检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：张宏发东北农业大学

学位级别：硕士

老山芹,学名短毛独活(Heracleum moellendorffii Hance),是东北林区的主要山野菜种类之一,其幼嫩茎叶是美味蔬菜,全株既是优质饲料、又可入药,这种药食同源的山野菜备受大众追捧,但老山芹种子具有较强休眠特性,种子发芽率低且出苗不整... 详细信息

老山芹,学名短毛独活(Heracleum moellendorffii Hance),是东北林区的主要山野菜种类之一,其幼嫩茎叶是美味蔬菜,全株既是优质饲料、又可入药,这种药食同源的山野菜备受大众追捧,但老山芹种子具有较强休眠特性,种子发芽率低且出苗不整齐等问题严重制约了老山芹规模化人工栽培和深度开发,且种子采收时成熟度差异较大。为突破限制老山芹深度开发和商业化生产的瓶颈,本研究以夏季采收老山芹种子为实验材料,按照种子质量将老山芹种子分为高成熟度(平均质量12.5 mg)、中成熟度(平均质量9.2 mg)和低成熟度(平均质量6.1 mg)三类,分别层积处理,系统研究层积过程中不同成熟度种子种胚发育进程差异、种子和胚形态指标变化、发芽率动态变化、主要糖代谢物质变化、糖代谢关键酶活性变化、糖代谢关键酶基因的生信分析及其表达差异变化等,为研究老山芹种子休眠与萌发调控机制、促进老山芹产业化发展从生理、分子水平提供理论依据和技术支撑。结果表明:(1)采收时不同成熟度老山芹种子可观测到的种胚发育时期主要集中在心形胚及鱼雷形胚两时期,心形胚所占比例随着成熟度的增加而降低。层积过程中不同成熟度种子胚发育进程存在较大差异;(2)层积过程中高成熟度种子比中和低成熟度种子在种胚发育速率、胚率等方面均表现出显著优势且发芽率高;(3)层积过程中蔗糖和淀粉含量呈先小幅度增加、后迅速降低的变化趋势;葡萄糖和果糖含量呈先缓慢降低、后小幅增加、最后急剧降低的变化趋势;(4)淀粉酶和蔗糖合成酶酶活性呈先缓慢下降、后迅速上升的变化趋势;果糖激酶活性呈先缓慢上升、后小幅下降、最后迅速上升的变化趋势;(5)层积结束时,高、中和低三类成熟度种子发芽率分别为43.70%、34.90%和28.41%;(6)关键酶基因生物信息学分析表明,Hm ACR12、Hm SUS4、Hm FRK1和Hm PGIC关键酶基因编码的蛋白氨基酸长度在301-808区间,相对分子质量范围是33241.96-93002.67 Da,理论等电点大致在5.14-6.19之间,不稳定系数在31.53-48.71间,均属于稳定、亲水性蛋白质。脂肪族系数在62.67-99.13区间。通过构建四种蛋白在不同植物中的进化树,并分析其结构域与核心基序特征,表明四种蛋白在不同物种中具有相同的结构域与核心基序,在进化中具有高度的保守性,可能行使相似功能。(7)随着层积时间的延长,不同成熟度老山芹种子Hm ACR12和Hm SUS4基因表达水平呈“降-升”、Hm FRK1基因表达水平呈“升-降-升”、Hm PGIC基因呈“降-升-降”变化趋势,其中高成熟度种子最早升、降至极值,而中、低成熟度种子分别比高成熟度种子晚20 d、40 d,且Hm SUS4、Hm FRK1表达水平与其酶活性变化相一致;

关键词：老山芹种子成熟度层积胚发育及糖代谢发芽率关键酶基因表达

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生态因子及关键酶基因表达对秋季黄芩采收期主要药效成分合成的影响

