检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：江鹏中国科学技术大学

学位级别：博士

甾体激素类物质（steroid hormones）在机体中作用常是首先结合到甾体激素相应的胞内受体，进而进入核内充当转录因子，调节着基因的表达。该过程由于涉及到蛋白质的合成，起效所需时间较长，一般数十分钟至数小时。自上个世纪八十年代... 详细信息

甾体激素类物质（steroid hormones）在机体中作用常是首先结合到甾体激素相应的胞内受体，进而进入核内充当转录因子，调节着基因的表达。该过程由于涉及到蛋白质的合成，起效所需时间较长，一般数十分钟至数小时。自上个世纪八十年代末以来，甾体激素类物质在神经系统中的作用研究掀起一股热潮。并且大量研究结果发现，神经系统中，部分甾体激素类物质可以直接作用于一些细胞膜表面配体门控离子通道或G蛋白偶联受体，从而在数毫秒至数秒内即可改变神经元兴奋性。鉴于这些甾体激素类物质快速起效的特性，它们也被称作为神经活性甾体（neuroactive steroids）。进一步研究发现，神经系统局部环境中某些神经活性甾体的浓度要远高于血浆中的水平，并且神经元和胶质细胞中存在有这些甾体激素合成的酶类，因此，这部分的甾体激素类物质在神经系统中可以自主合成。Baulieu于1997年提出了“神经甾体（neurosteroids）”的概念以命名这些甾体物质。一般说来，通过基因水平和非基因水平两方面途径，神经甾体调节了神经元的功能及其可塑性，在中枢神经系统中起到复杂多样的作用。成年动物中枢神经系统中，GABAA受体（GABAA receptors，GABAARs）是一种重要的抑制性受体，介导了快速的抑制性突触传递。过去的很多神经甾体调节抑制性受体的研究也主要是集中在对GABA能系统的调控。例如，神经甾体中，研究较多的一系列具有镇静和催眠作用的孕烷甾体，它们可以通过变构作用，增强GABAARs功能。又如有研究表明雌激素可以通过抑制GABA能的突触信号传递来调节神经元的兴奋性。然而，另一种抑制性受体甘氨酸受体（glycine receptors，GlyRs）所受的关注则较少。业已证明，GlyRs在中枢神经系统中广泛分布。脊髓中，GlyRs也介导了快速的突触传递，并参与脊髓中感觉信号的加工（包括伤害感受信息的加工传递），其中GlyRα3亚基更是外周炎症导致痛觉敏化现象的重要靶点。海马中，虽然GlyRs大量分布，但未有完全证明功能性glycine能突触的存在。由于这个原因，海马中GlyRs的研究受到了极大忽视。目前研究证据表明，海马中GlyRs的tonic激活则参与调节神经网络兴奋性、与GABAARs间交互抑制及短时程可塑性。此外，最近的研究还表明GlyRs在神经系统发育中起到重要作用，如参与脊椎动物视网膜、皮层及脊髓的发育。那么神经甾体又是如何调节GlyRs的功能呢?本研究中，我们主要使用海马和脊髓神经元培养技术、质粒的转化和转染技术及电生理记录研究了神经甾体孕烷醇酮（pregnanolone，PGN；5β-pregnan-3α-ol-20-one）和17-β-雌二醇（17-β-estradiol，E2）对于中枢神经元上GlyRs的调节作用和可能的机制，并探索其调节作用可能的生理功能和意义。 1．神经甾体PGN对培养大鼠脊髓神经元中甘氨酸能反应调控的研究本实验中，我们利用全细胞膜片钳方法检测了PGN及其三个异构体对于GlyRs的调控作用。结果显示，PGN可逆地抑制天然GlyRs和重组的α1-、α2、α3-和α1β-GlyR介导的峰值电流。在培养的大鼠脊髓背角神经元中，PGN浓度依赖性地抑制甘氨酸诱导的电流(glycine-induced current，IGly)，半效抑制浓度为1.0±0.3μM。PGN对IGly的抑制效果并不依赖于膜电位，且PGN使得IGly浓度效应曲线右移，却不改变glycine诱导的最大电流和曲线的希尔系数（Hillcoefficient）。PGN的三个异构体中，allopregnanolone略微增强IGly，然而iso-pregnanolone和iso-allopregnanolone不显著影响培养脊髓神经元中的IGly。因此，我们的研究结果提示PGN与glycine竞争结合到GlyRs，从而起到抑制IGly的作用，并且，这种竞争抑制作用具有结构特异性。此外，PGN可以降低甘氨酸能的微小抑制性突触后电流（glycinergic miniature inhibitory postsynapticcurrents，glycinergic mIPSCs）的幅度与频率。那么，通过调节甘氨酸能的突触传递，PGN可能在生理或病理情况下影响到伤害性感受信号在脊髓中的加工。 2．E2对培养的中枢神经元GlyRs的调控研究在培养的大鼠海马神经元中，我们利用全细胞膜片钳方法首先检测了E2对于IGly幅度的调节作用，结果发现E2快速且可逆地抑IGly的峰值。E2对IGly的抑制作用不依赖于细胞膜电压，也不依赖于glycine的浓度，提示E2对I

