检索结果-内蒙古大学图书馆

减毒鼠伤寒沙门氏菌运送的鸡传染性支气管炎病毒s1基因DNA疫苗及其免疫效力研究

病毒学报 2007年第3期23卷 212-217页

作者：焦红梅焦新安田华荣潘志明殷月兰崔一晨黄金林扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

为研制鸡传染性支气管炎新型基因工程疫苗,构建和表达了运送鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。首先将鸡传染性支气管炎病毒M41株的全长s1基因插入到嵌合CpG DNA的真核表达质粒pVAX1中,构建出重组真核表达质粒... 详细信息

为研制鸡传染性支气管炎新型基因工程疫苗,构建和表达了运送鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。首先将鸡传染性支气管炎病毒M41株的全长s1基因插入到嵌合CpG DNA的真核表达质粒pVAX1中,构建出重组真核表达质粒pVAX1-S1-CpG。然后将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建出运送DNA疫苗的重组减毒沙门氏菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)。将重组菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)分别以1×109CFU,5×109CFU,1×1010CFU的剂量滴鼻和口服接种4日龄雏鸡,2周内所有试验鸡均无任何不良反应,试验结果表明重组菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)具有良好的安全性。在免疫后35 d,商品鸡体重测定结果表明重组菌免疫不影响鸡体增重。以5×109CFU重组菌滴鼻和口服两次接种4日龄商品代伊莎褐蛋鸡,二免3周后,血清抗体和小肠黏膜抗体测定结果表明,SL7207(pVAX1-S1-CpG)免疫组抗体水平与空白对照组、空载体对照组之间分别存在极显著性差异(P<0.01)。攻毒试验结果表明,重组菌SL7207(pVAX1-S1-CpG)免疫组有较高的免疫保护效力,与灭活苗和减毒苗效力相当,显示出一定的应用前景。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 DNA疫苗 CpGDNA 减毒鼠伤寒沙门氏菌安全性免疫效力

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

减毒鼠伤寒沙门氏菌防龋疫苗的实验研究

减毒鼠伤寒沙门氏菌防龋疫苗的实验研究

引用

作者：陈罕中山医科大学中山大学

学位级别：博士

龋病是一种多因素作用的细菌感染性疾病.变形链球菌被认为是主要致龋病原菌之一.变形球菌表面有多种膜相关蛋白,其中有一种分子量190 KDa细胞表面蛋白质抗原被称表面蛋白PAc.已有的研究表明PAc介导变形链球菌与牙表面唾液获得膜成份之... 详细信息

龋病是一种多因素作用的细菌感染性疾病.变形链球菌被认为是主要致龋病原菌之一.变形球菌表面有多种膜相关蛋白,其中有一种分子量190 KDa细胞表面蛋白质抗原被称表面蛋白PAc.已有的研究表明PAc介导变形链球菌与牙表面唾液获得膜成份之间的粘附,是变形链球菌的毒力因子之一.PAc具有免疫原性,可诱导机体产生相应的特异性IgG和IgA抗体.抗PAc抗体特别是分泌型IgA(secretory immunoglobulin A,SIgA)抗体能对机体产生保护作用,降低龋病的发生.因此,PAc作为龋病疫苗的重要候选抗原得到了广泛的研究.这些研究包括:不同的免疫途径的研究,抗原有效基团的确定,抗原可能的毒副作用等.目的:采用分子生物学技术和免疫学研究方法,拟构建携带变形链球菌PAc A区片段的减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,***)防龋活疫苗,进行BALB/c鼠口服免疫研究,为龋病疫苗的进一步研究提供实验基础.结论:①构建了含质pET-17b/A的*** SL 3261 (pET-17b/A).②*** SL3261(pET-17b/A)中有PAc免疫有效成份的表达.③*** SL3261(pET-17b/A)口服后有效刺激抗PAc IgG、IgA抗体水平的升高.④*** SL3261(pET-17b/A)和*** BRD 509(pUAB024)能在鼠肠道中定居.

