检索结果-内蒙古大学图书馆

四川动物 2025年第2期44卷 232-240页

作者：李重言周智威段佳丽代锦吴江孙群四川大学生命科学学院成都610065 四川大学华西医院深地医学研究中心成都610041

水蛭广泛分布于湖泊、池塘和稻田等淡水环境,其唾液中含有多种生物活性物质,因此在临床治疗中具有较高应用价值。然而,水蛭体内共生的致病微生物可能通过叮咬或治疗过程进入人体,增加感染风险。这些共生微生物主要分布于水蛭的口腔、消... 详细信息

水蛭广泛分布于湖泊、池塘和稻田等淡水环境,其唾液中含有多种生物活性物质,因此在临床治疗中具有较高应用价值。然而,水蛭体内共生的致病微生物可能通过叮咬或治疗过程进入人体,增加感染风险。这些共生微生物主要分布于水蛭的口腔、消化道、肾盂和膀胱中。随着微生物分离培养和鉴定技术的进步,新型的微生物培养鉴定方法在微生物多样性研究中的应用日益广泛,为理解野生水蛭共生微生物的生态功能和代谢途径提供了新思路。本文阐述了常见水蛭的生物特性、分布及共生微生物致病风险,并探讨了新型微生物分离鉴定和培养技术在水蛭共生微生物研究中的应用前景,为预防水蛭叮咬感染提供科学依据。

关键词：水蛭多样性共生微生物分离鉴定技术致病菌感染

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发酵肉制品中乳酸菌的分离鉴定技术的研究

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肉类工业 2005年第11期 16-21页

作者：卢士玲吴桂春李开雄新疆石河子大学食品学院 832000

对发酵肉制品中乳酸菌的分离、纯化以及鉴定技术进行了研究,结果从发酵香肠、腊肠、火腿中分离筛选得到2株德氏乳杆菌,并建立了一套发酵肉制品中乳酸菌的分离鉴定方法。

关键词：发酵肉制品乳酸菌分离鉴定技术

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发酵肉制品中乳酸菌的分离、筛选和鉴定

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食品与生物技术学报 2006年第3期25卷 116-121页

作者：卢士玲吴桂春李开雄新疆石河子大学食品学院新疆石河子832000

关键词：发酵肉制品乳酸菌分离鉴定技术

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灵芝的化学成分及其生物活性研究

灵芝的化学成分及其生物活性研究

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作者：彭惺蓉中国科学院大学

学位级别：博士

灵芝作为传统中药其药用史已有2000多年，并一直是人们所关注的热点，然而，到目前为止，却没有得到任何有价值的活性成分。那么，问题出在哪里呢？是分离技术的限制，还是活性筛选范围和模型的局限，还是活性成分选择的偏差？因此，为... 详细信息