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中草药 2019年第4期50卷 936-944页

作者：张甜程林杨林林林红梅杨利民韩梅吉林农业大学中药材学院吉林长春130118

目的研究黄芩秋季采收期药效成分的动态变化及生态因子和关键酶表达对其的影响。方法以人工栽培的一年生黄芩为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定秋季连续时间黄芩根组织中9种关键酶基因(PAL、C4H、4CL、CHS、CHI、FNS、F6H... 详细信息

目的研究黄芩秋季采收期药效成分的动态变化及生态因子和关键酶表达对其的影响。方法以人工栽培的一年生黄芩为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定秋季连续时间黄芩根组织中9种关键酶基因(PAL、C4H、4CL、CHS、CHI、FNS、F6H、UBGAT、GUS)的表达量;采用HPLC法测定黄芩根中4种主要黄酮类化合物(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)的含量;以生态气象站对黄芩样地气象数据进行采集;采用SPSS统计软件和DPS统计软件进行数据分析。结果 4种黄酮类化合物含量在一年生黄芩秋季呈缓慢下降的趋势,因此黄芩秋季最佳采收时间应在9月初;灰色关联度分析结果表明影响4种黄酮类药效成分较大的生态因子为土壤含水量、最高空气温度、空气湿度、光合有效辐射;C4H、UBGAT基因的表达对黄芩秋季根部黄酮类化合物的积累具有重要影响;最大降雨强度可能通过对关键酶基因表达的影响来间接影响黄芩药效成分的积累。结论明确了一年生黄芩秋季采收期4种主要黄酮类药效成分的动态变化和黄酮类化合物关键酶基因的表达,为黄芩黄酮类化合物合成生理生态机制的明晰和黄芩药材质量的提高提供了理论依据。

关键词：黄芩黄酮类化合物关键酶基因表达生态因子药材质量黄芩苷汉黄芩苷黄芩素汉黄芩素

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黄芩主要药效成分积累与生态因子和关键酶基因表达的关系研究

黄芩主要药效成分积累与生态因子和关键酶基因表达的关系研究

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作者：张甜吉林农业大学

学位级别：硕士

黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）,唇形科黄芩属多年生草本植物,主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、河南、甘肃、陕西、山西、山东、四川等地。中药黄芩为其干燥根,具有清热燥湿,泻火解毒,止血安胎等功效。黄芩的主... 详细信息

黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）,唇形科黄芩属多年生草本植物,主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、河南、甘肃、陕西、山西、山东、四川等地。中药黄芩为其干燥根,具有清热燥湿,泻火解毒,止血安胎等功效。黄芩的主要药效成分是次生代谢产物,其合成和积累的影响因素除了与外部环境条件有着密切关系之外,内部基因表达也是造成药材活性成分差异的重要因素。因此,阐明黄芩药效成分的积累规律对于中药黄芩的优质高产具有重要的意义。本研究以一、二年生黄芩为研究对象,以中药黄芩主要药效成分的合成与积累作为评价指标,在前期课题组研究工作的基础上,系统开展了不同生长阶段黄芩主要药效成分合成与积累的动态变化的研究,并结合外界生态因子和黄酮类化合物合成途径中关键酶基因的表达,探讨了生态因子和关键酶基因表达与黄芩药效成分积累的关系。主要研究结果如下:1、以一、二年生黄芩根组织为试验材料,对不同生长发育时期黄芩产量和主要药效成分含量进行分析。结果表明,一年生黄芩产量在9至10月增长最快,产量占全年增长量的89%;二年生黄芩则在10月上旬产量最高,干重平均值为6.30 g﹒株-1。一年生黄芩黄芩苷的含量在9月上旬最高（11.72%）,之后逐渐下降;黄芩素含量先缓慢上升,9月中下旬达到最高。二年生黄芩黄芩苷含量呈“M”型变化,5月末含量最高,为13.22%,较之一年生黄芩,黄芩苷含量最高时上升了1.49%,8月末出现第二个峰值;而黄芩素含量呈“W”型变化,7月初含量最高（1.34%）。结合黄芩产量和药效成分含量,一年生黄芩主要药效成分总产量在9月份增长较快,10月中旬达到最高,黄芩苷含量达50.56g﹒m-2;二年生黄芩主要药效成分总产量在7月中下旬至8月末增长较快,增长量占黄芩第二年增长总产量的46%,9月中下旬达到最高,为0.68 g﹒株-1。因此,长春地区二年生黄芩的最佳采收期是9月中下旬。2、以一、二年生黄芩根为试验材料,对黄芩关键酶基因（PAL、C4H、4CL、CHS、CHI、FNS、F6H、UBGAT、GUS）的表达量与主要药效成分积累的关系研究表明,在黄芩的不同生长发育时期,关键酶基因表达对黄芩质量合成的影响程度不同。一年生秋季黄芩黄芩素与CHS、4CL和CHI基因表现出显著正相关,相关系数分别达到0.69、0.67和0.57,说明CHS、4CL和CHI基因对于黄芩素含量的积累具有重要的作用。黄芩苷、汉黄芩苷和总黄酮与PAL基因呈显著正相关,相关系数分别达到0.57、0.57和0.60;总黄酮与CHS、F6H和4CL基因呈显著正相关,相关系数分别达到0.61、0.59和0.57,因此,PAL、CHS、F6H和4CL基因对于一年生黄芩质量的合成与积累影响较大。二年生黄芩C4H基因与黄芩素呈显著正相关,相关系数达0.52,表明C4H基因能够有效促进二年生黄芩根部黄芩素的积累。综上,在黄芩的不同生长发育时期,关键酶基因表达对黄芩质量合成的影响程度不同,一年生秋季黄芩质量的形成受关键酶基因表达影响较大。3、不同生长阶段黄芩根组织中主要药效成分积累和关键酶基因表达与生态因子关系研究表明,在质量形成方面,一年生秋季黄芩样地中光合有效辐射与黄芩苷、黄芩素和总黄酮呈显著相关,相关系数分别为0.74、0.68和0.74;土壤含水量和土壤温度与黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和总黄酮均表现出了显著的相关性,其中与黄芩苷的相关系数分别达到0.85和0.82,与总黄酮的相关系数分别达到0.87和0.90;空气温度与黄芩苷、黄芩素和总黄酮均呈显著相关,相关系数分别为0.77、0.78和0.82。综上,光合有效辐射、土壤含水量、土壤温度和空气温度是重要的生态因子,在一年生秋季黄芩质量合成与积累过程中影响较大。二年生黄芩不同生长时期土壤含水量与黄芩素、汉黄芩素呈显著负相关,相关系数分别为0.56和0.58。黄芩苷是黄芩素的储存形式,由此推测土壤中水分的适度增加有助于促进黄芩素转化为黄芩苷。基因表达方面,对于一年生秋季的黄芩,光合有效辐射与PAL、CHI、FNS和GUS基因呈显著正相关,与PAL基因的相关系数达0.69;土壤含水量与PAL、FNS和GUS基因呈极显著相关,相关系数分别达到0.76、0.71和0.71;土壤温度和空气温度与4CL、CHS、CHI和F6H基因均表现出了显著的相关关系,其中与4CL基因的相关系数分别达到0.76和0.78,与CHS基因的相关系数分别达到0.73和0.75。因此,光合有效辐射、土壤含水量、土壤温度和空气温度对于一年生黄芩关键酶基因的表达也具有重要的促进作用。二年生黄芩中只有4CL基因与空气温度表现出了显著的相关性,相关系数为0.55,说明空气温度的提高有利于二年生黄芩4CL基因的表达。综上,相比于二年生黄芩,一年生

