检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验眼科杂志 2023年第12期41卷 1243-1248页

作者：徐翌华(综述) 朱鸿(审校) 上海交通大学附属第一人民医院眼科、上海市眼底病重点实验室、上海眼视觉与光医学工程技术研究中心上海200080

随着电子设备的普及与环境光污染现象的日趋严重,视网膜光辐照引起的损伤及其对视网膜色素变性、年龄相关性黄斑变性等疾病的致病作用逐渐被关注。光-视网膜组织反应类型以光热反应及光化学反应为主,其中可见光产生的光化学反应与视网... 详细信息

随着电子设备的普及与环境光污染现象的日趋严重,视网膜光辐照引起的损伤及其对视网膜色素变性、年龄相关性黄斑变性等疾病的致病作用逐渐被关注。光-视网膜组织反应类型以光热反应及光化学反应为主,其中可见光产生的光化学反应与视网膜疾病关系密切。光辐照参数包括光辐照波长、辐照能量及辐照时间等,不同参数下光辐照对视网膜细胞的作用还可能受多种外界因素影响。较多视网膜光辐照细胞实验模型建立以研究光辐照,尤其是蓝光对视网膜色素上皮细胞、光感受器细胞及神经细胞损伤的机制。光辐照会导致视网膜各细胞氧化应激、内质网应激及线粒体损伤激活自噬调控细胞凋亡。炎性小体激活及外泌体也参与调控光辐照对视网膜色素上皮细胞的损伤。也有研究探讨不同波长光源对细胞的潜在治疗作用。本文从光-视网膜组织反应类型、生物学研究中常用的光辐照参数,以及视网膜色素上皮细胞光辐照模型、视网膜光感受器细胞光辐照模型、视网膜神经节细胞光辐照模型等方面就视网膜光辐照的实验模型,探讨不同模型间细胞及光辐照参数的差异。

关键词：视网膜色素上皮光感受器细胞视网膜神经节细胞光辐照体外研究模型

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阿尔茨海默病研究的常用细胞模型

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中华医学杂志 2022年第5期102卷 385-388页

作者：聂淑雅贾建平首都医科大学宣武医院神经疾病高创中心国家老年疾病临床医学研究中心老年认知障碍疾病北京市重点实验室首都医科大学神经变性病与记忆障碍疾病临床诊疗与研究中心北京脑重大疾病研究院阿尔茨海默病研究所教育部神经变性病重点实验室北京100053

阿尔茨海默病(AD)是一种以进行性认知功能损害为主要表现的神经退行性疾病,且发病机制未明。因此,对AD复杂的发病机制研究尤为重要。AD体外细胞模型是研究AD发病机制的重要工具。利用单一的细胞系进行实验,能有效展示AD的病理生理特点,... 详细信息

阿尔茨海默病(AD)是一种以进行性认知功能损害为主要表现的神经退行性疾病,且发病机制未明。因此,对AD复杂的发病机制研究尤为重要。AD体外细胞模型是研究AD发病机制的重要工具。利用单一的细胞系进行实验,能有效展示AD的病理生理特点,相较于动物实验更加简便直观,可用于研究单一因素对AD病理过程的作用,如蛋白的异常代谢、干预通路的调控等。其实验周期短、易于培养、无限传代和经济高效的特点为研究AD的发病机制提供了有力的工具。人源的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y和BE(2)-M17细胞系,鼠来源的杂交细胞NC108-15、神经母细胞瘤细胞Neuro-2A、小胶质细胞BV2和海马神经元细胞HT22细胞系是AD发病机制研究中较常用的几种细胞模型,均为永生化的细胞系,它们不仅具有正常神经细胞的细胞突起、离子通道及酶等,还具备各自的特点,可作为良好的神经细胞模型,模拟AD的病理生理变化。本文对这几种细胞系进行系统综述,以期为后续研究AD复杂的发病机制提供参考。

关键词：阿尔茨海默病体外研究模型神经母细胞胶质细胞海马细胞

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低幅高频机械振动波（LMHF）对人成纤维细胞影响的实验研究