关键词：培养的大鼠海马和脊髓神经元天然和重组甘氨酸受体甘氨酸能微小抑制性突触后电流神经甾体孕烷醇酮雌激素 17-β-雌二醇伤害感受发育全细胞膜片钳记录

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IGF-1对海马神经元抑制性突触传递的影响

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首都医科大学学报 2007年第5期28卷 596-599页

作者：尹艳玲李峰邢长虹李菁锦谢佐平首都医科大学基础医学院神经生物学系首都医科大学宣武医院脑血管病诊疗中心清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室

目的：观察胰岛素样生长因子1（IGF-1）对原代培养海马神经元抑制性突触传递的影响并探讨其可能机制。方法：采用无血清培养基培养海马神经元,在10～14d时用于实验。电生理实验分为正常对照组和IGF-1处理组（实验前24h加入IGF-1,终浓度... 详细信息

目的：观察胰岛素样生长因子1（IGF-1）对原代培养海马神经元抑制性突触传递的影响并探讨其可能机制。方法：采用无血清培养基培养海马神经元,在10～14d时用于实验。电生理实验分为正常对照组和IGF-1处理组（实验前24h加入IGF-1,终浓度为10μmol/L）。细胞免疫化学实验分为正常对照组、IGF-1处理组和MAPKS转导通路抑制剂（PD98059）预处理组（IGF-1处理前1h加入PD98059,终浓度为10μmol/L）。采用全细胞膜片钳记录方法观察IGF-1对抑制性突触后电流（IPSC）的影响,用细胞免疫化学方法观察其对γ-氨基丁酸能细胞数目影响。结果：IGF-1能够显著降低IPSC的频率,但与对照组比较其幅度差异无统计学意义;IGF-1能够明显减少GABA阳性细胞数目,应用PD98059后可阻断这种作用。结论：IGF-1的上述作用可能参与海马对学习记忆功能的调节过程。

关键词：胰岛素样生长因子1 海马神经元 γ-氨基丁酸抑制性突触后电流全细胞膜片钳记录

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Tacrine对大鼠三叉神经节神经元5-HT激活电流的调制作用

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华中科技大学学报（医学版） 2006年第3期35卷 291-293页

作者：郑少萍罗加烈刘长金郑少江樊友珍李之望华中科技大学同济医学院基础医学院神经生物学系华中科技大学同济医学院基础医学院生理学系武汉430030 海南医学院病理学教研室海口571101

目的研究他可林（tacrine）对急性分离的大鼠三叉神经节神经元5-HT。受体的调制作用，探讨tacrine治疗阿尔茨海默病新的可能途径。方法采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的三叉神经节神经元膜5-HT。受体介导的电流。结果 83．75％（67... 详细信息

目的研究他可林（tacrine）对急性分离的大鼠三叉神经节神经元5-HT。受体的调制作用，探讨tacrine治疗阿尔茨海默病新的可能途径。方法采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的三叉神经节神经元膜5-HT。受体介导的电流。结果 83．75％（67／80）受检细胞对胞外加5-HT（10^-6～10^-3mol／1，）敏感，引起一快去敏感的内向电流，同时应用tacrine（10^-6～10^-4mol／L），5-HT激活电流被不同程度抑制，抑制作用随tacrine浓度的增加而增强，抑制作用的IC50值为3×10^-5mol／L。结论 Tacrine可抑制5-HT诱导的三叉神经节神经元膜电流，这可能是其改善阿尔茨海默病患者学习记忆功能障碍的机制之一。

