检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：袁燕平汕头大学

学位级别：硕士

研究背景：　　毛囊主要由上皮和真皮两部分结构组成，上皮部分的外根鞘（Outer root sheath，ORS）包含隆突部-毛囊干细胞所在地，而真皮部的毛乳头(Dermal papilla，DP)则是维持毛囊周期、诱导毛发再生的重要结构。哺乳动物通常不具... 详细信息

研究背景：　　毛囊主要由上皮和真皮两部分结构组成，上皮部分的外根鞘（Outer root sheath，ORS）包含隆突部-毛囊干细胞所在地，而真皮部的毛乳头(Dermal papilla，DP)则是维持毛囊周期、诱导毛发再生的重要结构。哺乳动物通常不具备很强的组织和器官再生能力，但是，毛囊却是一个特例，它是哺乳动物体内少数能够自我再生的微型器官。实验已经证实，切割后的部分毛囊片段可以再生出新的毛囊单位。事实上，毛囊，尤其是大鼠触须毛囊，是一个研究器官再生的非常好的对象，因为第一：大鼠触须毛囊非常容易获取;第二：毛囊结构相对简单，易于观察;第三：毛囊的胚胎发育和生长均涉及真皮与表皮间复杂的作用网络，即毛囊内部同时存在多条信号通路，这一特点有利于研究真皮-表皮之间、多种信号通路间的相互作用机制;第四：毛囊的生长具有典型的周期性特征，按顺序可分为生长期（anagen）、退行期（catagen）和休止期（telogen），各时期的信号分子的作用机制截然不同，这为研究各信号通路的作用机制提供了极好的模型。以往的研究已经表明，Wnt/β-catenin信号在毛囊胚胎发生以及出生后毛囊周期的维持、毛囊再生中，都发挥着不可或缺的作用，一旦Wnt/β-catenin信号通路被阻断，则会严重影响甚至中断毛囊的形态发生。在毛囊周期性的生长中，Wnt10b和Wnt5a蛋白通过Wnt/β-catenin经典信号通路发挥完全相反的调控作用，前者促进毛囊生长而后者则抑制毛囊生长。大量的研究还表明Wnt/β-catenin信号通路在肝脏、肺和皮肤等器官损伤后的再生修复过程中发挥关键性作用。许多研究结果都证实Wnt/β-catenin信号通路是调控器官再生的重要信号通路，由此可以猜想：Wnt/β-catenin信号通路和毛囊片段再生必然有着密不可分的联系。为了验证我们的猜想，我们决定从毛囊片段再生过程中的Wnt/β-catenin信号通路入手，结合干细胞标记物和PCNA的时空表达和蛋白变化情况，探寻调控毛囊片段再生的真正“奥秘”，试图为器官再生研究提供新的线索和依据。　　目的：　　(1)分离生长期大鼠触须毛囊，研究大鼠触须毛囊中Wnt/β-catenin信号通路分子、毛囊干细胞标志分子、DP和DS特异性标志分子α-SMA的表达定位。　　(2)构建毛囊上段体内再生模型，研究毛囊这个迷你器官再生的新方法和机制。　　(3)揭示Wnt/β-catenin信号通路在毛囊片段再生过程中的作用，重点揭示Wnt10b和Wnt5a分子与触须毛囊上段再生的关系。　　方法：　　(1)钝性分离SD大鼠触须毛囊，然后挑选处于生长期的毛囊进行冰冻切片,HE染色观察毛囊的组织结构。用荧光免疫组化技术（IF）检测Wnt/β-catenin信号通路分子、毛囊干细胞标记分子、DP和DS特异性分子α-SMA、PCNA在毛囊中的表达模式。　　(2)构建毛囊上段再生模型：挑选生长期触须毛囊，沿毛球部上方切除毛球部，将获得的毛囊上段群体移植至裸鼠背部皮下，最后在不同时间点分别取材，HE染色观察球部再生过程中毛囊内部结构变化情况，尤其是毛囊下端的变化情况。　　(3)将大鼠触须毛囊上段移植到裸鼠皮下，动物随机分成三组：　　实验组：分别在第5、6、7、8、9、10、11、12天注射DKK1到裸鼠皮下的毛囊移植点，注射剂量为40ng/点/次。　　PBS对照组：用PBS代替实验组的DKK1，移植方法和注射方法同实验组。　　空白对照组：只进行毛囊上段移植和取材。　　(4)空白对照组移植后第5，9，15，26天分别取材，冰冻切片后，用TUNEI法检测毛囊内部细胞凋亡情况，用IF检测β-catenin、LEF1、TCF3、Wnt10b、Wnt5a等在毛囊再生过程中的表达情况。移植后第5，9，15，26天提取毛囊总蛋白，Western Blot技术检测β-catenin、TCF3、Wnt10b、Wnt5a、CK15、CD34和PCNA的蛋白表达水平。　　(5) PBS对照组和实验组移植后第5，9，15，26天分别取材，制作石蜡切片，HE染色观察两组毛囊再生情况，比较移植后第26天两组毛囊再生率。提取移植后第9天两组毛囊总蛋白，Western Blot检测并比较两组毛囊中相关分子的蛋白表达水平。　　结果：　　(1)大鼠触须毛囊体积较大，肉眼易于分辨，镜下特征明显：一般包含两根毛发，毛干（hair shaft）和杵状毛（club shaft）。生长期毛囊内部Wnt/β-catenin信号通路异常活跃，Wnt10b、Wnt5a、β-catenin、LEF1、TCF3、CK15、CD34、α-SMA和PCNA均广泛地表达于整个毛囊的各个部位。　　(2)毛囊上段移植后第5天,ORS细胞大量增殖并填充了拔除毛发遗留的空腔，并且有部