低幅高频机械振动波（LMHF）对人成纤维细胞影响的实验研究

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作者：李琼华中科技大学

学位级别：博士

目的：为了探讨机械振动刺激对皮肤创面的影响，本研究欲建立正弦式低幅高频（Low-magnitude and high-frequency，LMHF）振动波体外研究的生物模型，研究机械振动波对人类皮肤成纤维细胞迁移、增殖、分化以及细胞外基质的影响，进而深... 详细信息

目的：为了探讨机械振动刺激对皮肤创面的影响，本研究欲建立正弦式低幅高频（Low-magnitude and high-frequency，LMHF）振动波体外研究的生物模型，研究机械振动波对人类皮肤成纤维细胞迁移、增殖、分化以及细胞外基质的影响，进而深入理解机械力对皮肤创面愈合影响的机制。方法：①在以往的关于全身振动的研究基础上，利用特制的正弦式低幅高频振动器，对人类皮肤成纤维细胞进行体外振动，尝试不同的振动参数，观察振动后细胞的变化情况，分析不同条件的振动对成纤维细胞的不同影响，最终选择合适的振动参数作为后续研究的基础。根据前期振动研究的结果以及本研究观察到的现象，本研究最终选择的振动参数为：振动加速度a=0.4g，振动时间t=15分钟，振动频率分别为f=30、50、65、100Hz。②对人类成纤维细胞进行正弦式低幅高频振动处理后，利用细胞迁移划痕实验的方法，来检测振动处理后22小时细胞迁移的速率。③分别应用CellQuanti-Blue和BrdU细胞活性检测方法检测正弦式低幅高频振动波对人类成纤维细胞增殖能力的影响。④利用Real-time PCR技术检测经过正弦式低幅高频振动波长时间（3-5d）刺激之后的人类成纤维细胞内α-SMA,以及主要细胞外基质的mRNA基因表达水平，进而研究机械振动波对成纤维细胞的分化和细胞外基质分泌的影响。结果：①在本实验的振动参数条件下，长时间（30min）的振动刺激会导致部分细胞发生坏死。镜下可见成纤维细胞突起数目减少，胞体由长梭形变为细长型或椭圆形，部分胞体内可以看到聚集的小空泡样改变，活细胞率下降。但是15min的振动刺激后，细胞的外形和活性跟对照组相比较，并没有明显的变化。②与对照组相比较，所有振动处理组内成纤维细胞的迁移能力均有明显降低（p<0.05)。并且这种降低的趋势与频率的增高成反比，即频率越高，细胞迁移的速度越慢，频率65Hz和100Hz的两组之间并没有差异性，但是从分析图表上我们可以发现仍呈下降趋势。同时我们还发现振动方向对细胞迁移的速率的影响不大。③与对照组相比，f=30Hz、50Hz、65Hz的振动刺激对细胞的增殖能力并没有显著的影响（p>0.05)，但是f=100Hz的振动会显著降低成纤维细胞的增殖能力。④对人类成纤维细胞进行长时间（3-5d）体外低幅高频振动刺激，成纤维细胞内的α-SMA有了增高的趋势，其中以f=50Hz振动组增高最明显，具有统计学意义。但是对细胞外基质蛋白的基因表达影响不明显。结论：本研究在基于前人研究的基础上，首次建立了正弦式机械振动波对人类皮肤成纤维细胞影响的体外生物模型，为后续进一步开展广泛研究打下了基础。低幅高频的机械振动波会减缓皮肤成纤维细胞的迁移速率，这种降低的趋势与一定范围内频率的增高成反比（f=30-100Hz），但是不同方向的振动对细胞的迁移速度并没有明显的影响。正弦式机械振动波对人类成纤维细胞增值能力的影响与振动的条件有关，当振动频率小于100Hz时，机械振动波对细胞的增殖能力并没有明显的影响。但是在振动频率大于100Hz的时候，细胞的增殖能力会受到抑制。长时间低幅高频机械振动波对人类皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化具有一定的促进作用，但是对细胞外基质蛋白的分泌则影响不明显。由于机械力振动对生物体的影响是一个非常复杂的过程，体内实验和体外实验之间存在非常大的差别，因此本研究的发现具有一定的局限性，需要更进一步的详细探索来逐渐认识机械振动波对皮肤创面的影响及其相关机制。