灵芝作为传统中药其药用史已有2000多年，并一直是人们所关注的热点，然而，到目前为止，却没有得到任何有价值的活性成分。那么，问题出在哪里呢？是分离技术的限制，还是活性筛选范围和模型的局限，还是活性成分选择的偏差？因此，为了寻找到灵芝的活性成分，对不同种灵芝的化学成分和生物活性进行研究。 　　由于市场中灵芝种类丰富、复杂，为了得到合适的灵芝样品，利用灵芝三萜在1D NMR和HPLC上的特征作为依据，对购买的十种灵芝进行筛选，并结合文献和市场调研，最终选出在1D NMR和HPLC上有灵芝三萜的特征信号和吸收，并且市场销量好，民间应用广泛，同时化学成分报道较少的种作为研究对象。最终我们选出三种灵芝:竹灵芝（Ganoderma hainanense）、薄盖灵芝（Ganoderma capense）和反柄紫芝(Ganoderme cochlear)。从上述三种灵芝中共分离鉴定了104个化合物，其中59个新化合物。化合物的结构类型包含了三萜、甾体、杂萜和生物碱四种。活性筛选涉及三萜类成分的细胞毒性;杂萜类成分的抗乙酰胆碱酯酶、抗炎、抗氧化、抗菌、降血糖等活性;生物碱类成分的抗丁酰胆碱酯酶活性。其具体研究结果如下: 　　利用细胞毒性追踪的方法从竹灵芝（***）的活性部位（乙酸乙酯萃取部分）中分离鉴定了23个三萜和2个甾体成分，有18个新化合物，包含了灵芝酸和灵芝醇类成分。竹灵芝中的灵芝酸通过X-单晶衍射确定25位的绝对构型为S，而以往从其他灵芝中分离得到的都默认为R。因此，灵芝酸中25位存在两种构型。研究显示侧链为23-oxo-26-oic acid的灵芝酸中26位的羧基为活性关键基团，那么25位构型的不同是否会影响活性呢？细胞毒性筛选结果显示化合物10，12和17对肿瘤细胞株HL-60，SMMC-7721，A-549和MCF-7有抑制作用，IC50值为15～40μM，而灵芝酸类成分的IC50值都大于40μM，这说明25位的构型对细胞毒性有一定影响。 　　薄盖灵芝（***）为中医药中常用的补益药之一，其菌丝提取物制成的注射液（薄芝液）和薄盖菌片对神经、心血管、免疫系统及代谢功能等有多方面作用。然而，其化学成分的研究仅限于甾体和嘧啶类成分，对解释其丰富的药理活性缺乏信息，因此，对薄盖灵芝的化学成分进行系统研究，并从中分离鉴定了20个化合物，包括9个甾体，1个五环三萜，1个酰胺和9个杂萜。新化合物6个，其中2个为大环芳香杂萜。化合物38通过手性HPLC分析显示为一对外消旋体，化合物39则含有1个十四元醚环结构。从该灵芝中并未得到三萜类成分，是否预示着灵芝的活性成分不只是三萜呢？ 　　反柄紫芝(***)常用于安神、改善睡眠、增强记忆力及延年益寿。前期我们课题组从该种灵芝中得到一系列具有保肝活性的三萜类成分，大量成分为A环开环的降三萜，与常见灵芝三萜有较大差别，因此，我们继续对该种灵芝的化学成分进行分离，以期寻找到骨架新颖的活性成分。从该种灵芝中共分离鉴定了58个化合物，包括22个三萜，9个为新化合物;31个杂萜，25个为新化合物;5个生物碱，4个为新的。三萜类成分中化合物44为新颖骨架结构的六降三萜，结构中A环降解三个碳形成五元内酯环，B环重排形成五环碳环。杂萜类成分中化合物69-83为结构新颖的多环芳香杂萜，其中69-80和82为外消旋体。它们的结构特点为:化合物69-72的结构中含有螺[4，5]癸烷环系;73中含有一个八元环;74-77含有6/6/6三环体系;79和80含有旋转门式结构;81则含有6/6二环结构。活性研究显示:化合物93和94表现出弱的抗炎活性;化合物73有较弱的乙酰胆碱酯酶抑制作用;化合物74-77，79，80，89和93显示了较强的抗氧化作用，并与阳性对照维生素C活性相当;化合物100和101对丁酰胆碱酯酶有一定的抑制作用（IC50值为3.827和4.821μM）。 　　随着分离技术的提高，活性筛选的深入，灵芝属真菌越来越受到人们的关注。除三萜和甾体外，其他类型的小分子成分，例如倍半萜、杂萜和生物碱，也陆续被报道。而目前的综述仅涉及到灵芝的三萜类成分和抗肿瘤活性，并未提及其他小分子类成分。但是天然小分子成分在新药开发中发挥着重要的作用。因此，我们对1984年到2015年报道的22种灵芝的343个小分子成分进行综述，包括它们的来源、生源途径、鉴定、生物活性及合成。以期为以后灵芝成分和生物活性的研究提供参考。

关键词：灵芝化学成分分离鉴定技术生物活性

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新产电细菌分离及其应用在微生物燃料电池和偶氮染料的脱色反应

新产电细菌分离及其应用在微生物燃料电池和偶氮染料的脱色反应

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作者： Subed Chandra Dev Sharma 中国科学院大学