关键词：毛囊结构再生模型负性调节时空表达免疫组织化学法

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一种传染病再生模型构建方法

一种传染病再生模型构建方法

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作者：王晓雯邱箫仪韩瑜牛瑾周晓芳 650022 云南省昆明市西山区东寺街158号

本发明提供了一种传染病再生模型构建方法，属于传染病预测技术领域，该传染病再生模型构建方法包括以下步骤：选取传染病暴发地点，收集传染病病例数据；依据所述收集传染病病例数据，设定或计算R0所需的新发传染病病例的代际时间分布... 详细信息

标准号: CN116013539A

本发明提供了一种传染病再生模型构建方法，属于传染病预测技术领域，该传染病再生模型构建方法包括以下步骤：选取传染病暴发地点，收集传染病病例数据；依据所述收集传染病病例数据，设定或计算R₀所需的新发传染病病例的代际时间分布；根据新发传染病病例的代际时间分布计算R₀；绘制代际时间分布图；依据所述收集传染病病例数据，设定或计算R_t所需的新发传染病的代际时间分布；根据新发病例的代际时间分布计算R_t；绘制流行曲线图；依据所述基本再生系数R₀和所述有效再生系数R_t构建传染病再生模型；本发明能够解决不能对传染病的再生情况进行快速高效计算，造成模型的搭建效率和准确度的降低的问题。

关键词：传染病时间分布病例数据再生模型构建再生系数绘制时间分布图准确度高效计算预测技术再生

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大鼠无细胞原位牙髓再生模型构建方法

大鼠无细胞原位牙髓再生模型构建方法

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作者：轩昆郭皓刘安琪范思远郭晓贺黄晓瑶刘培胜 710032 陕西省西安市新城区长乐西路169号

本发明涉及无细胞牙髓再生大鼠模型技术领域，尤其涉及一种大鼠无细胞原位牙髓再生模型构建方法，包括：步骤1：以实验室已经去除牙髓后的大鼠作为试验对象，3日后，将大鼠分为实验组和对照组，分别用15和20号K锉清理预备根管，0.25％... 详细信息

标准号: CN117016480A

本发明涉及无细胞牙髓再生大鼠模型技术领域，尤其涉及一种大鼠无细胞原位牙髓再生模型构建方法，包括：步骤1：以实验室已经去除牙髓后的大鼠作为试验对象，3日后，将大鼠分为实验组和对照组，分别用15和20号K锉清理预备根管，0.25％次氯酸钠及生理盐水交替冲洗，吸潮纸尖干燥根管；步骤2：实验组空根管内注射前提制备的预冷的SHED‑EVs凝胶；对照组注射等量的SHED‑EVs的空白凝胶，隔湿静置10min，待凝胶变胶状后，iRootBP封闭开髓孔；步骤3：大鼠苏醒后常规条件下饲养4周，按150mg/kg标准腹腔注射过量麻药处死大鼠，收集右侧上颌骨，4％多聚甲醛固定24h，17％EDTA脱钙液每日换液，脱钙4周，石蜡包埋后切片。