关键词：他可林 5 -HT3受体全细胞膜片钳记录三叉神经节

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细辛含药血清对SD大鼠DRG神经元INa影响的研究

细辛含药血清对SD大鼠DRG神经元INa影响的研究

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作者：杨伟峰湖北中医学院

学位级别：硕士

目的用血清药理学实验方法观察细辛含药血清对大鼠延髓背侧神经元细胞电压依赖性钠离子通道的影响。方法 1 细辛含药血清的制备北细辛干燥根茎置于电热干燥箱中（40℃）干燥1h，经粉碎机粉碎，过5号筛（80目），得细辛散剂... 详细信息

目的用血清药理学实验方法观察细辛含药血清对大鼠延髓背侧神经元细胞电压依赖性钠离子通道的影响。方法 1 细辛含药血清的制备北细辛干燥根茎置于电热干燥箱中（40℃）干燥1h，经粉碎机粉碎，过5号筛（80目），得细辛散剂，密封瓶中保存备用。成年SD大鼠随机分为空白血清组、细辛含药血清组，其中细辛含药血清组的细辛灌胃剂量按《中国药典》（2005版·一部）中对临床用细辛剂量的规定（1～3g）取其中间剂量2g，依据人与大鼠体表面积换算，给药剂量为其等效剂量的10倍，计算为1.78g／kg；空白血清组给予等量生理盐水。每日1次，连续8d，末次灌胃2h后固定大鼠，眼眶采血。室温下静置30min后取上清液，2500rpm离心25min，分离血清。分离的血清置于56℃水浴30min灭活，过0.22μm微孔滤膜滤过除菌，分装，-20℃条件下保存备用。 2 细辛含药血清对SD大鼠延髓背侧神经元INa的影响新生1～3d的SD大鼠快速断头取脑，置于0～4℃充氧（95％O2+5％CO2）的ACSF中，置于冰袋上分离延髓。振动切片机将延髓切成400～500μm厚的脑片，针头分离延髓背侧腹外侧区组织，放入通氧、32℃的ACSF中，恒温水浴平衡60min。60min孵育结束后将脑片置于0.25％胰蛋白酶消化液中，32℃孵育消化15min，后用ACSF将酶液洗去，依次用尖端热抛光处理的500μm、300μm、150μm Pastuer管吹打，直到没有明显的组织块为止。悬浮液静置5min后，吸取中层细胞悬液，滴加到清洁的载玻片上，静置5～10min待细胞贴壁后放入装有1.5～2mlACSF的玻璃培养皿（直径35mm）中进行膜片钳全细胞记录。将神经元细胞钳制在-80mV，给予步幅10mV、时程为100ms的阶跃方波刺激，记录从-80mV去极化到+30mV时激活的内向电流，待细胞电流稳定后，通过多排管微量加药系统分别加入细胞外液、10％空白血清和10％细辛含药血清，在相应药液加入5min后将细胞钳制在-80mV，给予-80mV至+30mV步幅10mV、时程为100ms的阶跃方波刺激，分别记录正常细胞外液、10％空白血清和10％细辛含药血清钠电流的变化并绘制电流-电压关系曲线（Ⅰ-Ⅴ曲线）。实验过程中，多排管微量加药系统置于神经元周围，给药管口距记录细胞约100μm左右，石英加药管内径约为220μm。结果在加入10％浓度的空白血清后神经元细胞膜INa峰值与加入普通细胞外液的空白对照组神经元细胞膜INa峰值相比从1.121±0.101略降

关键词：细辛血清药理学全细胞膜片钳记录钠离子通道实验研究

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细辛含药血清对SD大鼠DRG神经元Ⅰ<,Na>影响的研究

细辛含药血清对SD大鼠DRG神经元Ⅰ<,Na>影响的研究

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作者：杨伟峰湖北中医药大学

学位级别：硕士

目的用血清药理学实验方法观察细辛含药血清对大鼠延髓背侧神经元细胞电压依赖性钠离子通道的影响。方法1细辛含药血清的制备北细辛干燥根茎置于电热干燥箱中(40℃)干燥1h，经粉碎机粉碎，过5号筛(80目)，得细辛散剂，密封瓶中保存... 详细信息