学位级别：博士

微生物燃料电池(MFC)是一种利用细菌作为生物催化剂将有机物的化学能转化的设备。产电细菌是一种可以传递胞外电子至不溶性的电子受体比如金属氧化物和阳极的微生物，是微生物燃料电池中的基础。虽然微生物燃料电池的产电性能已经有了... 详细信息

微生物燃料电池(MFC)是一种利用细菌作为生物催化剂将有机物的化学能转化的设备。产电细菌是一种可以传递胞外电子至不溶性的电子受体比如金属氧化物和阳极的微生物，是微生物燃料电池中的基础。虽然微生物燃料电池的产电性能已经有了显著的提升，实际应用中的电能输出仍然存在短板。因此发现一株新种的细菌对于产生更多的电能以及去除有害的有机物至关重要。\n 本论文主要研究了新的胞外产电菌的分离鉴定及其固定化在微生物燃料电池及偶氮染料脱色方面的应用。主要研究结果有以下几个方面:\n (1)胞外产电细菌SCS5是在厌氧条件下，利用亨盖特滚管技术从没有电子传递中介体的微生物燃料电池中分离出来的，体系以乙酸盐为电子供体，以α-FeOOH为电子受体。菌株SCS5是一株兼性厌氧的革兰氏阴性菌，具运动能力，呈短杆状(0.9-1.3μm长，0.4-0.5μm宽)。基于16S rRNA、gyrB和rpoD三种基因的系统进化关系分析可知，菌株SCS5与简氏气单胞菌(Aeromonas jandaei)的进化关系非常接近。这株菌的最适生长温度、pH和盐度分别为35℃，7.0和0.5％。然而，从表型分析、细胞脂肪酸组成及核酸的G+C含量来看，这株菌与近缘种的模式菌*** ATCC49568还是存在一定差异的。菌株SCS5核酸的G+C含量为59.18％，它具有胞外电子传递能力，能将不溶性铁氧化物(α-FeOOH)还原。循环伏安图显示这株菌在好氧和厌氧条件下均有两对氧化还原峰出现，这表明SCS5是一株胞外产电菌。同样实验条件下，参照模式菌*** ATCC49568除了出现细小的还原峰外，没有显示出明显的氧化峰。这个结果表明，菌株SCS5是一株属于***这个种中新的胞外产电菌。拉曼光谱的显微分析结果显示，在厌氧条件下菌株SCS5的细胞色素C含量要高于好氧条件，而细胞色素C主要用于胞间的电子传递。细胞色素的基因组对比分析表明SCS5菌株的细胞色素种类比*** ATCC49568更多。SCS5菌株含有细胞色素C蛋白NrfB，TorC and NapC的基因，而*** ATCC49568不含有。这些结果的发现为进一步深入研究细菌与电极之间的电子传递机制提供了一株新的模式菌，该菌株在微生物燃料电池中能够以乙酸盐为底物进行产电，这个是***这类菌具备产电能力的首次报道。\n (2)生物膜上菌体的数量对于微生物燃料电池的性能具有十分重要的作用，要将基于微生物燃料电池的产电技术应用于实际生活中，其中一项最大的挑战是增加或维持阳极生物膜上产电菌的数量。菌体的固定化能够有效增加生物膜上产电菌的数量，从而提高微生物燃料电池的性能。本论文以产电能力为评价指标，研究4株单菌(菌株E1，菌株SCS5，菌株B2和***)及它们的混菌体系的产电能力。结果表明，比起纯菌体系，混菌的微生物燃料电池体系具有更高的产电能力(3.021 W/dm3)。并且发现混菌微生物燃料电池去除化学需氧量效率更高(82％)将混菌与导电材料石墨和电子传递中介体(AQDS和Fe3O4)一起固定化(PC-MIMC)后作为阳极，有效增强了微生物燃料电池的产电性能。与单菌相比，混菌PC-MIMC的微生物燃料电池体系具有更强的产电性能。充-放电实验表明，当PC-MIMC作为阳极时，微生物燃料电池的生物电容量增强了。与电子传递中介体Fe3O4相比带有电子传递中介体AQDS固定化颗粒具有更高的产电能力。综上可知，成熟细胞膜与电子传递中介体的联合固定化颗粒的应用有助于提高微生物燃料电池的产电性能。\n (3)产电细菌可以传递电子至胞外物质。我们应用SCS5这株菌来使偶氮染料甲基红(MR)脱色。无论是厌氧还是好氧的悬浮培养，菌株SCS5可以在6小时内完全脱色100 mg/L的染料，而酸性环境下脱色速率优于碱性环境。脱色效率与加入的细菌量成正比，与初始染料浓度成反比。用聚乙烯醇/海藻酸钠/高岭土固定化的细菌用激光共聚焦扫描显微镜证实有活性。固定化后的菌株SCS5能够使甲基红脱色，脱色速率在使用含有蒽醌2，6二磺酸盐和有磁性的四氧化三铁纳米颗粒的介质固定后相比单纯的细胞固定更高。固定化后的细菌珠即使在重复使用十次后仍有很高的脱色能力。紫外-可见光分光光度计(200-800 nm)和气相色谱联用质谱分析表明甲基红被菌株SCS5降解的原理是通过断裂还原偶氮键。甲基红的降解产物相比甲基红对小麦和黑绿豆的毒害较小。这个研究表明菌株SCS5可以很好的降解环境中的偶氮染料。

