检索结果-内蒙古大学图书馆

时珍国医国药 2015年第9期26卷 2096-2098页

作者：朱海燕吴贤波金贤国崔美玉李泰峰王明谊延边中医医院延吉市中医医院吉林延吉133000 成都中医药大学基础医学院四川成都611137

目的观察乌梅对肥大细胞的脱颗粒及相关信号通路蛋白的影响,探讨酸味中药乌梅抑制过敏性疾病炎症作用及机制,为乌梅的临床应用提供依据。方法体外采用胰蛋白酶刺激P815细胞的方法建立肥大细胞脱颗粒模型,观察乌梅对肥大细胞相关细胞因... 详细信息

目的观察乌梅对肥大细胞的脱颗粒及相关信号通路蛋白的影响,探讨酸味中药乌梅抑制过敏性疾病炎症作用及机制,为乌梅的临床应用提供依据。方法体外采用胰蛋白酶刺激P815细胞的方法建立肥大细胞脱颗粒模型,观察乌梅对肥大细胞相关细胞因子组胺、IL-4、IL-13及相关信号通路蛋白Akt、ERK、P38MAPK的影响。结果乌梅在体外可抑制肥大细胞组胺、IL-4的分泌,并抑制相关信号通路蛋白Akt、ERK的表达,与细胞模型组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结论乌梅在过敏反应中具有抑制肥大细胞脱颗粒作用,可能与AKT、ERK信号途径有关。

关键词：乌梅肥大细胞信号传导通路

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运动与骨骼肌mTOR信号传导通路研究现状

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中国运动医学杂志 2006年第5期25卷 620-622页

作者：贺道远曾凡星长江大学体育学院湖北荆州434020 北京体育大学运动人体科学学院

1哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其信号传导通路哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,其活性可被一种链霉菌的衍生物雷帕霉素(rapamycin)阻断。mTOR是一种大分子蛋白质,分子量为289kDa... 详细信息

1哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其信号传导通路哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,其活性可被一种链霉菌的衍生物雷帕霉素(rapamycin)阻断。mTOR是一种大分子蛋白质,分子量为289kDa,由2459个氨基酸分子组成,也被称为FRAP(FK506-binding protein 12 and rapamycin-associated protein),RAgrl(rapamycin and FKPB-12 target-1),RAPT1(rapamycin target-1)或者SEP(sirolimus effector protein)蛋白。[第一段]

关键词：信号传导通路 mTOR rapamycin 雷帕霉素靶蛋白骨骼肌苏氨酸蛋白激酶 protein 运动

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nm23-H1基因转染对人肺癌细胞中Ras-to-MAPK信号传导通路影响的实验研究

nm23-H1基因转染对人肺癌细胞中Ras-to-MAPK信号传导通路影响的实...

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作者：李印四川大学

学位级别：博士

肺癌的侵袭和转移是肺癌恶性标志和特征,也是导致肺癌病人治疗失败和死亡的主要原因。因此,研究和阐明肺癌侵袭转移的分子机制和信号传导通路必将为肺癌靶向性基因治疗提供新的分子靶点和途径。nm23-H1基因已被证明是肿瘤转移抑制基因,... 详细信息

肺癌的侵袭和转移是肺癌恶性标志和特征,也是导致肺癌病人治疗失败和死亡的主要原因。因此,研究和阐明肺癌侵袭转移的分子机制和信号传导通路必将为肺癌靶向性基因治疗提供新的分子靶点和途径。nm23-H1基因已被证明是肿瘤转移抑制基因,它的结构和功能的异常与癌细胞的侵袭和转移能力有密切联系。已有的研究证明nm23-H1基因的低表达和杂合性缺失与肺癌的高转移性和预后不良有密切关系,伴有nm23-H1基因缺失的肺癌常伴有一些肿瘤侵袭转移相关分子的表达异常。据此,周清华推测nm23-H1基因可能为转移相关基因的上游调节基因,它对肿瘤转移潜能的抑制作用可能是通过调控下游基因实现的,通过转染野生型nm23-H。基因有可能逆转肺癌的转移表型。因此,周清华等在国内外首次提出将这种nm23-H1基因参与调控下游基因并共同抑制或/和逆转肺癌转移表型的作用,称为“肺癌转移抑制级联”。丝裂原活化蛋白激酶MAPK（mitogen-activated protein kinase）信号通路是真核细胞介导细胞外信号到细胞内反应的重要信号传导系统,调节着细胞的生长、分化、分裂、死亡以及细胞间功能同步化过程。细胞外信号调节激酶（ERK）通路,即Ras-to-MAPK通路是MAPK系统主要