关键词：龋病疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌变形链球菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的抗原递呈系统在肿瘤治疗性口服DNA疫苗及蛋白质疫苗制备中的应用

减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的抗原递呈系统在肿瘤治疗性口服DNA疫苗...

引用

作者：朱向莹复旦大学

学位级别：博士

治疗性疫苗能够打破免疫耐受并引起针对癌症细胞的长时程免疫反应,由于疫苗给药途径与构建有效的抗原递呈系统是疫苗制备需要解决的关键性问题。减毒鼠伤寒沙门氏菌作为癌症疫苗的载体能够将DNA从原核细胞传递至真核细胞,并且能够选择... 详细信息

治疗性疫苗能够打破免疫耐受并引起针对癌症细胞的长时程免疫反应,由于疫苗给药途径与构建有效的抗原递呈系统是疫苗制备需要解决的关键性问题。减毒鼠伤寒沙门氏菌作为癌症疫苗的载体能够将DNA从原核细胞传递至真核细胞,并且能够选择性积聚在肿瘤组织。热休克蛋白70能够通过其多肽结合结构域与抗原结合并与抗原递呈细胞表面的Hsp70受体作用,将抗原传递至抗原递呈细胞。本论文的第一部分,我们构建了一种新型的低拷贝DNA疫苗,该疫苗基于Hsp70-TAA复合物构建,并由减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261菌株作为载体将DNA运送至小鼠体内。口服该重组细菌疫苗能够诱发针对黑色素肿瘤细胞的CTL细胞毒性细胞杀伤作用并显著激活T细胞反应。在肿瘤预防实验组C57BL/6J小鼠模型中,该治疗性口服疫苗能够诱发57.1%的肿瘤预防免疫反应,在肿瘤治疗组中,该疫苗能够完全消除62.5%的C57BL/6J小鼠中B16F10肿瘤的生长,显著延长小鼠的生存期。口服减毒沙门氏菌疫苗载体通常定位在吞噬性细胞中,限制了其所携带的抗原蛋白进入抗原递呈途径,论文的第二部分我们利用沙门氏菌Ⅲ型分泌系统对蛋白质的转运功能来克服这种限制。Ⅲ型分泌蛋白能够将沙门氏菌编码的抗原蛋白直接运送至抗原递呈细胞胞质。抗原递呈细胞表面存在Hsp70的特异性受体,故Hsp70能够以Hsp70-TAA复合物的形式向APC细胞递呈抗原。本研究利用Ⅲ型分泌系统来实现对Hsp70-TRP2融合抗原蛋白的转运和递呈。口服该重组细菌疫苗能够实现对肿瘤特异性抗原的有效递呈,打破免疫耐受,诱导产生肿瘤细胞特异性的CTL反应和NK细胞杀伤作用,并在C57BL/6J小鼠上建立的B16F10黑色素肿瘤模型中获得了75%的肿瘤预防效果和62.5%的治疗效果。我们设计了以减毒鼠伤寒沙门氏菌作为肿瘤DNA疫苗及蛋白疫苗的传递工具的两套抗原递呈系统,为肿瘤的预防和治疗提供了有效的新方法。

关键词：治疗性疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌口服抗原递呈平台低拷贝DNA疫苗沙门氏菌Ⅲ型分泌系统黑色素肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的斯氏艾美耳球虫DNA疫苗研究

减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的斯氏艾美耳球虫DNA疫苗研究

引用

作者：孟庆玲甘肃农业大学

学位级别：博士

兔球虫病是由艾美耳科的球虫引起的一种寄生性原虫病,随着规模养兔的迅速发展,该病对我国养兔业的危害日益严重。目前,报道的感染家兔的艾美耳属球虫有15个种,其中斯氏艾美耳球虫(Eimeria stiedai,Es)的致病力最强、危害最大,它寄生于... 详细信息

