检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：董强崔梅国敏陈兴栋赵鸿琛丁梦媛 200040 上海市静安区乌鲁木齐中路12号

本发明涉及一种高灵敏的磁珠分选联合胶体金标记的外泌体免疫电镜方法，具体包括以下步骤：(1)制备生物素化的抗体；(2)纯化目标亚型外泌体；(3)免疫标记。与现有技术相比，本发明克服了目前免疫电镜技术检测外泌体时纯度低、效率低的... 详细信息

标准号: CN109738630B

本发明涉及一种高灵敏的磁珠分选联合胶体金标记的外泌体免疫电镜方法，具体包括以下步骤：(1)制备生物素化的抗体；(2)纯化目标亚型外泌体；(3)免疫标记。与现有技术相比，本发明克服了目前免疫电镜技术检测外泌体时纯度低、效率低的弊端，保留了其分辨率高的优势，适合检测位于生物医学标本来源外泌体的微量抗原的检测，阳性信号得率高，便于判断。

关键词：检测免疫电镜技术胶体金标记纯化目标磁珠分选免疫标记免疫电镜生物医学微量抗原阳性信号制备生物分辨率得率抗体亚型灵敏标本保留联合

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动物诺如病毒的研究进展

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中国兽医杂志 2019年第12期55卷 72-75页

作者：师志海孟红丽王亚州张彬徐照学兰亚莉河南省农业科学院畜牧兽医研究所河南郑州450002

诺如病毒(Norovirus,NoV),为诺瓦克样病毒属,与札幌病毒属、兔病毒属、水疱疹病毒属和纽布病毒属同属杯状病毒科,是引起人及牛、猪、犬、猫、鼠、猴子等多种易感动物罹患急性胃肠炎的重要非细菌性病原之一。该病毒原型株于1972年由美国... 详细信息

诺如病毒(Norovirus,NoV),为诺瓦克样病毒属,与札幌病毒属、兔病毒属、水疱疹病毒属和纽布病毒属同属杯状病毒科,是引起人及牛、猪、犬、猫、鼠、猴子等多种易感动物罹患急性胃肠炎的重要非细菌性病原之一。该病毒原型株于1972年由美国学者Kapikian用免疫电镜技术从1968年暴发的胃肠炎患者样本中被发现,主要经粪—口途径传播,对人类和动物健康构成一定的威胁。

关键词：诺如病毒免疫电镜技术病毒属易感动物急性胃肠炎动物健康

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胶体金技术在免疫学检测中的应用

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山东畜牧兽医 2019年第3期40卷 63-66页

作者：曹雷王增国崔晓辰胡士林山东畜牧兽医职业学院山东潍坊261061 潍坊科瑞斯生物科技有限公司

胶体金技术是80年代首先于免疫学领域发展起来的一门新技术。最初该方法仅用于免疫电镜技术,现在已经发展到被动凝集试验、光镜染色、免疫印迹、免疫斑点渗滤法、免疫层析技术、生物传感器、PCR技术及染色体的基因定位的检测等生物学各... 详细信息

胶体金技术是80年代首先于免疫学领域发展起来的一门新技术。最初该方法仅用于免疫电镜技术,现在已经发展到被动凝集试验、光镜染色、免疫印迹、免疫斑点渗滤法、免疫层析技术、生物传感器、PCR技术及染色体的基因定位的检测等生物学各个领域。目前已广泛应用于临床诊断,对医学临床检验、食品加工等产生了巨大影响。该方法最大特点是简单快速、准确直观,特别适合于广大基层单位、医院、野外作业人员以及大批量时间紧的检测和大面积普查等,因此该技术具有巨大的发展潜力和应用前景。现将胶体金技术在某些领域的主要应用做一综述,希望能够给从事相关研究的工作者提供一些帮助。