关键词：人高转移大细胞肺癌细胞株 nm23-H1基因 ERK 信号传导通路侵袭转移

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地龙组分对UUO大鼠BMP--7信号传导通路影响的研究

地龙组分对UUO大鼠BMP--7信号传导通路影响的研究

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作者：郑敏敏黑龙江中医药大学

学位级别：博士

目的:通过实验研究观察地龙组分丝氨酸蛋白水解酶对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠BMP-7信号转导通路的影响，探讨地龙组分丝氨酸蛋白水解酶延缓肾间质纤维化的机制。　　方法:健康雄性wistar大鼠60只，随机分组:假手术组12只，模型组16只，... 详细信息

目的:通过实验研究观察地龙组分丝氨酸蛋白水解酶对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠BMP-7信号转导通路的影响，探讨地龙组分丝氨酸蛋白水解酶延缓肾间质纤维化的机制。　　方法:健康雄性wistar大鼠60只，随机分组:假手术组12只，模型组16只，地龙低剂量组16只，地龙高剂量组16只。采用单侧输尿管结扎法复制肾间质纤维化大鼠模型，地龙低剂量组给予地龙组分丝氨酸蛋白水解酶胶囊0.24g/kg·d灌胃;地龙高剂量组给予地龙组分丝氨酸蛋白水解酶胶囊0.48g/kg·d灌胃;假手术组和模型组给予等量蒸馏水灌胃。分别于术后2周、4周处死各组大鼠6只，处死前一天收集24h尿量检测24h尿蛋白定量，处死当天收集血标本用于血清肌酐、尿素氮的检测。取梗阻侧肾组织标本，HE染色后光镜下观察肾脏病理改变;免疫组织化学方法检测肾组织中BMP-7、Smad6、TGF-β1的表达;Western blot检测肾组织中ALK-2、P-Smad5的蛋白表达。　　结果:从外观上看，与模型组相比，地龙治疗组在对应时间点上梗阻侧肾脏的肿大及积水程度较轻，色泽较红润。在不同的时间点各组大鼠24小时尿蛋白定量无统计学差异(P＞0.05);地龙治疗组大鼠的BUN、Scr水平在第2、4周时均低于模型组(p＜0.05或P＜0.01)，同个时间点，地龙低剂量组大鼠BUN、Scr水平低于地龙高剂量组。HE染色结果显示:随着梗阻时间的延长，模型组及地龙治疗组肾组织开始出现肾间质纤维化，在对应的时间点，地龙治疗组较模型组肾纤维化程度轻。免疫组化结果显示:随着梗阻时间的延长，模型组及地龙治疗组BMP-7、Smad6的表达逐渐减少，TGF-β1的表达逐渐增多;在对应的时间点，地龙治疗组与模型组大鼠相比，BMP-7、Smad6蛋白表达显著增多（p＜0.05或p＜0.01）;地龙高、低剂量组与模型组大鼠相比，TGF-β1的表达显著下降(p＜0.05或p＜0.01)。Western blot检测结果显示:随着梗阻时间的延长，模型组及地龙治疗组ALK-2、P-Smad5的表达逐渐减少，地龙治疗组ALK-2、P-Smad5的表达明显高于对应时间点模型组(P＜0.05)，但地龙低剂量组优于高剂量组。　　结论:1、地龙组分能够改善UUO大鼠的肾功，降低血肌酐、尿素氮水平。2、地龙组分能够改善UUO大鼠的肾脏病理。3、地龙组分能够上调UUO大鼠肾组织BMP-7、Smad6表达，下调UUO大鼠肾组织TGF-β1的表达。4、地龙组分能够上调UUO大鼠肾组织ALK-2、P-Smad5蛋白水平。5、地龙组分可能通过激活BMP-7信号传导，恢复BMP-7的生物活性，从而抑制肾纤维化的发展。

