检索结果-内蒙古大学图书馆

中华预防医学杂志 1999年第1期33卷 34-36页

作者：钱锋管惟滨方军蒋春雷上海市第二军医大学寄生虫学教研室

目的检测含恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１基因片断的重组减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）的入侵宿主能力，所含质粒的稳定性和再表达能力。方法用含恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１第１号基因片段的重组减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐ... 详细信息

目的检测含恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１基因片断的重组减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）的入侵宿主能力，所含质粒的稳定性和再表达能力。方法用含恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１第１号基因片段的重组减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）灌胃接种ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用平板培养法、质粒酶切和免疫印迹反应，鉴定从小鼠组织中分离到的该重组菌，测定其表达能力，及在小鼠组织中的消长。结果从小鼠组织中分离到的减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４株含有重组的ｐＱＥＭ１质粒；减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）体外表达了恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１第１号片断；Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）在小鼠组织中的消长曲线与Ｘ４０６４的消长曲线基本一致。结论重组ｐＱＥＭ１质粒能稳定地存在于减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４株中，不妨碍其入侵宿主细胞，从小鼠组织中分离到的Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）依然具有表达Ｍ１蛋白的能力。

关键词：疟原虫 MSP1 减毒鼠伤寒杆菌

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表达胃癌MG7-Ag模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗的研制和初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第2期18卷 138-140,143页

作者：孟繁平丁杰喻召才韩全利郭长存樊代明第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所陕西西安710032

目的　　研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗。　方法将ＮｃｏⅠ位点和ＭＧ７－Ａｇ模拟表位编码序列的互补序列设计到上游引物的５′端。以含有ＨＢｃＡｇ全序列的质粒ｐ１．２Ⅱ为模板，通过ＰＣＲ扩增，获得Ｍ... 详细信息

目的　　研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗。　方法将ＮｃｏⅠ位点和ＭＧ７－Ａｇ模拟表位编码序列的互补序列设计到上游引物的５′端。以含有ＨＢｃＡｇ全序列的质粒ｐ１．２Ⅱ为模板，通过ＰＣＲ扩增，获得ＭＧ７－Ａｇ模拟表位与ＨＢｃＡｇ的融合基因。将目的基因插入载体ｐＵＣｍ－Ｔ，经酶切鉴定和序列测定证实后，再亚克隆至与减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４５５０互补的质粒ｐＹＡ３３４１中，再以此重组质粒转化减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４５５０。结果序列测定证实，ＰＣＲ产物为胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位与ＨＢｃＡｇ的融合基因片段；最终得到含有目的基因片段的重组表达载体ｐＹＡ３３４１。重组质粒在Ｘ４５５０中的表达产物，经Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ表明，在相对分子质量（Ｍｒ）约在２２　０００处有１条可与抗ＭＧ７　ｍＡｂ特异性结合的多肽表位。结论成功地研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位减毒鼠伤寒杆菌疫苗，为进一步研究其在胃癌免疫治疗中的作用奠定了基础。

关键词：胃肿瘤模拟表位减毒鼠伤寒杆菌 MG7-Ag 胃癌疫苗研制鉴定

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表达恶性疟原虫裂殖子表面蛋白-1片段的减毒鼠伤寒杆菌的构建

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中华传染病杂志 2000年第3期18卷 186-189页

作者：钱锋管惟滨方军蒋春雷第二军医大学寄生虫学教研室上海200433

目的　检测恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1基因在减毒鼠伤寒直菌X40 6 4株中的表达。方法　将 7个克隆有恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1基因片段的表达质粒 pQEM用氯化钙法转化到修饰系统正常、限制系统缺陷的鼠伤寒杆菌LB5 0 0 0中 ,再通过... 详细信息

目的　检测恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1基因在减毒鼠伤寒直菌X40 6 4株中的表达。方法　将 7个克隆有恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1基因片段的表达质粒 pQEM用氯化钙法转化到修饰系统正常、限制系统缺陷的鼠伤寒杆菌LB5 0 0 0中 ,再通过专一性噬菌体P2 2 转导入腺苷酸环化酶基因、环腺苷酸受体基因双重突变的减毒鼠伤寒杆菌X40 6 4株中 ,用质粒酶切、Westernblot鉴定构建的重组菌株、测定重组菌株的表达。结果　成功地构建了 7个重组减毒鼠伤寒杆菌X40 6 4(pQEM )株 ,重组pQEM质粒在减毒鼠伤寒杆菌X40 6 4株中获得了表达。结论　X40 6 4(pQEM )

关键词：恶性疟原虫裂殖子表面蛋白-1 减毒鼠伤寒杆菌

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沙眼衣原体主要外膜蛋白在减毒鼠伤寒杆菌中的表达及初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2000年第4期16卷 311-313页

