检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2023年第18期56卷 3556-3573页

作者：哈丹丹郑红霞张振昊竺利红刘浩王教瑜周雷天津科技大学生物工程学院浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所/农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所

【目的】以玉米穗腐病优势病原菌和伏马毒素主要产毒菌拟轮枝镰孢（Fusarium verticillioides）为研究对象，构建组成型表达绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白DsRED、过氧化物酶体靶向标记蛋白DsRED-PTS1和细胞骨架F-actin结合蛋白LifeAct-... 详细信息

【目的】以玉米穗腐病优势病原菌和伏马毒素主要产毒菌拟轮枝镰孢（Fusarium verticillioides）为研究对象，构建组成型表达绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白DsRED、过氧化物酶体靶向标记蛋白DsRED-PTS1和细胞骨架F-actin结合蛋白LifeAct-GFP的荧光菌株，观察拟轮枝镰孢侵染玉米须表皮的穿透结构，明确拟轮枝镰孢侵染结构形成的调控机制和影响因素。【方法】通过农杆菌介导的遗传转化方法将荧光表达载体p COM-GFP、p COM-Ds RED、p COM-Ds RED-PTS1和p COM-Life Act-GFP分别导入拟轮枝镰孢野生型菌株D85-2中，PCR鉴定含有目标基因的转化子，激光共聚焦显微镜观察各荧光蛋白的表达和分布；接种玉米须观察侵染结构；赛璐酚膜模拟植物表皮穿透试验，观察穿透结构和F-actin的动态组装；使用F-actin聚合抑制剂Latrunculin A、三环唑和活性氧抑制剂DPI(diphenyleneiodonium chloride)检测穿透结构形成的影响因素。【结果】建立了以遗传霉素G418为抗性标记的遗传转化方法；FV-GFP和FV-DsRED菌株分别具有清晰、明亮的绿色荧光和红色荧光，FV-DsRED-PTS1菌株中红色荧光呈圆点状分布，符合真菌中过氧化物酶体的分布特征，FV-LifeAct-GFP菌株孢子和菌丝内部具有丝絮状绿色荧光，符合真菌中F-actin蛋白的分布特征；玉米须表皮侵染过程中观察到菌丝顶端膨大类似附着枝侵染结构；赛璐酚膜模拟穿透试验观察到穿透结构中F-actin蛋白的成环组装；药物胁迫试验表明，穿透结构的形成受F-actin蛋白聚合和活性氧调控。同时，三环唑能够抑制穿透。【结论】构建了4种荧光标记菌株，细胞定位清晰，具有正常的生长表型和致病力，能够满足致病机制相关研究需求；明确了拟轮枝镰孢在侵染玉米时能够形成一种菌丝顶端膨大的类似附着枝状的侵染结构；确定了F-actin成环聚集、细胞骨架组装和活性氧调控是影响拟轮枝镰孢侵染结构形成的关键因素。

关键词：拟轮枝镰孢荧光标记过氧化物酶体侵染结构细胞骨架活性氧

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疏水表面诱导橡胶树炭疽菌侵染结构的发育分化过程

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植物保护学报 2018年第3期45卷 470-477页

作者：林春花牟保辉刘文波缪卫国郑服丛海南大学热带农林学院植物保护学院海南省热带生物资源可持续利用国家重点实验室培育基地海口570228

为了解橡胶树2种炭疽病菌的侵染结构发育分化过程,采用平板菌落生长速率法测定了3株胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides和3株尖孢炭疽菌***的菌丝生长速率,测量其分生孢子大小,显微观察2种炭疽菌在疏水表面诱导下侵染结构的发育... 详细信息