关键词：地龙 UUO 大鼠信号传导通路

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JNK信号传导通路在As<,2>O<,3>和H<,2>O<,2>诱导NB4细胞凋亡中的作用

JNK信号传导通路在As<,2>O<,3>和H<,2>O<,2>诱导NB4细胞凋亡中的...

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作者：张莹哈尔滨医科大学

学位级别：博士

目的:探讨c-jun N端激酶(c-jun N-terminal kinase,JNK)信号传导通路在三氧化二砷和过氧化氢抑制急性早幼粒白血病细胞(NB4)细胞生长并诱导凋亡中的作用.方法:通过<'3>H-胸腺嘧啶掺入实验观察三氧化二砷和过氧化... 详细信息

目的:探讨c-jun N端激酶(c-jun N-terminal kinase,JNK)信号传导通路在三氧化二砷和过氧化氢抑制急性早幼粒白血病细胞(NB4)细胞生长并诱导凋亡中的作用.方法:通过<'3>H-胸腺嘧啶掺入实验观察三氧化二砷和过氧化氢对NB4细胞增殖的抑制作用.运用DNA梯形电泳观察三氧化二砷和过氧化氢对NB4细胞的促凋亡作用.用Western blot明确三氧化二砷和过氧化氢对NB4细胞的JNK信号传导通路的影响及JNK信号级联反应.结果:三氧化二砷和过氧化氢均可抑制NB4细胞的增殖,均可诱导NB4细胞JNK磷酸化,c-jun磷酸化,细胞色素c的释放,caspase的激活.JNK抑制剂可以抑制三氧化二砷和过氧化氢诱导的JNK、c-jun、caspase的激活及细胞色素c的释放.Caspase抑制剂可以抑制三氧化二砷和过氧化氢引起的caspase活化,但不能阻断其激活JNK、c-jun及细胞色素c释放的作用结论:三氧化二砷和过氧化氢促NB4细胞凋亡作用是通过激活JNK信号传导通路实现的.此通路从激活JNK开始,继之激活c-jun,细胞色素c释放,caspase活化,最终导致细胞凋亡.

关键词： c-jun N端激酶信号传导通路三氧化二砷过氧化氢白血病

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角膜创伤愈合中TGF、CTGF的表达及MAPK、Smad信号传导通路的实验研究

角膜创伤愈合中TGF、CTGF的表达及MAPK、Smad信号传导通路的实验...

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作者：杨咏梅山东大学

学位级别：博士

目的观察角膜创伤愈合过程中,角膜上皮愈合情况及角膜纤维细胞活化增生情况;结缔组织生长因子（Connective Tissue Growth Factor,CTGF）及转化生长因子-β1（Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1）、Ⅰ型胶原和纤维粘连蛋白（Fibr... 详细信息

目的观察角膜创伤愈合过程中,角膜上皮愈合情况及角膜纤维细胞活化增生情况;结缔组织生长因子（Connective Tissue Growth Factor,CTGF）及转化生长因子-β1（Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1）、Ⅰ型胶原和纤维粘连蛋白（Fibronectin,FN）的表达,TGF、CTGF对角膜创伤愈合的作用,并对二者之间的相互作用及与此有关的Smad信号传导通路做初步的研究。方法随即选择Albino纯种白兔35只,空白对照组:2兔4眼。单纯角膜创伤组:又分术后2小时、6小时、1天、3天、7天、14天、21天组,每组随即4眼。TGF抗体组:颞侧球结膜下注射15.5μgTGF抗体（经预实验选择得到的浓度）又分为3天、7天、14天、21天组,每组随即4眼。Smad4抗体组:颞侧球结膜下注射20μgSmad4抗体;又分为3天、7天、14天、21天组,每组随即4眼。实验眼首先施一直径3毫米,包含0.05mm实质层的板层角膜切除术,TGF抗体组及Smad4抗体组术眼球结膜下注射TGF-β1抗体或smad4抗体。用免疫组化及mRNA原位杂交方法分别检测CTGF、TGF-β1、FN蛋白术后2小时、6小时、1天、3天、7天、14天、21天的表达及Ⅰ型胶原、CTGFmRNA在术后6h、3天、7天、21天的表达;角膜上皮愈合情况及角膜纤维细胞活化增生情况。免疫组化所检蛋白、mRNA原位杂交所检mRNA表达强度用组织学评分∑pi表示,其中p代表阳性细胞数所占计数细胞百分比,I代表细胞染色强度。P和I均划分为0、1、2、3分。∑pi为阳性细胞数量和着色强度两项得分相加所得结果。每个角膜选3个切片进行免疫组化或原位杂交染色,每张切片随机选取3个视野（×400）,共9个视野,分析结果进行