作者：白光春李元董辉李别虎薛莹范雄林马文煜第四军医大学微生物学教研室陕西西安710032

目的采用作为疫苗载体的减毒鼠伤寒杆菌致死性平衡系统 ,构建能异源表达沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)的重组菌株。方法以D型Ct的DNA为模板 ,用所设计的特异性引物扩增编码CtMOMP高变区(VDI～VDIV)基因 ,并将扩增产物定向克隆至质粒... 详细信息

目的采用作为疫苗载体的减毒鼠伤寒杆菌致死性平衡系统 ,构建能异源表达沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)的重组菌株。方法以D型Ct的DNA为模板 ,用所设计的特异性引物扩增编码CtMOMP高变区(VDI～VDIV)基因 ,并将扩增产物定向克隆至质粒pUC19中。序列分析后 ,再亚克隆至与减毒鼠伤寒杆菌X4550互补的质粒pYA3341中 ,以重组质粒转化减毒鼠伤寒杆菌X4550。结果对构建的重组菌以种特异性抗CtMOMP单克隆抗体(mAb)做蛋白印迹表明 ,在相对分子质量(Mr)约为33000处表达有1条带 ,表达量约占菌体总蛋白的13 %。结论成功地构建了能表达MOMP的重组菌株并获得表达。

关键词：沙眼衣原体 MOMP 减毒鼠伤寒杆菌基因表达

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幽门螺杆菌尿素酶减毒鼠伤寒杆菌疫苗诱导小鼠黏膜免疫应答的研究(英文)

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中国现代医学杂志 2004年第21期14卷 25-29页

作者：刘晓峰胡家露权启镇孙自勤王要军樊代明济南军区总医院消化科山东济南250031 第四军医大学西京医院消化科陕西西安710032

目的研究表达幽门螺杆菌(***)尿素酶B亚单位(UreB)的减毒鼠伤寒杆菌活菌重组疫苗口服免疫Balb/c小鼠后的黏膜免疫应答状况。方法将已构建成功的表达UreB的重组减毒鼠伤寒杆菌SL3261/pTC01-Ureb口服免疫Balb/c小鼠，12周后检测肠液和血... 详细信息

目的研究表达幽门螺杆菌(***)尿素酶B亚单位(UreB)的减毒鼠伤寒杆菌活菌重组疫苗口服免疫Balb/c小鼠后的黏膜免疫应答状况。方法将已构建成功的表达UreB的重组减毒鼠伤寒杆菌SL3261/pTC01-Ureb口服免疫Balb/c小鼠，12周后检测肠液和血清中的特异性抗体反应。结果疫苗组小鼠胃黏膜炎症程度的差异无统计学意义。结论表达*** UreB的减毒鼠伤寒杆菌SL3261/pTC01-UreB能够诱导小鼠产生抗***的黏膜免疫，可用作抗***感染的口服疫苗。

关键词：幽门螺杆菌减毒鼠伤寒杆菌疫苗黏膜免疫

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克隆有恶性疟原虫MSP1基因片断的pQE质粒在减毒鼠伤寒杆菌X4064株中的表达

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实用寄生虫病杂志 1998年第4期6卷 149-151页

作者：钱锋管惟滨方军蒋春雷第二军医大学寄生虫学教研室

为探讨克隆有恶性疟原虫ＭＳＰ１基因片断的重组ｐＱＥＭ１质粒在减毒鼠伤寒杆菌中的表达。使用转化和转导的方法构建减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＲＥＰ４／ｐＱＥＭ１）；通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳检测减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐ... 详细信息

为探讨克隆有恶性疟原虫ＭＳＰ１基因片断的重组ｐＱＥＭ１质粒在减毒鼠伤寒杆菌中的表达。使用转化和转导的方法构建减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＲＥＰ４／ｐＱＥＭ１）；通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳检测减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）和减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＲＥＰ４／ｐＱＥＭ１）的表达。实验结果成功地构建了减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１），Ｘ４０６４（ｐＲＥＰ４／ｐＱＥＭ１）的诱导型表达量高于Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）的组成型表达量。

关键词：恶性疟原虫 MSP1 基因片段减毒鼠伤寒杆菌克隆

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含恶性疟原虫基因片段的重组减毒鼠伤寒杆菌的免疫效果

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自然杂志 2000年第6期22卷 366-367页

作者：钱锋管惟滨方军蒋春雷第二军医大学病原生物学教研室上海200433

减毒鼠伤寒杆菌可被用作外源抗原基因经口导入宿主免疫系统的载体,能有效地激发起宿主针对该外源抗原的免疫应答反应.恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1(merozoite surfaceprotein 1,MSP1)是恶性疟原虫红内期的重要候选抗原.我们已成功地将克... 详细信息