为了解橡胶树2种炭疽病菌的侵染结构发育分化过程,采用平板菌落生长速率法测定了3株胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides和3株尖孢炭疽菌***的菌丝生长速率,测量其分生孢子大小,显微观察2种炭疽菌在疏水表面诱导下侵染结构的发育分化过程。结果表明,胶孢炭疽菌菌丝生长速率为0.96~1.36 cm/d,显著高于尖孢炭疽菌的菌丝生长速率0.72~0.89 cm/d,但二者分生孢子大小无显著差异。在疏水表面诱导下,2种炭疽菌分生孢子在接种2~6 h后开始萌发,12 h孢子萌发率为71.70%~88.05%,13~16 h开始分化附着胞,24 h附着胞形成率为48.99%~70.74%,36 h菌丝诱发形成大量附着枝,48 h后分生孢子产生的次生菌丝也可诱发形成附着枝,附着枝呈圆形、姜瓣形、梨形或不规则形。分生孢子极易产生,可在菌丝顶端成簇或菌丝侧面排列产生,也可由分生孢子形成的芽管产生,或在芽管分化附着胞过程分枝形成分生孢子;附着胞多着生于芽管顶端,少数附着胞顶端可继续萌发类似短芽管结构,再次分化形成可黑色化的次级附着胞。表明橡胶树2种炭疽菌不同菌株间分生孢子萌发时间、孢子萌发率、附着胞形成时间和形成率有一定差异,但种间无明显差异;橡胶树炭疽菌分生孢子极易形成,在疏水表面容易分化形成附着胞和附着枝,说明具有极强的适生性。

关键词：橡胶树胶孢炭疽菌尖孢炭疽菌侵染结构显微观察

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胡杨和灰叶胡杨锈菌夏孢子形态和侵染结构观察

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植物病理学报 2013年第3期43卷 267-273页

作者：李倩谷思辰王玉丽李志军李占林李健强中国农业大学植物病理学系/农业部植物病理学重点开放实验室北京100193 种苗健康北京市工程研究中心/种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193 塔里木大学植物科学学院/新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室阿拉尔843300 内蒙古赤峰市松山区岗子乡林业站赤峰024051

借助直接观察、显微和超微结构观测等手段,对胡杨和灰叶胡杨锈病显症叶片、锈菌夏孢子的形态、孢子萌发和侵染结构进行了观测。结果表明,胡杨和灰叶胡杨的锈菌夏孢子堆、夏孢子形态结构相似;夏孢子堆散生于叶片正反两面,近半球形或半椭... 详细信息

借助直接观察、显微和超微结构观测等手段,对胡杨和灰叶胡杨锈病显症叶片、锈菌夏孢子的形态、孢子萌发和侵染结构进行了观测。结果表明,胡杨和灰叶胡杨的锈菌夏孢子堆、夏孢子形态结构相似;夏孢子堆散生于叶片正反两面,近半球形或半椭球形,呈橙黄色或金黄色;夏孢子散落分布于叶片正反两面,圆形或卵圆形,透明、橙黄色,厚壁,单胞,表面密生刺瘤;胡杨和灰叶胡杨锈菌夏孢子的长轴和短轴长度、刺瘤高度及刺瘤间距四项指标均无显著性差异;夏孢子萌发产生芽管后形成菌丝,通过叶表气孔直接侵染叶片,以菌丝的形式在叶片组织内扩展。

关键词：胡杨灰叶胡杨粉被栅锈菌夏孢子形态侵染结构

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植物病原真菌侵染结构研究进展

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南京林业大学学报（自然科学版） 2007年第1期31卷 90-94页

作者：郑玲吴小芹南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037

对植物病原真菌侵染结构的研究近年愈受重视。笔者对植物病原真菌侵染结构的形成及其与寄主的互作关系进行了综述。病原真菌通常会产生侵染垫、附着胞和吸器等侵染结构来完成侵染寄主的过程。附着胞及其相伴形成的黑色素对病原真菌的侵... 详细信息