目的用血清药理学实验方法观察细辛含药血清对大鼠延髓背侧神经元细胞电压依赖性钠离子通道的影响。方法1细辛含药血清的制备北细辛干燥根茎置于电热干燥箱中(40℃)干燥1h，经粉碎机粉碎，过5号筛(80目)，得细辛散剂，密封瓶中保存备用。成年SD大鼠随机分为空白血清组、细辛含药血清组，其中细辛含药血清组的细辛灌胃剂量按《中国药典》(2005版·一部)中对临床用细辛剂量的规定(1～3g)取其中间剂量2g，依据人与大鼠体表面积换算，给药剂量为其等效剂量的10倍，计算为1.78g/kg;空白血清组给予等量生理盐水。每日1次，连续8d，末次灌胃2h后固定大鼠，眼眶采血。室温下静置30min后取上清液，2500rpm离心25min，分离血清。分离的血清置于56℃水浴30min灭活，过0.22μm微孔滤膜滤过除菌，分装，-20℃条件下保存备用。2细辛含药血清对SD大鼠延髓背侧神经元INa的影响新生1～3d的SD大鼠快速断头取脑，置于0～4℃充氧(95％O2+5％CO2)的ACSF中，置于冰袋上分离延髓。振动切片机将延髓切成400～500μm厚的脑片，针头分离延髓背侧腹外侧区组织，放入通氧、32℃的ACSF中，恒温水浴平衡60min。60min孵育结束后将脑片置于0.25％胰蛋白酶消化液中，32℃孵育消化15min，后用ACSF将酶液洗去，依次用尖端热抛光处理的500μm、300μm、150μmPastuer管吹打，直到没有明显的组织块为止。悬浮液静置5min后，吸取中层细胞悬液，滴加到清洁的载玻片上，静置5～10min待细胞贴壁后放入装有1.5～2mlACSF的玻璃培养皿(直径35mm)中进行膜片钳全细胞记录。将神经元细胞钳制在-80mV，给予步幅10mV、时程为100ms的阶跃方波刺激，记录从-80mV去极化到+30mV时激活的内向电流，待细胞电流稳定后，通过多排管微量加药系统分别加入细胞外液、10％空白血清和10％细辛含药血清，在相应药液加入5min后将细胞钳制在-80mV，给予-80mV至+30mV步幅10mV、时程为100ms的阶跃方波刺激，分别记录正常细胞外液、10％空白血清和10％细辛含药血清钠电流的变化并绘制电流-电压关系曲线(Ⅰ-Ⅴ曲线)。实验过程中，多排管微量加药系统置于神经元周围，给药管口距记录细胞约100μm左右，石英加药管内径约为220μm。结果在加入10％浓度的空白血清后神经元细胞膜INa峰值与加入普通细胞外液的空白对照组神经元细胞膜INa峰值相比从1.121±0.101略降至1.108±0.265，但与空白对照组相比，10％浓度空白血清组对大鼠DRG神经元细胞INa无显著性影响(P＞0.05)，而在加入10％细辛含药血清后大鼠DRG神经元细胞INa则可明显激活INa、INa峰值从1.121±0.101增加至1.379±0.353，且与空白对照组相比有显著性差异(P＜0.01);与空白血清组相比也有显著性差异(P＜0.01);说明细辛含药血清在10％浓度时可明显激活电压门控性钠离子通道，而空白血清组对电压门控性钠离子通道无影响，故可消除血清中其他成分对电压门控性钠离子通道的影响。结论1.细辛含药血清对大鼠延髓DRG呼吸神经元细胞的VGSC有明显激活作用。 2.细辛含药血清对大鼠延髓DRG呼吸神经元细胞VGSC的生物特性无明显影响。 3.细辛对呼吸中枢的影响与延髓DRG的INs激活密切相关。

关键词：细辛血清药理学全细胞膜片钳记录钠离子通道中药药理

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神经干细胞体外培养及分化过程中钾电流的变化

神经干细胞体外培养及分化过程中钾电流的变化

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作者：张紫娟郑州大学

学位级别：硕士

近十年的研究表明，胚胎和成人脑组织及外周神经系统中均存在神经干细胞(neural stem cells，NSCs)，而且还证实这些神经干细胞在细胞因子、激素和环境因素的调控下能在体外分裂，并可进一步分化为神经元或／和胶质细胞(星形胶质细胞、... 详细信息