兔球虫病是由艾美耳科的球虫引起的一种寄生性原虫病,随着规模养兔的迅速发展,该病对我国养兔业的危害日益严重。目前,报道的感染家兔的艾美耳属球虫有15个种,其中斯氏艾美耳球虫(Eimeria stiedai,Es)的致病力最强、危害最大,它寄生于兔的肝胆管上皮细胞,能引起严重的肝球虫病。尽管化学药物是目前控制兔球虫病的常用手段,但随着耐药虫株的不断出现和化学药物残留问题的日益凸现,越来越多的学者寻求用免疫学方法来防控该病。本研究应用无球虫兔和单卵囊分离技术进行了Es LZ株的分离,运用RT-PCR技术成功扩增出Es LZ株微线蛋白5(MIC-5)基因,并进行了原核表达和纯化;克隆了兔IL-15基因;以含有双启动子的pBudCE4.1为载体,构建了真核表达质粒pBMIC-5-IL-15,通过脂质体转染BHK-21细胞,证实该真核表达质粒能正确表达重组蛋白Es MIC-5和IL-15。在上述研究的基础上,根据载体-宿主平衡致死系统的原理,将asd基因引入真核表达质粒pBMIC-5-IL-15中,相继电转化asd基因缺陷型减毒鼠伤寒沙门氏菌X3730和X4550,从而构建了pBMIC-5-IL-15-asd载体-沙门氏菌平衡致死系统。遗传稳定性试验表明,该载体能稳定存在于减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550中。用携带重组质粒pBMIC-5-IL-15-asd的减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550在无球虫兔上进行了免疫试验。结果表明,重组菌X4550/pBMIC-5-IL-15-asd能诱导机体产生较高水平的抗球虫细胞免疫应答和体液免疫应答,有较好的免疫保护作用。以上试验为兔肝球虫病口服疫苗的研制奠定了基础。

关键词：斯氏艾美耳球虫微线蛋白5 DNA疫苗平衡致死系统减毒鼠伤寒沙门氏菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的多肽肿瘤靶向成像

减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的多肽肿瘤靶向成像

引用

作者：熊赛赛苏州大学

学位级别：硕士

癌症（恶性肿瘤）是当今世界上威胁人类健康的主要因素之一。手术治疗、放射治疗、化学药物治疗和中医治疗等手段常常被应用于肿瘤的临床治疗,这些手段虽然一定程度上满足了人们对于癌症治疗的需求,但是由于癌症的难以早期发现、难以根... 详细信息