关键词：产电细菌分离鉴定技术微生物燃料电池产电性能偶氮染料脱色反应

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杭州郊区-奶牛场子宫内膜炎主要病原菌的分离鉴定及药敏研究

杭州郊区-奶牛场子宫内膜炎主要病原菌的分离鉴定及药敏研究

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作者：王星星浙江大学

学位级别：硕士

子宫内膜炎是奶牛产后常见的繁殖障碍性疾病，引起该病发生的主要原因是子宫感染病原。该病对奶牛的繁殖性能有很大的负面影响，给奶牛养殖业造成严重的经济损失。目前，临床上主要应用抗生素治疗奶牛子宫内膜炎，随着抗生素的大量应用... 详细信息

子宫内膜炎是奶牛产后常见的繁殖障碍性疾病，引起该病发生的主要原因是子宫感染病原。该病对奶牛的繁殖性能有很大的负面影响，给奶牛养殖业造成严重的经济损失。目前，临床上主要应用抗生素治疗奶牛子宫内膜炎，随着抗生素的大量应用，耐药菌株越来越多，抗生素的治疗效果也明显下降。为找出有效的治疗药物，对杭州市某郊区奶牛场的子宫内膜炎病例进行细菌分离和鉴定，并对其中部分病原菌进行了体外药敏试验。\n 从25头患子宫内膜炎的奶牛中采集子宫分泌物进行细菌分离和鉴定。结果发现，25份病料中有9份分离到一种细菌，占36％，12份分离到两种或两种以上细菌，占48％，细菌检出率为84％。同时，获得39个细菌分离株，其中7株为凝固酶阴性葡萄球菌(Coagulase negative staphylococci)，占17.9％;6株为毗邻乏养球菌(Abiotrophia adjacens)，占15.4％;4株为粪肠球菌（Enterococcus faecalis），占10.3％;2株为浅黄肠球菌（Enterococcus gilvus），占5.1％;4株为大肠埃希菌（Eseherichia coli），占10.3％;7株为革兰阳性杆菌(Gram-positive bacilli)，占17.9％;7株为革兰阴性杆菌(Gram-negative bacilli)，占17.9％;2株为革兰阴性球菌（Gram-negative cocci），占5.1％。\n 为了解分离菌对常用抗菌药物的敏感性，进行了葡萄球菌属分离菌对15种常用抗菌药物的药敏试验以及大肠杆菌分离菌对12种常用抗菌药物的药敏试验。结果发现，葡萄球菌属分离菌均对头孢噻吩(cefalotin)、头孢呋辛(cefuroxime)、环丙沙星(ciprofloxacin)和多粘菌素B(polymyxin B)敏感，没有发生耐药现象;其次为氟苯尼考(florfenicol)、头孢他啶(ceftazidime)、庆大霉素（gentamicin）、卡那霉素(kanamycin)、复方新诺明(cotrimoxazole)，耐药率分别为14.3％(1/7)、28.6％(2/7)、28.6％(2/7)、28.6％(2/7)、28.6％(2/7):对苯唑西林(oxacillin)、红霉素(erythromycin)、林可霉素(lincomycin)和氨苄西林（ampicillin）耐药比较严重，耐药率分别为71.4％(5/7)、71.4％(5/7)、71.4％(5/7)、85.7％(6/7);而对青霉素(penicillin)和四环素(tetracycline)则表现为完全耐药，耐药率均为100％(7/7)。大肠杆菌分离菌对多粘菌素B和复方新诺明敏感，没有发生耐药现象;其次为环丙沙星、头孢噻吩、头孢呋辛、头孢他啶、氟苯尼考和红霉素，耐药率分别为25％(1/4)、25％(1/4)、25％(1/4)、25％(1/4)、25％(1/4)、50％(2/4);对庆大霉素有比较严重的耐药现象，耐药率为75％(3/4);而对氨苄西林、卡那霉素和四环素则表现为完全耐药，耐药率均为100％(4/4)。\n 综上所述，从该奶牛场子宫内膜炎奶牛分离到的细菌种类比较复杂，有凝固酶阴性葡萄球菌、大肠杆菌、毗邻乏养球菌、粪肠球菌和浅黄肠球菌等。凝固酶阴性葡萄球菌对苯唑西林、红霉素、林可霉素、氨苄西林、青霉素和四环素有严重耐药现象，而对头孢噻吩、头孢呋辛、环丙沙星和多粘菌素B敏感;大肠杆菌对庆大霉素、氨苄西林、卡那霉素和四环素有严重耐药现象，而对多粘菌素B和复方新诺明敏感。可以看出，凝固酶阴性葡萄球菌和大肠杆菌分离菌均对氨苄西林和四环素有严重耐药现象，而均对多粘菌素B敏感。