减毒鼠伤寒杆菌可被用作外源抗原基因经口导入宿主免疫系统的载体,能有效地激发起宿主针对该外源抗原的免疫应答反应.恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1(merozoite surfaceprotein 1,MSP1)是恶性疟原虫红内期的重要候选抗原.我们已成功地将克隆有恶性疟原虫MSP1第1号基因片段(M1)的pQE质粒导入了减毒鼠伤寒杆菌x4064株中,构建成x4064(pQEM1)重组菌,测定了其在小鼠体内的稳定性.本文就X4064(pQEM1)重组菌接种小鼠后所激发的针对M1蛋白的免疫应答进行了初步的检测.

关键词：减毒鼠伤寒杆菌恶性疟原虫免疫

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灌洗液法检测幽门螺杆菌减毒鼠伤寒杆菌疫苗诱导小鼠免疫应答的实验研究

灌洗液法检测幽门螺杆菌减毒鼠伤寒杆菌疫苗诱导小鼠免疫应答的实...

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中华医学会第七次全国消化病学术会议

作者：刘晓峰孙自勤刘长江尚瑞莲济南军区总医院消化科济南军区总医院消化科济南军区总医院消化科济南军区总医院消化科

目的应用高渗灌洗液法(灌洗法)检测表达幽门螺杆菌(Hp)尿素酶 B 亚单位(ureB)的减毒鼠伤寒杆菌活菌重组疫苗口服免疫小鼠后的免疫应答状况。方法构建能表达 UreB 的重组减毒鼠伤寒杆菌 SL3261/pTC01-UreB,Western-blot 检测 UreB 的表... 详细信息

目的应用高渗灌洗液法(灌洗法)检测表达幽门螺杆菌(Hp)尿素酶 B 亚单位(ureB)的减毒鼠伤寒杆菌活菌重组疫苗口服免疫小鼠后的免疫应答状况。方法构建能表达 UreB 的重组减毒鼠伤寒杆菌 SL3261/pTC01-UreB,Western-blot 检测 UreB 的表达。将 SL3261/pTC01-UreB 口服免疫 Balb/c 小鼠,

关键词：减毒鼠伤寒杆菌免疫应答灌洗液幽门螺杆菌

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表达疟原虫裂殖子表面蛋白1减毒鼠伤寒杆菌的稳定性

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第二军医大学学报 1999年第4期20卷 252-252页

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沙眼衣原体重组口服活疫苗的构建及其免疫学特性的初步研究

沙眼衣原体重组口服活疫苗的构建及其免疫学特性的初步研究

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作者：白光春第四军医大学

学位级别：博士

沙眼衣原体(Ct)既是感染致盲的主要病原体，又是性传播疾病最常见的病原体之一，目前仍无有效疫苗。Ct疫苗研制存在的主要问题有：①灭活疫苗、亚单位疫苗及合成肽疫苗不能有效刺激机体产生特异性粘膜免疫；②疫苗诱发的特异性IgG在体... 详细信息

沙眼衣原体(Ct)既是感染致盲的主要病原体，又是性传播疾病最常见的病原体之一，目前仍无有效疫苗。Ct疫苗研制存在的主要问题有：①灭活疫苗、亚单位疫苗及合成肽疫苗不能有效刺激机体产生特异性粘膜免疫；②疫苗诱发的特异性IgG在体外往往具有较好的中和活性，体内实验却对Ct感染的保护性较差；③抗原在体内维持时间较短，不能有效预防Ct的感染。减毒沙门氏菌不仅被用于预防沙门氏菌的感染，还可以作为异源抗原的载体，构建成能表达其它病原体保护性抗原的活疫苗，通过口服形成自限性感染，在免疫动物或人体内稳定、高效表达外源抗原，获得相应粘膜免疫、体液免疫和细胞免疫。该类疫苗具有安全、高效、简便和经济等优点。Ct主要外膜蛋白(MOMP)是对Ct感染保护性较好的靶抗原，其编码基因(momp)序列明确，将momp通过与减毒沙门氏菌重组诱发特异性粘膜免疫有可能成为预防Ct感染的有效途径之一。本研究以D型Ct的DNA为模板，用所设计的特异性引物扩增编码Ct MOMP高变区(VDⅠ～VDⅣ)基因，将扩增产物定向克隆至质粒

关键词：沙眼衣原体减毒鼠伤寒杆菌重组疫苗口服疫苗活疫苗

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