近十年的研究表明，胚胎和成人脑组织及外周神经系统中均存在神经干细胞(neural stem cells，NSCs)，而且还证实这些神经干细胞在细胞因子、激素和环境因素的调控下能在体外分裂，并可进一步分化为神经元或／和胶质细胞(星形胶质细胞、少突胶质细胞)。然而，体外培养的神经干细胞是否适宜用于移植治疗呢?神经干细胞移植能发挥作用，最重要的是其分化后必须具有相应的功能。目前，对神经干细胞诱导后状态的评价，大多限于免疫组织化学鉴定，但神经细胞的主要功能是接受刺激和传递信息，而其功能的实现又是通过神经冲动的方式来实现的，神经冲动的主要表现形式是动作电位的产生(由细胞膜内外离子的移动形成)，因此，用膜片钳技术测定神经细胞的离子通道，可以作为检测诱导后的神经干细胞功能的一种方法。近年来，人们对神经干细胞的形态学和神经化学等方面已进行了深入的研究，但有关其电生理特征特别是钾通道的深入研究报道甚少。对正在分化的神经元细胞系的定性研究表明形态学的发育与功能的成熟并不程完全很好的相关。如果仅通过定性分析就假定神经干细胞来源的神经元和神经胶质细胞是充分分化和有功能的，而无电生理或其他功能性方面的研究证据，那么这种研究是很难令人信服的。本实验旨在观察体外培养的神经干细胞在分化过程中钾电流的变化情况，将形态学观察和电生理特性的探讨结合起来，为神经干细胞应用于临床提供理论基础。

关键词：神经干细胞诱导分化全细胞膜片钳记录延迟整流钾电流

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小鼠心室肌细胞分离方法的改进

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第四军医大学学报 2006年第11期27卷 990-990页

作者：徐明周士胜李龙天迟庆

目的：探索更简单实用和重复性好的小鼠心肌细胞分离技术．方法：实验于2005～05／09在大连大学医学院医学研究中心完成．选择8～16周龄昆明小鼠150只，雌雄不拘，体质量30～40g，由大连大学医学院动物中心提供．采用原位主动脉插管和... 详细信息

目的：探索更简单实用和重复性好的小鼠心肌细胞分离技术．方法：实验于2005～05／09在大连大学医学院医学研究中心完成．选择8～16周龄昆明小鼠150只，雌雄不拘，体质量30～40g，由大连大学医学院动物中心提供．采用原位主动脉插管和动脉夹固定法酶解分离小鼠心室肌细胞，并在室温下进行全细胞膜片钳记录．结果：可将主动脉插管的时间控制在1．5min内，所获心室肌细胞横纹清晰，一次性复钙可获得50％～60％的耐钙细胞，分离所得细胞可在全细胞膜片钳方式下记录到一过性外向钾电流（Ito）.

关键词：细胞分离方法心室肌细胞昆明小鼠全细胞膜片钳记录大连大学医学院一过性外向钾电流主动脉插管细胞分离技术研究中心小鼠心肌

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5-HT_2受体介导大鼠DRG神经元膜GABA 激活电流的增强作用(英文)

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药学学报 2005年第1期40卷 1-7页

作者：安杰陈长华关兵才唐明余承高李之望华中科技大学同济医学院神经生物学系湖北武汉430030 山东武警总医院山东济南250014 华中科技大学同济医学院生理学系湖北武汉430030

目的　探讨 5 HT对大鼠DRG神经元膜GABA 激活电流的调节作用及其机制。方法　在新鲜分离的大鼠DRG神经元标本上,以全细胞膜片钳技术记录膜电流,用排管快速换液装置行胞外给药,以胞内透析技术分析信号转导途径。结果　给予GABA可使多数... 详细信息

目的　探讨 5 HT对大鼠DRG神经元膜GABA 激活电流的调节作用及其机制。方法　在新鲜分离的大鼠DRG神经元标本上,以全细胞膜片钳技术记录膜电流,用排管快速换液装置行胞外给药,以胞内透析技术分析信号转导途径。结果　给予GABA可使多数受检细胞产生浓度依赖性内向电流 (IGABA)。预加 5 HT,可使IGABA增加。此效应可被 5 HT2受体特异性激动剂α methyl 5 HT( 1×10-6mol·L-1 )所模拟,被 5 HT2受体选择性拮抗剂cyproheptadine所阻断。在部分细胞, 5 HT本身可引起由 5 HT3受体介导的快速内向电流,但并未发现该电流与 5 HT对IGABA的增强作用有必然的联系。从GABA激活电流的量效曲线可见,预加 5 HT后和对照曲线相比,阈浓度不变、EC50值相近,IGABA最大值增加 33. 6%。胞内透析GDP β S或H 7可取消 5 HT增强IGABA的效应,而透析H 9无效。结论　5 HT可增强GABA 激活电流,其机制为 5 HT2受体激活后通过PKC引起GABAA受体胞内磷酸化所致。

关键词：背根神经节全细胞膜片钳记录 5-HT2受体 GABA激活电流

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川芎嗪对大鼠背根神经节细胞P2X嘌呤受体介导反应的作用

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中国药理学通报 2005年第11期21卷 1319-1323页