关键词：奶牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定技术药敏试验

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襄阳大头菜中嗜盐菌的分离鉴定及对其挥发性成分的影响

襄阳大头菜中嗜盐菌的分离鉴定及对其挥发性成分的影响

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作者：宋洁华中农业大学

学位级别：硕士

襄阳大头菜是襄阳地区一种高盐腌制的蔬菜。嗜盐菌是一类可以在高盐环境下生存的极端微生物，大头菜盐卤作为一种特殊的高盐环境，分布多种嗜盐菌。本课题以襄阳大头菜卤水为研究对象，通过对大头菜腌制时卤水中的嗜盐菌的分离纯化，获... 详细信息

襄阳大头菜是襄阳地区一种高盐腌制的蔬菜。嗜盐菌是一类可以在高盐环境下生存的极端微生物，大头菜盐卤作为一种特殊的高盐环境，分布多种嗜盐菌。本课题以襄阳大头菜卤水为研究对象，通过对大头菜腌制时卤水中的嗜盐菌的分离纯化，获得菌种，进行形态、生理生化等试验，同时结合16S rRNA分子生物学手段鉴定其种属，确定大头菜腌制时嗜盐菌的种类。再将分离出的菌种分别单独接种于卤水中，利用固相微萃取-气相色谱质谱联用技术分析挥发性成分，与空白对照组对比差异，研究嗜盐菌对挥发性成分的影响。　　从大头菜卤水中共分离得到了10种菌，记为S-1、S-2、S-3...S-10。经过形态学、生理生化及16S rRNA分析得到以下结论：S-1呈淡黄色类似圆，革兰氏阴性菌，产芽孢，耐盐度高达30％，与Halobacillus *** M-33相似度达99％，为盐芽孢杆菌属;S-2呈浅橘黄色类似圆，革兰氏阴性菌，产芽孢，耐盐度达25％，与Virgibacillus olivae strain R188相似度达100％，为枝芽孢杆菌属;S-3呈黄色圆形，革兰氏阴性菌，产芽孢，耐盐度达 25％，与 Virgibacillus sp.T2相似度达100％，为枝芽孢杆菌属;S-4呈白色圆形，革兰氏阴性菌，产芽孢，耐盐度达10％，与Oceanobacillus sp. strain TRB48匹配达99％，为大洋芽孢杆菌属;S-5呈半透明类似圆，革兰氏阳性菌，产芽孢，耐盐度达 25％，与 Virgibacillus sp. YHSA41相似度达99％，为枝芽孢杆菌属;S-6呈褐色类似圆，革兰氏阴性菌，产芽孢，耐盐度达25％，与Oceanobacillus oncorhynchi strain SP18相似度达99％，为大洋芽孢杆菌属;S-7呈透明圆形，革兰氏阴性菌，不产芽孢，耐盐度达20％，与Sediminibacillus *** 102062相似度达99％，为嗜盐沉积物杆菌;S-8呈透明类似圆，革兰氏阳性菌，产芽孢，耐盐度达20％，与Oceanobacillus oncorhynchi subsp. incaldanensis strain TB-130相似度达99％，为大洋芽孢杆菌属;S-9呈透明圆形，革兰氏阴性菌，产芽孢，耐盐度达25％，与Gracilibacillus sp. K3相似度达99％，为细长芽孢杆菌属;S-10呈淡黄色类似圆，革兰氏阴性菌，产芽孢，耐盐度达25％，与Oceanobacillus sp. 66w相似度达97％，为大洋芽孢杆菌属。　　将得到的菌种经过活化培养后，以6％的接种量分别接种到卤水中，37℃恒温培养30 d后采用固相微萃取-气相色谱质谱联用技术测定所含的挥发性成分，得到以下结论：各样品中挥发性成分分别有34种、40种、47种、43种、41种、49种、39种、57种、43种、57种和55种，其中苯乙醇、苯代丙腈、异硫氰酸烯丙酯所占比例较大，为主要挥发性成分物质。添加菌株后挥发性成分有不同程度的改变，其中对大头菜风味影响最为显著的是添加菌株S-2、S-8后可以显著降低异硫氰酸烯丙酯这一主要刺激性辛辣挥发性成分，有效促进产品的成熟，以及添加菌株S-9后可以显著提高苯代丙腈含量，增加类似柑橘或者药草的味道。

关键词：大头菜嗜盐菌分离鉴定技术挥发性成分

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山东省潍坊地区鸭源H9N2亚型AIV的分离鉴定及HA基因序列分析

山东省潍坊地区鸭源H9N2亚型AIV的分离鉴定及HA基因序列分析

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作者：崔晓娜山东农业大学

学位级别：硕士

禽流感是由A型流感病毒引起的禽类传染病，临床表现为呼吸道感染，产蛋量下降，头颈水肿和腹泻。H9亚型禽流感为低致病力禽流感，能引起少量死亡或不死亡，表现为生长障碍和产蛋量下降。H9亚型禽流感病毒(AIV)在包括我国在内的东南亚及... 详细信息