关键词：体外研究模型低幅高频振动波全身振动设备正弦式机械振动振幅加速度振动时间人类成纤维细胞肌成纤维细胞间充质干细胞细胞迁移实验细胞划痕实验细胞增殖检测荧光实时定量聚合酶链反应细胞迁移细胞增殖细胞分化细胞外基质细胞骨架皮肤创面愈合

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血管内皮钙黏蛋白外功能区脱落对内皮通透性的影响及在严重脓毒症中的意义

血管内皮钙黏蛋白外功能区脱落对内皮通透性的影响及在严重脓毒症...

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作者：张如愿上海交通大学

学位级别：博士

背景脓毒症尤其严重脓毒症仍是面临的主要健康问题之一,是重症监护病房(ICU)病人的首要死亡因为。内皮细胞激活、功能障碍和损伤是严重脓毒症及多器官功能障碍综合征(MODS)的重要特征。内皮通透性增高所致微血管渗漏是严重脓毒症和MODS... 详细信息

背景脓毒症尤其严重脓毒症仍是面临的主要健康问题之一,是重症监护病房(ICU)病人的首要死亡因为。内皮细胞激活、功能障碍和损伤是严重脓毒症及多器官功能障碍综合征(MODS)的重要特征。内皮通透性增高所致微血管渗漏是严重脓毒症和MODS的重要病理生理。血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)为内皮细胞特异性膜蛋白,是内皮细胞之间黏附连接的主要成分。VE-cadherin介导的细胞间同型黏附在内皮屏障和内皮细胞其他功能的控制方面具有关键作用。本研究拟:(1)探讨内皮细胞体外研究模型的选择；(2)研究VE-cadherin胞外区即外功能区脱落在内皮通透性增高中的作用；(3)检测严重脓毒症病人血清可溶性VE-cadherin(VE-cadherin外功能区)水平,并探讨其与疾病严重程度及预后的关系。<br>　　材料和方法：用原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为阳性对照,从蛋白水平和mRNA水平分析广泛作为内皮细胞体外研究模型的ECV304细胞系VE-cadherin的表达。以重组人基质金属蛋白酶9(rMMP-9)裂解VE-cadherin胞外区,研究VE-cadherin外功能区脱落对内皮通透性、肌动蛋白细胞骨架和RhoA的影响。收集入住SICU的重症病人28例,其中严重脓毒症15例,非脓毒症重症病人13例,健康志愿者13例。对比分析严重脓毒症血清可溶性钙黏蛋白水平,并分析和APACHEⅡ评分及死亡的相关性。内皮细胞VE-cadherin的蛋白水平检测采用免疫荧光法(IF)和免疫印迹法(WB)。VE-cadherin在mRNA水平的检测应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)。内皮通透性测定采用FITC-葡聚糖透过Transwell方法测定。肌动蛋白细胞骨架采用罗丹明-鬼笔环肽染色荧光显微镜下观察。RhoA表达以WB法检测。细胞培养液和人血清可溶性VE-cadherin检测采用酶联免疫吸附试验法(Elisa)。<br>　　结果：(1)已广泛用作内皮细胞体外研究模型的ECV304细胞系在蛋白水平和mRNA水平均未检测到VE-cadherin。(2)VE-cadherin外功能区脱落明显增高了内皮通透性；激活内皮细胞RhoA,引起肌动蛋白细胞骨架重组和内皮细胞间隙形成；(3)和健康志愿者及非严重脓毒症的重症病人相比,严重脓毒症病人血清可溶性VE-cadherin水平明显增高(P<0.0001)。重症病人血清可溶性VE-cadherin水平和APACHEⅡ评分呈直线相关(相关系数r=0.577,P<0.01)。严重脓毒症死亡者血清可溶性VE-cadherin水平明显高于生存者(P<0.01)。最后,我们用严重脓毒症病人血清刺激HUVEC,发现内皮细胞连接处VE-cadherin明显减少,并且VE-cadherin总量明显降低。<br>　　结论：(1)ECV304细胞系不表达VE-cadherin,缺乏内皮细胞重要特征,不应作为内皮细胞体外研究模型；(2)VE-cadherin外功能区脱落后可发生由外向内的细胞信号转导作用,激活RhoA,引起肌动蛋白细胞骨架重组和内皮细胞间隙形成,对内皮通透性具有重要调节作用；(3)严重脓毒症血清可溶性VE-cadherin水平明显增高,并和疾病严重程度及预后相关。