关键词：结缔组织生长因子转化生长因子角膜创伤愈合表达信号传导通路

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胃癌中ER-α36与EGFR信号传导通路的研究

胃癌中ER-α36与EGFR信号传导通路的研究

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作者：周红艳华中科技大学

学位级别：博士

胃癌是世界上第四常见的恶性肿瘤，死亡率居恶性肿瘤的第二位。治疗以手术切除为主，效果不佳，5年生存率为26％。流行病学的调查显示，雌激素（estrogen）和胃癌发生有关。胃癌发病存在男女性别差异，男性约为女性的2～3倍，女性绝经... 详细信息

胃癌是世界上第四常见的恶性肿瘤，死亡率居恶性肿瘤的第二位。治疗以手术切除为主，效果不佳，5年生存率为26％。流行病学的调查显示，雌激素（estrogen）和胃癌发生有关。胃癌发病存在男女性别差异，男性约为女性的2～3倍，女性绝经期后与男性的这种差异消失。雌激素在胃癌发生发展中如何发挥作用目前还不清楚。　　雌激素通过与雌激素受体（estrogen receptor，ER）结合发挥多种生理和病理效应。雌激素受体有四个亚型：ER-α66、ER-α46、ER-α36和ER-β。ER-α36是近年来新发现的一个雌激素受体，是ER-α66（即经典的ER-α）的剪切变异体。与全长的ER-α66比较，ER-α36缺少AF-1和AF-2两个转录激活区，但是保留了DNA结合区和部分二聚体化及雌激素结合区，并且在羧基末端有一个特异的由27个氨基酸组成的结构。目前的研究发现，ER-α36主要位于细胞膜和细胞浆，通过调节MAPK/ERK、PI3K/Akt等信号通路发挥雌激素的非基因组效应，在多种肿瘤的发生发展中发挥重要作用。在ER阴性（即ER-α66阴性）的乳腺癌中的进一步研究表明，ER-α36与EGFR相互作用，激活MAPK/ERK、PI3K/Akt信号通路，促进乳腺癌细胞生长。　　表皮生长因子受体（epithelial growth factorreceptor，EGFR）属于受体酪氨酸激酶家族成员之一。活化的EGFR可以激活MAPK/ERK、PI3K/Akt等信号通路，将细胞外的有丝分裂信号传导到细胞内，从而调节细胞的生长、增殖、分化、粘附以及迁移等活动。EGFR在包括胃癌在内的多种肿瘤细胞中过表达。　　以前的研究发现，胃癌低表达 ER-α66（2～28％）和ER-β，由此认为胃癌是非雌激素依赖的肿瘤。本课题组在前期的研究中已经发现，在胃癌细胞株BGC823、SGC7901、AGS、MKN45中均可检测出ER-α36mRNA和ER-α66mRNA，且ER-α36表达量高于ER-α66。ER-α36 mRNA在癌组织中的表达量要高于癌旁组织和正常组织，ER-α66 mRNA的表达量则呈现相反的趋势。这提示ER-α36在胃癌细胞中发挥的作用可能大于ER-α66。　　但是，ER-α36在胃癌中所发挥的作用机制并不清楚。在胃癌细胞中，ER-α36是否和乳腺癌中一样，与EGFR存在相互作用从而激活相关信号通路？