癌症（恶性肿瘤）是当今世界上威胁人类健康的主要因素之一。手术治疗、放射治疗、化学药物治疗和中医治疗等手段常常被应用于肿瘤的临床治疗,这些手段虽然一定程度上满足了人们对于癌症治疗的需求,但是由于癌症的难以早期发现、难以根治,导致人们至今依旧“谈癌色变”。癌症难以治愈的根源大部分是由于癌症难以早发现。如果在癌症发病早期就能快速对其做出诊断,癌症的治愈率将会大幅提高。因此,开发一种恶性肿瘤的早期诊断方法显得尤为重要。近年来,随着生物医学工程技术的不断发展,生物材料以及生物学方法被广泛地应用于肿瘤的诊断和治疗。本硕士论文在前人关于部分细菌可以在肿瘤乏氧微环境中特异性增殖的研究基础上,创新性地提出利用抗菌肽标记荧光染料Cy5.5或放射性核素125I联合细菌进行肿瘤早期诊断的策略。本论文选用减毒鼠伤寒沙门氏菌作为靶向肿瘤的细菌,之后将具有靶向减毒鼠伤寒沙门氏菌能力的抗菌肽Ubiquicidine（UBI）标记上荧光染料Cy5.5或者放射性核素碘-125,利用显像剂标记的抗菌肽UBI对肿瘤进行荧光及核素双模态成像。本论文主要研究内容如下:第一章:简要阐述了当前肿瘤成像的主要技术,细菌在肿瘤治疗中的应用并着重阐述了减毒鼠伤寒沙门氏菌的抗肿瘤机制,抗菌肽的抗菌生物学机制以及抗菌肽UBI的研究进展,并简要介绍了本论文的选题依据和研究策略。第二章:抗菌肽UBI体外靶向减毒鼠伤寒沙门氏菌的研究。采用酰胺化反应原理,将抗菌肽UBI和荧光染料Cy5.5偶联获得Cy5.5-UBI,之后通过SephadexTMG-25M葡聚糖凝胶柱纯化获取纯化后的Cy5.5-UBI溶液,并进行一系列表征和分析。将Cy5.5-UBI溶液与减毒鼠伤寒沙门氏菌体外共培养。研究发现,与单独的荧光染料相比,抗菌肽UBI具有很强的减毒鼠伤寒沙门氏菌的靶向能力。此外,通过Iodogen氧化法,将放射性125I标记到抗菌肽UBI上获得125I-UBI溶液,同样通过Sephadex TMG-25M葡聚糖凝胶柱萃取获得纯化后的125I-UBI溶液并进行表征和分析。第三章:减毒鼠伤寒沙门氏菌靶向肿瘤部位的研究。将减毒鼠伤寒沙门氏菌通过尾静脉注入荷瘤小鼠,通过减毒鼠伤寒沙门氏菌体内生物发光成像以及组织切片革兰氏染色实验探究了其对肿瘤组织的靶向能力。此外,采用细菌涂板实验以及组织切片H&E染色实验探究了减毒鼠伤寒沙门氏菌在Balb/c小白鼠体内的毒性。第四章:减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的抗菌肽UBI活体成像研究。在上述减毒鼠伤寒沙门氏菌靶向肿瘤乏氧微环境以及抗菌肽UBI靶向减毒鼠伤寒沙门氏菌实验的基础上,我们在4T1（小鼠乳腺癌）和CT26（小鼠结肠癌）荷瘤小鼠模型上,进行抗菌肽UBI联合减毒鼠伤寒沙门氏菌的活体荧光成像以及4T1荷瘤小鼠模型上的125I放射性核素SPECT成像,实现了对肿瘤的多模态成像。总而言之,我们提出了使用荧光染料或放射性同位素标记的抗菌肽UBI联合减毒鼠伤寒沙门氏菌进行肿瘤靶向成像的策略。具有兼性厌氧特性的减毒鼠伤寒沙门氏菌在静脉注射后可以在肿瘤部位特异性增殖,而在正常组织中不增殖。抗菌肽UBI无论在体外还是体内都具有靶向减毒鼠伤寒沙门氏菌的能力。利用荧光染料Cy5.5或者放射性核素125I标记抗菌肽UBI联合减毒鼠伤寒沙门氏菌进行肿瘤成像。在两个独立的肿瘤模型上,体内荧光成像和SPECT/CT成像显示,荧光染料Cy5.5或放射性核素125I标记的抗菌肽UBI可以特异性靶向减毒鼠伤寒沙门氏菌感染的肿瘤,实现了对肿瘤区域的多模态成像。因此,这种策略（细菌介导的肿瘤靶向）可以进一步提高对肿瘤早期诊断的灵敏度。我们希望将来这一策略可以进一步扩展到临床癌症治疗,为广大癌症患者带来好消息。

关键词：减毒鼠伤寒沙门氏菌抗菌肽荧光成像核素成像肿瘤靶向

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

减毒鼠伤寒沙门氏菌影响日本血吸虫感染小鼠代谢组的NMR研究

减毒鼠伤寒沙门氏菌影响日本血吸虫感染小鼠代谢组的NMR研究

引用

作者：陈璐中国科学院研究生院（武汉物理与数学研究所）

学位级别：硕士

血吸虫病是一种全球性的人兽共患寄生虫病,能够造成宿主的发热、消瘦、贫血,甚至死亡。因此,安全、有效的血吸虫病疫苗的研制已成为目前抗血吸虫病研究中的热点,未来也可能成为血吸虫病防治的根本途径。鼠伤寒沙门氏菌属于胞内侵袭性兼... 详细信息