关键词：严重脓毒症内皮细胞内皮通透性血管内皮钙黏蛋白体外研究模型 ECV304细胞系

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微流控仿生肾单位芯片的构建及功能研究

微流控仿生肾单位芯片的构建及功能研究

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作者：曲玥阳大连理工大学

学位级别：博士

微环境对维持细胞的活性和功能起到重要作用。作为肾脏的基本结构和功能单元,肾单位具有肾小球滤过和肾小管重吸收、分泌等功能。由于肾单位特殊的结构和功能,不同种类、不同区域的细胞所处的微环境有较大差异。体外实验影响因素少、条... 详细信息

微环境对维持细胞的活性和功能起到重要作用。作为肾脏的基本结构和功能单元,肾单位具有肾小球滤过和肾小管重吸收、分泌等功能。由于肾单位特殊的结构和功能,不同种类、不同区域的细胞所处的微环境有较大差异。体外实验影响因素少、条件可控,在研究肾脏损伤机制和药物筛选中占据重要地位。但现有的二维和三维体外培养平台仿真度低,难以模拟肾脏复杂的微环境。微流控平台具有流体可控、设计组合灵活等优点,辅以具有生理功能的细胞与仿生的细胞排布,有可能构建具有相似结构和核心功能的肾芯片。目前已有肾芯片相关报道,但现有工作使用的具有功能的细胞种类少,只模拟了肾单位的部分节段,不能在一个系统内完整实现物质经肾小球滤过、肾小管分泌或重吸收的生理过程,结构和功能的仿真度较差。为探讨和验证提高肾芯片仿真度的关键因素,本文首先由简单到复杂,分别设计并构建了单层肾小管上皮细胞芯片、肾小管管周芯片以及同时具有肾小球单元和肾小管单元的肾单位芯片。其中前两种芯片能够初步模拟肾小管相应功能,肾单位芯片能够初步模拟体内肾脏中物质在结合态和游离态之间的转换、肾小球滤过、肾小管分泌、肾小管重吸收等四个物质经肾消除的重要环节。随后对肾单位芯片具有相对完整的结构和功能的必要性进行验证,并对肾单位芯片的功能及潜力进行探讨。论文的第一步部分开发了构建肾单位模型所需细胞的分离和提取方法。使用该方法可以通过一次实验,从同一只大鼠的肾脏中,同时获得原代肾足细胞、肾小管管周血管内皮细胞、肾小管上皮细胞。通过比较不同组织获取方法对细胞活性的影响,胶原酶的种类和消化时间的选择对获取组织的纯度和活性的影响,不同包被条件对三种原代细胞的增殖和功能维持情况的影响,不同培养液成分对肾小管上皮细胞和足细胞的活性和功能维持的影响,确定了最优分离、培养方案。论文的第二步部分描述了两种肾小管芯片的构建方法,以“夹膜”式为基本结构,利用种有肾小管上皮细胞的多孔膜构建单层肾小管上皮细胞芯片,利用分别种有肾小管管周血管内皮细胞和肾小管上皮细胞的多孔膜构建肾小管管周芯片。考察了肾小管管周血管内皮细胞和肾小管上皮细胞形成的细胞层的致密性和功能;考察了肾小管芯片对于细胞功能在体外重建的影响;考察了在肾小管芯片中形成细胞极性对顺铂致损伤评估结果的影响;比较了两种肾小管芯片在顺铂致肾小管损伤评估中的仿真性。与单层肾小管上皮细胞芯片相比,肾小管管周芯片从结构上以及在顺铂肾毒性评价的表现中都更为接近体内情况。论文的第三部分,描述了一种肾单位芯片的构建方法。该方法以“夹膜”式为基本结构,利用种有大鼠原代肾足细胞、血管内皮细胞的多孔膜构建肾小球单元,利用种有大鼠原代肾小管上皮细胞、血管内皮细胞的多孔膜构建肾小管单元。肾小球单元具有分子尺寸和电荷选择性滤过功能,肾小管单元具有对氨基马尿酸分泌和葡萄糖重吸收功能。在“人工血液”里添加血清白蛋白,促进细胞功能重建。比较了肾单位芯片和单层肾小管上皮细胞芯片以及肾小管管周芯片在顺铂致肾小管损伤评估中的仿真性。与另两种肾小管芯片相比,肾单位芯片从结构上以及在顺铂肾毒性评价的表现中都更为接近体内情况。论文的第四部分,以药致肾损伤为例,探讨了肾单位芯片的功能及潜力。该芯片可以用于考察不同浓度的顺铂作用下,肾小球单元和肾小管单元细胞的损伤情况;比较顺铂和阿霉素对肾单位芯片的肾小球单元和肾小管单元细胞的损伤顺序;考察顺铂和阿霉素对肾单位芯片的肾小球单元和肾小管单元细胞功能蛋白表达的影响;探讨在“人工血液”里添加血清白蛋白对顺铂和阿霉素所致肾损伤的影响。部分数据与已报道的体内结果相近,表明肾单位芯片在药致肾损伤研究中有较大的应用潜力。本文设计并构建的肾单位芯片,初步模拟了体内肾脏中药物在结合态和游离态之间的转换、肾小球滤过、肾小管分泌、肾小管重吸收等四个对药物肾毒性的影响较大动态过程。与现有细胞实验平台相比,该芯片在结构和功能上具有更高的仿真性。该肾单位芯片可用于体外测试药物肾毒性,研究肾的功能,特别是肾损伤致病机制,有望填补现有体外研究缺乏高仿真度模型的空白,成为肾脏疾病研究的有力武器,从而在寻找新的治疗靶点及药物研发中占据重要地位。