关键词：免疫电镜技术免疫学检测胶体金应用生物传感器 PCR技术凝集试验免疫印迹

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免疫电镜技术在植物病毒研究中的应用

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南方农业 2011年第3期5卷 84-86页

作者：李文财周常勇西南大学植物保护学院重庆400716 中国农业科学院柑橘研究所重庆400716

免疫电镜技术通过将免疫学与超微结构形态学相结合,利用抗原—抗体的专化性反应对抗原或抗体进行精确定位。介绍免疫电镜技术的原理、发展阶段及其在植物病毒研究中的应用。

关键词：免疫电镜技术病原检测病毒定位

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一种高灵敏的磁珠分选联合胶体金标记的外泌体免疫电镜方法

一种高灵敏的磁珠分选联合胶体金标记的外泌体免疫电镜方法

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作者：董强崔梅国敏陈兴栋赵鸿琛丁梦媛 200040 上海市静安区乌鲁木齐中路12号

标准号: CN109738630A

关键词：检测免疫电镜技术胶体金标记纯化目标磁珠分选免疫标记免疫电镜生物医学微量抗原阳性信号制备生物分辨率得率抗体亚型灵敏标本保留联合

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眼睑松弛症泪腺组织病理学研究

眼睑松弛症泪腺组织病理学研究

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中华医学会第二十二次全国眼科学术会议

作者：辛月顼晓琳李冬梅首都医科大学附属北京同仁医院

目的对眼睑松弛症并发泪腺脱垂患者泪腺组织进行组织病理学检查，观察其临床病理学的特征表现，从而探讨眼睑松弛症发病机制。方法前瞻性连续性病例研究，收集2009年1月至2016年12月就诊于北京同仁医院眼整形科门诊眼睑松弛症并发泪... 详细信息

目的对眼睑松弛症并发泪腺脱垂患者泪腺组织进行组织病理学检查，观察其临床病理学的特征表现，从而探讨眼睑松弛症发病机制。方法前瞻性连续性病例研究，收集2009年1月至2016年12月就诊于北京同仁医院眼整形科门诊眼睑松弛症并发泪腺脱垂患者24例(30只眼)，泪腺标本共30例。

关键词：眼睑松弛症泪腺组织病理免疫电镜技术

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家蚕微孢子虫水通道蛋白NbAQP基因克隆、定位及功能研究

家蚕微孢子虫水通道蛋白NbAQP基因克隆、定位及功能研究

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作者：王玮江苏科技大学

学位级别：硕士

微孢子虫(Microsporidia)是一类寄主域广泛的真核生物,从脊椎动物到无脊椎动物都会被微孢子虫感染。微孢子虫作为鱼类、甲壳类和许多经济类昆虫的病原体,常给农业生产带来巨大损失。由家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)引起的家蚕微粒子病... 详细信息