关键词：大鼠牙髓实验组无细胞根管凝胶注射多聚甲醛固定常规条件次氯酸钠大鼠模型腹腔注射空白凝胶生理盐水石蜡包埋试验对象吸潮纸尖再生模型干燥根上颌骨脱钙液麻药切片等量隔湿构建换液胶状去除脱钙预冷制备冲洗苏醒过量预备饲养再生封闭

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特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型及其构建方法

特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型及其构建方法

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作者：李礼赵方莹逯亚芳贺蒋勇崔念飞李智繁 215124 江苏省中国(江苏)自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区华池街88号2幢1007室

本发明涉及疾病动物模型技术领域，具体涉及特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型及其构建方法。特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型的构建方法，包括以下依次进行的步骤：培养转基因斑马鱼的受精卵获得待处理幼鱼；所述转基因斑马鱼用... 详细信息

标准号: CN114717262B

本发明涉及疾病动物模型技术领域，具体涉及特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型及其构建方法。特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型的构建方法，包括以下依次进行的步骤：培养转基因斑马鱼的受精卵获得待处理幼鱼；所述转基因斑马鱼用于表达硝基还原酶，所述硝基还原酶的基因的表达受coro1a基因的启动子调控；使用2mM甲硝唑处理待处理幼鱼，获得甲硝唑处理后幼鱼；清洗所述甲硝唑处理后幼鱼，获得所述特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型。本方案解决了现有技术中缺少用于淋巴细胞再生和免疫系统恢复研究的胸腺损伤模型动物模型的技术问题，为获得性免疫系统发生损伤下，免疫系统恢复情况研究以及相关药物筛选创造了条件。

关键词：幼鱼胸腺淋巴细胞再生模型损伤甲硝唑免疫系统恢复硝基还原酶构建淋巴细胞获得性免疫系统疾病动物模型转基因斑马鱼培养转基因启动子调控动物模型方案解决损伤模型药物筛选受精卵斑马鱼基因胸腺清洗再生研究

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大鼠心尖切除诱导心肌再生模型的建立方法

大鼠心尖切除诱导心肌再生模型的建立方法

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作者：肖俊杰李进沙钊孟祥民 200444 上海市宝山区上大路99号

本发明涉及一种大鼠心尖切除诱导心肌再生模型的建立方法，目的在于提供一种可重复的新生大鼠心尖切除术，对切除心尖大小达到可定量控制的目的。以出生后1天新生大鼠为实验对象，对现有心尖切除术进行改良。手术过程中和手术后通过对... 详细信息

标准号: CN109998726A

本发明涉及一种大鼠心尖切除诱导心肌再生模型的建立方法，目的在于提供一种可重复的新生大鼠心尖切除术，对切除心尖大小达到可定量控制的目的。以出生后1天新生大鼠为实验对象，对现有心尖切除术进行改良。手术过程中和手术后通过对小鼠切除心尖体积进行定量，已达到手术稳定性和均一性。

关键词：切除新生大鼠切除术定量控制实验对象手术过程再生模型均一性可重复手术后大鼠小鼠心肌诱导中和改良

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特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型及其构建方法

特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型及其构建方法

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作者：李礼赵方莹逯亚芳贺蒋勇崔念飞李智繁 215124 江苏省中国(江苏)自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区华池街88号2幢1007室

标准号: CN114717262A

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一种免疫系统作用下的骨骼肌再生模型建模的方法

一种免疫系统作用下的骨骼肌再生模型建模的方法

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作者：王沫楠洪典 150080 黑龙江省哈尔滨市南岗区学府路52号

本发明提供了一种免疫系统作用下的骨骼肌再生模型建模的方法，其步骤为：步骤一：基于骨骼肌再生常微分方程建立骨骼肌再生数学模型；步骤二：基于免疫系统及其分泌因子对肌肉细胞的调控作用，建立免疫系统作用下的骨骼肌再生模型。本... 详细信息