血吸虫病是一种全球性的人兽共患寄生虫病,能够造成宿主的发热、消瘦、贫血,甚至死亡。因此,安全、有效的血吸虫病疫苗的研制已成为目前抗血吸虫病研究中的热点,未来也可能成为血吸虫病防治的根本途径。鼠伤寒沙门氏菌属于胞内侵袭性兼性厌氧菌,减毒后的鼠伤寒沙门氏菌安全性大大提高,已被广泛用于病毒、细菌及寄生虫疫苗的研制。但是目前还没有研究利用代谢组学方法来系统分析小鼠口服减毒鼠伤寒沙门氏菌后的代谢改变,更不了解减毒鼠伤寒沙门氏菌与日本血吸虫共同作用后机体代谢物的变化规律及特点。鉴于上述,本论文运用核磁共振(NMR)检测与多变量数据分析相结合的代谢组学研究方法,开展了减毒鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠的代谢组学研究和减毒鼠伤寒沙门氏菌对日本血吸虫感染小鼠代谢组的影响两方面的研究工作。首先,本论文通过建立减毒鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠的实验动物模型,并应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和基于NMR的代谢组学方法,综合分析了小鼠口服减毒鼠伤寒沙门氏菌11周后产生的免疫效应以及血样、尿样、肝脏和脾脏的代谢组变化。ELISA检测结果显示,小鼠口服减毒鼠伤寒沙门氏菌后,血浆中细胞因子γ干扰素(IFN-γ)水平明显升高,提示机体辅助性T细胞(Th)1型细胞免疫效应增强。此外,机体发生的代谢应答主要表现为糖异生的促进、氨基酸水平的改变、脂肪酸β-氧化的增强、胆碱类物质合成的增多、核苷酸代谢的异常以及肠道菌群功能的活化,这些代谢物质的变化表明减毒鼠伤寒沙门氏菌能够引起小鼠体内持久的代谢应答。其次,为了探寻减毒鼠伤寒沙门氏菌对日本血吸虫感染小鼠代谢组的影响,本研究在小鼠口服减毒鼠伤寒沙门氏菌免疫后,再使其经皮下感染60条日本血吸虫尾蚴。感染后第5周,对小鼠体内的日本血吸虫成虫数进行统计,并观察减毒鼠伤寒沙门氏菌与日本血吸虫共同作用所引发的小鼠体内代谢物质的变化规律及特点。研究结果发现,减毒鼠伤寒沙门氏菌与日本血吸虫先后感染小鼠后,能够有效刺激机体免疫效应的增强,并表现为日本血吸虫虫负荷的显著性降低。共感染后小鼠代谢组变化主要表现为日本血吸虫感染为主导的代谢改变,即引发了宿主体内氨基酸的蓄积、肝糖原和葡萄糖含量的暂时性升高、糖酵解的促进、三羧酸循环的抑制、脂代谢的异常、胆碱类物质合成受阻、核苷酸代谢的异常以及肠道菌群功能的紊乱。综上所述,本论文有助于进一步了解宿主-多病原体相互作用的机制,并为以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的寄生虫疫苗的研制提供代谢组学基础数据。

关键词：代谢组学减毒鼠伤寒沙门氏菌日本血吸虫 NMR 免疫

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

减毒鼠伤寒沙门氏菌与IFN-γ联合治疗对结肠癌的影响研究

减毒鼠伤寒沙门氏菌与IFN-γ联合治疗对结肠癌的影响研究

引用

作者：徐惠敏海南大学

学位级别：硕士

干扰素-γ（Interferon-gamma,简称IFN-γ）是II型干扰素的唯一成员,是一种具有广谱抗病毒作用的糖蛋白,还具有高效免疫调节、治疗癌症等作用。有研究表明减毒鼠伤寒沙门氏菌等兼性厌氧细菌靶向肿瘤并在内积累增殖后,肿瘤周围浸润大量... 详细信息