微孢子虫(Microsporidia)是一类寄主域广泛的真核生物,从脊椎动物到无脊椎动物都会被微孢子虫感染。微孢子虫作为鱼类、甲壳类和许多经济类昆虫的病原体,常给农业生产带来巨大损失。由家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)引起的家蚕微粒子病是蚕业生产中一种重要的蚕病,不仅能够水平传播,还能经由卵垂直传播给后代,有时会给蚕业生产造成严重影响。迄今为止,虽然在家蚕微孢子虫的传染规律和防治技术方面取得了不少研究进展,但在其侵染机制方面还没有完全弄清楚。微孢子虫对宿主细胞的侵染,往往是通过孢子萌发将孢子内的孢原质注射到宿主细胞中来实现的。目前普遍认为的微孢子虫萌发感染宿主经历了以下几个事件:(1)孢子与宿主细胞的粘附;(2)孢子被激活;(3)孢子内的渗透压升高;(4)极丝外翻弹出;(5)孢原质通过弹出的极丝进入宿主细胞。孢子的发芽是微孢子虫感染宿主体的首要前提,研究其发芽机制对防治微孢子虫病有着重要的作用。有观点认为微孢子虫中可能有水通道蛋白的存在,将孢外的水分运输到孢子内部,造成孢子内部渗透压的升高,这种升高的内压便成为孢子发芽的动力。因此,本文希望通过研究,探索家蚕微孢子虫中是否存在水通道蛋白以及该蛋白参与孢子发芽的机制。本研究根据微孢子虫数据库和MIP数据库交叉比较分析筛选出可能的家蚕微孢子虫水通道蛋白基因,成功克隆出家蚕微孢子虫NbAQP序列,该序列具有完整的开放阅读框ORF,长750bp,共编码249个氨基酸,蛋白质分子质量约为26.66kD,等电点为5.12,无信号肽。NbAQP氨基酸序列与其他5种微孢子虫的水通道蛋白序列同源性为50%以上,含有6个跨膜结构域,三级结构预测分析显示有6个长螺旋和2个短螺旋,分别以两个螺旋为起点,各自延伸出一条氨基酸链,氨基酸链在外部环绕后返回起点处。用半定量PCR的方法检测家蚕微孢子虫感染家蚕后NbAQP的转录情况。利用酿酒酵母真核表达系统对家蚕微孢子虫NbAQP蛋白的体外表达进行了研究。首先设计带有酶切位点的引物,将NbAQP基因克隆到真核表达载体pYES2-NTC中,构建重组表达质粒并转化酵母感受态细胞。随后在INVSc1菌株中使用β-半乳糖诱导带His标签的融合蛋白的表达以及通过Western blot免疫印迹鉴定,免疫印迹检测到大小为31kD的His-NbAQP融合蛋白条带,说明家蚕微孢子虫NbAQP蛋白可在真核表达系统中表达。预测蛋白抗原表位并合成多肽,以该条多肽作为抗原免疫新西兰兔制备多克隆抗体,利用免疫胶体金电镜技术对NbAQP蛋白在家蚕微孢子虫中进行定位分析。免疫电镜结果显示,在家蚕微孢子虫的孢子壁上能够看到胶体金颗粒分布,而对照组中相应位置则没有胶体金的分布,说明家蚕微孢子虫NbAQP蛋白主要定位于家蚕微孢子虫的孢子壁上,对其功能的行使有着重要意义。为了研究家蚕微孢子虫NbAQP蛋白是否能够参与孢子发芽的过程,进而在微孢子虫感染家蚕的事件中发挥作用,对NbAQP蛋白做初步功能研究。通过抗体封闭实验检测抗体封闭处理后孢子发芽率的变化。结果显示,使用多克隆抗体孵育封闭1h的处理组的发芽率为16.58%,与空白对照组的发芽率(23.05%)相比,差异性显著(P<0.05)。抗体封闭对孢子发芽的抑制率约为28%。说明封闭NbAQP蛋白后能够降低孢子的发芽率,NbAQP蛋白可能参与了家蚕微孢子虫发芽的过程。本研究结果表明,家蚕微孢子虫中存在水通道蛋白,该蛋白主要存在于孢子壁和原生质膜,在微孢子虫感染家蚕、增殖以及孢子形成的整个生活史均有转录表达,且在孢子的发芽过程中起到重要作用。

关键词：家蚕微孢子虫水通道蛋白免疫电镜技术孢子发芽

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我国甲型肝炎疫苗免疫的影响与思考

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国际流行病学传染病学杂志 2016年第3期43卷 145-149页

作者：莫兆军汪萱怡广西壮族自治区疾病预防控制中心疫苗临床研究所南宁530028 复旦大学生物医学研究院上海200032

甲型肝炎是由HAV 感染引起的急性传染病。甲型肝炎是一种古老的疾病，曾被认为由飞沫传播。1923年Blumer总结分析了美国1812—1922年间的63次暴发报告，开始确认了人与人之间的密切接触是该病的主要传播方式。20世纪50年代至70年代初，H... 详细信息