对植物病原真菌侵染结构的研究近年愈受重视。笔者对植物病原真菌侵染结构的形成及其与寄主的互作关系进行了综述。病原真菌通常会产生侵染垫、附着胞和吸器等侵染结构来完成侵染寄主的过程。附着胞及其相伴形成的黑色素对病原真菌的侵染能力至关重要,其受遗传基因的控制,并受寄主表面结构、温度、pH值等环境因素的影响。吸器不仅是病原真菌吸收寄主营养的器官,也是寄主和病原真菌进行信息交换的区域。吸器外膜源于寄主质膜,但其结构和功能不同于寄主质膜,病原真菌与寄主的互作直接导致吸器超微结构的变化。研究植物病原真菌的侵染结构及其侵染机理,对植物侵染性病害的防治具有重要的参考价值。

关键词：植物病原真菌侵染结构附着胞吸器

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植物致病真菌的侵染结构——对于防治植物病害的潜在靶标

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浙江化工 1999年第3期30卷 44-47页

作者：汪灿明刘洪安谢春艳沈阳化工研究院辽宁沈阳110021

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一个新的核蛋白基因控制梨孢菌的分生孢子形态与侵染结构的形成

一个新的核蛋白基因控制梨孢菌的分生孢子形态与侵染结构的形成

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中国植物病理学会2005年学术年会暨植物病理学报创刊50周年纪念会

作者：赵晓燕彭友良中国农业大学植物病理系中国农业大学植物病理系

梨孢菌(Magnaporthe grisea)引起水稻稻瘟病,该病是水稻最重要的病害之一。梨孢菌也是研究植物病原真菌的模式系统之一,其致病性分子基础的探讨不仅有助于梨孢菌和其它病原真菌的致病机理的解明,而且还有助于稻瘟病和其它真菌病害的控... 详细信息

梨孢菌(Magnaporthe grisea)引起水稻稻瘟病,该病是水稻最重要的病害之一。梨孢菌也是研究植物病原真菌的模式系统之一,其致病性分子基础的探讨不仅有助于梨孢菌和其它病原真菌的致病机理的解明,而且还有助于稻瘟病和其它真菌病害的控制。梨孢菌的分生孢子呈梨形,由三个细胞组成,是该菌侵染水稻的主要初侵染源和再侵染源。但是,有关该菌分生孢子的形态建成及其在致病性中作用的研究

关键词：梨孢菌侵染结构分生孢子附着胞病原真菌核蛋白基因

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多核和双核丝核菌侵染水稻过程中细胞超微结构变化及细胞壁降解酶活性的差异

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沈阳农业大学学报 2021年第5期52卷 604-610页

作者：魏松红段淯张优张照茹李昕洋刘伟王海宁沈阳农业大学植物保护学院沈阳110161

丝核菌属真菌是重要的植物病原真菌,多种丝核菌种类及融合群可侵染水稻,不同丝核菌种类及融合群间致病力具有较大差异,分析不同丝核菌致病力差异对于研究丝核菌属病原菌导致的水稻病害的发生流行以及种群动态具有重要意义。为探究多核... 详细信息

丝核菌属真菌是重要的植物病原真菌,多种丝核菌种类及融合群可侵染水稻,不同丝核菌种类及融合群间致病力具有较大差异,分析不同丝核菌致病力差异对于研究丝核菌属病原菌导致的水稻病害的发生流行以及种群动态具有重要意义。为探究多核和双核丝核菌对水稻致病力差异产生的原因,采用扫描电子显微镜和透射电子显微镜对2种病原菌侵染水稻叶片细胞的超微结构进行观察,利用3,5-二硝基水杨酸法和实时荧光定量PCR技术对其侵染过程中产生的多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纤维素酶(Cx)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)的活性差异和多聚半乳糖醛酸酶基因(PG基因)的表达差异进行分析。结果表明:多核菌株菌丝扩展速度与形成侵染结构的数量均显著高于双核菌株。侵染24h时,多核菌株在水稻叶片表面形成较多侵染垫,双核菌株形成的侵染垫数量明显少于多核菌株;侵染48h时,多核菌株侵染的水稻叶片细胞叶绿体解体,而双核菌株侵染的水稻叶片细胞无明显变化。多核菌株与双核菌株在侵染水稻时均能产生5种细胞壁降解酶,且多核菌株细胞壁降解酶活性均显著高于双核菌株。PG酶活性显著高于其他4种细胞壁降解酶活性,多核菌株PG酶活性最高为860.46U·mg^(-1),双核菌株PG酶活性最高为59.27U·mg^(-1)。水稻纹枯病菌多核与双核菌株侵染水稻叶片过程中其PG基因表达趋势相同,但多核菌株PG基因表达量显著高于双核菌株,多核菌株侵染水稻24h时PG基因表达量达到最高,双核菌株在侵染水稻48h时PG基因表达量达到最高。研究结果可为进一步了解丝核菌属真菌的致病机制奠定理论基础。