关键词：黄芩黄酮类化合物关键酶基因表达生态因子药材质量

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瓜氨酸研究进展

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长江蔬菜 2022年第22期 35-39页

作者：李亚莉甘肃省农业科学院蔬菜研究所兰州730070

瓜氨酸在植物中参与许多生理代谢,从瓜氨酸的作用、测定方法、合成途径及其关键酶基因的表达及调控等方面概述了其研究进展。

关键词：瓜氨酸测定合成途径关键酶基因表达

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水分充沛与亏缺对膜荚黄芪皂苷次生代谢的影响

水分充沛与亏缺对膜荚黄芪皂苷次生代谢的影响

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作者：韦赫吉林农业大学

学位级别：硕士

膜荚黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge.]为豆科草本植物,我国传统大宗药材,干燥根入药。膜荚黄芪主产于我国东北、华北、西北等地区,次生代谢产物黄芪皂苷为其主要有效成分之一。不同产地黄芪皂苷含量差异较大,这种差异受环... 详细信息

膜荚黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge.]为豆科草本植物,我国传统大宗药材,干燥根入药。膜荚黄芪主产于我国东北、华北、西北等地区,次生代谢产物黄芪皂苷为其主要有效成分之一。不同产地黄芪皂苷含量差异较大,这种差异受环境因素和遗传因素共同影响。水分因子是影响黄芪次生代谢形成的重要生态因子之一,适度的水分调控可促进黄芪药效成分的积累,但水分调控下黄芪药材质量形成的分子生态机制还未得到阐明,无疑制约了中药材生产中质量控制技术的创新。因此,本研究对盆栽膜荚黄芪进行水分调控试验,系统地开展黄芪皂苷对水分调控响应规律研究,以期对水分调控影响黄芪皂苷形成的机制进行阐释,为黄芪精准化栽培提供理论支撑。本研究采用盆栽试验的方式,以膜荚黄芪为研究材料,根据黄芪生长分布区降水情况设置水分处理组,分别采用短期渐近干旱和长期水分亏缺的水分调控模式,考察了在水分调控过程中膜荚黄芪的生物量、皂苷含量、基因表达量及栽培土壤养分含量,分析了水分调控下土壤养分含量对膜荚黄芪皂苷次生代谢形成的影响。主要研究结果如下:1、不同水分调控模式对膜荚黄芪的生长发育及有效成分含量的影响短期水分调控下渐近干旱组地上、地下组织干重低于水分充沛组,干物质量减少;渐近干旱组黄芪甲苷及总皂苷含量在处理后第15d达到最大值,相对水分充沛组分别提高了16.8%和23.6%,此时渐近干旱组中黄芪甲苷和总皂苷积累量达到最大值,是水分充沛组的1.37和1.45倍。长期水分调控下水分亏缺组地上组织鲜重、干重只有水分充沛组的57.62%和55.92%,但地下组织鲜重和干重高于水分充沛组;水分亏缺组黄芪甲苷和总皂苷含量在7月、8月分别达到最大值,相对水分充沛组分别提高了15.92%和49.42%,7月中旬黄芪甲苷积累量最高,是水分充沛组的2.14倍。短期和长期水分调控均促进了黄芪皂苷的积累,其中长期水分亏缺对黄芪总皂苷积累的促进效果优于短期渐近干旱,因此7～8月份采用水分亏缺方式可能是调控膜荚黄芪药材质量提高的有效手段。2、不同水分调控模式对黄芪皂苷合成途径中关键酶基因(AACT、HMGS、HMGR、IDI、FPS、SS、SE和CAS)相对表达量的影响短期水分调控下,中度干旱阶段渐近干旱组AACT、HMGS、IDI、FPS、SS、SE表达量显著低于水分充沛组,而重度干旱阶段表达量高于水分充沛组;HMGR表达量在复水后受影响较大,下降显著;CAS表达量在干旱阶段逐渐降低。各个关键酶基因间相关性较高,共同响应土壤水分变化。长期水分调控过程中,6、7月份是黄芪皂苷合成关键酶基因表达的活跃时期。水分亏缺组AACT、IDI、FPS和CAS表达模式相近,6月末基因相对表达量显著高于水分充沛组,7月中旬达到最大值;HMGS、SS、SE在7月中旬表达量显著高于水分充沛组。相关分析显示,长期水分调控下,黄芪甲苷和与8种关键酶基因表达量关系密切,与AACT、HMGS、IDI、FPS、SS、SE、CAS表达量呈极显著正相关(p<0.01),与HMGR表达量呈显著正相关(p<0.05)。表明8种关键酶基因的表达相互影响,协同增减,在黄芪皂苷合成积累过程中发挥重要作用。3、不同水分调控模式下黄芪栽培土壤养分(有机质、碱解氮、全氮、速效磷、速效钾)含量变化及其与黄芪皂苷形成的关系长期水分调控下,水分亏缺组全氮含量低于水分充沛组,速效钾含量呈逐渐增加的趋势,有机质含量呈逐渐降低,水分亏缺组速效磷含量始终低于水分充沛组。相关分析性分析显示,短期水分调控下,土壤有机质含量与HMGS表达量呈显著负相关(p<0.05),土壤速效磷含量与HMGR表达量呈极显著正相关(p<0.01),土壤速效磷含量与黄芪甲苷积累量呈显著正相关(p<0.05)。长期水分调控下,土壤碱解氮含量与CAS表达量呈显著正相关(p<0.05),土壤全氮含量与除HMGR以外的其它7种关键酶基因均呈极显著正相关(p<0.01),速效磷含量与AACT表达量呈显著负相关(p<0.05)。土壤碱解氮含量与总皂苷积累量呈显著负相关(p<0.05),土壤速效钾含量与黄芪甲苷积累量、总皂苷积累量呈极显著正相关(p<0.01),与总皂苷含量呈显著正相关(p<0.05)。说明水分调控改变了土壤速效养分含量,进而影响了膜荚黄芪对于速效养分的吸收利用,应对外部环境变化其体内皂苷合成关键酶基因表达快速响应,最终表现出黄芪皂苷含量的差异。