为解决这个问题，本研究设计三个实验。　　第一部分：胃癌组织中ER-α36蛋白的表达与临床病理特征关系的研究。搜集存档的人体胃癌组织标本蜡块，构建组织芯片，运用免疫组织化学染色方法检测ER-α36蛋白的表达，评价其临床病理意义。　　第二部分：胃癌组织中ER-α36、EGFR、P-ERK蛋白的表达及其相互关系的研究。利用新鲜冰冻的人体胃癌组织，用Western blot方法检测ER-α36、EGFR、P-ERK蛋白的表达及其相互关系。从组织水平研究胃癌中ER-α36是否和EGFR-ERK信号转导通路有关。　　第三部分：胃癌细胞中ER-α36与EGFR信号传导通路关系的研究。构建胃癌细胞SGC7901稳定高表达ER-α36（SGC7901-High36）和低表达ER-α36的重组细胞株（SGC7901-Low36）。用EGF作用于正常、高表达ER-α36、低表达ER-α36的胃癌细胞SGC7901，Western blot方法检测三种细胞中P-ERK蛋白的表达。从细胞水平研究胃癌中ER-α36是否和EGFR-ERK信号转导通路有关。　　第一部分胃癌组织中ER-α36蛋白的表达与临床病理特征关系的研究　　目的：检测胃癌组织中ER-α36蛋白的表达情况及其与各项临床病理特征关系。方法：应用组织芯片技术制作67例胃癌组织芯片，4μm连续切片2张分别进行HE染色和免疫组织化学染色。观察组织芯片可供分析病例中ER-α36蛋白的表达情况，并分析其与各项临床病理特征的关系。结果：制作的67例胃癌组织芯片经免疫组织化学染色后可分析病例为53例，可分析率79.1％。胃癌组织中存在ER-α36蛋白的表达，主要定位于细胞膜和细胞浆。有33例胃癌组织表达ER-α36蛋白，阳性表达率62.3％。ER-α36蛋白在肠型胃癌的表达比弥漫/混合型胃癌高，与性别、年龄、肿块大小、浸润深度、淋巴结转移等病理学指标无关。结论：胃癌组织中存在ER-α36蛋白的表达，阳性表达率62.3％（33/53）。肠型胃癌中ER-α36蛋白表达更高。　　第二部分胃癌组织中ER-α36、EGFR、P-ERK蛋白表达相互关系的研究　　目的：研究胃癌组织中ER-α36与EGFR、P-ERK蛋白表达相关性。方法：用Western blot方法检测24例新鲜冰冻的人体胃癌组织中ER-α36、EGFR和P-ERK蛋白

关键词：胃癌雌激素受体-α36 表皮生长因子受体信号传导通路

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PI3K/AKT信号传导通路在血管瘤发生发展中的作用及靶向该通路治疗血管瘤的实验研究

PI3K/AKT信号传导通路在血管瘤发生发展中的作用及靶向该通路治疗...

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作者：郑宁宁中国医科大学(辽宁)

学位级别：博士

目的 　　血管瘤是一种常见的血管内皮肿瘤，在我国的发病率约为0.3％～1%，具有一系列广泛的临床表现。从良性的婴幼儿血管瘤，恶性度低的血管内皮瘤，到多发于成人的恶性血管肉瘤。血管瘤及相关的血管畸形可见于... 详细信息