干扰素-γ（Interferon-gamma,简称IFN-γ）是II型干扰素的唯一成员,是一种具有广谱抗病毒作用的糖蛋白,还具有高效免疫调节、治疗癌症等作用。有研究表明减毒鼠伤寒沙门氏菌等兼性厌氧细菌靶向肿瘤并在内积累增殖后,肿瘤周围浸润大量中性粒细胞,引起了肿瘤治疗效果复发转移,预后效果不佳。有文献报道减毒鼠伤寒沙门氏菌和IFN-γ治疗肿瘤分别有抗肿瘤效果,但其联合治疗效果机理目前还未有相关报道。因此,本试验从减毒鼠伤寒沙门氏菌抗癌症和IFN-γ的免疫调节联合作用机制角度入手。探究其联合治疗对免疫细胞及肿瘤治疗效果的影响,为细菌介导的肿瘤治疗与其它药物的协同作用的研究提供理论依据。本试验材料为:以减毒鼠伤寒沙门氏菌（S.tΔpp Gpp菌株）、IFN-γ、Bal B/c小鼠1)S.tΔpp Gpp+IFN-γ联合作用抗小鼠结肠癌的研究。本试验将达到5-6周龄Bal B/c雄性小白鼠每只注射1×10～6个CT26细胞到小鼠肌皮下建立结肠癌小鼠模型。当肿瘤的体积长到120-180 mm3时,当天尾静脉注射1μg/IFN-γ,第二天尾静脉注射100μL细菌（只注射1次;细菌注射量为3×10～7CFU/只）,之后每天尾静脉注射1μg/只IFN-γ21天。肿瘤体积=（L×H×W）/2。从肿瘤生长曲线可看到,小鼠注射细菌后7天内,肿瘤体积逐渐坏死减小且结痂脱落,但结痂脱落后肿瘤又会渐渐复发。而S.tΔpp Gpp+IFN-γ联合治疗组相较单独S.tΔpp Gp菌组有显著增强的肿瘤抑制效果,甚至使肿瘤完全脱落:联合处理的小鼠中（27%）显示完全肿瘤消退,且比其他组存活时间更长,在剃毛的右侧部重新生长毛发并保持健康直至第60天观察停止。这表明,减毒鼠伤寒沙门氏菌在具有一定的抗肿瘤效果基础上,联合IFN-γ治疗肿瘤起到了增强抗肿瘤效果。2)S.tΔpp Gpp+IFN-γ联合作用对肿瘤中细菌靶向的影响。本试验在细菌注射后第二和第六天,将单独菌组和联合治疗组小鼠脱颈死。采集小鼠的肿瘤、肝、脾、肺按重量（g）:PBS体积（m L）=1:9的比例进行机械匀浆,37℃过夜培养,算得每克组织中所含细菌数。以此来研究IFN-γ对S.tΔpp Gpp/Lux（菌株转入Lux荧光基因）工程菌靶向肿瘤能力以及在肿瘤中存留时间的影响。从小鼠活体发光成像显示,S.tΔpp Gpp+IFN-γ联合治疗不影响细菌在肿瘤中积累增殖的能力,在细菌注射后1-3天全部定植在肿瘤部位。在第2天和第6天细菌计数统计结果可看到,联合治疗组和单独菌组这两组的肿瘤内部聚集细菌数都远远高于其他脏器,差异极显著（P<0.001）。特别是细菌注射处理后第六天,联合治疗组肿瘤中细菌数差异显著（P<0.05）高于单独菌治疗组;由此可以看出,IFN-γ能增强S.tΔpp Gpp工程菌靶向肿瘤内部能力并存在一定的时间。3)S.tΔpp Gpp+IFN-γ联合作用对肿瘤微环境的影响。本试验通过将细菌注射48h后采集肿瘤组织进行常规免疫组化。使用中性粒细胞一抗ly6G（兔抗大鼠1:100）、巨噬细胞M1型一抗CD86（兔多抗1:50）和巨噬细胞M2型一抗CD206（兔多抗1:200）孵育,二抗生物标记的羊抗兔/大鼠Ig G孵育。IHC结果显示肿瘤组织在细菌浸润后,观察到M1/M2型巨噬细胞数量相对于对照组和单独IFN-γ组来说,联合治疗组和单独菌组明显增多且存在差异极显著（P<0.001）;同时联合治疗组M1/M2型巨噬细胞数量相对于单独菌组的差异显著上升（P<0.05）;尤其M1型巨噬细胞比M2型巨噬细胞差异极显著增多（P<0.001）。对于中性粒细胞,单独菌组比对照组和单独IFN-γ组显著上升,差异极显著（P<0.001）;而联合治疗组比单独菌组中性粒细胞募集明显下降,差异极显著（P<0.001）。这些结果表明IFN-γ对细菌浸润肿瘤后明显诱导巨噬细胞M1/M2极化和抑制了中性粒细胞的募集。4)S.tΔpp Gpp+IFN-γ联合治疗肿瘤中相关细胞因子变化。由于在减毒鼠伤寒沙门氏菌定植肿瘤后中引起了不同免疫细胞群体浸润,产生的效应分子可能参与抗肿瘤作用。因此,我们接下来研究了肿瘤的免疫学变化。用q RT-PCR检测S.tΔpp Gpp+IFN-γ联合治疗48h相关细胞因子表达的变化。结果发现,相比于对照组和单独IFN-γ组,单独菌组的IL-1β、TNF-α、TGF-β、IL-6、IL-10、GM-CSF、G-CSF和联合治疗组的TGF-β、IL-6、IL-10、GM-CSF的转录水平均较高表达,差异极显著（P<0.001）;联合治疗组的IL-1β、TNF-α、GM-CSF的转录水平均高表达,差异显著（P<0.05）。而联合治疗组的G-CSF和单独菌组相比,差异显著降低（P<0.05）。因此可以推测S