关键词：膜荚黄芪水分调控黄芪甲苷关键酶基因表达土壤养分

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干旱胁迫下银杏叶黄酮含量与黄酮类代谢关键酶基因表达之间的关系

干旱胁迫下银杏叶黄酮含量与黄酮类代谢关键酶基因表达之间的关系

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中国园艺学会2012年学术年会

作者：朱灿灿曹福亮汪贵斌耿国民江苏省中国科学院植物研究所南京林业大学森林资源与环境学院

逆境(如干旱、严寒、伤害、高温、重金属等)能刺激植物次生物质的积累与释放,为研究植物从接受环境信号到做出适应反应(产生次生代谢物以应对环境)的过程和分子机制,本试验中以2年生银杏盆栽实生苗为研究材料,通过人工模拟干旱胁迫环境... 详细信息

逆境(如干旱、严寒、伤害、高温、重金属等)能刺激植物次生物质的积累与释放,为研究植物从接受环境信号到做出适应反应(产生次生代谢物以应对环境)的过程和分子机制,本试验中以2年生银杏盆栽实生苗为研究材料,通过人工模拟干旱胁迫环境,探索4个干旱胁迫处理(土壤含水量分别为田间持水量的75%～80%、55%～60%、40%～45%和30%～35%)对银杏叶黄酮类物质季节变化的影响,同时采用RT-PCR方法分析黄酮代谢过程中7个关键酶基因的表达,从终产物、

关键词：银杏干旱胁迫黄酮含量关键酶基因表达

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异黄酮在大豆抗胞囊线虫过程中的作用研究

异黄酮在大豆抗胞囊线虫过程中的作用研究

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作者：郭春红沈阳农业大学

学位级别：硕士

大豆胞囊线虫(Soybean cyst nematode,SCN)是世界上对大豆产生严重危害的重要病原物,我国主要是在东北和黄淮海大豆主产区严重发生。大豆异黄酮作为一类重要的植保素,在大豆抗胞囊线虫过程中发挥重要作用,但是具体哪些种类异黄酮起到多... 详细信息