目的 　　血管瘤是一种常见的血管内皮肿瘤，在我国的发病率约为0.3％～1%，具有一系列广泛的临床表现。从良性的婴幼儿血管瘤，恶性度低的血管内皮瘤，到多发于成人的恶性血管肉瘤。血管瘤及相关的血管畸形可见于多种先天性遗传性疾病，通常伴有多种组织器官发育缺陷。到目前为止，血管瘤形成的分子及细胞学机制仍然不清。与正常血管内皮细胞相比，血管瘤内皮细胞增殖、侵袭能力增强。血管内皮细胞过度增殖，病理性血管生成是血管瘤形成的主要生物学行为。PI3 K/Akt信号转导通路在广泛的人类肿瘤谱中失调，该通路某些成分的突变所导致的功能获得或功能缺失能够引起细胞转化，该通路是调节内皮细胞生存、血管生成的主要信号调节途径，在血管瘤中表现出异常激活。VEGF是该信号通路主要的信号刺激因子。AKT是该信号通路的中心调控点，其完全磷酸化由Thr308和Ser473磷酸化组成。AKT Thr308磷酸化由上游激酶PDK1激活，而Ser473则由mTORC2磷酸化激活。AKT完全磷酸化是其发挥生物学功能所必需的。哺乳动物AKT有三种亚型：Akt1，Akt2 and Akt3。这三种亚型由严格区分却又高度同源的基因编码。特异性AKT亚型基因敲除鼠研究表明，不同AKT亚型表现出不同的功能。目前，AKT亚型特异性功能研究成为肿瘤研究中的热点。雷帕霉素是mTOR抑制剂，根据不同细胞类型发挥不同程度的mTORC1和mTORC2抑制作用，动物研究表明，雷帕霉素可以显著抑制实体瘤中AKT的活性及病理性血管生成。本研究探讨血管瘤中AKT信号传导通路的调节作用；通过慢病毒介导的shRNA靶向沉默AKT磷酸化的上游激酶PDK1、mTORC2-RICTOR，探讨这两种AKT上游激酶对AKT活性及血管瘤的生长、增殖及侵袭的影响及其作用机制；探讨低剂量雷帕霉素对血管瘤的治疗作用；探讨AKT三种亚型对良、恶性血管瘤生长、增殖、侵袭的影响及其作用机制。 　　实验材料： 　　实验用EOMA细胞，293T细胞由哈佛医学院，Laura Benjamin实验室提供，婴儿血管瘤组织、原代婴儿血管瘤内皮细胞、人皮肤微血管内皮细胞、ASM.5细胞及正常人皮肤组织、小鼠血管内皮细胞由哈佛医学院Carole Perruzzi友情赠送及技术支持。实验动物为裸鼠，4-6周，雌性(Charles River，MA)。实验所用AKT信号通路相关抗体、VEGF/VEGF受体等抗体均购于Cell SignalingTechnology。LY-294002(L9908)购于Sigma。 　　实验方法： 　　 1、慢病毒介导的shRNA靶向基因沉默靶向PDK1、RICTOR、AKT1、AKT2、AKT3的小鼠shRNA序列克隆到pLKO慢病毒表达载体中。该质粒由哈佛大学LeslieWardwell，RNAi Facility，Dana-Farber Cancer Institute构建。在293T细胞内包装成慢病毒颗粒，转染靶细胞。 　　 2、Western Blot方法检测各种蛋白激酶激活及表达情况。 　　细胞经含有蛋白酶及磷酸酶抑制剂的细胞裂解液作用后，提取细胞总蛋白，调节蛋白浓度均等，在4%-20%的Tris-Glycine胶上上样，每孔蛋白量为20ug。电泳后转移至硝酸纤维素膜，加入适当比例稀释的一抗孵育过夜，第二天加入HRP标记的二抗作用后，进行膜孵育及曝光检查蛋白表达情况。 　　 3、利用WST-1细胞增殖检测法检测血管瘤细胞增殖能力。 　　 4、Transwell Matrigel方法检测血管瘤细胞侵袭转移能力。 　　 5、体外出芽实验检测血管瘤细胞新生血管形成能力。 　　 6、免疫组织化学方法检测几种人类良、恶性血管瘤中AKTSer473位点磷酸化表达情况。 　　结果： 　　 1、人血管瘤中AKT磷酸化活性异常增高福尔马林固定，石蜡包埋的人良、恶性血管瘤组织经AKT磷酸化Ser473位点的抗体染色，结果表明，与邻近的正常血管组织比较，在所选血管瘤组织中，都表现出AKT Ser473磷酸化表达增强。 　　 2、慢病毒介导的shRNA靶向沉默PDK1、RICTOR及AKT三种亚型的表达Western Blot结果表明，shRNA成功抑制了各个靶蛋白的表达，获得了稳定沉默靶蛋白的血管瘤细胞。 　　 3、PDK1、RICTOR基因表达沉默下调AKT磷酸化水平，从而抑制血管瘤生长、增殖及侵袭Western Blot