关键词：水稻纹枯病菌多核菌株双核菌株侵染结构细胞壁降解酶 PG基因

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胶孢炭疽菌侵染橡胶树叶片染色方法的建立及显微观察

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热带作物学报 2021年第10期42卷 2979-2985页

作者：龙明滕梁晓宇杜艳楠邹丽君张宇王萌海南大学植物保护学院海南海口570228 热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室海南海口570228

本研究建立了一种橡胶树叶片中胶孢炭疽菌的染色方法,通过显微观察明确胶孢炭疽菌在橡胶树叶片中的侵染结构,为橡胶树炭疽病的预测预报提供理论依据。在脱色剂(0.15%三氯乙酸乙醇溶液∶氯仿=5∶1)处理12 h,1%刚果红染色剂抽滤染色3 h的... 详细信息

本研究建立了一种橡胶树叶片中胶孢炭疽菌的染色方法,通过显微观察明确胶孢炭疽菌在橡胶树叶片中的侵染结构,为橡胶树炭疽病的预测预报提供理论依据。在脱色剂(0.15%三氯乙酸乙醇溶液∶氯仿=5∶1)处理12 h,1%刚果红染色剂抽滤染色3 h的条件下,能清晰观察到胶孢炭疽菌在橡胶树叶片上的发育进程和侵染结构。结果表明,在28℃、100%相对湿度培养条件下,接种橡胶树淡绿期叶片2~6 h为分生孢子萌发高峰期,12 h后分生孢子萌发率大于85%;8~12 h为附着胞形成高峰期,接种12 h约75%的芽管顶端产生附着胞,少数附着胞中央部位开始形成侵染钉;24 h为侵染钉形成高峰期,同时分生孢子萌发形成多个芽管;36 h时附着胞顶端再次萌发产生次级附着胞,从而进一步侵染周围细胞,叶片出现零星病斑;48 h时芽管不断分支异化成菌丝并产生次级分生孢子,叶片出现大量典型的炭疽病病斑;72 h后菌丝在叶片表面纵横扩展,随机分支,逐步形成网状分布。随着菌丝的扩展,叶片组织发生一系列的病理变化,侵染部位组织出现褐色坏死病斑。本研究建立了一种着色效果好,简便易行,经济有效的橡胶树叶片中胶孢炭疽菌的染色方法,进一步明确了胶孢炭疽菌的侵染结构。

关键词：橡胶树炭疽病胶孢炭疽菌染色方法侵染结构

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小麦条锈病菌夏孢子在水稻叶片上的侵染动态

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西南农业学报 2016年第11期29卷 2520-2528页

作者：张重梅章振羽姬红丽胡培松彭云良四川省农业科学院植物保护研究所/农业部西南作物有害生物综合治理重点实验室四川成都610066 华中农业大学植物科学技术学院湖北武汉430070 中国水稻研究所浙江杭州311404

水稻是一种对已知所有锈菌免疫的重要粮食作物,从组织和细胞水平研究锈菌与水稻之间的互作关系对于利用水稻抗锈性机制具有重要意义。通过系统观察小麦条锈病菌夏孢子在水稻品种丽江新团黑谷叶片上的侵染过程,发现小麦条锈菌混合菌株的... 详细信息