关键词：联合免疫治疗 IFN-γ 减毒鼠伤寒沙门氏菌中性粒细胞 M1/M2巨噬细胞极化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

减毒鼠伤寒沙门氏菌及其基因工程菌在制备治疗急性白血病的药物上的应用

减毒鼠伤寒沙门氏菌及其基因工程菌在制备治疗急性白血病的药物上...

引用

作者：赵子建李芳红李美蓉赵正刚周素瑾赖运浩 510000 广东省广州市番禺区广州大学城外环西路100号

本发明公开了减毒鼠伤寒沙门氏菌及其基因工程菌在制备治疗急性白血病的药物上的应用，涉及医药技术领域。该基因工程菌携带克隆有L‑methioninase(L‑甲硫氨酸酶或蛋氨酸酶)基因的重组表达质粒，可以在肿瘤组织持续表达L‑methioninase，... 详细信息

标准号: CN112190717A

本发明公开了减毒鼠伤寒沙门氏菌及其基因工程菌在制备治疗急性白血病的药物上的应用，涉及医药技术领域。该基因工程菌携带克隆有L‑methioninase(L‑甲硫氨酸酶或蛋氨酸酶)基因的重组表达质粒，可以在肿瘤组织持续表达L‑methioninase，大量消耗甲硫氨酸及其它营养物质，使得肿瘤细胞缺乏营养，生长缓慢，对急性白血病细胞具有显著的生长抑制作用，因此可以用于制备治疗急性白血病的药物。

关键词：基因工程菌急性白血病制备减毒鼠伤寒沙门氏菌急性白血病细胞生长抑制作用医药技术领域重组表达质粒甲硫氨酸酶甲硫氨酸生长缓慢营养物质肿瘤细胞肿瘤组织蛋氨酸治疗克隆消耗携带基因应用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达猪瘟病毒E2蛋白重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株的构建及动物免疫试验