关键词：血管瘤 AKT活性信号传导通路血管内皮生长因子慢病毒介导发病机制

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环磷酸腺苷/蛋白激酶A（cAMP/PKA）信号传导通路对精子运动功能调节机制的研究

环磷酸腺苷/蛋白激酶A（cAMP/PKA）信号传导通路对精子运动功能调...

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作者：李杨华中科技大学

学位级别：博士

精子活力低下是男性不育症的常见病因之一，精子跨膜细胞信号传导与精子的活力密切相关，不同的细胞信号通过细胞信号传导通路引起精子鞭毛蛋白的磷酸化或去磷酸化来调节精子的活力。可能调节精子运动的细胞信号传导通路有多种，如二酰... 详细信息

精子活力低下是男性不育症的常见病因之一，精子跨膜细胞信号传导与精子的活力密切相关，不同的细胞信号通过细胞信号传导通路引起精子鞭毛蛋白的磷酸化或去磷酸化来调节精子的活力。可能调节精子运动的细胞信号传导通路有多种，如二酰甘油/蛋白激酶C(DG/PKC)通路以及钙通道等。部分研究表明蛋白激酶A(proteinkinaseA，PKA)介导的cAMP/PKA信号传导通路对精子活力有重要影响，目前对cAMP/PKA信号传导通路研究的较为深入。PKA是cAMP/PKA通路中的关键分子，是细胞信号传递系统中的重要一环。在多种哺乳动物精子实验中，腺苷酸环化酶(adenylatecyclase，AC)激活剂及PKA激活剂都能提高精子的活力。虽然有许多实验证据提示cAMP/PKA通路参与调节精子的活力，但也有一些实验结果不支持这一点，目前仍存在着争议。双丁酰环磷酸腺苷(dibutyrylcyclicadenosinemonophosphate，dbcAMP)是一种经典的cAMP类似物，同cAMP一样能激活PKA，产生与cAMP类似的生物学效应。弗司扣林(forskolin)来自毛喉鞘蕊花中提取的一种毛喉素，是磷酸二酯酶PDE的抑制剂。Forskolin能抑制cAMP的分解，提高细胞内cAMP的浓度，增强cAMP所产生的生物学效应。目前在forskolin增强精子的授精能力及项体反应方面研究的较多，而在对精子活力的影响方面尚缺乏深入的研究报道。为了进一步证实cAMP/PKA信号传导通路对人精子运动功能的影响，我们选择不同浓度的dbcAMP和Forskolin体外分别与经上游优化处理的生育男性的精子一起孵育不同时间，应用计算机辅助的精子分析(Computeraidedspermanalysis，CASA)分析其对精子不同运动参数的影响，结果显示：0.1、0.5和1.0mmol/L的dbcAMP以及0.01、0.1和1.0mmol/L的forskolin与对照组相比都能明显提高精子的活率及前向性运动百分率(P＜0.001)，而对直线速度VSL和曲线速度VCL无明显影响(p＞0.05)。相关性分析表明在实验浓度范围内，精子的活率及前向性运动百分率与dbcAMP和forskolin的浓度都呈正相关。而在1h内，精子运动各参数无明显变化。结果说明在一定浓度范围内dbcAMP和forskolin在体外能提高人精子的运动功能，此结果为证实cAMP/PKA信号传导通路参与调节人精子运动功能提供了一定的实验依据。 A激酶锚定蛋白(A-kinaseanchorproteins，AKAPs)是cAMP介导的细胞信号传递系统中一类十分重要的蛋白质分子。AKAPs主要通过特异性结合PKA，使PKA锚定于作用底物附近，催化靶蛋白磷酸化从而传递细胞信号，调节细胞反应。众多试验研究表明AKAP82是将PKA锚定于精子鞭毛通过催化鞭毛蛋白磷酸化来调节精子的运动的关键蛋白，那么精子活力低下是否由于AKAP82的表达异常所引起?为了证实上述假说，我们选用AKAP82的前体pro-AKAP82第131～145氨基酸形成的多肽作为抗原决定簇制作抗血清，利用Western印迹和免疫荧光检测分析活力低下精子的AKAP82是否异常，并与正常精子作对照。结果表明对照组在免疫荧光中出现精子鞭毛荧光染色，并且绝大部分在WesternBlot中检测到相对分子质量(Mr)为97000和18000的两条蛋白条带，而试验组有2例样本既没有在WesternBlot中检测出任何蛋白条带显色，也没有在免疫荧光中出现精子鞭毛荧光染色，9例样本在免疫荧光中出现精子鞭毛正常荧光染色，但在WesternBlot检测中出现异常，其中1例仅出现Mr97000的条带，其余8例除了出现Mr97000的条带外，还出现了其它的蛋白条带，其中4例出现Mr33000的条带，3例出现Mr26000的条带，1例出现Mr22000的条带，试验组与对照组之间差异有显著性。AKAP82的表达异常可能是精子活力低下的原因之一。