水稻是一种对已知所有锈菌免疫的重要粮食作物,从组织和细胞水平研究锈菌与水稻之间的互作关系对于利用水稻抗锈性机制具有重要意义。通过系统观察小麦条锈病菌夏孢子在水稻品种丽江新团黑谷叶片上的侵染过程,发现小麦条锈菌混合菌株的夏孢子在水稻叶片上附着不稳定。在静置叶片上病菌夏孢子能够萌发、侵入,并形成气孔下囊、侵染菌丝、吸器母细胞、吸器、次生菌丝等结构,但是自侵入起便受到丽江新团黑谷对其侵染和扩展的抵抗,表现在侵染各个环节成功率均显著低于在小麦感病品种铭贤169叶片上的成功率。接种后5 d内夏孢子芽管侵入气孔并形成气孔下囊、气孔下囊产生初级侵染菌丝、初生侵染菌丝产生吸器母细胞和/或吸器的比率分别比在铭贤169叶片上低51.01%、53.99%和43.05%;自接种后3 d开始,侵染点便开始逐渐出现越来越强烈的水稻气孔细胞和/或叶肉细胞的坏死反应;最终孢子床和孢子堆发育则完全未发生。研究结果表明,水稻对小麦条锈病菌的非寄主抗性涉及预成型抗性和诱导抗性等多种抗性机制。

关键词：水稻小麦条锈病菌夏孢子侵染结构非寄主抗性

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灰葡萄孢Gβ-like蛋白Bcgbl1功能研究

灰葡萄孢Gβ-like蛋白Bcgbl1功能研究

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作者：汤洁静华中农业大学

学位级别：博士

灰葡萄孢（Botrytis cinerea）是植物灰霉病的主要病原菌,寄主广泛,侵袭力强,对寄主植物危害严重,造成巨大的经济损失。这种病原菌形成侵染垫和类似附着胞等侵染结构侵染植物组织,但其形成和发育的分子机理还不清楚。本研究从灰葡萄孢菌... 详细信息