标准号: CN114863990A

本发明提供了一种免疫系统作用下的骨骼肌再生模型建模的方法，其步骤为：步骤一：基于骨骼肌再生常微分方程建立骨骼肌再生数学模型；步骤二：基于免疫系统及其分泌因子对肌肉细胞的调控作用，建立免疫系统作用下的骨骼肌再生模型。本发明基于人体内免疫和肌肉细胞之间的互相作用为骨骼肌再生的复杂过程提供了一种数学描述，对研究骨骼肌再生机理和治疗骨骼肌损伤有理论指导作用。

关键词：骨骼肌免疫系统作用肌肉细胞再生模型再生常微分方程骨骼肌损伤调控作用复杂过程互相作用理论指导免疫系统数学描述数学模型体内免疫再生机理分泌建模治疗研究

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蛋白质组学技术在肝脏再生研究中的应用

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军事医学科学院院刊 2004年第6期28卷 572-574页

作者：孙言伟姜颖贺福初军事医学科学院放射医学研究所北京100850

肝脏在遭受部分切除或毒素损伤后 ,具有极强的再生能力 ,其本质在于残余肝细胞重新进行有丝分裂增殖。再生过程中肝细胞增殖受到多种血源性因子和胞内信号分子的调节和控制。研究人员通过建立动物肝脏再生模型和肝细胞原代培养模型 ,逐... 详细信息

肝脏在遭受部分切除或毒素损伤后 ,具有极强的再生能力 ,其本质在于残余肝细胞重新进行有丝分裂增殖。再生过程中肝细胞增殖受到多种血源性因子和胞内信号分子的调节和控制。研究人员通过建立动物肝脏再生模型和肝细胞原代培养模型 ,逐渐发现多种效应因子。鉴于肝脏再生机制的复杂性 ,新兴的蛋白质组学技术成为研究肝脏再生的首选技术。

关键词：肝脏再生生长物质再生模型蛋白质组学

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引导性骨再生系列研究(三)

引导性骨再生系列研究(三)

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作者：张浩解放军总医院(北京301医院)&军医进修学院

学位级别：博士

该实验应用X-线、非脱钙骨组织切片、骨形态计量学方法、电镜等手段研究了引导性骨再生模型中各成骨过程的再生细胞的来源、骨再生的方式,并研究去除外骨膜和骨髓对膜管内和膜管外两种成骨过程的影响.从而对引导性骨再生模型的本质有更... 详细信息

该实验应用X-线、非脱钙骨组织切片、骨形态计量学方法、电镜等手段研究了引导性骨再生模型中各成骨过程的再生细胞的来源、骨再生的方式,并研究去除外骨膜和骨髓对膜管内和膜管外两种成骨过程的影响.从而对引导性骨再生模型的本质有更深的认识.

关键词：引导性骨再生再生模型引导性组织再生骨修复骨再生

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MiR-34a在大鼠肝脏再生终止阶段的作用及机制研究

MiR-34a在大鼠肝脏再生终止阶段的作用及机制研究

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作者：董瑞奇第二军医大学

学位级别：硕士

人和动物的肝脏具有很强的再生能力。大鼠的肝脏在70％切除(PHx)后，可启动再生反应，在7—10天内基本恢复原有的体积和体质量，这个过程叫做肝再生。肝再生的过程可以分为三个时期：启动期、再生期和终止期。肝再生过程受到很多种复杂... 详细信息