引用

中国兽医科学 2011年第9期41卷 901-906页

作者：许信刚王丹童德文西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

为了构建表达猪瘟病毒E2蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株,亚克隆猪瘟病毒E2基因,将其插入到表达载体pYA3341中,构建了重组质粒pYA3341-E2。将该重组质粒电转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550(缺失asd、cya、crp基因),获得重... 详细信息

为了构建表达猪瘟病毒E2蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株,亚克隆猪瘟病毒E2基因,将其插入到表达载体pYA3341中,构建了重组质粒pYA3341-E2。将该重组质粒电转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550(缺失asd、cya、crp基因),获得重组疫苗菌株X4550(pYA3341-E2),并对重组菌表达的E2蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析、测定其在体内外的稳定性、生长曲线、安全性及动物免疫试验。结果显示,重组菌能表达E2蛋白且表达的蛋白能与猪瘟病毒阳性血清特异性结合。在体外营养选择压力下,重组菌株在体外可稳定地携带重组质粒传代繁殖,在体内可稳定地定居于肠系膜淋巴结和脾。小鼠口服试验证实重组菌无毒性,安全可靠。动物免疫试验表明,口服重组菌免疫猪产生了抗E2蛋白抗体。淋巴细胞增殖试验表明,重组菌能诱导机体产生较强的细胞免疫应答。结果表明,成功构建了能稳定表达猪瘟病毒E2蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株,为研究猪瘟口服基因工程疫苗奠定了基础。

关键词：猪瘟病毒 E2蛋白减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

1株asdA缺陷型减毒鼠伤寒沙门氏菌作为核酸疫苗载体的构建与鉴定(英文)

引用

中国人兽共患病学报 2014年第7期30卷 663-668页

作者：于斌罗语思彭晓袁硕峰牛憨笨屈军乐张科深圳大学光电工程学院光电子器件与系统(教育部/广东省)重点实验室深圳518060 香港大学李嘉诚医学院微生物学系中国香港999077 贵阳医学院附属医院急诊内科贵阳550004 贵阳医学院人体寄生虫学教研室贵阳550004

目的利用载体-宿主平衡致死系统,将1株香港分离的野生型沙门氏菌(S129)构建为减毒核酸疫苗载体。方法以细菌生化反应和血清学方法鉴定S129为鼠伤寒沙门氏菌;以λ-RED同源重组方法靶向敲除S129株的asdA基因,并以卡那霉素抗性基因代替;通... 详细信息

目的利用载体-宿主平衡致死系统,将1株香港分离的野生型沙门氏菌(S129)构建为减毒核酸疫苗载体。方法以细菌生化反应和血清学方法鉴定S129为鼠伤寒沙门氏菌;以λ-RED同源重组方法靶向敲除S129株的asdA基因,并以卡那霉素抗性基因代替;通过菌落PCR鉴定后挑取阳性克隆asdA缺陷型减毒鼠伤寒沙门氏菌(asdAΔS129),在含2,6-二氨基庚二酸(2,6-diaminopimelic acid,DAP)或无DAP的LB培养基中培养,与野生株S129对比生长曲线以验证asdAΔS129构建的成功;以S129和asdAΔS129攻击BALB/c小鼠验证asdAΔS129减毒情况;结果菌落PCR鉴定得到阳性克隆,asdAΔS129必需外源性添加DAP方能生长;asdAΔS129不能致死BALB/c小鼠,得到成功的减毒;结论成功将1株野生型沙门氏菌构建成asdA缺陷型减毒核酸疫苗载体,并在体外和体内实验中验证,为下一步的疫苗呈递和肿瘤治疗实验提供了合适的载体。

关键词：减毒鼠伤寒沙门氏菌核酸疫苗载体 λ-RED同源重组

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：