灰葡萄孢（Botrytis cinerea）是植物灰霉病的主要病原菌,寄主广泛,侵袭力强,对寄主植物危害严重,造成巨大的经济损失。这种病原菌形成侵染垫和类似附着胞等侵染结构侵染植物组织,但其形成和发育的分子机理还不清楚。本研究从灰葡萄孢菌株RoseBC-3的T-DNA插入突变体库中筛选获得了1株不能形成侵染垫的无致病力突变体AT19,以此为线索探究灰葡萄孢侵染结构形成的机制和致病机理。取得的主要研究结果如下:1.从T-DNA突变体库中筛选获得Gβ-like基因Bcgbl1缺陷突变体AT19。通过致病力测定,获得7株灰葡萄孢致病力缺陷T-DNA插入突变体,其中突变体AT19不能形成侵染垫。与亲本菌株RoseBC-3相比,AT19生长速度下降,分生孢子产量降低,对高盐、高渗、氧化胁迫敏感性增加,致病力丧失。Southern杂交和hiTAIL-PCR证实AT19中T-DNA以单拷贝插入,破坏了Gβ-like基因Bcgbl1的表达。2.明确了Bcgbl1基因敲除影响灰葡萄孢菌丝生长、菌核和分生孢子发育以及侵染能力。在灰葡萄孢菌株B05.10中将基因Bcgbl1进行敲除,获得了与AT19表型类似的敲除突变体。与B05.10相比,ΔBcgbl1生长减慢,不形成菌核,分生孢子产量显著下降,且分生孢子从圆形、椭圆形变为长椭圆形,对高盐、细胞壁胁迫及氧化胁迫敏感性增加。ΔBcgbl1不能形成正常的侵染结构,非刺伤接种的条件下不能侵染烟草叶片,在刺伤接种的条件下可以侵染烟草叶片,但是病斑扩展缓慢,病斑直径大约是野生型菌株的3/10。3.发现ΔBcgbl1中MAPK（Bmp1和Bmp3）磷酸化水平降低,不能形成侵染结构,致病力缺陷。外源添加cAMP不能恢复ΔBcgbl1菌落培养特性和侵染垫形成缺陷。Bcgbl1基因敲除对菌丝胞内cAMP水平无明显影响,酵母双杂交显示Bcgbl1与cAMP信号传导元件没有直接互作,表明Bcgbl1可能不参与cAMP信号通路。MAPK蛋白磷酸化水平检测结果显示,Bcgbl1敲除导致菌丝胞内Bmp1和Bmp3磷酸化水平显著降低。酵母双杂交显示Bcgbl1可以与Bmp3上游MAPKKK BcBck1、BcSte11-BcSte7-Bmp1支架蛋白BcSte50直接互作,BcSte50又可与BcSte11和BcBck1互作。这说明Bcgbl1通过参与MAPK（Bmp1和Bmp3）信号通路,调控灰葡萄孢侵染结构形成和定殖。4.通过转录组测序,构建了Bcgbl1介导的灰葡萄孢侵染发育调控网络。野生型接触疏水表面形成侵染垫阶段显著上调表达基因3001个,显著下调1695个。筛选得到Gβ-like蛋白Bcgbl1调控的侵染垫形成候选基因3668个,其中显著上调2499个,显著下调1169个。GO功能与KEGG pathway富集分析显示上述差异表达基因主要涉及刺激响应、物质合成、物质代谢、能量提供、转运活性,这表明灰葡萄孢在形成侵染垫时需要大量物质与能量,且该过程可能因Bcgbl1敲除受到阻碍。结合灰葡萄孢中已报道的259个基因敲除突变体,筛选到11个在ΔBcgbl1中显著下调表达的致病相关基因,qRT-PCR结果与转录组结果一致,表明转录组数据可靠。5.明确了疏水表面结合蛋白编码基因BcHsbA1,BcHsbA2和BcHsbA3的功能。由于ΔBcgbl1在植物表面的黏附能力下降,我们从转录组数据中筛选到3个受Bcgbl1调控的疏水表面结合蛋白基因（BcHsbA1,BcHsbA2和BcHsbA3）。这3个基因在ΔBcgbl1中的表达量显著低于野生型,且启动子区域均含有Bmp1下游转录因子Ste12结合位点。BcHsbA1,BcHsbA2和BcHsbA3氨基酸序列均含有分泌信号肽和疏水表面结合蛋白A结构域（HsbA）。BcHsbA1,BcHsbA2和BcHsbA3三个基因敲除后对菌丝生长速度、菌核形成、分生孢子产生、菌落形态和侵染垫形成均无明显影响,但ΔBcHsbA1和ΔBcHsbA2致病力显著下降。此外,为了明确Gβ-like蛋白Bcgbl1与Gβ亚基Bcgb1在调控灰葡萄孢生长发育和侵染能力上的差异,我们对Bcgb1进行了敲除。ΔBcgb1生长减慢,气生菌丝发达,不产生分生孢子,不形成菌核,对H2O2敏感性增加,胞内cAMP水平显著升高。ΔBcgb1致病力显著下降,侵染垫形成时间延缓、侵染垫结构小、数量少,穿透延迟。酵母双杂交表明Bcgb1可以直接与BcSte11、BcBck1、BcMkk1及BcSte50互作。ΔBcgb1胞内Bmp1和Bmp3蛋白磷酸化水平显著升高。qRT-PCR结果显示,Bmp1下游转录因子BcSte12靶标基因Bcgas2在ΔBcgb1中表达量显著升高。这表明灰葡萄孢Gβ亚基Bcgb1既参与了cAMP信号传

关键词：灰葡萄孢侵染结构 Gβ-like蛋白 Gβ亚基磷酸化水平 BcSte50 疏水表面结合蛋白

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