禽流感是由A型流感病毒引起的禽类传染病，临床表现为呼吸道感染，产蛋量下降，头颈水肿和腹泻。H9亚型禽流感为低致病力禽流感，能引起少量死亡或不死亡，表现为生长障碍和产蛋量下降。H9亚型禽流感病毒(AIV)在包括我国在内的东南亚及世界许多国家分布广泛，中国大陆1994年首次公开报道从鸡群中分离到H9亚型AIV，随后便在一些地区形成小规模的流行，未波及全国。但1998年春夏开始的H9亚型禽流感在短短的几个月时间内就形成波及20多个省区的全国范围大流行，给我国的养禽业造成了巨大的经济损失。1998年以来我国发生的H9亚型AI传播效率高、速度快和范围广，1999年又从人类病毒中分离出H9亚型AIV，对于它存在的潜在危害已经越来越多的受到关注。\n 本试验从山东省潍坊地区发生疑似禽流感的病死鸭脏器中分离出4株H9亚型禽流感病毒，并对其进行了生物学特性研究和HA基因的序列分析。旨在了解分离的4株H9N2亚型禽流感病毒的毒力及HA基因的变异，从而为更好的预防控制H9亚型禽流感病毒提供一定的理论基础。\n 试验一、H9亚型AIV的分离鉴定及生物学特性研究\n 本试验从临床表现症状疑似禽流感的病死鸭脏器中分离得到4株H9亚型禽流感病毒，命名为SDWF1、SDWF2、SDWF3、SDWF4株。首先通过血凝特性的测定、鸡胚致病力的测定、鸡胚平均死亡时间的测定和1日龄雏鸡脑内接种指数测定等方法对10株禽流感H9亚型毒株的致病力进行分析和比较。结果表明，从山东潍坊地区分离到的4株禽流感H9亚型毒株的致病力不强，其HA效价在28～29之间，ELD50在10-6.25/0.2mL～10-7.69/0.2mL之间，其中SDWF2毒株的ELD50为10-7.69/0.2mL，表出较其它3株病毒强的致病力，其它3株病毒的ELD50在10-6.25/0.2mL～10-6.55/0.2mL之间。这4株病毒的鸡胚平均死亡时间差异不大，在90.0h～105.0h之间。其中SDWF2毒株的鸡胚平均死亡时间最短为90.0h，说明该病毒的致病力较强；而其他病毒的鸡胚平均死亡时间都在90h以上，说明它们的致病力较弱。攻毒鸡胚孵化出的雏鸡和攻毒雏鸡均出现了明显的剖检症状。\n 试验二、4株H9亚型AIVHA基因克隆测序及序列分析\n 本研究采用RT-PCR方法成功扩增出了4株H9亚型AIV的HA基因片段。序列分析结果表明，扩增获得的基因片段长度为1003bp。核苷酸和氨基酸序列同源性分析表明，这4株毒株彼此关系密切，同源性在93.7％以上，与山东省2003年分离的H9亚型AIV同源性为94.5％，并没有随着时间和地区的不同而发生较大的变异。与国内其它省份H9亚型AIV同源性为78.9％～96.9%。系统进化树分析结果表明，这4株毒株与山东、河北、南京、广州H9亚型AIV毒株亲缘性较近，属于同一分支。由此可见山东地区H9亚型禽流感的发生和流行与河北、南京、广州地区H9亚型禽流感病毒的发生密切相关。