关键词：男性不育症精子活力环磷酸腺苷蛋白激酶A 细胞信号信号传导通路精子运动

来源：评论

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CXCL12/CXCR4信号传导通路在溃疡性结肠炎中的表达及临床意义

CXCL12/CXCR4信号传导通路在溃疡性结肠炎中的表达及临床意义

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作者：曹婷婷哈尔滨医科大学

学位级别：硕士

目的：通过检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在溃疡性结肠炎(UC)组、对照组肠道黏膜组织中及血清中的表达水平情况，探讨CXCL12/CXCR4信号传导通路在UC发病过程中的作用及临床意义。为IBD的免疫治疗提供理论依据，同时为新的靶向治疗寻... 详细信息

目的：通过检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在溃疡性结肠炎(UC)组、对照组肠道黏膜组织中及血清中的表达水平情况，探讨CXCL12/CXCR4信号传导通路在UC发病过程中的作用及临床意义。为IBD的免疫治疗提供理论依据，同时为新的靶向治疗寻找可能的治疗靶点。 　　方法：收集经临床明确诊断的活动期UC患者肠黏膜组织和血清标本各30例，并选择同期健康者肠黏膜组织和血清标本各30例作为对照组；应用HE染色观察UC组及对照组肠道黏膜组织的组织学变化，应用免疫组织化学方法分别检测CXCL12、CXCR4在UC组及对照组肠道黏膜组织中的表达水平；应用ELISA法分别检测CXCL12、CXCR4在UC组及对照组血清中的表达水平。所有数据采用SPSS18.0统计软件处理，P<0.05为差异有统计学意义。 　　结果：***12及CXCR4在UC组及对照组肠道黏膜组织中的阳性表达差别有统计学意义(P均<0.05)，且UC组CXCL12、CXCR4的阳性表达显著高于对照组(P均<0.05)，但UC组肠道黏膜组织中CXCL12及CXCR4阳性表达的水平与UC的轻重程度无关。***12及CXCR4在溃疡性结肠炎患者及对照组血清中的阳性表达差别有统计学意义(P均<0.05)，且UC组CXCL12、CXCR4的阳性表达明显高于对照组(P均<0.05)，但UC组血清中CXCL12及CXCR4阳性表达的水平与UC的轻重程度无关。***12及CXCR4在UC组肠道黏膜组织中的表达水平与其在UC组血清中的表达水平正相关。 　　结论：趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在UC的肠黏膜组织及血清中的高表达，但与UC的轻重程度无关。CXCL12/CXCR4信号传导通路可能参与了UC肠黏膜的慢性炎症过程。趋化因子CXCL12及其受体CXCR4可能会成为IBD的一个新的免疫治疗靶点。

关键词：溃疡性结肠炎发病机制趋化因子信号传导通路阳性表达

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