作者：徐昌水徐文苑梁尚栋江西医学院生理学教研室江西南昌330006 江西医学院第一附属医院神经内科江西南昌330006

目的探讨川芎嗪（tetramethy1pyrazine,TMP）对嘌呤2X（P2X）受体介导反应的作用。方法在大鼠新鲜分离的背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）神经元标本上应用全细胞膜片钳技术记录川芎嗪对P2X受体激动剂激活电流的影响。结果外... 详细信息

目的探讨川芎嗪（tetramethy1pyrazine,TMP）对嘌呤2X（P2X）受体介导反应的作用。方法在大鼠新鲜分离的背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）神经元标本上应用全细胞膜片钳技术记录川芎嗪对P2X受体激动剂激活电流的影响。结果外加ATP（1～1 000 μmol·L^-1）可引起DRG神经元产生激活电流（n=102）,ATP-激活电流（IATP）显示快失敏和慢失敏两种形式的内向电流。预加川芎嗪（0.1～10 mmol· L^-1）后，大部分（89.2%,91/102）受检细胞可观察到ATP（100 μmol·L^-1）-激活电流出现明显的抑制作用。川芎嗪（1 mmol· L^-1）使α,β-meATP （10 μmol·L^-1）-激活电流减小。预加川芎嗪（1 mmol·L^-1）后ATP（1～1 000 μmol·L^-1）激活电流的剂量-效应曲线明显下移。预加川芎嗪（1 mmol·L^-1）前后ATP（100 μmol·L^-1）的I-V曲线反转电位值不变，均接近0 mV.川芎嗪（1 mmol·L^-1）可明显抑制被前列腺素E2（100 μmol·L^-1）或P物质（0.1 μmol·L^-1）增大的ATP激活电流。通过微电极胞内透析注入PKA抑制剂H89（10 μmol·L^-1）至胞内,使川芎嗪（1 mmol· L^-1）抑制ATP（100 μmol·L^-1）激活电流的作用减小。结论川芎嗪可能是通过PKA系统以及P2X受体离子通道复合体细胞外环的变构调制点影响P2X受体激动剂在大鼠DRG神经元的激活电流.

关键词：川芎嗪背根神经节嘌呤2X受体全细胞膜片钳记录抑制

来源：评论

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人肺腺癌A549细胞膜钾离子通道特性与细胞增殖关系的研究

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中国肺癌杂志 2005年第4期8卷 261-265页

作者：李向楠戴天阳曾晓荣杨艳潘雪王琼泸州医学院附属医院胸心外科泸州医学院心肌电教室泸州医学院组胚教研室

背景与目的肺癌的发生发展、侵袭和转移均受肺癌相关基因的调控,而相关基因的表达、缺失或/和突变常是通过细胞膜信号传导系统和细胞膜离子通道实现的。本研究观察了人肺腺癌细胞系A549细胞膜钾离子通道的特性,以探讨应用钾通道阻断剂... 详细信息

背景与目的肺癌的发生发展、侵袭和转移均受肺癌相关基因的调控,而相关基因的表达、缺失或/和突变常是通过细胞膜信号传导系统和细胞膜离子通道实现的。本研究观察了人肺腺癌细胞系A549细胞膜钾离子通道的特性,以探讨应用钾通道阻断剂抑制肺腺癌细胞增殖的可行性。方法以人肺腺癌细胞系A549细胞为研究对象,采用全细胞膜片钳技术记录细胞膜离子通道特性;通过细胞体外增殖试验,观察钾通道阻断剂四乙胺(TEA)对细胞增殖影响。结果A549细胞在保持电压为-70mV,测试电压-30^+110mV时,记录到一种跨膜电流,该跨膜电流具有电压依赖性、外向整流特性,并且500ms内不失活,可被钾通道阻断剂TEA阻断;细胞体外增殖试验显示,20、40和60mmol/L的TEA作用24h能明显抑制人肺腺癌A549细胞的体外增殖,而0.2和2mmol/L的TEA对细胞的体外增殖无明显抑制作用。结论人肺腺癌细胞系A549细胞中存在外向性电压门控性钾通道,该钾通道可被TEA阻断;钾通道阻断剂TEA能抑制A549细胞的体外增殖,抑制作用与TEA存在剂量依赖关系。

关键词：肺腺癌钾离子通道全细胞膜片钳记录四乙胺细胞增殖

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