检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：骆科兵遵义医学院

学位级别：硕士

目的:研究单侧输尿管完全梗阻对肾小管上皮细胞凋亡、HO-1和b FGF在肾小管中表达的影响。方法:将实验用SD大鼠80只,随机分为手术组与假手术组,前者再进一步随机分为单侧输尿管完全梗阻3、5、7天组,各组20只。用0.01%戊巴比妥钠,按1ml/k... 详细信息

目的:研究单侧输尿管完全梗阻对肾小管上皮细胞凋亡、HO-1和b FGF在肾小管中表达的影响。方法:将实验用SD大鼠80只,随机分为手术组与假手术组,前者再进一步随机分为单侧输尿管完全梗阻3、5、7天组,各组20只。用0.01%戊巴比妥钠,按1ml/kg腹腔注射麻醉,取下腹部正中切口进入腹腔,找到膀胱,于其附近分离显露一侧输尿管,在输尿管下1/3段切断并用1号丝线分别结扎远、近断端,缝合切口继续饲养;假手术组仅行单侧输尿管显露。手术组术后第3、5、7天麻醉后取出对应时间组双侧肾脏,假手术组肾脏术后第7天同时取出,用8%的甲醛固定待用。所取标本均行HE染色观察组织细胞形态的病理变化,TUNEL染色法计算肾小管上皮细胞凋亡率,免疫组化检测肾小管HO-1及b FGF的表达。结果:80只实验用大鼠全部满足实验设计,无术后意外死亡。手术组随梗阻时间延长,患侧肾脏体积逐渐增大,表面色泽灰暗,质地变韧,输尿管、肾盂扩张,皮质变薄;HE染色可见肾小球逐渐萎缩呈玻璃样变,肾小管上皮细胞空泡样变性,肾间质内大量单核、淋巴细胞弥漫浸润,肌成纤维细胞弥漫增生;肾小管上皮细胞凋亡增加;免疫组化可见各组大鼠梗阻侧肾脏中均存在HO-1、b FGF蛋白表达,阴性对照均未见阳性表达,HO-1、b FGF主要表达于肾小管,梗阻后阳性表达明显增加,随梗阻时间延长,HO-1的阳性表达减弱,b FGF的阳性表达增强,差异均具有统计学意义(P<0.05);相关分析发现:HO-1的表达与肾小管上皮细胞的凋亡率呈负相关,b FGF的表达与肾小管上皮细胞的凋亡率呈正相关,相关系数r检验存在显著性差异(P<0.05)。梗阻对侧肾脏体积形态学改变不明显,仍存在肾小管上皮细胞凋亡,但随梗阻时间延长,凋亡率变化相对较缓慢。结论:单侧输尿管完全梗阻后,梗阻侧及梗阻对侧均发生肾小管上皮细胞凋亡,且随梗阻时间延长,细胞凋亡率升高,以梗阻侧明显,梗阻对侧变化相对缓慢;输尿管梗阻后肾小管中HO-1、b FGF的表达强度与梗阻持续时间有关,其中HO-1的表达强度随梗阻时间延长而减弱,与肾小管上皮细胞凋亡率呈负相关,可能其在单侧输尿管梗阻过程中具有抑制细胞凋亡等保护性作用;b FGF的表达强度随梗阻时间延长而增强,与肾小管上皮细胞凋亡率呈正相关,其在梗阻性肾病肾小管纤维化的过程中的促进作用已有论证;HO-1、b FGF可能参与了梗阻性肾病中肾实质细胞萎缩及肾小管纤维化的调节,并反应在蛋白表达水平上。

关键词：单侧输尿管完全梗阻细胞凋亡 HO-1 bFGF 肾小管纤维化

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肾小管周围毛细血管损伤与肾小管上皮细胞凋亡的关系

引用

苏州大学学报（医学版） 2008年第1期28卷 59-61,175页

作者：樊彩斌温端改侯建全严春寅周云严向明王兴东苏州大学附属第一医院泌尿外科江苏苏州215006 苏州大学附属儿童医院泌尿外科江苏苏州215003

目的观察单侧输尿管完全梗阻(CUUO)模型中肾小管周围毛细血管(PTC)损伤与肾小管上皮细胞凋亡的关系。方法建立SD大鼠CUUO模型,用免疫组化方法检测PTC的密度,TUNEL法对PTC和肾小管上皮细胞进行原位凋亡测定,透射电镜显示超微结构变化。... 详细信息

目的观察单侧输尿管完全梗阻(CUUO)模型中肾小管周围毛细血管(PTC)损伤与肾小管上皮细胞凋亡的关系。方法建立SD大鼠CUUO模型,用免疫组化方法检测PTC的密度,TUNEL法对PTC和肾小管上皮细胞进行原位凋亡测定,透射电镜显示超微结构变化。结果梗阻第1周,Flk-1阳性PTC数量变化不显著,肾小管上皮细胞凋亡很少见。第2、4周,Flk-1阳性的PTC数量减少,肾小管扩张或萎缩明显。电镜显示肾小管上皮细胞、PTC内皮细胞的死亡形式主要为凋亡;TUNEL显示肾小管上皮细胞凋亡在第14 d达到高峰,然后迅速下降。在梗阻第2周时,PTC密度与肾小管上皮细胞凋亡负相关(r=-0.863,P<0.01)。结论PTC损伤是以内皮细胞凋亡为主要特征,PTC减少在肾小管上皮细胞凋亡的过程中发挥了重要作用。