甲型肝炎是由HAV 感染引起的急性传染病。甲型肝炎是一种古老的疾病，曾被认为由飞沫传播。1923年Blumer总结分析了美国1812—1922年间的63次暴发报告，开始确认了人与人之间的密切接触是该病的主要传播方式。20世纪50年代至70年代初，Hollinger等[1-2]详细研究了MS-1肝炎病原体在成人志愿者中的表现，证明了甲型肝炎的粪-口传播途径。1973年，Feinstone与Kapikian运用免疫电镜技术在甲型肝炎暴发患者的粪便中首次发现了HAV颗粒[3-4]。1979年，Provost与Hilleman在体外细胞培养HAV成功，对HAV的研究与疫苗的研制具有决定性意义[1-2]。

关键词：甲型肝炎暴发疫苗免疫免疫电镜技术体外细胞培养急性传染病 HAV 飞沫传播传播方式

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大鼠延髓腹外侧A1/C1区儿茶酚胺能神经元的电镜观察——包埋前液氮冻融和Triton X-100组织处理方法的比较

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神经解剖学杂志 2015年第6期31卷 799-803页

作者：梁卫华亢君君黄晓峰刘莹莹第四军医大学病理学与病理生理学教研室 68057部队第四军医大学神经生物学教研室

目的:比较液氮冻融和Triton X-100不同方法对大鼠延髓腹外侧A1/C1区儿茶酚胺能神经元多巴胺β羟化酶(dopamine-β-hydroxylase,DβH)免疫反应(immunoreaetive,ir)标记的影响。方法:实验分组包括:液氮冻融1次组、液氮冻融2次组、0.03%Tri... 详细信息

目的:比较液氮冻融和Triton X-100不同方法对大鼠延髓腹外侧A1/C1区儿茶酚胺能神经元多巴胺β羟化酶(dopamine-β-hydroxylase,DβH)免疫反应(immunoreaetive,ir)标记的影响。方法:实验分组包括:液氮冻融1次组、液氮冻融2次组、0.03%Triton X-100组、0.05%Triton X-100组。应用包埋前纳米金-银加强免疫电镜技术,标记延髓腹外侧A1/C1区DβH-ir神经元。结果:光镜下可观察到DβH-ir产物分布于胞体和突起,清晰标记A1/C1区神经元。不同组间DβH-ir神经元数量明显不同:冻融组数量少,突起少且细短;Triton X-100组数量明显增多,突起浓密且长,其中以0.05%Triton X-100组最为明显,差异显著。电镜结果显示:DβH-ir金-银颗粒主要分布在神经元胞体、树突和轴突终末内,DβH-ir轴突终末与胞体或树突形成密切接触或非对称性突触。金颗粒标记的数量在Triton X-100组明显多于冻融组这与光镜观察结果相一致。结论:包埋前免疫电镜技术中应用少量Triton X-100处理,可取代液氮冻融,能更好地增加胞膜的通透性,提高抗体的组织渗透能力和特异性标记是一种较好的包埋前免疫电镜的处理方法。

关键词：多巴胺β羟化酶免疫电镜技术液氮冻融 Triton X-100 大鼠

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诺如病毒的自白书

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家庭用药 2014年第9期 58-59页

作者：李增烈陕西省人民医院消化科

换名不改姓顽强求生存我叫诺如病毒，混迹人间已多年，以前由于人类显微技术不过关，我才得以多次蒙混过关。1972年，我在美国俄亥俄州诺瓦克城的小学生中制造了一次胃肠炎，这次可“露了馅”，被卡匹康医生用免疫电镜技术把我揪了出... 详细信息

换名不改姓顽强求生存我叫诺如病毒，混迹人间已多年，以前由于人类显微技术不过关，我才得以多次蒙混过关。1972年，我在美国俄亥俄州诺瓦克城的小学生中制造了一次胃肠炎，这次可“露了馅”，被卡匹康医生用免疫电镜技术把我揪了出来，从此再也无法隐身了。

关键词：诺如病毒免疫电镜技术显微技术胃肠炎小学生

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