大豆胞囊线虫(Soybean cyst nematode,SCN)是世界上对大豆产生严重危害的重要病原物,我国主要是在东北和黄淮海大豆主产区严重发生。大豆异黄酮作为一类重要的植保素,在大豆抗胞囊线虫过程中发挥重要作用,但是具体哪些种类异黄酮起到多大作用则鲜见研究。因此,本研究在明确了6种大豆异黄酮对大豆胞囊线虫的生物活性基础上,又利用ELISA和Real-time PCR方法测定了大豆异黄酮合成代谢途径中查尔酮还原酶(CHR)、查尔酮合酶(CHS)和查尔酮异构酶(CHI)的酶含量变化和基因表达,从而探究根瘤菌Sneb183诱导过程中大豆异黄酮的表达,明确大豆异黄酮在大豆抗胞囊线虫中的作用,为大豆线虫病害的防治提供新思路。结果如下:1.大豆异黄酮的不同种类对胞囊线虫的生物活性研究:选取了黄豆苷元(Daidzein)、黄豆苷(Daidzin)、染料木素(Genistein)、染料木苷(Genistin)、黄豆黄苷(Glycitin)和黄豆黄素(Glycitein)6种大豆异黄酮,测定其不同浓度对大豆胞囊线虫的卵孵化和二龄幼虫J2的致死率及其田间防效,结果表明:6种大豆异黄酮对胞囊线虫均具有一定的抑制作用,其中100 μg/mL染料木素对胞囊线虫的抑制作用最强,处理24 h和72 h后,对J2的校正死亡率分别为45.46%和56.86%;卵孵化的抑制率分别为43.48%和48.48%;且50 μg/mL染料木素处理种子后的田间防效显示对胞囊抑制率亦达到49.47%。此外,染料木苷和黄豆苷元对J2和卵孵化也有较明显效果,但田间防效较其他异黄酮差;黄豆黄苷和黄豆黄素对J2毒杀作用较弱但对卵孵化抑制作用较强;黄豆苷对J2和卵孵化作用效果最弱,但是其田间防效与染料木素无显著性差异。说明供试的6种异黄酮在不同浓度和条件下均对大豆胞囊线虫有抑制作用,而染料木素的综合效果最好。2.生物胁迫下大豆异黄酮关键酶基因的表达分析:采用荧光定量PCR技术检测与大豆异黄酮合成密切相关的3种关键酶基因在大豆根部的相对表达,包括查尔酮还原酶基因CHR、查尔酮合酶基因CHS和查尔酮异构酶基因CHI,这几个基因主要调控染料木素和黄豆苷元的合成。研究发现在根瘤菌Sneb183诱导后再接种大豆胞囊线虫的处理中,处理前7 h,3个基因的相对表达量均显著高于单独接种线虫和根瘤菌的处理;其中单独接种线虫的相对表达量略高于单独接种根瘤菌,但是两种处理差异不显著。3.生物胁迫下大豆异黄酮关键酶的含量分析:采用ELISA酶联免疫方法检测与大豆异黄酮合成密切相关的3种关键酶活性,包括查尔酮还原酶CHR、查尔酮合酶CHS和查尔酮异构酶CHI,单独接种线虫和根瘤菌以及接种根瘤菌后再接种线虫的3种处理的CHR、CHS和CHI含量在整体水平上均高于空白对照。而根瘤菌Sneb183诱导后接种大豆胞囊线虫的处理8 h时的大豆根部3种关键酶的含量均最高,单独接种线虫的处理次之,只接种根瘤菌Sneb183的处理3种酶含量最低。ELISA酶含量检测结果与基因的表达分析结果一致。说明根瘤菌Sneb183能够诱导3种大豆异黄酮关键酶的表达,但是需要受线虫侵染后的诱导表达量才能够达到最大。本研究明确了对大豆胞囊线虫有活性的染料木素等大豆异黄酮种类,同时也揭示了大豆异黄酮的关键酶能够被生物因子根瘤菌Sneb183和线虫诱导表达的科学现象。

关键词：大豆异黄酮大豆胞囊线虫根瘤菌Sneb183 异黄酮合成酶活性关键酶基因表达

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