关键词：单侧输尿管完全梗阻肾小管周围毛细血管凋亡

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梗阻性肾病中肾小管周围毛细血管损伤和依那普利保护作用的实验研究

梗阻性肾病中肾小管周围毛细血管损伤和依那普利保护作用的实验研...

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作者：樊彩斌苏州大学

学位级别：硕士

目的：慢性梗阻性肾病中肾小管周围毛细血管(peritubular capillary，PTC)的损伤可引起明显的肾小管上皮细胞凋亡和间质纤维化，其机制仍未完全阐明。本课题通过建立大鼠单侧输尿管完全梗阻(complete unilateral ureteral obstruction，... 详细信息

目的：慢性梗阻性肾病中肾小管周围毛细血管(peritubular capillary，PTC)的损伤可引起明显的肾小管上皮细胞凋亡和间质纤维化，其机制仍未完全阐明。本课题通过建立大鼠单侧输尿管完全梗阻(complete unilateral ureteral obstruction，CUUO)模型，来观察PTC的密度、形态学变化以及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)蛋白的表达水平，分析其相关性以及与肾小管上皮细胞凋亡和间质纤维化之间的关系；进一步应用依那普利进行干预治疗，观察其对PTC和肾小管的保护作用。方法：选用42只刚断乳雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠进行动物实验。在氯氨酮麻醉下，36只大鼠用4-0丝线双重结扎左侧肾盂输尿管连接部，制成单侧输尿管完全梗阻(CUUO)模型。术后0、1、7、14、28天，分别随机选择6只CUUO模型大鼠，麻醉下收获肾脏标本后，采取断髓法处死。治疗组随机选6只CUUO模型大鼠，从第五天开始在其饮用水中加入依那普利(200mg／L)，直至第14天收集肾脏标本。假手术(SO)组6只大鼠仅剖腹暴露输尿管后不作结扎，术后第14天收集肾脏标本。所有肾脏标本常规病理切片，分别用HE、PAS和Masson染色观察组织学变化。用电镜技术研究肾小管上皮细胞和PTC的形态学变化，用Flk-1标记PTC后进行密度测定。用TUNEL方法检测原位细胞凋亡，免疫组织化学方法检测VEGF蛋白表达水平。用Leica图像分析系统对VEGF蛋白的表达强度和间质纤维化程度进行半定量检测。结果： 1．肾脏梗阻第一周，肾小管上皮细胞胞浆里的VEGF染色在局部有增强，Flk-1阳性PTC数量变化不显著，肾小管上皮细胞凋亡和肾间质纤维化很少见。第二、四周，VEGF表达逐渐下降，直至在一些肾小管内完全消失。与此同时，Flk-1 梗阻性肾病中肾小管周围毛细血管损伤和依那普利保护作用的实验研究中文摘要阳性的PTC数量减少，肾小管扩张或萎缩明显，间隙增宽; 电镜技术显示肾小管上皮细胞、PTC内皮细胞的死亡形式主要为凋亡;T切阿EL 方法显示肾小管上皮细胞凋亡在第14天达到高峰，PTC内皮细胞的凋亡呈升高趋势，直至实验结束; 在梗阻第二周时，VEGF表达面积百分比与PTC密度正相关(r=0.668，P<0.05)，而与凋亡的PTC内皮细胞平均数负相关(r一0.707，P<0.05);PTC密度与凋亡的肾小管上皮细胞平均数(r=一0.863，P<0.01)和间质纤维化面积百分比(r 二一0.858，P<0.01)之间均呈负相关; 依那普利治疗组梗阻肾脏的平均PTC密度为26.55士***/HPF，明显高于非治疗组的梗阻肾脏(19.34士3.98/H PF，P<0.05)。治疗组肾小管上皮凋亡细胞的平均数为2.30士0.77/HPF，明显低于非治疗组(3.91士0.58/H PF，P<0.01)，肾小管间质纤维化程度亦有明显减轻。结论:大鼠的CUUO模型中，PTC损伤以内皮细胞凋亡和随之发生的毛细血管结构的破坏为主要特征。PTC损伤与肾小管上皮细胞内VEGF的表达不足相关，在肾小管上皮细胞凋亡和肾间质纤维化的过程中可能发挥重要的作用。依那普利能有效地保护PTC、延缓梗阻性肾病进程，具有潜在治疗价值。

关键词：梗阻性肾病单侧输尿管完全梗阻肾小管周围毛细血管血管内皮细胞生长因子胎肝激酶-1 凋亡大鼠

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