关键词：微流控肾单位芯片仿生体外研究模型功能重建

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人体肠道菌群的试验模型的研究进展

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食品科技 2022年第1期47卷 8-12页

作者：薛玉玲袁庆彬杨婉秋张栋冯丽莉王世杰石家庄君乐宝乳业有限公司河北石家庄050221 河北省发酵乳制品技术创新中心河北石家庄050221 河北科技大学生物科学与工程学院河北石家庄050018

肠道菌群与人体健康密切相关,肠内菌群可以参与人体发育、消化吸收、代谢等生理过程,因此,肠道菌群的平衡对我们的健康和疾病有着重要的影响。但是,肠道菌群数量及种类庞大,且与人体相互组成了非常复杂的生态系统,因此研究人体肠道菌群... 详细信息

肠道菌群与人体健康密切相关,肠内菌群可以参与人体发育、消化吸收、代谢等生理过程,因此,肠道菌群的平衡对我们的健康和疾病有着重要的影响。但是,肠道菌群数量及种类庞大,且与人体相互组成了非常复杂的生态系统,因此研究人体肠道菌群存在很多困难。文章综述了研究人体肠道菌群的体内和体外的具有代表性的试验模型方法,并概述了各模型方法的特点和问题,为完善和开发新的技术及方法提供基础与思路。

关键词：肠道菌群体内研究模型体外研究模型

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光声成像技术在牙隐裂检测中的初步研究

光声成像技术在牙隐裂检测中的初步研究

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作者：邵皎皎南京大学

学位级别：硕士

目的:建立隐裂牙体外研究模型,实现光声断层成像技术在隐裂牙检测中的应用。方法:收集12颗新鲜离体牙,分为4组,每组三颗,分别为组1:完整牙齿无包裹,组2:牙冠无包裹,组3:完整牙齿2层湿包裹,组4:完整牙齿4层湿包裹。实验采用最低温度-196... 详细信息