关键词：鸭源H9N2亚型AIV 分离鉴定技术生物学特性序列分析 HA基因

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川西獐牙菜化学成分分离鉴定及抑制胆囊炎致病菌活性的研究

川西獐牙菜化学成分分离鉴定及抑制胆囊炎致病菌活性的研究

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作者：赵小军青海师范大学

学位级别：硕士

川西獐牙菜（Swertia mussotii Franch）是传统藏药，在治疗肝胆疾病方面具有独特疗效。经研究证明，川西獐牙菜对胆囊炎有很好的治疗功效；胆囊炎是常见的胆系疾病之一，临床上分急性和慢性两种。急性胆囊炎发病与细菌感染密切相关，... 详细信息

川西獐牙菜（Swertia mussotii Franch）是传统藏药，在治疗肝胆疾病方面具有独特疗效。经研究证明，川西獐牙菜对胆囊炎有很好的治疗功效；胆囊炎是常见的胆系疾病之一，临床上分急性和慢性两种。急性胆囊炎发病与细菌感染密切相关，主要的致病菌有大肠杆菌（占60%~70%）克雷伯菌和厌氧杆菌（如绿脓杆菌）等革兰氏阴性菌。\n 为了寻找川西獐牙菜中抑制急性胆囊炎致病菌的有效成分，本文采用柱色谱法、薄层色谱法以及重结晶等方法从川西獐牙菜氯仿部位分离得到3个化合物，通过核磁共振技术鉴定，分别为β-谷甾醇（1），1，8-二羟基-3，5-二甲氧基(口山）酮（2），1-羟基-2，3，5，7-四甲氧基(口山）酮（3）；从川西獐牙菜正丁醇部位分离得到7个化合物，通过核磁共振技术鉴定，分别为1-羟基-3，5，8-三甲氧基(口山）酮（4）1-羟基-2，3，4，5-四甲氧基(口山）酮（5）1-羟基-3，7，8-三甲氧基(口山）酮（6）异荭草素（7）芒果苷（8）龙胆苦苷（9）獐牙菜苦苷（10）。并通过这些成分与急性胆囊炎致病菌的抑菌实验得出：化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6和化合物8有明显的抑菌活性；化合物3、化合物7、化合物9、和化合物10抑菌活性不明显或没有抑菌作用。\n 通过抑菌功能试验筛选出对急性胆囊炎致病菌有显著的抑菌活性的化合物1，8-二羟基-3，5-二甲氧基(口山）酮（2）和化合物1-羟基-3，7，8-三甲氧基(口山）酮（6）。且化合物1-羟基-3，7，8-三甲氧基(口山）酮（6）对大肠杆菌、绿脓杆菌、粪链球菌、变形杆菌及鼠伤寒沙门氏菌五种菌的抑菌率都达到20%以上，且对大肠杆菌、绿脓杆菌抑菌作用明显，抑菌率分别达到65.7%和55.9%。