人和动物的肝脏具有很强的再生能力。大鼠的肝脏在70％切除(PHx)后，可启动再生反应，在7—10天内基本恢复原有的体积和体质量，这个过程叫做肝再生。肝再生的过程可以分为三个时期：启动期、再生期和终止期。肝再生过程受到很多种复杂因素的精密调控，包括各种生长因子、细胞因子和激素等。肝脏再生与肝癌都表现为肝细胞极强的增殖能力，但两者有明显区别：肝癌具有无限细胞分裂和增殖能力，缺乏终止机制，而肝再生具有自动终止机制。长期以来，肝再生研究主要集中在肝脏再生启动和增殖阶段相关正调信号，而对肝脏再生终止、肝脏组织重塑和肝脏大小精确调控等负调信号及其分子机制的研究和认识很少。因此，研究肝再生的负调机制，找出各种调控分子的变化规律和相应的分子机制，不仅有助于对肝再生的进一步认识，对肝癌病理机制的认识和治疗靶点的探索等也具有积极意义。　　 microRNA(miRNA，miR)是长度为22—25nt的单链短序列非编码RNA，它可以与靶mRNA的3'非编码区的特定部位结合使得翻译抑制或mRNA降解，属于转录后负性调控。它参与了动植物发育、细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡和肿瘤发生等重要生理和病理过程。研究证明miRNAs通过下调不同癌基因或抑癌基因，而发挥抑癌基因或癌基因的作用。因此，有理由认为这些对细胞增殖具有正调或负调作用的miRNAs可能是肝再生复杂调控网络中的重要部分。但至今有关miRNAs与肝脏再生研究还很少，几个研究只限于肝脏再生启动和增殖阶段，还没肝再生终止相关的miRNAs研究报道。　　为此，本课题采用miRNAs芯片筛选大鼠肝再生后期(PHx后5d)miRNAs差异表达谱，并对显著表达差异miRNAs检索targetscan数据库和MAS软件分析获得受此miRNAs调节的相应靶基因;进一步利用大鼠肝脏再生模型和肝细胞系，以及荧光素酶报告基因分析和基因干预技术等来探讨miRNA在肝再生终止中作用及可能机制。　　结果：　　 ***芯片筛选和验证　　大鼠肝再生后期(PHx后5d)miRNAs差异表达miRNAs共10条(下调2条，上调8条)，其中表达差异达2倍以上的只有miR—34a，其上调幅度达5．6倍。在肿瘤研究中证实miR—34a是肿瘤抑制因子，它通过负调细胞周期蛋白、凋亡抑制因子和细胞增殖信号分子导致细胞周期终止、细胞凋亡和衰老。我们通过检索targetscan数据库和MAS软件分析，获得mir—34a的靶基因，这些靶基因与细胞周期、细胞凋亡，以及与TGF—β和HGF/c—Met通路相关的靶基因miR—34a。这初步表明mir—34a可能与肝脏再生终止密切相关。我们首先选择了INHBB(Inhibin B，主要拮抗同族的Activin A和BMP，削弱TGF—β通路信号[23])和c—Met(HGF受体，HGF/c—Met通路在肝脏再生中具有重要作用)两个靶基因，在大鼠肝再生模型和细胞水平上进一步验证了INHBB和c—Met与miR—34a关系。　　 ***—34a、INHBB和c—Met在大鼠肝脏再生中的表达　　 miR—34a在大鼠肝脏再生全程的表达规律：PHx后3d时miR—34a显著上调，5d时表达最高，是对照组的6倍以上，9d时基本恢复到正常水平。　　 PHx后5d时INHBB和c—Met的mRNA水平和蛋白质水平均显著下降，呈现与miR—34a反相表达。该结果提示INHBB和c—Met在肝再生过程中可能受miR—34a调节。　　 ***—34a对肝细胞系(BRL—3A)生物学功能及靶基因的影响　　用miR—34a的mimics转染大鼠肝细胞BRL—3A后，用MTT法来检测miR—34a对大鼠肝脏细胞增殖调控的影响，在4天时可观察到miR—34a对BRL—3A细胞的增殖抑制作用，6天时抑制作用达到最高水平。实验结果证明了miR—34a可以抑制大鼠正常肝细胞增殖。随后，用miR—34a的mimics转染大鼠肝细胞BRL—3A后48h，流式细胞术检测细胞凋亡和周期的变化情况，发现处理后细胞滞留在G2期，miR—34a组G2期细胞比例为(23．144±4．26)％，对照组(NC)为(8．484±2．93)％，同时出现明显的凋亡峰。这表明miR—34a有明显负调肝细胞功能。　　用miR—34a mimics转染大鼠正常肝细胞BRL—3A，检测miR—34a对靶基因的调控。结果证明，miR—34a可以负调MET和INHBB的水平。　　 ***—34a负调INHBB表达　　虽然c—Met在HeLa细胞和HepG2细胞中已证实为miR—34a的靶基因(He et al．2007;Li et al．2009)。而miR—34a是否直接调节INHBB还没有实验验证，所以我们首先选择

关键词：肝再生 miR-34a负调再生模型细胞凋亡 miRNAs芯片基因表达肝癌

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