目的:建立隐裂牙体外研究模型,实现光声断层成像技术在隐裂牙检测中的应用。方法:收集12颗新鲜离体牙,分为4组,每组三颗,分别为组1:完整牙齿无包裹,组2:牙冠无包裹,组3:完整牙齿2层湿包裹,组4:完整牙齿4层湿包裹。实验采用最低温度-196℃,冷冻12h,最高温度90℃,浸泡5min,利用热胀冷缩的原理制造离体牙人工裂纹。收集2颗离体牙,样本1为牙齿完整,无硬组织病损的上颌第三磨牙;样本2为牙冠部受到牙钳破坏,并存在邻面釉质白垩色龋损的上颌第一前磨牙。实验采用光声断层成像技术,分别对两个样本进行扫描和内部图像构建,并对两样本的光声信号分别进行时域分析和频域分析。结果:在实验条件下,组1和组2成功制作出牙釉质和牙本质裂纹,其中组1和组2各出现一样本完全崩裂;组3和组4与实验前对比无明显变化。光声断层成像技术分别对两样本牙冠横截面进行成像,频域分析的方式可以有效区分牙釉质与牙本质以及牙体硬组织病损。结论:温差法能够制作离体牙人工裂纹,光声断层成像技术可以实现牙冠成像,选择合适的信号分析方式可实现病损检测。

关键词：隐裂牙体外研究模型光声断层成像技术信号处理

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体外肝脏/肝胆类器官技术及其应用的研究进展

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癌变．畸变．突变 2024年第6期36卷 497-501,505页

作者：徐嘉琪孙震晓北京中医药大学生命科学学院北京102488

传统体外研究系统如细胞系、原代细胞、组织切片等在模拟体内环境方面存在局限。类器官技术利用干细胞在体外形成三维结构,能够更好地模拟真实器官的复杂结构和微环境,为现代科研提供了一种新的研究平台。药物肝毒性研究在新药研发及药... 详细信息

传统体外研究系统如细胞系、原代细胞、组织切片等在模拟体内环境方面存在局限。类器官技术利用干细胞在体外形成三维结构,能够更好地模拟真实器官的复杂结构和微环境,为现代科研提供了一种新的研究平台。药物肝毒性研究在新药研发及药物上市后安全性评价中非常重要,肝胆类器官能够更全面地模拟肝脏内多种细胞类型和微环境,为药物肝毒性研究提供了新的手段。尽管类器官技术面临扩增难度大、无法完全复制体内环境等挑战,但通过改进培养条件、结合生物材料和基因编辑技术等方法有望实现突破。本文对肝脏/肝胆类器官技术的发展,肝胆类器官的构建、培养方法、评价标准,以及将其应用在药物肝毒性评估中的研究实例等进行了综述。

关键词：类器官技术体外研究模型肝胆类器官培养药物肝毒性药物开发

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肝纤维化的动物模型制备研究

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山西职工医学院学报 2013年第2期23卷 62-64页

作者：王晓丽临汾职业技术学院山西临汾041000

肝纤维化是肝损伤后不断进行愈合修复反应的结果,其发病机制复杂。选择合适的研究模型可以有效地对肝纤维化发病机制进行深入研究,同时也可以作为一个很好的手段实施高通量筛选抗肝纤维化药物。本文就如何制备肝纤维化的动物模型分别从... 详细信息

肝纤维化是肝损伤后不断进行愈合修复反应的结果,其发病机制复杂。选择合适的研究模型可以有效地对肝纤维化发病机制进行深入研究,同时也可以作为一个很好的手段实施高通量筛选抗肝纤维化药物。本文就如何制备肝纤维化的动物模型分别从体内动物模型与体外细胞离体培养模型两个方面作阐述。

关键词：肝纤维化体内研究模型体外研究模型肝星状细胞

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