关键词：川西獐牙菜化学成分分离鉴定技术抑菌活性

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滨州地区规模化鸡场大肠杆菌分离鉴定和诊疗措施

滨州地区规模化鸡场大肠杆菌分离鉴定和诊疗措施

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作者：齐风云山东农业大学

学位级别：硕士

鸡大肠杆菌病是严重危害养鸡业的一种重要的细菌性传染病，规模养鸡场细菌性疫病的发生以大肠杆菌居首位。为此由于其血清型复杂，耐药菌株不断增加，给防治工作带来了巨大困难。首先对滨州地区主要养鸡集中区及兽医门诊的调查，从滨州... 详细信息

鸡大肠杆菌病是严重危害养鸡业的一种重要的细菌性传染病，规模养鸡场细菌性疫病的发生以大肠杆菌居首位。为此由于其血清型复杂，耐药菌株不断增加，给防治工作带来了巨大困难。首先对滨州地区主要养鸡集中区及兽医门诊的调查，从滨州地区发病鸡群中分离出疑似致病性大肠杆菌，对其进行分离鉴定和药敏试验以及对毒力因子检测，在此基础上进行了疫苗和药物防治研究并对滨州地区鸡大肠杆菌病的综合防制措施进行了探讨。\n 1.鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验。从滨州地区养鸡场的发病鸡中分离出可疑菌株，经常规方法培养、纯化、镜检及生理生化鉴定，分离鉴定出18株鸡致病性大肠杆菌，有12株分离株被鉴定出血清型，血清型主要有078、035、036、01、02、05、018。其中078共有4株，占33.3％，035共有3株，占25％，为滨州的优势血清型。用18株分离菌株接种供试雏鸡后，发病症状及剖检病变均符合本病特征，其中高致病性菌株有10株，中度致病菌株有5株，低致病性菌株有3株，分别占试验菌株总数的55.56％，27.78％，16.67％。药敏试验结果表明，分离的大肠杆菌对氟苯尼考，丁胺卡那霉素，新霉素，庆大霉素敏感，对环丙沙星，强力霉素，诺氟沙星中度敏感，而对红霉素，青霉素，链霉素产生了耐药。不同鸡场分离的大肠杆菌药物敏感性不同。\n 2.鸡致病性大肠杆菌分离株毒力因子检测。利用PCR检测11株高致病性大肠杆菌的6种毒力因子，iss(90.9％)、iucD(81.8％)和irP2(54.5％)三种毒力因子出现的频率较高，其次是tsh(36.4％)、vat(36.4％)、asta(18.2％)，基因表型iss/iucD/irP2可以作为致病性大肠杆菌的毒力标志。\n 3.鸡大肠杆菌的防控措施。选自分离的高致病性菌株制备大肠杆菌自家灭活苗，结合其它预防措施，用于易感鸡群，发病率显著下降，而对于发病鸡群，配以敏感药物，辅以中药“菌消散”进行治疗，也取得了理想效果。\n 本研究中鸡大肠杆菌的分离和鉴定为滨州地区大肠杆菌的流行病学打下了基础，对分离菌株进行的耐药性试验以及毒力分析为临床治疗提供了依据，疫苗和药物预防治疗试验则为滨州地区禽大肠杆菌病的防治积累了经验，并具有重要的指导意义。

关键词：鸡大肠杆菌病分离鉴定技术流行病学药敏试验诊疗措施

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