm=0.084的菌悬液100μL,10 g/L BSA封闭时间2 h,一抗血清稀释度为1∶400,酶标二抗的稀释度为1∶5000,血清阴阳性的OD450 nm值临界值为0.352。该方法仅对Cp阳性血清呈特异性反应,与6种常见病原阳性血清均无交叉反应,特异性较强。批内试验和批间试验的变异系数均小于9.5%,重复性较好。敏感性试验结果表明,当伪结核标准阳性血清进行1∶1280稀释时检测仍为阳性,敏感性较强。用该方法对10份经细菌分离鉴定为阳性的血清进行Cp抗体检测,结果均为阳性。用建立的方法对临床随机采集的423份血清进行检测,结果显示阳性率为35%。研究建立的抗体间接ELISA方法为Cp抗体检测及血清学调查奠定了基础。

关键词：伪结核棒状杆菌间接ELISA 抗体检测

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伪结核棒状杆菌可视化LAMP现场检测方法的建立

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中国兽医科学 2023年第7期53卷 837-842页

作者：李富祥夏九鲜喻永福朱沛杨仕标赵文华高华峰云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明650224 昆明市西山区农业农村局云南昆明650100 石林彝族自治县动物疾病预防控制中心云南石林652200

为建立伪结核棒状杆菌可视化LAMP检测方法,根据伪结核棒状杆菌16S rRNA基因的特异性保守核苷酸序列设计2对引物,通过反应体系和反应条件的优化,建立了伪结核棒状杆菌可视化LAMP现场检测方法,并评价该方法的特异性和敏感性。结果显示,本... 详细信息

为建立伪结核棒状杆菌可视化LAMP检测方法,根据伪结核棒状杆菌16S rRNA基因的特异性保守核苷酸序列设计2对引物,通过反应体系和反应条件的优化,建立了伪结核棒状杆菌可视化LAMP现场检测方法,并评价该方法的特异性和敏感性。结果显示,本实验所建立LAMP方法的最佳反应条件为62℃1 h。利用该方法检测大肠杆菌、肠炎沙门菌、金黄色葡萄球菌等山羊和绵羊常见的15种细菌的DNA样品,结果显示仅伪结核棒状杆菌检测为阳性,其他细菌检测为阴性。该方法对阳性质粒标准品pMD19-Cory的最低检出浓度为4.7 copies/μL。应用建立的LAMP方法和普通PCR方法对128份山羊皮下脓肿样品进行检测,结果显示LAMP方法和普通PCR方法的阳性率分别为21.1%(27/128)和20.3%(26/128),2种检测方法的总符合率为99.2%(127/128)。结果表明,本研究建立的可视化LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高、快速的优点,为山羊和绵羊伪结核棒状杆菌感染的可视化现场快速诊断提供可行方法。

关键词：伪结核棒状杆菌环介等温扩增可视化现场检测

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伪结核棒状杆菌pld和cp40基因的克隆、序列分析及原核表达

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动物医学进展 2020年第10期41卷 25-29页

作者：尹峥刘刚王理想金剑苏红付明哲张琪许信刚西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

为了解伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,CP)陕西分离株的pld和cp40基因的遗传变异情况及制备检测抗原,利用GenBank收录CP的pld(CP001829.1)和cp40(KY041980.1)基因序列,设计合成特异性PCR引物,分别对pld和cp40基因进行扩增、序列分析和原核表达。结果表明,成功克隆了CP陕西分离株的pld和cp40全基因序列。核苷酸序列分析表明,陕西分离株pld基因与国内外已报道的伪结核棒状杆菌核苷酸同源性在98%~100%之间,cp40基因核苷酸同源性在91%~99%之间。pld和cp40基因重组原核表达菌株经IPTG诱导后可分别表达约为33 ku和41 ku的重组融合蛋白,重组蛋白均能与CP的阳性血清特异性结合。试验结果可为CP陕西分离株分子生物学特性研究提供资料,为进一步研制CP抗体ELISA检测试剂盒提供基础。

关键词：伪结核棒状杆菌 pld cp40 序列分析原核表达

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